本發(fā)明屬于乳液殘留物檢測(cè)，具體涉及一種磁性殼聚糖、奶源中磺胺氯噠嗪的提取方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、磺胺氯噠嗪一種具有廣譜抗菌作用的磺胺類藥物，常用于畜禽疾病的預(yù)防和治療。但是，磺胺氯噠嗪會(huì)在動(dòng)物體內(nèi)殘留，而動(dòng)物體內(nèi)的磺胺氯噠嗪殘留會(huì)分泌到乳液中，進(jìn)而被人類吸收。磺胺氯噠嗪殘留可引起部分人群發(fā)生過敏反應(yīng)，輕者表現(xiàn)為蕁麻疹、發(fā)熱、關(guān)節(jié)腫痛等，嚴(yán)重時(shí)可能出現(xiàn)過敏性休克，甚至危及生命；并且長期低劑量吸收磺胺氯噠嗪殘留，可能導(dǎo)致人體內(nèi)耐藥菌的增加，使得抗生素在治療感染性疾病時(shí)效果降低或失效；除此之外，磺胺氯噠嗪殘留可能抑制或殺滅敏感菌，導(dǎo)致胃腸道菌群失衡，從而引發(fā)感染性疾病。

2、所以，為了保障食品安全和人類健康，各國對(duì)動(dòng)物乳液中的磺胺氯噠嗪等抗生素的殘留量制定了嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)。例如，根據(jù)公開發(fā)布的信息，牛奶中磺胺氯噠嗪等磺胺類藥物的殘留量檢出限通常為較低的微克每千克水平(如1.0ug/kg)，以確保消費(fèi)者攝入的牛奶中抗生素殘留量在安全范圍內(nèi)。

3、目前，動(dòng)物乳液中磺胺氯噠嗪的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(比如《gb/t22966-2008》)中，大多都用到了固相凈化小柱和正己烷、乙腈、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑，固相凈化小柱屬于耗材，只能使用一次，使用成本較高。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明開發(fā)了一種磁性聚殼糖，可以將其作為固相柱，結(jié)合洗脫液，可以對(duì)牛奶中(蛋白處理后)的磺胺氯噠嗪進(jìn)行提取，后續(xù)檢測(cè)磺胺氯噠嗪的加標(biāo)回收率可以達(dá)到89％；將該磁性聚殼糖制備方法簡(jiǎn)單，成本較低。

2、為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明可以采用以下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明一方面提供一種磁性殼聚糖，其制備方法包括：(1)將含有殼聚糖的酸溶液、fe2+鹽和fe3+鹽混合溶解得混合物；(2)將所述混合物與堿性溶液混合反應(yīng)得第一磁性殼聚糖。

4、優(yōu)選地，上述制備方法還可以包括：將所述第一磁性殼聚糖與殼聚糖交聯(lián)劑混合反應(yīng)得第二磁性殼聚糖。

5、優(yōu)選地，上述殼聚糖交聯(lián)劑選自戊二醛、甲醛和乙二醛中的一種或多種組合。

6、本發(fā)明另一方面還提供一種奶源中磺胺氯噠嗪的提取方法，其包括：(1)將奶源進(jìn)行酶解得處理液；(2)在所述處理液加入磁性殼聚糖進(jìn)行提取得含有磺胺氯噠嗪的提取液；其中，所述磁性殼聚糖為本發(fā)明中的磁性殼聚糖。

7、優(yōu)選地，上述洗脫包括：將所述磁性殼聚糖與所述處理液混合，渦旋振蕩，去上清得剩余物；將剩余物與洗脫液混合，洗脫得提取液。

8、優(yōu)選地，上述提取包括以下條件中的一種或多種組合：(a)所述洗脫液為高氯酸和甲醇混合溶液；(b)所述洗脫液為高氯酸和甲醇混合溶液，其中，高氯酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05％-0.15％；(c)所述洗脫液為高氯酸和甲醇混合溶液，其中，高氯酸和甲醇的體積比為(17-21):1；(d)磁性殼聚糖的用量為80mg-120mg；(e)所述洗脫液的用量為5ml-10ml。

9、優(yōu)選地，上述提取包括以下條件中的一種或多種組合：(a)所述渦旋振蕩時(shí)間≥20min；(b)所述渦旋振蕩的溫度為23℃-27℃；(c)所述洗脫包括：剩余物與洗脫液混合后的混合物進(jìn)行超聲振蕩，過濾；超聲振蕩的溫度為40℃-50℃；(d)所述洗脫包括：剩余物與洗脫液混合后的混合物進(jìn)行超聲振蕩，過濾；超聲振蕩的時(shí)間為≥20min。

10、優(yōu)選地，上述酶解包括：使用蛋白酶進(jìn)行酶解。

11、本發(fā)明再一方面提供一種奶源中磺胺氯噠嗪含量的檢測(cè)方法，(1)將奶源按照本發(fā)明中的提取方法提取得到含有磺胺氯噠嗪的提取液；(2)檢測(cè)所述含有磺胺氯噠嗪的提取液中磺胺氯噠嗪含量。

12、優(yōu)選地，上述檢測(cè)方法中，使用lc/ms/ms檢測(cè)所述含有磺胺氯噠嗪的提取液磺胺氯噠嗪含量。

13、本發(fā)明有益效果至少包括：

14、(1)本發(fā)明提供的磁性聚殼糖可以作為洗脫磺胺氯噠嗪的固體凈化小柱，該磁性聚殼糖制備方法簡(jiǎn)單，原料便宜，成本較現(xiàn)有的國標(biāo)中的固體凈化小柱的陳本更低。

15、(2)基于本發(fā)明提供的奶源中磺胺氯噠嗪的提取方法對(duì)磺胺氯噠嗪進(jìn)行加標(biāo)檢測(cè)，加標(biāo)回收率可以達(dá)到93.4％。

技術(shù)特征：

1.一種磁性殼聚糖，其特征在于，其制備方法包括：(1)將含有殼聚糖的酸溶液、fe2+鹽和fe3+鹽混合溶解得混合物；(2)將所述混合物與堿性溶液混合反應(yīng)得第一磁性殼聚糖。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性殼聚糖，其特征在于，其制備方法還包括：將所述第一磁性殼聚糖與殼聚糖交聯(lián)劑混合反應(yīng)得第二磁性殼聚糖。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的磁性殼聚糖，其特征在于，所述殼聚糖交聯(lián)劑選自戊二醛、甲醛和乙二醛中的一種或多種組合。

4.一種奶源中磺胺氯噠嗪的提取方法，其特征在于，包括：(1)將奶源進(jìn)行酶解得處理液；(2)在所述處理液加入磁性殼聚糖進(jìn)行提取得含有磺胺氯噠嗪的提取液；其中，所述磁性殼聚糖為權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的磁性殼聚糖。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的提取方法，其特征在于，提取包括：將所述磁性殼聚糖與所述處理液混合，渦旋振蕩，去上清得剩余物；將剩余物與洗脫液混合，洗脫得提取液。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的提取方法，其特征在于，所述提取包括以下條件中的一種或多種組合：

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的提取方法，其特征在于，所述提取包括以下條件中的一種或多種組合：

8.根據(jù)權(quán)利要求4至6中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的提取方法，其特征在于，所述酶解包括：使用蛋白酶進(jìn)行酶解。

9.一種奶源中磺胺氯噠嗪含量的檢測(cè)方法，其特征在于，包括：(1)將奶源按照上述權(quán)利要求4至8中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的提取方法提取得到含有磺胺氯噠嗪的提取液；(2)檢測(cè)所述含有磺胺氯噠嗪的提取液中磺胺氯噠嗪含量。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的檢測(cè)方法，其特征在于，使用lc/ms/ms檢測(cè)所述含有磺胺氯噠嗪的提取液磺胺氯噠嗪含量。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于乳液殘留物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種磁性殼聚糖、奶源中磺胺氯噠嗪的提取方法及應(yīng)用。該磁性殼聚糖的制備方法包括：(1)將含有殼聚糖的酸溶液、Fe2+鹽和Fe3+鹽混合溶解得混合物；(2)將所述混合物與堿性溶液混合反應(yīng)得第一磁性殼聚糖。該磁性聚殼糖可以作為洗脫磺胺氯噠嗪的固體凈化小柱，該磁性聚殼糖制備方法簡(jiǎn)單，原料便宜，成本較現(xiàn)有的固體凈化小柱更低。

技術(shù)研發(fā)人員：陳偉,郭宇逍,江友婭,張鳳,薛艾蓮,王玉英,谷名育,熊欣,陳瑜
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶市天友乳業(yè)股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/11/14