一種蝸牛酶的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明是一種生物的提取技術(shù)，尤其涉及一種蝸牛酶的提取方法:它是一種從蝸牛嗉囊及消化道中提取的蝸牛酶的生物提取過程。
【背景技術(shù)】
[0002]在現(xiàn)有技術(shù)中，蝸牛酶的提取主要活體蝸牛在刺激下自身分泌出來的蝸牛粘液和蝸牛的內(nèi)臟為原料，蝸牛粘液成分包括蛋白質(zhì)，蝸牛酶，黏液素，硫酸軟骨素蛋白多糖，羥基乙酸等；蝸牛的嗉囊及消化道中含有20多種酶，蝸牛酶是多種混合酶；其中有纖維素酶，果膠酶，淀粉酶，蛋白酶等；價值高，廣泛應用在細胞學，基因工程學領(lǐng)域，在醫(yī)學上，飼料的添加劑，保健品都有應用。
[0003]目前國內(nèi)并有沒有完成有效的提取蝸牛酶的提取技術(shù)，一方面蝸牛粘液的提取非常困難，不能對蝸牛內(nèi)臟進行有效的分離，在提取的過程中，蝸牛酶損害嚴重，而且蝸牛酶的保存困難，影響保管運輸。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供了一種蝸牛酶的提取方法，提取過程中充分提取蝸牛粘液，有效對蝸牛內(nèi)臟進行有效的分離，降低減少蝸牛酶的活性。本發(fā)明的目的在于提供一種操作性強，提取度高并且能夠保證蝸牛酶的成分提取方法。
[0005]為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
[0006]一種蝸牛酶的提取方法，其特征在于，包括以下步驟:
[0007]I)選取體重30-40克，月齡3個半月及4個月的健康蝸牛；
[0008]2)利用提取裝置對上述蝸牛進行具有活性酶的蝸牛粘液收集；
[0009]3)對2)中提取過蝸牛粘液的蝸牛進行蝸牛殼與蝸牛肉分開，在蝸牛肉中提取內(nèi)臟，在內(nèi)臟中提取含有蝸牛酶的棕色液體；
[0010]4)對上述2)與3)收集的含有活性酶的蝸牛粘液與棕色液體進行細胞的破碎水解；
[0011]5)對上述4)中水解過的含有蝸牛酶的水解物進行蝸牛酶提取，并經(jīng)脫色，靜置，分層后，取出上清液；
[0012]6)對上述5)提取的上清液進行三次過濾，過濾液為蝸牛酶提取液；
[0013]7)對上述過濾后的提取液進行結(jié)晶，獲得蝸牛酶制劑；
[0014]8)對上述蝸牛酶制劑進行包裝、入庫。
[0015]優(yōu)先地，用于所述步驟2)所述設(shè)備包括旋轉(zhuǎn)振動桶2、噴水器I和集液桶3 ;所述旋轉(zhuǎn)桶上設(shè)置有噴水器1，所述旋轉(zhuǎn)振動桶2外設(shè)置所述集液桶3，所述旋轉(zhuǎn)桶內(nèi)可以放置蝸牛；所述旋轉(zhuǎn)振動桶2上均有分布有液體導出孔6，原液和水的混合液通過所述液體導出孔6流入所述集液桶3 ;所述集液桶3上設(shè)置有液體收集孔5 ;所述旋轉(zhuǎn)振動桶2下端設(shè)置有旋轉(zhuǎn)振動軸，所述旋轉(zhuǎn)振動軸通過轉(zhuǎn)動帶7連接第一電機88，并由所述轉(zhuǎn)動帶7帶動而轉(zhuǎn)動；所述旋轉(zhuǎn)振動軸還連接第二電機999，所述第二電機999使所述旋轉(zhuǎn)振動軸產(chǎn)生振動；第一電機88與第二電機999分別為橫向電機與縱向電機；所述電機的功率為1.5KW。
[0016]優(yōu)先地，所述2)收集的蝸牛粘液在4°C恒溫下保存待用。
[0017]優(yōu)先地，所述步驟3)提取內(nèi)臟中的棕紅色液體，采用下列兩種方法之一:
[0018]第一種方法將蝸牛殼打破，將蝸牛肉和內(nèi)臟分開，從蝸牛內(nèi)臟里抽出嗉囊及消化道中的棕紅色液體；
[0019]第二種方法將水煮沸騰把蝸牛迅速放入，在沸水中放入3-5分鐘將蝸牛撈出放入冷水中，將蝸牛殼去掉，同時將蝸牛肉與內(nèi)臟分開，內(nèi)臟中找到棕紅色液體。
[0020]優(yōu)先地，所述步驟4)中進行水解采用的方法為高速離心泵，所述高速離心泵轉(zhuǎn)數(shù)在8000rpm-12000rpm ;水解工作環(huán)境為_4°C ;水解時間為10分鐘。
[0021]優(yōu)先地，所述步驟5)中進行利用有機溶液正丁醇提取蝸牛酶，所述正丁醇的量為水解溶液的3-5倍，加入苯甲基磺酰氟與基乙醇用于提高酶的穩(wěn)定性與防止氧化。
[0022]優(yōu)先地，所述步驟5)脫色是利用活性炭脫色，活性炭的用量在0.1%。
[0023]優(yōu)先地，所述的三次過濾分別為第一次粗濾截留大于直徑2um顆粒，第二次微濾直徑為0.2-2um的顆粒，第三次超濾截留直接20A-0.2um的顆粒。
[0024]優(yōu)先地，所述的結(jié)晶方法獲取蝸牛酶制劑采用下述兩種方法之一，第一種采用中性鹽硫酸銨，慢慢增加鹽濃度至渾濁為止，然后靜置進行結(jié)晶；第二種方法是對含酶溶液殺菌后直接采用冷凍干燥或噴霧干燥的方式結(jié)晶。
[0025]優(yōu)先地，所述步驟7)的結(jié)晶條件為酶的純度為50%以上，酶蛋白的溶度3_50mg/ml，溫度在0-4°C，PH值在4.5-6.5之間。
[0026]說明書附圖
[0027]圖1為發(fā)明涉及一種蝸牛酶提取方法的流程圖；
[0028]圖2為發(fā)明的蝸牛粘液收集器，包括1-噴水器、2-旋轉(zhuǎn)振動桶、3-集液桶、4-轉(zhuǎn)動軸、5-液體收集孔、6-液體導出孔、7-轉(zhuǎn)動帶、8-第一電機與9-第二電機。
【具體實施方式】
[0029]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細描述。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用于解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0030]相反，本發(fā)明涵蓋任何由權(quán)利要求定義的在本發(fā)明的精髓和范圍上做的替代、修改、等效方法以及方案。進一步，為了使公眾對本發(fā)明有更好的了解，在下文對本發(fā)明的細節(jié)描述中，詳盡描述了一些特定的細節(jié)部分。對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說沒有這些細節(jié)部分的描述也可以完全理解本發(fā)明。
[0031]本發(fā)明涉及一種蝸牛酶的提取方法，蝸牛酶的原料是以蝸牛，首先對蝸牛進行挑選，選擇活體健康生長的白玉蝸牛所述白玉蝸牛為30-50克的重量，所述蝸牛生長周期在3個半月到4個月齡。
[0032]對選取的蝸牛凈養(yǎng)，將選好的蝸牛放在凈養(yǎng)池中凈養(yǎng)3天，每天兩次用清水沖洗凈養(yǎng)池，使其排除體內(nèi)的糞便，清除體外的泥土。
[0033]對上述凈養(yǎng)處理過的蝸牛進行含有蝸牛酶及有效成分的粘液的收集，采用蝸牛粘液收集器，如圖2所示，為本發(fā)明的蝸牛粘液收集器，是一種具有旋轉(zhuǎn)滾動裝置的容器，包括噴水器1、旋轉(zhuǎn)振動桶2、集液桶3、轉(zhuǎn)動軸4、液體收集孔5、液體導出孔6、轉(zhuǎn)動帶7、第一電機8與第二電機9，所述第一電機8是橫向電機，所述第二電機9是豎向電機。所述旋轉(zhuǎn)振動桶2上設(shè)置有噴水器1，所述旋轉(zhuǎn)振動桶2外設(shè)置所述集液桶3，所述旋轉(zhuǎn)振動桶2內(nèi)可以放置蝸牛，所述旋轉(zhuǎn)振動桶2上均有分布有液體導出孔6，原液和水的混合液通過所述液體導出孔6流入所述集液桶3，所述集液桶3上設(shè)置有液體收集孔5，所述旋轉(zhuǎn)振動桶2下端設(shè)置有旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)動軸4，所述旋轉(zhuǎn)振動軸通過轉(zhuǎn)動帶7連接第一電機8，并由所述轉(zhuǎn)動帶7帶動而轉(zhuǎn)動，所述旋轉(zhuǎn)振動軸還連接第二電機9，所述第二電機9使所述旋轉(zhuǎn)振動軸產(chǎn)生振動，第一電機8與第二電機9分別為橫向電機與縱向電機，第一電機8與第二電機9 (功率為1.5KW)帶動旋轉(zhuǎn)振動桶2在旋轉(zhuǎn)的同時還使旋轉(zhuǎn)振動桶2產(chǎn)生振動，所述旋轉(zhuǎn)振動桶2上均勻分布有液體導出孔6，上面還設(shè)置有噴水器1，用于加水稀釋原液；所述旋轉(zhuǎn)振動桶2外還設(shè)置有集液桶3，集液桶3底部設(shè)置有液體收集孔5，可排出粘液和水。蝸牛在刺激情況下分泌出含有蝸牛酶以及蛋白質(zhì)，蛋白含量在80%以上，其余是微量元素。蝸牛在刺激情況下分泌出含有蝸牛酶以及蛋白質(zhì)。
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