一種amf+dse組合菌劑及其在制備促進黃瓜生長與抗根結(jié)線蟲的制劑中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物保護技術領域，具體涉及一種AMF+DSE組合菌劑及其在制備促進 黃瓜生長與抗根結(jié)線蟲的制劑中的應用。
【背景技術】
[0002] 叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，AMF)是陸地生態(tài)系統(tǒng)中的重要 成員，能與植物根系建立互惠共生體。AMF可改善植物的礦質(zhì)營養(yǎng)、增強植物抗病性、提高 植物在極端環(huán)境中的抗逆性，有助于植物抵御病原菌的侵害，并改善土壤團粒結(jié)構(gòu)、促進作 物的高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)高效。AMF侵染植物根尖的特性，表明該真菌的生態(tài)位與土傳病原物相 同，這就為拮抗病原物創(chuàng)造了得天獨厚的條件。更為重要的是由根內(nèi)伸展至根外于土壤中 形成的巨大菌絲網(wǎng)絡，以及由此形成的菌根網(wǎng)路為其發(fā)揮生理生態(tài)功能（如水分養(yǎng)分吸收 等）奠定了堅實的生物學和生態(tài)學基礎。AMF在農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展、生態(tài)保護、環(huán)境與食品安 全等方面亦具重要意義。
[0003] 我國的AMF研宄雖然起步較晚，開始于上世紀70年代末，10年后則進入了快速發(fā) 展階段。進入本世紀后，我國AMF研宄始終保持快速穩(wěn)定的發(fā)展。例如，AMF分類、資源與生 物多樣性方面報道7屬130種，包括球囊霉屬（Glomus)，盾巨孢囊霉屬（Scutellospora)， 無梗囊霉屬（Acaulospora)，原囊霉屬（Archaeospora)，巨孢囊霉屬（Gigaspora)，類球囊 霉屬（Paraglomus)，內(nèi)養(yǎng)囊霉屬（Entrophospora)，并不斷有新種和新記錄種報道。各國都 分離到多種不同屬的AMF種類，球囊霉屬出現(xiàn)頻度最高，尤其是G. clarum，G. etunicatum， G. geosporum，G. intraradices，G.mosseae，G. sinuosum 在全球分布最為廣泛。同時在生理 效應及生態(tài)學等方面開展了系統(tǒng)研宄工作；而菌根研宄技術方面，也建立了測定AMF接種 勢新的方法；提出了 AMF誘導植物抗病性的理論。目前，國際上已經(jīng)建立了 AMF菌種保藏庫， 收集世界AMF資源、繁殖、菌種保藏和交流，為各國研宄者提供菌種等措施來規(guī)范菌種的保 藏工作。綜上所述，AMF物種多樣研宄取得了巨大進展，多樣性和資源研宄與保護得到了發(fā) 達國家和發(fā)展中國家的重視。
[0004] 深色有隔內(nèi)生真菌（dark septate endophytes, DSE)廣泛定殖于植物根系皮層細 胞內(nèi)或細胞間隙，形成深色有隔的菌絲和微菌核。DSE通?？梢源龠M植物生長，改善養(yǎng)分吸 收，提高植物抗病性，增強抵御不良環(huán)境條件的能力。自然環(huán)境下DSE和AMF可以同時侵染 植物根系。DSE與其他土壤微生物有協(xié)同互助關系，DSE可以在根內(nèi)或根間與AMF形成致密 菌絲橋，擴大根系養(yǎng)分吸收范圍，有效進行物質(zhì)交換與信息傳遞，共同促進植物根圍微生物 活動，改善植物根圍土壤微環(huán)境，從而促進植物的生長發(fā)育。
[0005] 有關DSE的研宄報道從上世紀初已經(jīng)開始，早期對DSE的認識源于研宄者在菌根 真菌研宄中所發(fā)現(xiàn)的一些非傳統(tǒng)意義上的菌根真菌，經(jīng)過一段時間的探索將其正式命名為 DSE。DSE分布廣泛，幾乎在地球所有生境中均有發(fā)現(xiàn)，但除了少數(shù)幾種DSE的分類地位 已經(jīng)明確外，大多數(shù)類群的分類地位尚不明確。目前對這該類群真菌的認識仍處于起步階 段。
[0006] 黃瓜（Cucumis sativus)作為一種全球性的重要蔬菜作物，日常生活中占據(jù)重要 地位。但是，生產(chǎn)中的連作障礙使得黃瓜土傳病害，尤其是根結(jié)線蟲病害的發(fā)病率和死亡 率不斷升高，造成大面積減產(chǎn)，對黃瓜栽培影響很大，是當今黃瓜生產(chǎn)中較為突出的問題之 〇

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明提供了一種AMF+DSE組合菌劑及其在制備促進黃瓜生長與抗根結(jié)線蟲的 制劑中的應用，利用本發(fā)明所述的組合菌劑可以用于促進植物的生長發(fā)育和提高植物的抗 病性。
[0008] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案予以實現(xiàn)：
[0009] 本發(fā)明提供了莖點霉F2-3-10菌株，其分類命名為Phoma Ieveillei，保藏于中國 微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為：CGMCC No. 10482。
[0010] 本發(fā)明還提供了一種AMF+DSE組合菌劑，所述組合菌劑包括AMF菌劑和DSE菌劑， 所述DSE菌劑為保藏編號為CGMCC No. 10482的莖點霉F2-3-10菌株制成的菌劑。
[0011] 所述AMF菌劑為：摩西球囊霉、全球盾巨孢囊霉或光壁無梗囊霉中的一種或幾種。
[0012] 本發(fā)明進一步提供了所述的AMF+DSE組合菌劑在制備促進植物生長的制劑中的 應用。
[0013] 所述組合菌劑能提高黃瓜的株高、地上部干重、地下部干重和單株產(chǎn)量。
[0014] 本發(fā)明進一步提供了所述的AMF+DSE組合菌劑在制備抗根結(jié)線蟲的制劑中的應 用。
[0015] 所述根結(jié)線蟲為南方根結(jié)線蟲（Meloidogyne incognita)。
[0016] 所述組合菌劑能顯著降低黃瓜根內(nèi)二齡幼蟲數(shù)、線蟲雌蟲數(shù)和卵數(shù)。
[0017] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的優(yōu)點和技術效果是：本發(fā)明在溫室栽培條件下采用盆 栽方法，設置不同AMF+DSE組合對黃瓜進行接種試驗，測定分析了不同AMF+DSE組合的侵 染率、叢枝著生率、叢枝類型等對黃瓜生長發(fā)育和黃瓜根結(jié)線蟲的影響，通過試驗結(jié)果確 定最佳的抗南方根結(jié)線蟲的AMF+DSE組合為G. m+S. a+A. Ι+Ph. 1，該組合處理的黃瓜植株 高度、莖粗度、地上部干重、根系干重和單株產(chǎn)量最高、而病情指數(shù)最低，分別為130. 3cm、 0. 95cm、20. 7g、2. 9g、562. 9g和15. 3。表明促進黃瓜生長發(fā)育、抗南方根結(jié)線蟲的最佳組合 是G. m+S. a+A. 1+Ph. 1。此最佳組合菌劑具有促進黃瓜的生長與提高抗根結(jié)線蟲的功效，本 發(fā)明為進一步探索AMF和DSE的相互效應與作用機制奠定了基礎。
【具體實施方式】
[0018] 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的技術方案做進一步詳細的說明。
[0019] 實施例1
[0020] L試驗材料
[0021] 黃瓜（Cucumis sativus，品種為"津優(yōu)35號"），由天津科潤農(nóng)業(yè)科技股份有限 公司提供，也可采用其它常見黃瓜品種；南方根結(jié)線蟲（Meloidogyne incognita，Mi)由 青島農(nóng)業(yè)大學植物保護學院線蟲實驗室提供；DSE為莖點霉（Phoma leVeillei)F2-3-10 菌株（簡稱Ph. I)，由青島農(nóng)業(yè)大學菌根生物技術研宄所提供;AMF為摩西球囊霉Glomus mosseae (保藏編號Gm32)，地表球囊霉Glomus versiforme (保藏編號Gv39)，光壁無梗囊霉 Acaulospora Iaevis (保藏編號 A157)，全球盾巨抱囊霉 Scutellospora aurigloba (保藏 編號Sa97)，保藏編號Gm32、保藏編號Gv39、保藏編號A157和保藏編號Sa97均是由青島農(nóng) 業(yè)大學菌根生物技術研宄所提供，本發(fā)明中的AMF也可以采用