堿蓬黃酮c及其制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是一種具有治療免疫力相關(guān)疾病的新化合物一一堿蓬 黃酮C，化學(xué)名：6,2' -二羥基-5,7-二甲氧基-異黃燒（6,2' -dihydroxy-5,7_dimethox yisoavanone)的制備方法和在醫(yī)藥領(lǐng)域中的治療免疫力相關(guān)疾病的用途。具體涉及從堿 蓬全草乙醇提取物中分離得到的一種新化合物，該化合物具有對DPPH自由基、?0H自由基 和〇2?自由基的清除作用，另外，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)堿蓬黃酮C具有很好的免疫抑制活性，可用 于制備治療免疫力低下相關(guān)疾病的藥物。
【背景技術(shù)】
[0002] 喊蓬 (Bunge) Bunge 為薬科 Chenopodiaceae 喊蓬屬 ^'waet/aForsk. ex Scop. -年生草本真鹽植物。它廣泛分布于我國新疆、山東、河北、遼寧、吉林、內(nèi)蒙古及 甘肅等地的鹽堿荒漠和沿海灘涂。已知天然存在的植物黃酮表現(xiàn)出廣泛的生物活性，包括 抗氧化、抗腫瘤、抗動脈粥樣硬化、抗炎等。研究表明，堿蓬中含有豐富的營養(yǎng)成分，堿蓬種 子脂肪含量較高，約占其干物質(zhì)的36. 5%，高于大豆；堿蓬鮮嫩莖葉的蛋白質(zhì)含量為40% ;除 以上營養(yǎng)成分外，堿蓬中還含有豐富人類所必需的維生素以及微量元素，堿蓬中含有大量 黃酮類化合物，但對它的化學(xué)成分研究較少。堿蓬藥材始載于《救荒本草》，云："其葉味微 咸，性微寒"。據(jù)清代《本草綱目拾遺》記載：堿蓬"味咸性涼，清熱消積"，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā) 現(xiàn)，堿蓬具有抗炎、保肝、降血脂、抗衰老等藥理活性而且對老年人、高血壓病人具有一定的 保健作用，另有文獻(xiàn)報道二氫異黃酮類化合物具有較好的抗氧化及免疫抑制活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明提供一種具有顯著抑制自由基的新化合物一一堿蓬黃酮C的制備方法和在 醫(yī)藥領(lǐng)域中治療免疫低下相關(guān)疾病的用途以及抗氧化活性。
[0004] 本發(fā)明公開了該化合物的結(jié)構(gòu)式
分子式為：C17H1606，不飽和度為10。分子量：316。
[0005] 命名為：堿蓬黃酮C，化學(xué)名：6, 2'-二羥基-5, 7-二甲氧基-異黃烷（6, 2'-dih ydroxy-5, 7-dimethoxyisoavanone)〇
[0006] 本發(fā)明中上述化合物的制備方法如下： 其特征在于以8月份產(chǎn)自山東省壽光市的堿蓬為原料，經(jīng)反復(fù)通過硅膠或球形硅膠、 Sephadex LH_20(Sep.)凝膠柱層析、反相材料0DS中的一種或幾種柱層析和重結(jié)晶等手段 分離純化得到該化合物。
[0007] 本發(fā)明的新化合物及其衍生物與醫(yī)學(xué)上可接受的藥用輔料組成藥物制劑用于治 療免疫力相關(guān)疾病?？芍苽涞膭┬陀校浩瑒⒛z囊劑、顆粒劑和注射劑。
[0008] 四、【附圖說明】： 以下圖可作為附件材料上報。
[0009]圖1、化合物的1H-NMR譜 圖2、化合物的13C-NMR譜 圖3、化合物的DEPT譜 圖4、化合物的1H-i COSY的譜 圖5、化合物的HSQC譜 圖6、化合物的HMBC譜 圖7、化合物的R0ESY譜 圖8、化合物的ESI -MS譜 五、【具體實施方式】： 結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不僅僅限于所列舉的實 施方式。
[0010] 實施例1.從堿蓬全草中分離和鑒定該新化合物 堿蓬干燥全草約10 Kg，粉碎，經(jīng)80%乙醇加熱回流提取3次，濃縮，得到總浸膏，依次經(jīng) 石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等體積萃取3次，得乙酸乙酯部位浸膏180 g，經(jīng)硅膠柱層析，石 油醚-乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫，共收集11個流份，流份6反復(fù)經(jīng)硅膠柱、Sephadex LH-20 柱、反相柱層析從堿蓬干燥全草乙醇提取物中得到該單體化合物，通過理化性質(zhì)、波譜方法 鑒定為堿蓬黃酮C，經(jīng)文獻(xiàn)檢索該化合物是新化合物。
[0011] 該化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)核磁共振譜鑒定如下： 無色油狀物，可溶于氯仿、甲醇等有機(jī)溶劑，紫外365nm下無熒光，紫外254nm下有暗 斑，TLC濃硫酸-香草醛顯粉紅色逐漸變亮黃色，F(xiàn)eCl3顯色陽性，Molish反應(yīng)呈陰性，初步 判斷該化合物為黃酮類化合物。ESI-MS m/z 317 [M+H]+，提示其分子量為316。結(jié)合1H-NMR 和13C-NMR圖譜數(shù)據(jù)推斷SG-18的分子式為C 17H1606，不飽和度為10。
[0012] 4-匪1?(300 MHz，CDC13)心:8.40 (lH，brs)，6.41 (lH，brs)為 2 個酚羥基的信 號峰；心:6. 96 (1H，d，方7. 90 Hz)，6. 89 (1H，t，方7. 60,7. 50 Hz)，7. 18 (1H，t，方7. 90， 7.60抱），7.49(1札(1，方7.50抱）是厶厶'88'系統(tǒng)的4個芳香氫信號；心 :6.36(111，8) 是芳香氫的信號峰；A:3. 88 (6H，s)是-OMe的信號峰，說明存在2個-OMe ; A:4. 89 (1H， dd，方11. 90, 3. 50 Hz)，4. 73 (1H，dd，方11. 90,4. 50 Hz)為與氧相連的-CH2上的氫信號； A:3. 97 (lH，t，方4. 45, 5. 35 Hz)為與氧相連且與一個亞甲基相連的-CH上的氫信號。
[0013]結(jié)合11-11〇)5￥譜和1?0￡5￥譜中心:7.49(111，（1，方7.50抱）與6.89(111，扒 ^7.60,7.50 Hz)，4.89(lH，dd，^11.90,3.50 Hz)，4.73(lH，dd，^11.90,4.50 Hz)，3.97 (1H，t，方4. 45, 5. 35 Hz)有相關(guān)峰；心:7. 18 (1H，t，方7. 90, 7. 60 Hz)與 6. 96 (1H，d， 方7.90抱），6.89(111，扒方7.60,7.50 抱）以及6.96(111，(1，方7.90抱）與7.18(111，扒 方7.90,7.60 抱），6.89(111，扒方7.60,7.50 抱）有相關(guān)峰，6.89(111，扒方7.60,7.50 抱） 與7.49(1札(1，方7.50抱），7.18(111，扒方7.90,7.60 抱），6.96(111，(1，方7.90抱）有相 關(guān)峰，可推斷出存在1'，2'-二取代芳香B環(huán)。
[0014]13C-NMR (75 MHz，CDC13)與 DEPT 譜結(jié)合，可知有 6 個-CH 即心:129. 3,126. 9， 120. 9,118. 0,98. 9,46. 9 ;2個-CH3即心:61. 5,61. 3 ;8個季碳即 Jc:191. 9,160. 2,157. 0， 155. 5,155. 5,135. 5,123. 0,107. 3 ;1 個-CH2即心:69. 2。
[0015] 邯0<：譜可知心:7.49(111，(1，方7.50抱）與心:126.9有相關(guān)峰，心 :7.18(111，扒 方7.90,7.60 抱）與心:129.3有相關(guān)峰，心:6.89(111，扒方7.60,7.50 抱）與心:120.9 有相關(guān)峰，心:6.96(1札(1，方7.90抱）與心:118.0有相關(guān)峰，證明存在廣，2'-二取 代芳香B環(huán)；Jh:6. 36(lH，s)與心:98. 9有相關(guān)峰，證明該碳與氫相連；Jh:3. 97(lH，t， 方4.45,5.35 抱）與心:46.9有相關(guān)峰；心:4.89(111，(1(1，方11.90,3.50 抱），4.73(111， (1(1，方11.90,4.50抱）與4:69.2有相關(guān)峰，證明這2個氫與該碳相連 ；心:3.88(311，8) 與4:61. 5，心:3. 88 (3H，s)與4:61. 3有相關(guān)峰，證明2個-OMe的存在。
[0016]從 HMBC 譜中心:7.49 (1H，d，方7.50 Hz)與心:155.5，129.3,46.9 有相關(guān)峰， 心:7.18(111，扒方7.90,7.60 抱）與4:155.5，126.9有相關(guān)峰，心:6.96(111，(1，方7.90 抱）與 Jc:155.5，123.3，120.9 有相關(guān)峰，心:6.89(lH，t，方7.60,7.50 抱）與 Jc:155.5， 123. 3,118. 0有相關(guān)峰，證明C-P與C-2'化學(xué)位移分別為4:123. 3,155. 5;心:6. 36 (lH，s)與心:191. 9,160. 2,157. 0,155. 5,135. 5,107. 3 有相關(guān)峰，證明 C-8 可能與氫相連； 心:4. 89(lH，dd，方 11. 90,3. 50 抱）與 Jc:191. 9,160. 2,123. 3,69. 2,49. 6 有相關(guān)峰，心： 4. 73 (1H，dd，方 11. 90,4. 50 Hz)與 191. 9,160. 2,123. 3,69. 2 有相關(guān)峰；心:3. 97 (1H， t，方4. 45,5. 35 Hz)與 191. 9,155. 5,135. 5,126. 9,123. 3,69. 2,驗證 Fig. 2. 25 歸屬正確； 心:3.88(611，8，-0116)與4:155.5，135.5有相關(guān)峰，說明（：-5,7分別連接-0116，(：-2'與 C-6分別與-OH相連。
[0017] 綜合以上信息，推