沉淀，獲得包被膠體金的鏈霉親和素溶液。
[0083] 2、試紙條的制備
[0084] 將金標墊（GL0194,5mm)用預處理液（10mMTris-HCl，ρΗ6· 5)浸泡，15min，37 度 烘烤2小時。將烘干的金標墊剪成適當大小，把包被膠體金的鏈霉親和素溶液點在上面，待 整塊金標墊吸漲后，37度烘烤2小時，備用。
[0085] 在NC膜（whatmanAE99/135S/180S)上劃線兩條不同標簽序列（SEQIDN0:1和 SEQIDN0:2)的檢測線，以及劃線一條核苷酸序列（SEQIDN0:21)修飾的生物素的質檢 線，37度烘箱烘烤1. 5小時，備用，所述質檢線與金標墊相距最遠，兩條檢測線位于質檢線 和金標墊之間；將備用的金標墊搭接在備用的NC膜一端，緊接著將吸水濾紙分別搭接在所 述金標墊和NC膜的外端，再將所述吸水濾紙、金標墊和NC膜設置在載玻片上，獲得所述試 紙條。
[0086] 3、引物的制備
[0087] 針對待檢測的DNA中SNP位點設計5'端偶聯(lián)有標簽序列（SEQIDNO: 1)的野生 型ARMS-PCR上游引物、5'端偶聯(lián)有標簽序列（SEQIDN0:2)的突變型ARMS-PCR上游引物 以及5'端偶聯(lián)有生物素的下游引物。
[0088] 實施例2 :本發(fā)明所述試紙條的制備
[0089]1、包被膠體金的鏈霉親和素溶液的配制
[0090] 配制鏈霉親和素溶液,濃度為lug/uL。將鏈霉親和素溶液注射入透析卡，置于裝有 ddH20的燒杯進行透析。將透析卡取出，從卡中取出透析樣品，測蛋白濃度，確定濃度為lug/ uL〇
[0091] 檢測未包被鏈霉親和素的膠體金溶液pH，調整pH為6. 6。膠體金溶液與鏈霉親 和素溶液的最佳反應量為l〇〇uL:lug(20uL)。將鏈霉親和素逐滴加入膠體金溶液中，邊加 邊震蕩，加完后室溫靜置30min。2000rpm，4°C，10min。收集上清，lOOOOrpm，10min，4°C，用 lOmMTris，以300uL體積溶解沉淀，獲得包被膠體金的鏈霉親和素溶液。
[0092] 2、試紙條的制備
[0093] 將金標墊（GL0194,5mm)用預處理液（10mMTris-HCl，ρΗ6· 5)浸泡，15min，37 度 烘烤2小時。將烘干的金標墊剪成適當大小，把包被膠體金的鏈霉親和素溶液點在上面，待 整塊金標墊吸漲后，37度烘烤2小時，備用。
[0094] 在NC膜（whatmanAE99/135S/180S)上劃線兩條不同反標簽序列（SEQIDN0:13 和SEQIDNO: 14)的檢測線，以及劃線一條核苷酸序列（SEQIDNO: 22)修飾的生物素的質 檢線，37度烘箱烘烤1. 5小時，備用，所述質檢線與金標墊相距最遠，兩條檢測線位于質檢 線和金標墊之間；將備用的金標墊搭接在備用的NC膜一端，緊接著將吸水濾紙分別搭接在 所述金標墊和NC膜的外端，再將所述吸水濾紙、金標墊和NC膜設置在載玻片上，獲得所述 試紙條。
[0095] 3、引物的制備
[0096] 針對待檢測的DNA中SNP位點設計5 '端偶聯(lián)有標簽序列（SEQIDN0:3)和 C3Spacer墊片序列的野生型ARMS-PCR上游引物、5'端偶聯(lián)有標簽序列（SEQIDN0:4)和 Spacer9墊片序列的突變型ARMS-PCR上游引物以及5'端偶聯(lián)有生物素的下游引物，墊片序 列連接標簽序列和ARMS-PCR上游引物。
[0097] 實施例3 :本發(fā)明所述試紙條的制備
[0098] 1、包被膠體金的鏈霉親和素溶液的配制
[0099] 配制鏈霉親和素溶液,濃度為lug/uL。將鏈霉親和素溶液注射入透析卡，置于裝有 ddH20的燒杯進行透析。將透析卡取出，從卡中取出透析樣品，測蛋白濃度，確定濃度為lug/ uL〇
[0100] 檢測未包被鏈霉親和素的膠體金溶液pH，調整pH為6. 6。膠體金溶液與鏈霉親 和素溶液的最佳反應量為l〇〇uL:lug(20uL)。將鏈霉親和素逐滴加入膠體金溶液中，邊加 邊震蕩，加完后室溫靜置30min。2000rpm，4°C，lOmin。收集上清，lOOOOrpm，lOmin，4°C，用 lOmMTris，以300uL體積溶解沉淀，獲得包被膠體金的鏈霉親和素溶液。
[0101] 2、試紙條的制備
[0102] 將金標墊（GL0194,5mm)用預處理液（10mMTris-HCl，ρΗ6· 5)浸泡，15min，37 度 烘烤2小時。將烘干的金標墊剪成適當大小，把包被膠體金的鏈霉親和素溶液點在上面，待 整塊金標墊吸漲后，37度烘烤2小時，備用。
[0103] 在NC膜（whatmanAE99/135S/180S)上劃線兩條不同標簽序列（SEQIDN0:5和 SEQIDN0:6)的檢測線，以及劃線一條核苷酸序列（SEQIDN0:23)修飾的生物素的質檢 線，37度烘箱烘烤1. 5小時，備用，所述質檢線與金標墊相距最遠，兩條檢測線位于質檢線 和金標墊之間；將備用的金標墊搭接在備用的NC膜一端，緊接著將吸水濾紙分別搭接在所 述金標墊和NC膜的外端，再將所述吸水濾紙、金標墊和NC膜設置在載玻片上，獲得所述試 紙條。
[0104] 3、引物的制備
[0105] 針對待檢測的DNA中SNP位點設計5'端偶聯(lián)有標簽序列（SEQIDN0:5)的野生 型ARMS-PCR上游引物、5'端偶聯(lián)有標簽序列（SEQIDN0:6)的突變型ARMS-PCR上游引物 以及5'端偶聯(lián)有生物素的下游引物。
[0106] 實施例4 :本發(fā)明所述試紙條的制備
[0107] 1、包被膠體金的鏈霉親和素溶液的配制
[0108] 配制鏈霉親和素溶液,濃度為lug/uL。將鏈霉親和素溶液注射入透析卡，置于裝有 ddH20的燒杯進行透析。將透析卡取出，從卡中取出透析樣品，測蛋白濃度，確定濃度為lug/ uL〇
[0109] 檢測未包被鏈霉親和素的膠體金溶液pH，調整pH為6. 6。膠體金溶液與鏈霉親 和素溶液的最佳反應量為l〇〇uL:lug(20uL)。將鏈霉親和素逐滴加入膠體金溶液中，邊加 邊震蕩，加完后室溫靜置30min。2000rpm，4°C，10min。收集上清，lOOOOrpm，10min，4°C，用 lOmMTris，以300uL體積溶解沉淀，獲得包被膠體金的鏈霉親和素溶液。
[0110] 2、試紙條的制備
[0111] 將金標墊（GL0194,5mm)用預處理液（10mMTris-HCl，ρΗ6· 5)浸泡，15min，37 度 烘烤2小時。將烘干的金標墊剪成適當大小，把包被膠體金的鏈霉親和素溶液點在上面，待 整塊金標墊吸漲后，37度烘烤2小時，備用。
[0112] 在NC膜（whatmanAE99/135S/180S)上劃線兩條不同反標簽序列（SEQIDN0:17 和SEQIDNO: 18)的檢測線，以及劃線一條核苷酸序列（SEQIDNO: 24)修飾的生物素的質 檢線，37度烘箱烘烤1. 5小時，備用，所述質檢線與金標墊相距最遠，兩條檢測線位于質檢 線和金標墊之間；將備用的金標墊搭接在備用的NC膜一端，緊接著將吸水濾紙分別搭接在 所述金標墊和NC膜的外端，再將所述吸水濾紙、金標墊和NC膜設置在載玻片上，獲得所述 試紙條。
[0113] 3、引物的制備
[0114] 針對待檢測的DNA中SNP位點設計5 '端偶聯(lián)有標簽序列（SEQIDN0:7)和 dSpacer墊片序列的野生型ARMS-PCR上游引物、5'端偶聯(lián)有標簽序列（SEQIDN0:8)和 3'C6SpaCer墊片序列的突變型ARMS-PCR上游引物以及5'端偶聯(lián)有生物素的下游引物，墊 片序列連接標簽序列和ARMS-PCR上游引物。
[0115] 實施例5 :本發(fā)明所述試紙條的制備
[0116] 1、包被膠體金的鏈霉親和素溶液的配制
[0117] 配制鏈霉親和素溶液，濃度為lug/uL。將鏈霉親和素溶液注射入透析卡，置于裝有 ddH20的燒杯進行透析。將透析卡取出，從卡中取出透析樣品，測蛋白濃度，確定濃度為lug/ uL〇
[0118] 檢測未包被鏈霉親和素的膠體金溶液pH，調整pH為6. 6。膠體金溶液與鏈霉親 和素溶液的最佳反應量為l〇〇uL:lug(20uL)。將鏈霉親和素逐滴加入膠體金溶液中，邊加 邊震蕩，加完后室溫靜置30min。2000rpm，4°C，lOmin。收集上清，lOOOOrpm，lOmin，4°C，用 lOmMTris，以300uL體積溶解沉淀，獲得包被膠體金的鏈霉親和素溶液。
[0119] 2、試紙條的制備
[0120] 將金標墊（GL0194,5mm)用預處理液（10mMTris-HCl，ρΗ6· 5)浸泡，15min，37 度 烘烤2小時。將烘干的金標墊剪成適當大小，把包被膠體金的鏈霉親和素溶液點在上面，待 整塊金標墊吸漲后，37度烘烤2小時，備用。
[0121] 在NC膜（whatmanAE99/135S/180S)上劃線兩條不同標簽序列（SEQIDN0:9和 SEQIDNO: 10)