葡聚糖酶，編碼它們的核酸以及制備和使用它們的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及具有葡聚糖酶，例如內(nèi)切葡聚糖酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶活性或這些活性的組合的多肽，和編碼它們的多核苷酸。在一個(gè)方面，葡聚糖酶活性是內(nèi)切葡聚糖酶活性(例如內(nèi)-1,4-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶活性)，和包括水解纖維素、纖維素衍生物(例如羧甲基纖維素和羥乙基纖維素)、地衣多糖中的1,4-β-D-糖苷鍵，以及水解混合的β-1,3-葡聚糖，諸如谷物β-D-葡聚糖或木葡聚糖和含有纖維素部分的其他植物中的β-1,4鍵。此外，本發(fā)明也提供了設(shè)計(jì)新酶的方法，和使用它們的方法。在可選擇的方面，新型葡聚糖酶，例如內(nèi)切葡聚糖酶、甘露聚糖酶或木聚糖酶在增高的pH和溫度中具有增加的活性和穩(wěn)定性。
【專利說明】葡聚糖酶，編碼它們的核酸以及制備和使用它們的方法
[0001]本申請(qǐng)是分案申請(qǐng)，原申請(qǐng)的申請(qǐng)日為2004年07月02日、申請(qǐng)?zhí)枮?00480025009.2 (PCT/US2004/021492)、發(fā)明名稱為“葡聚糖酶，編碼它們的核酸以及制備和使用它們的方法”。
[0002]查閱提交在光盤上的序列表
[0003]本申請(qǐng)包括光盤(一式四份提交)，該光盤中含有序列表。序列表的全部?jī)?nèi)容通過參考并入本文。序列表在光盤上標(biāo)識(shí)如下:
【權(quán)利要求】
1.分離或重組的核酸，所述核酸包括與SEQID NO: 175具有至少50%的序列同一性的核酸序列，所述序列同一性在至少約20、30、40、50、60、75或100個(gè)殘基的區(qū)域內(nèi)，其中所述核酸編碼至少一種具有葡聚糖酶活性的多肽，所述序列同一性通過采用序列比對(duì)算法的分析或通過目視檢查法來測(cè)定。
2.如權(quán)利要求1所述的分離或重組的核酸,其中所述序列同一性至少約51%、52%、53%、54%、55%、56%、57%、58%、59%、60%、61%、62%、63% 或 64%。
3.如權(quán)利要求2所述的分離或重組的核酸，其中所述序列同一性至少約65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99% 或更大的序列同一性。
4.如權(quán)利要求1所述的分離或重組的核酸，其中所述的序列同一性是在至少大約50、75、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1050、1100、1150或更多個(gè)殘基，或者基因或轉(zhuǎn)錄物的全長(zhǎng)區(qū)域上。
5.如權(quán)利要求3所述的分離或重組的核酸，其中所述核酸序列包括SEQID NO: 175中示出的序列。
6.如權(quán)利要求1所述的分離或重組的核酸，其中所述核酸序列編碼具有SEQIDNO: 176中示出的序列的多肽。
7.分離或重組的核酸，其中所述核酸包括序列，所述序列在嚴(yán)緊性條件下雜交到包括SEQ ID NO: 175的核酸，其 中所述核酸編碼具有葡聚糖酶活性的多肽。
8.如權(quán)利要求7所述的分離或重組的核酸，其中所述核酸長(zhǎng)度為至少約20、30、40、50、60、75、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000 個(gè)或更多殘基，或基因或轉(zhuǎn)錄物的全長(zhǎng)。
9.如權(quán)利要求7所述的分離或重組的核酸，其中所述嚴(yán)緊性條件包括洗滌步驟，所述洗滌步驟包括在0.2XSSC中，在約65°C的溫度洗滌約15分鐘。
10.核酸探針，用于鑒定編碼具有葡聚糖酶活性的多肽的核酸，其中所述探針包括序列的至少10個(gè)連續(xù)的堿基，所述序列包括SEQ ID NO: 175，其中所述探針通過結(jié)合或雜交鑒定核酸。
11.如權(quán)利要求10所述的核酸探針、其中所述探針包括寡核苷酸，所述寡核苷酸包括至少約10至50、約20至60、約30至70、約40至80、或約60至100或約50至150個(gè)連續(xù)喊基。
12.核酸探針，用于鑒定編碼具有葡聚糖酶活性的多肽的核酸，其中所述探針包括核酸，所述核酸包括與SEQ ID NO: 175具有至少50%序列同一性的核酸序列的至少約10個(gè)連續(xù)殘基。所述序列同一性通過用序列比對(duì)算法分析或通過目視檢查法來測(cè)定。
13.如權(quán)利要求12所述的核酸探針，其中所述探針包括寡核苷酸，所述寡核苷酸包括至少約10至50、約20至60、約30至70、約40至80、約60至100或約50至150個(gè)連續(xù)堿基。
【文檔編號(hào)】C12NGK103484485SQ201310370270
【公開日】2014年1月1日 申請(qǐng)日期:2004年7月2日 優(yōu)先權(quán)日:2003年7月2日
【發(fā)明者】B·斯蒂爾, W·卡倫, S·希利, D·普利安 申請(qǐng)人:維萊尼姆公司