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      一種茶籽黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物及其制法和用圖_2

      文檔序號:9803426閱讀:來源:國知局
      醇復溶后,加入無水碳酸鈉15g,醋酸鋅10g,75°C反應8h;用氨水調(diào)節(jié)pH至9,靜置沉淀20小 時,收集沉淀用乙醇洗滌后,60 °C真空干燥5小時,制得45g的黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合 物。
      [0047] 產(chǎn)物同實施例1同樣檢測,結(jié)果與實施例1 一致。
      [0048] 實施例6
      [0049]將脫脂油茶籽柏1kg,加入18L的體積分數(shù)70 %的乙醇水溶液,80 °C回流提取2.5小 時,過濾,濾液加入鹽酸至HC1的終濃度4.5mol/L,75°C水解時間8小時;65°C和0.03大氣壓 下減壓濃縮至濾液體積的1/3,加入濃縮液體積5倍水沉淀,沉淀物用其等倍質(zhì)量的無水乙 醇復溶后,加入無水碳酸鈉17g,醋酸鋅14g,80°C反應9h,用氨水調(diào)節(jié)pH至9,靜置沉淀12小 時,收集沉淀用乙醇洗滌后,80°C真空干燥3.5小時,制得34g的黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合 物。
      [0050]產(chǎn)物同實施例1同樣檢測,結(jié)果與實施例1 一致。
      [0051 ] 實施例7
      [0052] 取實施例1~6的黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物10g,與乳糖、結(jié)晶纖維素按3: 7混 合物30g、l%硬脂酸鎂混合均勻,經(jīng)壓片機制成每片200mg的片劑。
      [0053] 實施例8
      [0054] 稱取實施例1~6制得的黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物10g,加入藥用微晶纖維素 30g,混合均勻,濕法制粒,用乙醇調(diào)節(jié),制得顆粒松散過20目篩,晾干。干燥后填充膠囊,即 得黃酮苷元并茶阜苷元鋅配合物的膠囊劑。
      [0055] 實施例9
      [0056] 取實施例1~6的黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物10g,用多乙氧基醚1000mL溶解后, 灌入小瓶,制成注射針劑。
      [0057] 實施例10
      [0058] 稱取實施例1~6制得的黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物10g,加入50g PEG6000,加 熱至60°C熔化后混合均勻,置于滴丸機內(nèi),用液體石蠟致冷,滴丸。冷卻即得黃酮苷元并茶 皂苷元鋅配合物的滴丸劑。
      [0059] 本發(fā)明的黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物具有顯著神經(jīng)保護作用,通過以下實驗得 以證實。
      [0060] (1)對谷氨酸(Glu)損傷大鼠海馬組織的保護性實驗
      [0061 ] 方法:取4~5月齡雄性Wistar大鼠40只,體重(200±20)g,隨機分為假手術組、Glu 損傷組、黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物組、山萘酚組、茶皂素組每組8只。給藥組預先灌胃給 藥l〇d,其余組灌胃等量生理鹽水。鼠經(jīng)尾靜脈注射硫噴妥鈉麻醉后,固定于腦立體定位儀, 切開顏頂正中皮膚及骨膜,清晰暴露前肉,在前肉后〇.8mm,矢狀縫右側(cè)旁1.5mm處鉆開盧頁 骨,用微量注射器行側(cè)腦室注射Glu4yL( lmg/kg),進針深度3.8mm,留針5min。取針后觀察大 鼠行為學改變,以出現(xiàn)癲癇樣發(fā)作的表現(xiàn)為模型成功。注射Glu溶液2h后,將大鼠斷頭處死, 迅速取全腦,分離出海馬,稱重后加入生理鹽水配制成1:10(重量體積比)的海馬組織勻漿。 取各組海馬組織勻漿,嚴格按照試劑盒說明書操作,用多功能酶標儀檢測其中MDA含量、S0D 和GSH-Px活性。結(jié)果見表1。
      [0062] 結(jié)果:偵_室注射Glu可引起大鼠海馬組織中MDA含量升高,S0D和GSH-Px的活性降 低(p〈0.05);與Glu損傷組比較,藥物組MDA含量均降低,S0D和GSH-Px的活性均升高,黃酮苷 元并茶皂苷元鋅配合物組變化最大,達顯著水平(P〈〇. 01 ),表明黃酮苷元并茶皂苷元鋅配 合物可提高腦內(nèi)抗氧化酶的活性而拮抗Glu的神經(jīng)毒性,具有神經(jīng)保護作用,其效果優(yōu)于山 萘酚和茶皂素組。
      [0063] 表1黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物對海馬組織中抗氧化酶活性影響彳:SD )
      [0064]
      [0065] (2)對MPTP所致小鼠多巴胺神經(jīng)元損傷的保護實驗
      [0066] 方法:取5~6月齡雄性小鼠50只,體重(20 ± 2)g,隨機分為正常對照組、MPTP組、黃 酮苷元并茶皂苷元鋅配合物、山萘酚組、茶皂素組,每組10只。給藥組預先腹腔注射給藥3d, 每天1次,其余組腹腔注射等量生理鹽水。第4d除正常組外,其它均注射MPTP溶液4mg/k g(37d 后,將小鼠斷頭處死,迅速取全腦,分離出紋狀體,稱重后加入PE緩沖液配制成1:10(重量體 積比)的組織勻漿。勻漿液離心后,經(jīng)HPLC測定多巴胺(DA)含量。結(jié)果見表2。
      [0067] 結(jié)果:MPTP組DA含量較正常組顯著降低(p〈0.05),表明MPTP造成了多巴胺神經(jīng)元 的損傷。黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物給藥組DA含量與MPTP照組比顯著提高(p〈0.05),說 明黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物對MPTP所致多巴胺神經(jīng)元的損傷有較好的保護作用。
      [0068] 表2黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物對紋狀體DA含量的影響(I±SD )
      [0069]
      【主權(quán)項】
      1. 一種茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物,其特征在于:其結(jié)構(gòu)式如下式所示:2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物的制備方法,其特征在于:具 體包括W下步驟:將脫脂茶巧巧用乙醇水溶液提取,過濾,向濾液中加酸水解,濃縮,得到濃 縮液;向濃縮液中加入沉淀劑進行沉淀,得到沉淀物;將沉淀物溶解,加入無水碳酸鋼和鋒 鹽,回流反應,調(diào)節(jié)抑至8~10,靜置沉淀,洗涂,干燥,即得茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合 物。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物的制備方法,其特征在于:所 述乙醇水溶液的體積分數(shù)為70~85% ;所述提取溫度為60~80°C,提取時間1~3小時;所述 水解溫度70~80°C,水解時間5~8小時;所述回流反應溫度70~80°C,反應時間為5~lOh。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物的制備方法,其特征在于:所 述乙醇水溶液的加入量與脫脂茶巧巧原料的液固比為(10~20)mL:lg;所述酸為鹽酸;所述 鹽酸加入濾液后肥1的終濃度為2~5mol/L。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物的制備方法,其特征在于:所 述無水碳酸鋼加入量為脫脂茶巧質(zhì)量的0.5~2%,所述鋒鹽加入量為脫脂茶巧質(zhì)量的0.5 ~2 %;所述鋒鹽為醋酸鋒。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物的制備方法,其特征在于:所 述沉淀物溶解是指向沉淀物中加入無水乙醇進行溶解,乙醇的用量與沉淀物質(zhì)量相同。7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物的制備方法,其特征在于:所 述濃縮的條件為于50~80°C和0.01~0.1個大氣壓下減壓濃縮,所述濃縮液體積為濾液體 積的1/3;所述干燥的條件為50~80°C干燥3~6小時。8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物的制備方法,其特征在于:所 述沉淀劑為水,沉淀劑的用量為濃縮液體積3~5倍;所述調(diào)節(jié)抑的物質(zhì)為氨水;所述洗涂是 指采用乙醇進行洗涂;所述脫脂茶巧巧為脫脂茶葉巧巧或脫脂油茶巧巧的中一種。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述茶巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物的應用,其特征在于:所述茶 巧黃酬巧元并茶皂巧元鋒配合物用于制備具有神經(jīng)保護作用藥物制劑。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述茶皂巧元鋒配合物的應用,其特征在于:所述藥物制劑的劑型 為外用、口服或注射用藥劑型的一種。
      【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域,公開了一種茶籽黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物及其制法和用途。所述方法,具體包括以下步驟:將脫脂茶籽粕用乙醇水溶液提取,過濾,將濾液用酸水解,濃縮,將濃縮液沉淀,將沉淀物用乙醇復溶,加入無水碳酸鈉、鋅鹽,回流反應,調(diào)節(jié)pH至8~10,靜置沉淀,洗滌,真空干燥,即得茶籽黃酮苷元并茶皂苷元鋅配合物。所述配合物具有顯著保護神經(jīng)細胞、防神經(jīng)退化的效果,可作為新型抗神經(jīng)退行性疾病藥物的應用開發(fā)。
      【IPC分類】C07J63/00, A61P25/28, C07F3/06, A61P25/00
      【公開號】CN105566436
      【申請?zhí)枴緾N201510962057
      【發(fā)明人】葉勇, 楊謙
      【申請人】華南理工大學
      【公開日】2016年5月11日
      【申請日】2015年12月17日
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