一種腺苷脫氨酶檢測試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種檢測試劑盒，具體涉及一種腺苷脫氨酶檢測試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]腺苷脫氨酶(ADA)是一種與機(jī)體細(xì)胞免疫活性有重要關(guān)系的核酸代謝酶。測定血液、體液中的ADA及其同工酶水平對某些疾病的診斷、鑒別診斷、治療及免疫功能的研究日趨受到臨床重視。ADA活性是反映肝損傷的敏感指標(biāo)，可作為肝功能常規(guī)檢查項(xiàng)目之一，與ALT或GGT等組成肝酶譜能較全面地反映肝臟病的酶學(xué)改變。
[0003]近十幾年來，隨著對ADA的深入研究，檢測方法也不斷發(fā)展。目前已發(fā)展了四代。對于第一代ADA測試方法，由于高底物濃度造成吸光度過高，該法僅適用于腺苷濃度低于40μΜ。如此低的底物濃度達(dá)不到底物飽和要求，造成ADA活性檢測失真。因此，該法不適用于臨床應(yīng)用。對于第二代ADA測試方法，所需試劑易配制，儀器簡單，但靈敏度低，易受外源性NH3影響，空白過高，不能直接測定紅細(xì)胞ADA活性。同樣原因，對于ADA偶聯(lián)谷氨酸脫氫酶(Glutamate Dehydrogenase,GLDH)反應(yīng)方法來說，其是通過測量340nm處NADPH吸光度下降的速度來測算ADA活性。該法也因血清含氨干擾，以及測試系統(tǒng)中過高NADPH造成非特異性氧化而無成算。對于第三代ADA測試方法，在293nm時(shí)血清吸光度太高，造成臨床應(yīng)用不便。第四代ADA測試該法克服了以往ADA測試的困難，然而，鑒于試劑成本高，阻礙了實(shí)際臨床使用。
[0004]鑒于現(xiàn)有技術(shù)的上述技術(shù)缺陷，迫切需要研制一種新型的腺苷脫氨酶測試方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，提供一種腺苷脫氨酶檢測試劑盒，該檢測試劑盒具有測定精密度高、抗干擾能力強(qiáng)、適合自動化快速測定的特點(diǎn)，能為臨床常規(guī)開展ADA檢測應(yīng)用創(chuàng)造有利條件。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:一種腺苷脫氨酶檢測試劑盒，該檢測試劑盒內(nèi)裝有容器，所述容器內(nèi)裝有檢測液，所述檢測液的組成為:甘氨酸緩沖液50-100mmol/L ；苯甲酸鈉50-80mmol/L ；嘌呤核苷磷酸化酶12_18u/L ；黃嘌呤氧化酶30_40u/L ；過氧化物酶200-300u/L ；甘油醛30-100g/L ；疊氮鈉0.5g/L ；磷酸氫二鈉10-200mmol/L ； KCl100_300mmol/L;甘露醇 40-100mmol/L;防腐劑0.1-0.3ml/L;腺昔 100-150mmol/L;4-氛基替比林2-4mmol/L;顯色劑10-15mmol/L;腺嘌呤核苷20-40mmol/L;牛血清白蛋白3-5g/L。
[0007]與現(xiàn)有的腺苷脫氨酶測試方法相比，本發(fā)明的腺苷脫氨酶檢測試劑盒具有如下有益技術(shù)效果:
[0008]1、其顯色效果好，反應(yīng)迅速、穩(wěn)定，因此，測定精密度高、抗干擾能力強(qiáng)。
[0009]2、其試劑穩(wěn)定、易存儲、保質(zhì)期長。
【具體實(shí)施方式】
[0010]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)一步說明，實(shí)施例的內(nèi)容不作為對本發(fā)明的保護(hù)范圍的限制。
[0011]實(shí)施例1
[0012]在該實(shí)施例的腺苷脫氨酶檢測試劑盒中，檢測液的組成為:甘氨酸緩沖液eommol/L;苯甲酸鈉60mmol/L ；嘌呤核苷磷酸化酶15u/L ；黃嘌呤氧化酶35u/L ；過氧化物酶250u/L ；甘油醛60g/L;疊氮鈉0.58凡;磷酸氫二鈉1001111]101凡;1((]1 200mmol/L;甘露醇60mmol/L;防腐劑0.2ml/L;腺苷130mmol/L; 4-氨基替比林3mmo 1/L;顯色劑13mmol/L ；腺嘌呤核苷30mmol/L;牛血清白蛋白4g/L。
[0013]實(shí)施例2
[0014]在該實(shí)施例的腺苷脫氨酶檢測試劑盒中，檢測液的組成為:甘氨酸緩沖液50mmol/L;苯甲酸鈉50mmol/L ；嘌呤核苷磷酸化酶12u/L ；黃嘌呤氧化酶30u/L ；過氧化物酶200u/L ；甘油醛30g/L;疊氮鈉0.58凡;磷酸氫二鈉101111]101凡;1((]1 1001111]101凡;甘露醇401111]101凡;防腐劑0.11111凡;腺苷1001]11]101八;4-氨基替比林21111]101凡;顯色劑101]11]101八;腺嘌呤核苷201]11]101/L;牛血清白蛋白3g/L。
[0015]實(shí)施例3
[0016]該實(shí)施例的腺苷脫氨酶檢測試劑盒中，檢測液的組成為:甘氨酸緩沖液10mmol/L;苯甲酸鈉80mmol/L ；嘌呤核苷磷酸化酶18u/L ；黃嘌呤氧化酶40u/L ；過氧化物酶300u/L ；甘油醛 100g/L;疊氮鈉0.5g/L;磷酸氫二鈉200mmol/L;KCl 300mmo 1/L;甘露醇10mmo 1/L;防腐劑0.3ml/L ；腺苷150mmol/L; 4-氨基替比林4mmol/L ；顯色劑15mmol/L;腺嘌呤核苷40mmol/L;牛血清白蛋白5g/L。
[0017]采用本發(fā)明的腺苷脫氨酶檢測試劑盒對病人進(jìn)行測試實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn):與現(xiàn)有的測試試劑相比，其測試速度更快、準(zhǔn)確度更高、顯示更清晰，且易存儲、保質(zhì)期長;而且，抗干擾能力強(qiáng)、更穩(wěn)定。
[0018]本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對本發(fā)明的實(shí)施方式的限定。對于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動。這里無法對所有的實(shí)施方式予以窮舉。凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種腺苷脫氨酶檢測試劑盒，該檢測試劑盒內(nèi)裝有容器，所述容器內(nèi)裝有檢測液，所述檢測液的組成為:甘氨酸緩沖液50-1001111]101/1^苯甲酸鈉50-801]11]101/1^嘌呤核苷磷酸化酶12-18u/L ；黃嘌呤氧化酶30-40u/L ；過氧化物酶200_300u/L ；甘油醛30_100g/L ；疊氮鈉.0.5g/L;磷酸氫二鈉 10-200mmol/L;KCl 100-300_01/1;甘露醇40-100_01/1;防腐齊丨」0.1-.0.3ml/L;腺苷 100-150mmol/L;4-氨基替比林 2-4mmol/L;顯色劑 10-15mmol/L;腺嘌呤核苷.20_40mmol/L;牛血清白蛋白 3_5g/L。
【專利摘要】本發(fā)明涉及腺苷脫氨酶檢測試劑盒，該檢測試劑盒內(nèi)裝有容器，所述容器內(nèi)裝有檢測液，所述檢測液的組成為：甘氨酸緩沖液50-100mmol/L；苯甲酸鈉50-80mmol/L；嘌呤核苷磷酸化酶12-18u/L；黃嘌呤氧化酶30-40u/L；過氧化物酶200-300u/L；甘油醛30-100g/L；疊氮鈉0.5g/L；磷酸氫二鈉10-200mmol/L；KCl？100-300mmol/L；甘露醇40-100mmol/L；防腐劑0.1-0.3ml/L；腺苷100-150mmol/L；4-氨基替比林2-4mmol/L；顯色劑10-15mmol/L；腺嘌呤核苷20-40mmol/L；牛血清白蛋白3-5g/L。該檢測試劑盒具有測定精密度高、抗干擾能力強(qiáng)、適合自動化快速測定的特點(diǎn)，能為臨床常規(guī)開展ADA檢測應(yīng)用創(chuàng)造有利條件。
【IPC分類】C12Q1/26, C12Q1/48, C12Q1/28, C12Q1/34
【公開號】CN105586387
【申請?zhí)枴緾N201610142046
【發(fā)明人】程明
【申請人】威尚生物技術(shù)（合肥）有限公司
【公開日】2016年5月18日
【申請日】2016年3月11日