一種豬用復(fù)合微生態(tài)制劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種微生態(tài)制劑屬于生物發(fā)酵范疇，具體涉及一種豬飼用復(fù)合微生態(tài)制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]在過去幾十年中，抗生素曾經(jīng)為養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展做出了很大的貢獻，但同時也帶來了較多的弊端。隨著抗生素的使用，易使動物產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致飼料中的用藥量不斷加大、效果越來越差，可選用的藥物也越來越少?？股氐氖褂脮箘游餀C體的抵抗力降低，甚至造成生產(chǎn)能力的下降，同時抗生素的殘留對人類也構(gòu)成健康的威脅。因此近年來尋找抗生素的替代物成為畜牧業(yè)內(nèi)越來越重視的問題，其中微生態(tài)制劑成為了研究的重點。
[0003]微生態(tài)制劑又稱為益生素、活菌制劑，在飼料中添加不僅能維持動物腸胃道中正常微生物體系的平衡，促進畜禽生長，減少疾病的發(fā)生，提高畜禽日增重，改善肉品質(zhì)，還能殺死潛在病原菌，減少氨和硫類物質(zhì)的產(chǎn)生，改善畜禽生長環(huán)境。正是因為微生態(tài)制劑的上述優(yōu)點以及無毒害、無耐藥性、無殘留、成本低，所以在畜牧業(yè)中得到大量的使用。
[0004]目前，生產(chǎn)上主要使用的微生態(tài)制劑有兩種，一種為單一菌屬組成的單一型制劑，另一種為多種不同菌屬組成的復(fù)合菌制劑。一般來說，復(fù)合型更能促進畜禽生長以及提高飼料利用率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種復(fù)合微生態(tài)制劑的制備，用于促進豬腸道優(yōu)勢菌群的形成，保持胃腸道生態(tài)平衡，提高生長速度，改善豬肉品質(zhì)。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的:
(I)、菌種制備:配備凝結(jié)芽孢桿菌(CTCC 23316)不少于3X109cfu/L、枯草芽孢桿菌(ATCC 23857)不少于5X109cfu/L、雙歧桿菌(ATCC 15708)不少于2 X 109cfu/L。
[0006](2 )、發(fā)酵培養(yǎng)基的制備:原料以質(zhì)量百分比計，混合均勻后加入。麩皮70?80%、甘蔗渣10?20%、玉米粉I?3%、硫酸銨1%、硫酸鎂0.4%、磷酸二氫鉀0.3%、硫酸錳0.2?0.5%、碳酸I丐4%、氯化鈉1%，調(diào)節(jié)pH至7.0 ±0.5后進行滅菌，加入蒸饋水調(diào)節(jié)水量10%。
[0007](3)、接種和發(fā)酵:先將枯草芽孢桿菌和凝結(jié)芽孢桿菌按1:1體積混合，再以培養(yǎng)基25%的質(zhì)量百分比接種到培養(yǎng)基中，在25°C下有氧發(fā)酵3?5天后再進行厭氧發(fā)酵2?3天，以10%的質(zhì)量百分比接種量接入雙歧桿菌，同時加入5%的番茄汁，在36°C下厭氧發(fā)酵2?3天后結(jié)束。
[0008]對于上述培養(yǎng)基的制備過程中最后的原料配比為麩皮75%、甘蔗渣15%、玉米粉3%、硫酸銨1%、硫酸鎂0.4%、磷酸二氫鉀0.3%、硫酸錳0.3%、碳酸鈣4%、氯化鈉1%，后加入的番茄汁5%。由以上方法獲得飼用微生態(tài)制劑。
[0009]本發(fā)明的優(yōu)點:
1、本發(fā)明主要采用兩次接種的方法，分階段發(fā)酵制備，先將凝結(jié)芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌混合有氧發(fā)酵進行大量增殖、高效分解有機物，然后轉(zhuǎn)變?yōu)閰捬醢l(fā)酵產(chǎn)生乳酸，抑止雜菌生長，進而為第二次接入雙歧桿菌提供有利的生長環(huán)境。
[0010]2、所采用的培養(yǎng)基原料來源廣泛，配比合理，有利于菌種的生長。
[0011]3、以該方法所制微生態(tài)制劑有利于在飼料中添加，具有特殊的酸香味，可提高豬的采食量。
[0012]4、所涉及的菌種都有利于維持腸道的微生態(tài)平衡、增強免疫力，降低糞便臭味，改善豬的生長環(huán)境。其中的凝結(jié)芽孢桿菌因為其在腸道上皮細(xì)胞的粘附性較弱，所以在自然條件下一般很難在腸道中存在，只有添加含有凝結(jié)芽孢桿菌的制劑，才能讓該菌在腸道中充分發(fā)揮其益生作用。
【具體實施方式】
[0013]實施例1:種子培養(yǎng)基的制備:
1、凝結(jié)芽孢桿菌的制備
1.1凝結(jié)芽孢桿菌來自中國微生物菌種保藏中心CTCC23316。
[0014]1.2菌液的制備
先制備含葡萄糖808/1;玉米漿干粉1.2 g/L；(NH4)S04 5g/L；MgS04.7H20 0.4 g/L；KH2P04 0.4g/L;FeS04.7H20和MnS04.H20配成3 g/L溶液取0.5ml;CaC03 40 g/L；pH 7.2的1000ml種子培養(yǎng)基將菌種活化，再逐級擴大培養(yǎng)。
[0015]1.3發(fā)酵培養(yǎng)基的制備
在65L發(fā)酵罐中，甘蔗渣為原料以質(zhì)量百分比計:甘蔗渣10%，硫酸銨1%，硫酸鎂0.4%，磷酸二氫鉀0.3%，碳酸鈣4%，pH7.2。
[0016]1.4活菌計數(shù)
以稀釋涂布平板法計算活菌總數(shù)。
[0017]!.5主要設(shè)備
上海樹信儀器儀表有限公司微電腦臺式pH計pH211，SANYO公司電熱恒溫培養(yǎng)箱MIR-262和高壓蒸汽滅菌鍋MLS — 2420，北京賽多利斯天平有限公司電子天平PL303，國華企業(yè)恒溫振蕩器SHA-C，上海精宏實驗設(shè)備有限公司真空干燥箱DZF-6021型，鎮(zhèn)江東方生物工程設(shè)備技術(shù)有限公司65L發(fā)酵罐。
[0018]2、枯草芽孢桿菌的制備
2.1枯草芽孢桿菌來自中國微生物菌種保藏中心ATCC23857。
[0019]2.2菌液的制備
制備含葡萄糖5(^/1;牛肉膏1.2 g/L;蛋白胨1.5g/L，(NH4)S04 2g/L；MgSO4.7H20 lg/L5KH2PO4 0.5g/L;調(diào)節(jié)pH為7.0的1000ml種子培養(yǎng)基將菌種活化，再逐級擴大培養(yǎng)。
[0020]2.3發(fā)酵培養(yǎng)基的制備
在65L發(fā)酵罐中，麩皮為原料以質(zhì)量百分比計:麩皮20%，硫酸銨1%，硫酸鎂0.4%，磷酸二氫鉀0.3%，pH7.2o
[0021]2.4活菌計數(shù)
以稀釋涂布平板法計算活菌總數(shù)。
[0022]2.5主要設(shè)備
上海樹信儀器儀表有限公司微電腦臺式pH計pH211，SANYO公司電熱恒溫培養(yǎng)箱MIR-262和高壓蒸汽滅菌鍋MLS — 2420，北京賽多利斯天平有限公司電子天平PL303，國華企業(yè)恒溫振蕩器SHA-C，上海精宏實驗設(shè)備有限公司真空干燥箱DZF-6021型，鎮(zhèn)江東方生物工程設(shè)備技術(shù)有限公司65L發(fā)酵罐。
[0023]3、雙歧桿菌的制備
3.1雙歧桿菌來自中國微生物菌種保藏中心ATCCl5708。
[0024]3.2菌液的制備
制備含葡萄糖20g/L;酵母膏粉2 g/L;蛋白胨5g/L，NaCl 2g/L;5%半胱氨酸lg/L;西紅柿浸出液400ml;肝粉Ig;調(diào)節(jié)pH為7.0的1000ml種子培養(yǎng)基將菌種活化，再