一種玫瑰茄揮發(fā)油及制備方法與在制備抗炎藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體設(shè)及一種玫瑰茄揮發(fā)油及制備方法與在制備抗炎藥物 中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 中藥揮發(fā)油又稱精油，是存在于植物體中一類可隨水蒸氣蒸饋得到的與水不相混 溶的揮發(fā)性油狀成分，往往具有特異的芳香氣味。在中藥里，有許多藥材含有揮發(fā)油成分， 通常具有很強(qiáng)的藥理活性。如柴胡揮發(fā)油有很好的退燒效果，薄荷油有清涼、消炎作用，大 蒜油可治療支氣管炎、肺炎和霉菌感染，生姜油有解熱、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜作用，川號(hào)油具有擴(kuò)張腦 血管作用，乳香、沒藥的揮發(fā)油具有良好的活血化疲、改善微循環(huán)的作用等等。
[0003] 目前最有前途的替代經(jīng)典抗生素治療的抗炎方法之一是使用能增強(qiáng)宿主防御反 應(yīng)的免疫調(diào)節(jié)劑?，F(xiàn)已知的多種免疫調(diào)節(jié)劑，包括哺乳動(dòng)物蛋白，如：丫-干擾素、粒細(xì)胞集 落刺激因子和粒細(xì)胞-巨隧細(xì)胞集落刺激因子及從微生物分離純化的物質(zhì)。對(duì)于免疫細(xì)菌 多糖和人工合成的化合物來說，其不良反應(yīng)和副作用已引起人們廣泛注意。大多數(shù)高等植 物來源的揮發(fā)油均為無不良反應(yīng)的物質(zhì)，不會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生較大的副作用，因此，從植物中分 離的揮發(fā)油在生物醫(yī)學(xué)上引起極大關(guān)注。對(duì)運(yùn)些活性物質(zhì)的作用機(jī)制也在不斷發(fā)展。傳統(tǒng) 中藥理論認(rèn)為，揮發(fā)油具有芳香走串功能，可快速發(fā)揮療效?，F(xiàn)代藥物研究表明，揮發(fā)油分 子量小，脂溶性強(qiáng)，容易穿過體內(nèi)生物膜，生物利用度高，能快速吸收起效，與傳統(tǒng)中藥理論 相一致。
[0004] 玫瑰茄化化iscus sabdarifTa)，又名洛神花、洛克紅、山茄等，是錦葵科木穫屬的 一年生草本植物，廣布于炎熱地區(qū)和亞熱帶地區(qū)，原產(chǎn)于西方、印度，目前在我國的浙江、廣 西、貴州、云南、上海等地均有栽培。玫瑰茄是傳統(tǒng)的藥食兩用植物，富含維生素C、氨基酸、 有機(jī)酸、黃酬類、花青巧類等多種成分，亦作為天然色素的資源植物。玫瑰茄除具有消除疲 勞、清熱解暑的功效外，還具有降壓、平喘、解毒、利尿等藥理作用，用于屯、臟病、神經(jīng)疾病和 癌癥等的治療。但是對(duì)于玫瑰茄揮發(fā)油抗炎的研究卻沒有。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺點(diǎn)，本發(fā)明的首要目的在于提供一種玫瑰茄揮發(fā)油 的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的另一目的在于提供上述制備方法制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油。
[0007] 本發(fā)明的再一目的在于提供上述玫瑰茄揮發(fā)油在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。
[000引本發(fā)明的目的通過下述方案實(shí)現(xiàn)：
[0009] -種玫瑰茄揮發(fā)油的制備方法，包含如下步驟：
[0010] (1)將玫瑰茄化ibiscus sabdariffa)粉碎過篩，得到玫瑰茄粗粉;將玫瑰茄粗粉 與水充分混勻，然后浸泡，得到浸提液；
[0011] (2)將步驟(1)制得的浸提液置于水蒸氣蒸饋裝置中，采用水蒸氣蒸饋法提取揮發(fā) 油；停止加熱后冷卻，使冷凝管中的揮發(fā)油全部冷凝下來，減少揮發(fā);采用有機(jī)溶劑收集揮 發(fā)油，除水除去有機(jī)溶劑，得到揮發(fā)油I;即為玫瑰茄揮發(fā)油；
[0012] 步驟(1)中所述的水與玫瑰茄粗粉的質(zhì)量比(水料比）為10:1~30:1;
[0013] 步驟(1)中所述的水與玫瑰茄粗粉的質(zhì)量比(水料比)優(yōu)選為20:1;
[0014] 步驟（1)中所述的浸泡時(shí)間為20min~化；
[001引步驟（1)中所述的浸泡時(shí)間優(yōu)選為30min;
[0016] 步驟(2)中所述的提取的條件為煮沸后100°C提取5~化；
[0017] 步驟(2)中所述的提取的條件優(yōu)選為煮沸后100°C提取化；
[0018] 步驟(2)中所述的冷卻的時(shí)間為20~40min;
[0019]步驟(2)中所述的冷卻的時(shí)間優(yōu)選為30min;
[0020] 步驟(2)中所述的有機(jī)溶劑為乙酸或石油酸；
[0021] 步驟(2)中所述的有機(jī)溶劑優(yōu)選為乙酸；
[0022] 步驟(2)中所述的除水的方式優(yōu)選為采用無水硫酸鋼除水；
[0023] 步驟(2)中所述的除去有機(jī)溶劑的方式優(yōu)選為減壓濃縮；
[0024] 所述的減壓濃縮的溫度為30~40°C ;
[0025] 一種玫瑰茄揮發(fā)油(HFY-I)，通過上述制備方法制備得到；
[00%] -種玫瑰茄揮發(fā)油IKHFY-II )，通過將上述玫瑰茄揮發(fā)油化FY-I)進(jìn)一步微波處 理得到；
[0027] 所述的微波處理的微波功率為500~800W;
[0028] 所述的微波處理的時(shí)間為30s~150s;
[00巧]所述的微波處理優(yōu)選采用格蘭仕G70D20CN1P-D2(S0)進(jìn)行；
[0030] -種玫瑰茄揮發(fā)油III(HFY-III)，通過將上述玫瑰茄揮發(fā)油I進(jìn)一步超聲處理得 到；
[0031] 所述的超聲處理的頻率為80~IOOIfflz，功率為200~500W;
[0032] 所述的超聲處理的時(shí)間為2~5min;
[0033] 所述的超聲處理優(yōu)選為采用KQ-300VDB型S頻數(shù)控超聲清洗器進(jìn)行；
[0034] 所述的玫瑰茄揮發(fā)油、玫瑰茄揮發(fā)油II或玫瑰茄揮發(fā)油III在制備抗炎藥物中的 應(yīng)用；
[0035] 所述的玫瑰茄揮發(fā)油可作為新型的抗炎藥物，應(yīng)用于炎癥的治療。
[0036] -種抗炎藥物，含有上述玫瑰茄揮發(fā)油、玫瑰茄揮發(fā)油II和玫瑰茄揮發(fā)油III中的 至少一種；
[0037] 本發(fā)明的原理:植物來源的揮發(fā)油能通過調(diào)節(jié)巨隧細(xì)胞的免疫功能體現(xiàn)出各種有 益的藥理作用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)和確證植物揮發(fā)油具有顯著的抗炎活性，且植物揮發(fā)油的使用 劑量低，在同樣劑量下的毒副作用也較低。
[0038] 本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果：
[0039 ] (1)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)玫瑰茄揮發(fā)油、玫瑰茄揮發(fā)油II和玫瑰茄揮發(fā)油HI在體外能 顯著抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞NO的釋放。
[0040] (2)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)玫瑰茄揮發(fā)油、玫瑰茄揮發(fā)油II和玫瑰茄揮發(fā)油HI在體外能 顯著抑制1?8誘導(dǎo)的34胖264.7巨隧細(xì)胞了冊(cè)-〇、1^8、比-1、比-6和0^-2 1111?酷的表達(dá)。
[0041 ] (3)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)玫瑰茄揮發(fā)油、玫瑰茄揮發(fā)油II和玫瑰茄揮發(fā)油HI在體外能 顯著抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞p-P65、p-JNK和P-E服蛋白的表達(dá)。
[0042] (4)玫瑰茄揮發(fā)油、玫瑰茄揮發(fā)油II和玫瑰茄揮發(fā)油III的用藥劑量比較低，而且 在有效用藥劑量范圍內(nèi)毒性較低。
【附圖說明】
[0043] 圖1是實(shí)施例1、4和7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油I、II和III對(duì)RAW264.7巨隧細(xì)胞的 毒性作用圖。
[0044] 圖2是實(shí)施例1、4和7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油I、II和HI對(duì)WS誘導(dǎo)的RAW264.7巨 隧細(xì)胞釋放NO的影響圖。
[0045] 圖3是實(shí)施例7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油III對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞形態(tài) 的影響圖。
[0046] 圖4是實(shí)施例7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油III對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞釋放 IL-I因子的影響圖，其中，與control組比較，P<0.01。
[0047] 圖5是實(shí)施例7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油III對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞釋放 IL-6因子的影響圖，其中，與control組比較，P<0.01。
[004引圖6是實(shí)施例7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油HI對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞TNF-a mRNA表達(dá)的影響圖，其中，與control組比較，P<0.01。
[0049] 圖7是實(shí)施例7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油III對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞iNOS mRNA表達(dá)的影響圖，其中，與control組比較，P<0.01。
[0050] 圖8是實(shí)施例7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油III對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞化-1 mRNA表達(dá)的影響圖，其中，與control組比較，P<0.01。
[0051 ]圖9是實(shí)施例7制備得到的玫瑰茄揮發(fā)油III對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨隧細(xì)胞IL-6 mRNA表達(dá)的影響圖，其中，與control組比較