(7-(((S)-l，4-二氧六環(huán)-2-基）甲氧基)-4-(3-氯-4-氣苯基氨基)哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺（17)
[0326]
[0327] 參照實(shí)施例12的制備過程，將中間體E替換為中間體G，制備標(biāo)題化合物。
[032引 MS-ESI(m/z):572[M+H] +。
[0；329] 實(shí)施例18
[0扣0]化)-N-(7-((lR，5S，6r)-3-氧雜二環(huán)[3.1.0]己燒-6-基甲氧基)-4-(3-氯-4-氣苯 基氨基)哇挫嘟-6-基)-4-(2-(?甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺（18)
[0331]
[0332] 參照實(shí)施例1的制備過程，將中間體A替換為中間體H，制備標(biāo)題化合物。
[0333] MS-ESI(m/z):554[M+扣+。
[0：334] 實(shí)施例19
[0 靴]化)-N-(7-((lR，5S，6r)-3-氧雜二環(huán)[3.1.0]己燒-6-基甲氧基)-4-(3-氯-4-氣苯 基氨基)哇挫嘟-6-基)-4-((R)-2-(甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺（19)
[0336]
[0337] 參照實(shí)施例2的制備過程，將中間體A替換為中間體H，制備標(biāo)題化合物。
[033引 MS-ESI(m/z):568[M+H] +。
[0：339] 實(shí)施例20
[0340] 化)-N-(7-((lR，5S，6r)-3-氧雜二環(huán)[3.1.0]己燒-6-基甲氧基)-4-(3-氯-4-氣苯 基氨基)哇挫嘟-6-基)-4-((5)-2-(甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺(20)
[0341]
[0342] 參照實(shí)施例3的制備過程，將中間體A替換為中間體H，制備標(biāo)題化合物。
[0；343] MS-ESI(m/z):568[M+H] +。
[0；344]細(xì)胞增殖抑制活性測(cè)試
[0345] 材料和試劑:
[0346] MTS檢測(cè)試劑盒購(gòu)自PromegaeRPMI-1640培養(yǎng)基、胎牛血清和青霉素-鏈霉素購(gòu)自 Gibco。二甲基亞諷（DMSO)購(gòu)自Sigma。
[0347] 細(xì)胞增殖抑制活性
[0348] 通過測(cè)定化合物對(duì)BT474化GFR過表達(dá)）和N87化GFR和化bB過表達(dá))細(xì)胞增殖的抑 制作用，檢測(cè)化合物對(duì)細(xì)胞EGFR和化bB2的抑制作用。BT474細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清的 DMEM培養(yǎng)基中，單細(xì)胞層覆蓋率40-80% dN87細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng) 基中，單細(xì)胞層覆蓋率40-80%。消化細(xì)胞，將細(xì)胞按相應(yīng)濃度(BT474:1000/孔，N87:1000/ 孔)接種于96孔板。BT474細(xì)胞板于37°C，5%C〇2解育4她;N87細(xì)胞板于37°C，5%C〇2解育過 夜。96 孔板中加入不同濃度(終濃度 1000、333.3、111.1、27.04、12.35、4.12、1.37、0.46和 0.15nM)的化合物，BT474細(xì)胞板于37°C，5%C02解育7天。N87細(xì)胞板于37°C，5%C02解育72h。 棄去培養(yǎng)基，每孔加入10化I培養(yǎng)基和MTS。解育化后，用酶標(biāo)儀測(cè)量490皿和65化m處 的吸收。用Gra地Pad Prism 5.0計(jì)算ICso。
[0349] 根據(jù)本文中所述的生物學(xué)方法對(duì)上述制備的所選化合物進(jìn)行試驗(yàn)。其結(jié)果如表1 所示。
[0；3加]表1
[0353]
[0354] N87腫瘤體內(nèi)試驗(yàn)
[03W]雌性BALB/cA-nude裸小鼠皮下接種人胃癌NCI-N87細(xì)胞。每周測(cè)量?jī)纱文[瘤體積。 待腫瘤生長(zhǎng)至60-150mm3后，將動(dòng)物隨機(jī)分組(第0天）。每組6只小鼠。待測(cè)化合物經(jīng)口給藥， 每天一次，給藥21天。在第21天確定腫瘤抑制能力。
[0356] 待測(cè)化合物的腫瘤抑制能力見圖1和表2。腫瘤體積(V)計(jì)算方法為:V=l/2XaX b，其中a和b分別表示腫瘤的長(zhǎng)和寬。相對(duì)腫瘤增殖率計(jì)算方法為:TAX % ) = (T-To)AC-Co) X 100,其中T和C分別為測(cè)試化合物組和溶劑對(duì)照組第21天的腫瘤體積，To和Co分別為測(cè) 試化合物組和溶劑對(duì)照組第0天的腫瘤體積。
[0357] 表2測(cè)試化合物腫瘤抑制活性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 至少一個(gè)式(I)所示的化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué)上可接受的鹽，其中 Ri和R2獨(dú)立地選自氨和Ci-6烷基，其中所述烷基是被至少一個(gè)獨(dú)立地選自徑基和Ci-6燒 氧基的取代基取代； R3選自Ci-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、四氨巧喃-3-氧基、四氨巧喃-2-甲氧基、四氨巧喃-3- 甲氧基、四氨巧喃-4-氧基、四氨巧喃-4-甲氧基、（1,4-二氧六環(huán)-2-基）甲氧基、（3-氧雜-二 環(huán)[3.1.0]己燒-6-基）甲氧基，其中每個(gè)所述烷氧基和環(huán)烷氧基是未被取代的或被至少一 個(gè)取代基取代，例如一個(gè)、兩個(gè)、Ξ個(gè)或四個(gè)取代基，所述取代基獨(dú)立選自面素、徑基、Cl-6燒 基、C3-6環(huán)烷氧基和Cl-6烷氧基； Ar選自芳基，其中所示芳基是被至少一個(gè)取代基取代，例如一個(gè)、兩個(gè)、Ξ個(gè)或四個(gè)取 代基，所述取代基獨(dú)立地選自面素、徑基和氯基。2. 權(quán)利要求1的至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2是氨。3. 權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)所述的至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué)上可接受的 鹽，其中Rl是Cl-6烷基，其中所述烷基是被至少一個(gè)獨(dú)立地選自徑基和Cl-6烷氧基的取代基 取代。4. 權(quán)利要求3的至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué)上可接受的鹽，其中Ri選自徑甲 基，甲氧基甲基和乙氧基甲基。5. 權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué)上可接受的 鹽，其中R3選自甲氧基、乙氧基、甲氧基乙氧基、環(huán)丙基甲氧基、四氨巧喃-3-氧基、四氨巧 喃-2-甲氧基、四氨巧喃-3-甲氧基、四氨巧喃-4-氧基、四氨巧喃-4-甲氧基、（1,4-二氧六 環(huán)-2-基）甲氧基、（3-氧雜-二環(huán)[3.1.0 ]己燒-6-基）甲氧基。6. 權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué)上可接受的 鹽，其中Ar為芳基，其中所述芳基是被至少一個(gè)取代基取代，例如一個(gè)、兩個(gè)、Ξ個(gè)或四個(gè)取 代基，所述取代基獨(dú)立選自氣、氯、漠和艦。7. 權(quán)利要求6的至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué)上可接受的鹽，其中Ar是3-氯- 4-氣苯基。8. 至少-個(gè)化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽，其選自： 化)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-甲氧基哇挫嘟-6-基)-4-(2-(?甲基)氮雜環(huán)下- 1-基)下-2-締酷胺； (R，E)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-甲氧基哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧基甲基)氮雜 環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； (S，E)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-甲氧基哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧基甲基)氮雜 環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； (R，E)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-乙氧基哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧基甲基)氮雜 環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； (S，E)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-乙氧基哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧基甲基)氮雜 環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； (R，E)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-(2-甲氧基乙氧基）哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧 基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； (S，E)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-(2-甲氧基乙氧基）哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧 基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-(環(huán)丙基甲氧基)哇挫嘟-6-基)-4-(2-(?甲基)氮 雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； (R，E)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-(環(huán)丙基甲氧基）哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧基 甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； (S，E)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-(環(huán)丙基甲氧基）哇挫嘟-6-基)-4-(2-(甲氧基 甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-( (S)-四氨巧喃-3-基氧基）哇挫嘟-6-基)-4-(2- 巧圣甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(4-(3-氯-4-氣苯基氨基)-7-( (S)-四氨巧喃-3-基氧基）哇挫嘟-6-基)-4-(2- (甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺. 化)-N-(7-(((R)-l，4-二氧六環(huán)-2-基）甲氧基）-4-(3-氯-4-氣苯基氨基）哇挫嘟-6- 基)-4-(2-(?甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(7-(((R)-l，4-二氧六環(huán)-2-基）甲氧基）-4-(3-氯-4-氣苯基氨基）哇挫嘟-6- 基)-4-((R)-2-(甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(7-(((R)-l，4-二氧六環(huán)-2-基）甲氧基）-4-(3-氯-4-氣苯基氨基）哇挫嘟-6- 基)-4-((S)-2-(甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(7-(((S)-l，4-二氧六環(huán)-2-基）甲氧基）-4-(3-氯-4-氣苯基氨基）哇挫嘟-6- 基)-4-(2-(?甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(7-(((S)-l，4-二氧六環(huán)-2-基）甲氧基）-4-(3-氯-4-氣苯基氨基）哇挫嘟-6- 基)-4-(2-(甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(7-( (lR，5S，6R)-3-氧雜二環(huán)[3.1.0]己燒-6-基甲氧基)-4-(3-氯-4-氣苯基氨 基)哇挫嘟-6-基)-4-(2-(?甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(7-( (lR，5S，6R)-3-氧雜二環(huán)[3.1.0]己燒-6-基甲氧基)-4-(3-氯-4-氣苯基氨 基)哇挫嘟-6-基)-4-((R)-2-(甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺； 化)-N-(7-( (lR，5S，6R)-3-氧雜二環(huán)[3.1.0]己燒-6-基甲氧基)-4-(3-氯-4-氣苯基氨 基)哇挫嘟-6-基)-4-( (S)-2-(甲氧基甲基)氮雜環(huán)下-1-基)下-2-締酷胺。9. 藥物組合物，包含權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè) 藥學(xué)上可接受的鹽，和至少一種藥學(xué)上可接受的載體。10. -種治療、改善或預(yù)防對(duì)抑制化bB家族受體激酶有響應(yīng)的癥狀的方法，包括對(duì)有此 需要的患者給予有效量的權(quán)利要求1至8任一所述的至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué) 上可接受的鹽，可任選與另一治療藥物組合。11. 一種制造治療細(xì)胞增殖異常的藥物的方法，包括該藥物含有權(quán)利要求1至8所述的 至少一個(gè)化合物和/或其至少一個(gè)藥學(xué)上可接受的鹽。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蛋白酶抑制劑，尤其是公開了一類新型的喹唑啉衍生物及其藥物組合物，以及它們的制備方法和用途。
【IPC分類】C07D239/94, C07D403/12, A61P35/00, A61K31/517
【公開號(hào)】CN105705494
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201480040698
【發(fā)明人】王為波, 趙興東, 李同雙, 田強(qiáng), 陳嶺, 周祖文, 李志福, 王憲龍, 容悅, 姜立花, 劉研新, 孫婧, 曾凡新
【申請(qǐng)人】錦州奧鴻藥業(yè)有限責(zé)任公司
【公開日】2016年6月22日
【申請(qǐng)日】2014年7月17日
【公告號(hào)】EP3022186A1, US20160168129, WO2015007219A1