一種由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽及其應用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽及其應用，通過如下步驟制備而成：步驟S1，將嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物與水按照質(zhì)量體積比1:2～4混合攪拌，靜置；步驟S2，取上述混合物靜置后的上清液，離心，收集離心上清液；步驟S3，將離心上清液過超濾膜，截留分子量不大于10kDa的組分；步驟S4，將上述分子量不大于10kDa的組分繼續(xù)超濾，截留分子量6～8kDa的組分，濃縮，冷凍干燥即得所述廣譜抗菌肽。本發(fā)明提供的由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽對細菌的抑制效果更強且熱穩(wěn)定性更高，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
【專利說明】
一種由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽及其應用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽及其應用。
【背景技術(shù)】
[0002] 傳統(tǒng)抗生素在治療細菌性感染疾病方面取得了顯著效果，但是近年來，隨著傳統(tǒng) 抗生素在醫(yī)學和養(yǎng)殖業(yè)等領(lǐng)域的濫用，微生物對傳統(tǒng)抗生素產(chǎn)生了越來越強的耐受性，同 時也出現(xiàn)了一些耐藥性極強的超級細菌，微生物耐藥問題已成為嚴重威脅人類健康的難 題。所以急需開發(fā)出一種新的安全的抗微生物藥物。
[0003] 抗菌肽是一種小分子多肽，對細菌、真菌、病毒和原蟲等均具有殺滅作用。抗菌肽 具有分子量小、結(jié)構(gòu)簡單、殺菌活性強等特點。它可以殺死腸道病原菌并調(diào)節(jié)腸道健康，且 宜被蛋白酶(胰蛋白酶)水解，不會殘留在機體內(nèi)。因此抗菌肽有望成為一種新型的高效的 抗菌藥物，具有廣闊的開發(fā)應用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽及其應用。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0006] -種由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽，通過如下步驟制備而成：
[0007] 步驟S1，將嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物與水按照質(zhì)量體積比1:2~4混合攪拌，靜置；
[0008] 步驟S2，取上述混合物靜置后的上清液，離心，收集離心上清液；
[0009] 步驟S3,將離心上清液過超濾膜，截留分子量不大于10kDa的組分；
[0010] 步驟S4,將上述分子量不大于10kDa的組分繼續(xù)超濾，截留分子量6~8kDa的組分， 濃縮，冷凍干燥即得所述廣譜抗菌肽。
[0011] 進一步地，所述嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物為豆柏、玉米、麩皮中的一種或多種與嗜酸 乳桿菌混合后經(jīng)固體發(fā)酵所得產(chǎn)物。
[0012] 進一步地，步驟S2中，所述離心具體為5000rpm離心10min。
[0013] 上述廣譜抗菌肽作為飼料添加劑的用途。
[0014] 上述廣譜抗菌肽用于制備抑制細菌的藥物的用途。
[0015] 本發(fā)明的優(yōu)點：
[0016] 本發(fā)明提供的由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽對細菌的抑制效果更強且熱穩(wěn)定性 更高，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
【具體實施方式】
[0017] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0018] 下述實施例中，所述嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物為豆柏、玉米、麩皮中的一種或多種與 嗜酸乳桿菌混合后經(jīng)固體發(fā)酵所得產(chǎn)物。
[0019] 實施例1:由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽的制備
[0020] 步驟S1，將嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物與水按照質(zhì)量體積比1:3混合攪拌，靜置；
[0021 ] 步驟S2,取上述混合物靜置后的上清液，5000rpm離心10min，收集離心上清液；
[0022]步驟S3,將離心上清液過超濾膜，截留分子量不大于lOkDa的組分；
[0023] 步驟S4,將上述分子量不大于lOkDa的組分繼續(xù)超濾，截留分子量6~8kDa的組分， 濃縮，冷凍干燥即得所述廣譜抗菌肽。
[0024] 實施例2:對比實施例，截留分子量5~6kDa的組分
[0025]步驟S1，將嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物與水按照質(zhì)量體積比1:3混合攪拌，靜置；
[0026] 步驟S2,取上述混合物靜置后的上清液，5000rpm離心10min，收集離心上清液；
[0027]步驟S3,將離心上清液過超濾膜，截留分子量不大于lOkDa的組分；
[0028] 步驟S4,將上述分子量不大于lOkDa的組分繼續(xù)超濾，截留分子量5~6kDa的組分， 濃縮，冷凍干燥。
[0029] 實施例3:對比實施例，截留分子量8~9kDa的組分
[0030]步驟S1，將嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物與水按照質(zhì)量體積比1:3混合攪拌，靜置；
[0031 ] 步驟S2,取上述混合物靜置后的上清液，5000rpm離心10min，收集離心上清液；
[0032]步驟S3,將離心上清液過超濾膜，截留分子量不大于lOkDa的組分；
[0033] 步驟S4,將上述分子量不大于lOkDa的組分繼續(xù)超濾，截留分子量8~9kDa的組分， 濃縮，冷凍干燥。
[0034]實施例4:效果實施例
[0035]分別將實施例1~3制備的抗菌肽配制成濃度為lmg/100ml的供試液1~3。分別測 試供試液1~3對大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和李斯特菌抑制率（％ );再將供試液 1~3在121°C條件下熱處理30min，測試熱處理后對大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和 李斯特菌抑制率（％)。
[0036]實驗結(jié)果見下表。
[0038] 上述結(jié)果表明，本發(fā)明提供的由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽對細菌的抑制效果更 強且熱穩(wěn)定性更高，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
[0039] 上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和保護范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種由嗜酸乳桿菌產(chǎn)的廣譜抗菌肽，其特征在于，通過如下步驟制備而成： 步驟S1，將嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物與水按照質(zhì)量體積比1:2~4混合攪拌，靜置； 步驟S2，取上述混合物靜置后的上清液，離心，收集離心上清液； 步驟S3,將離心上清液過超濾膜，截留分子量不大于lOkDa的組分； 步驟S4,將上述分子量不大于lOkDa的組分繼續(xù)超濾，截留分子量6~8kDa的組分，濃 縮，冷凍干燥即得所述廣譜抗菌肽。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜抗菌肽，其特征在于：所述嗜酸乳桿菌固體發(fā)酵物為豆 柏、玉米、麩皮中的一種或多種與嗜酸乳桿菌混合后經(jīng)固體發(fā)酵所得產(chǎn)物。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜抗菌肽，其特征在于:步驟S2中，所述離心具體為5000rpm 離心10min。4. 權(quán)利要求1~3任一所述的廣譜抗菌肽作為飼料添加劑的用途。5. 權(quán)利要求1~3任一所述的廣譜抗菌肽用于制備抑制細菌的藥物的用途。
【文檔編號】A61P31/04GK106046126SQ201610403172
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月8日
【發(fā)明人】李世超, 方華, 季春源, 朱校適, 楊旭, 沈城
【申請人】江蘇鹽城源耀生物科技有限公司