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      快速提取核酸的便攜式提取裝置的制造方法_2

      文檔序號(hào):8590432閱讀:來(lái)源:國(guó)知局
      6] i)提取柱架和收集組之間;
      [0037] ii)收集組的連接裝置和加熱組之間;以及
      [0038] iii)加熱組和真空組之間。
      [0039] 在一個(gè)實(shí)施例中,與本發(fā)明的裝置一起使用的提取柱內(nèi)嵌入有適用于提取核酸的 濾膜或膜。在另一個(gè)實(shí)施例中,樣品或試劑,或其組合通過(guò)提取柱到達(dá)收集管或廢液槽。
      [0040] 在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明的裝置用于從生物樣品中提取核酸。在另一個(gè)實(shí)施例中, 所述生物樣品是血液、血清、血漿、唾液、痰、精液、淋巴液,或其他體液。
      [0041] 在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明的裝置可與導(dǎo)流雜交裝置、反向斑點(diǎn)導(dǎo)流雜交裝置,或 任何能進(jìn)行導(dǎo)流雜交的裝置或儀器結(jié)合使用。
      [0042] 在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明的裝置可與發(fā)熱裝置或加熱板結(jié)合使用。在另一個(gè)實(shí)施 例中,本發(fā)明的裝置可與一個(gè)自動(dòng)化或機(jī)械化的系統(tǒng)結(jié)合使用。
      [0043] 在一個(gè)實(shí)施例中,如圖1所示的提取裝置包含有至少三個(gè)功能組:
      [0044] 1.提取柱架(10),用于支撐多個(gè)提取柱(11),其中樣品或試劑加入到提取柱中;
      [0045] 2.收集組(20),以支撐多個(gè)收集管(21),收集管(21)用于收集從提取柱架上的提 取柱中排出的物料;以及
      [0046] 3.加熱組(30),用于為裝置提供熱力或維持裝置某一范圍的溫度。
      [0047] 在一個(gè)實(shí)施例中,提取柱架(10)與收集組(20)的頂部相結(jié)合,其中所述的收集組 (20) 進(jìn)而通過(guò)連接裝置(22)與加熱組(30)的頂部相結(jié)合。收集組(20)的上端含有多個(gè) 槽(23),用于支撐收集管(21)。提取柱架(10)的下端放置在收集組(20)的上端,因而使 得放置在收集組(20)的槽(23)內(nèi)的收集管(21)與提取柱(11)相結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施例 中,收集組(20)的下端包含多個(gè)連接裝置(22),可以插入處于加熱組(30)的上端的加熱室 (31)中。
      [0048] 在一個(gè)實(shí)施例中,本發(fā)明的提取柱架(10)包含多個(gè)中空管腔(12),可以根據(jù)試驗(yàn) 的需要,容納各種大小的提取柱、柱或瓶。所述的提取柱、柱或瓶可以按其要處理的物質(zhì) 或核酸的類型,相嵌上不同種類的吸附物質(zhì)和滲透性物質(zhì)如硅石。提取柱架(10)可以被設(shè) 計(jì)成任何合適的形式,如"nxm"的形式或線形排列的形式。在一個(gè)實(shí)施例中,提取柱架為 "4x4"的形式(圖2),因此可以同時(shí)提取16個(gè)樣品的核酸。在另一個(gè)實(shí)施例中,提取裝置 的提取柱架(10)頂部還包含一個(gè)蓋子或罩子。圖2所示的提取柱架(10)由上組件(13) 和下組件(14)組合而成,其中上組件(13)和下組件(14)是完全互補(bǔ)的。
      [0049] 提取柱架(10)可以由塑料、金屬、塑料與金屬的兩者或其他材料制成。在一個(gè) 實(shí)施例中,提取柱架(10)為單件式設(shè)計(jì)(圖3A),由金屬如鋁、不銹鋼或合金制成。在一個(gè) 實(shí)施例中,提取柱架(10)為雙件式設(shè)計(jì)(圖3B),由上組件(13)和下組件(14)組成,上組 件由熱塑性塑膠例如聚丙烯(PP)、聚碳酸酯(PC)或丙烯晴丁二烯苯乙烯(ABS)制成,下 組件由鋁、不銹鋼或合金制成。
      [0050] 為了加速細(xì)胞裂解或維持樣品在一定的溫度,本發(fā)明的提取柱架(10)還可包含 一個(gè)或多個(gè)提取柱發(fā)熱元件(15),為提取柱(11)中的樣品提供或產(chǎn)生熱量。在一個(gè)實(shí)施 例中,提取柱架(10)包含一個(gè)或多個(gè)放置在中空管腔(12)旁或管腔(12)行列之間的插槽 (16) ,插槽(16)用于收納提取柱發(fā)熱元件(15)。圖4所示的提取柱架(10)中,每排的中空 管腔(12)被夾在兩個(gè)插槽(16)之間。在一個(gè)實(shí)施例中,提取柱發(fā)熱元件(15)嵌入到提取 柱架(10)內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)插槽(16)中。在一個(gè)實(shí)施例中,溫度范圍為25°C-95°C。
      [0051] 提取柱發(fā)熱元件(15)可以是任何發(fā)熱元件,例如電阻式發(fā)熱元件,包括但不限于 金屬發(fā)熱元件、陶瓷發(fā)熱元件和合成發(fā)熱元件。在一個(gè)實(shí)施例中,提取柱發(fā)熱元件(15)為 印制電路板(PCB),軟性PCB或陶瓷發(fā)熱器。
      [0052] 在一個(gè)實(shí)施例中,如圖5中所示,適當(dāng)大小的適配器(17)可以放入提取柱(11)的 開(kāi)口內(nèi),以容納更大體積的液體并使其得以穿過(guò)提取柱、柱或瓶。在一個(gè)實(shí)施例中,適配器 (17) 為 100yL、200 yL、500 yL、lmL、1.5mL 或 2mL。適配器(17)可以由不同的塑 料制成,例如聚丙烯(PP)和聚碳酸酯(PC)等。
      [0053] 在整個(gè)提取過(guò)程中,因應(yīng)個(gè)別提取步驟可以使用不同類型的收集組(20)和收集 管(21)。收集組(20)的槽(23)可以有多種不同的直徑和曲率,以支撐適當(dāng)類型的收集管 (21) 。在一個(gè)實(shí)施例中,收集組(20)為一個(gè)用于收集廢液或其他棄置物質(zhì)的廢液收集組。 在另一個(gè)實(shí)施例中,收集組(20)為一個(gè)用于收集洗脫物或其他有用物質(zhì)的樣品收集組。具 有其他設(shè)計(jì)的收集組亦可與本發(fā)明一同使用以配合不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。例如在引入樣品到?取柱時(shí),可以使用樣品回收組以收集首次洗脫后來(lái)自提取柱的導(dǎo)流液。收集到的導(dǎo)流液可 以再次被引入到同一提取柱中以進(jìn)行第二輪結(jié)合,以盡可能增加核酸的提取量。在另一實(shí) 施例中,收集組(20)為一個(gè)洗脫組,用于收集來(lái)自提取柱中的洗脫物。所述的洗脫組可以 支撐小管或其他容器,這些小管或容器裝有適當(dāng)?shù)奈锪弦赃M(jìn)一步處理提取的核酸。例如, 可以在洗脫組內(nèi)放置含有合適試劑的〇. 5mL小管,以對(duì)核酸進(jìn)行酶切。
      [0054] 收集組(20)可以由任何材料制成,例如塑料、金屬、塑料和金屬的組合或其他 材料。在一個(gè)實(shí)施例中,收集組(20)由塑料如聚丙烯(PP)、聚碳酸酯(PC)、丙烯晴丁二 烯苯乙烯(ABS)或鐵氟龍(Teflon)制成。在另一個(gè)實(shí)施例中,收集組(20)由金屬如鋁、 不銹鋼或合金制成。
      [0055] 根據(jù)收集組(20)的設(shè)計(jì),可以使用不同大小或容量的收集管(21)。在一個(gè)實(shí)施例 中,與本發(fā)明一起使用的收集管(21)的容量為IOOyL, 200 μ L,500 μ L,1.5mL或5mL。如 圖1中所示,I. 5mL的收集管(21)被放置在本裝置的槽(23)中。如圖6中所示,5mL的收 集管(21)被放置在本裝置的槽(23)中。
      [0056] 在一個(gè)實(shí)施例中,提取裝置還包括一個(gè)廢液槽(40),廢液槽(40)放在提取柱架 (10)和收集組(20)之間,用于收集從提取柱(11)出來(lái)的廢液或棄置的物質(zhì)(圖7)。在一 個(gè)實(shí)施例中,廢液槽(40)是一排廢液桶(41)。廢液桶(41)可放在收集組(20)的槽(23) 中或放在所述的槽(23)內(nèi)的收集管(21)中??梢耘浜喜煌枰O(shè)計(jì)和使用不同直徑和大 小的廢液桶(41)。
      [0057] 本發(fā)明的加熱組(30)是一個(gè)可以發(fā)熱或保持一定的溫度的導(dǎo)熱介質(zhì),以促進(jìn)核 酸提取及進(jìn)行隨后的程序如核酸等溫?cái)U(kuò)增。加熱組(30)可以由任何金屬材料制成,例如鋁 、不銹鋼或合金。在一個(gè)實(shí)施例中,加熱組(30)由耐腐蝕金屬或經(jīng)耐腐蝕處理的金屬制 成。在一個(gè)實(shí)施例中,加熱組(30)的上部包含多個(gè)發(fā)熱室(31),該發(fā)熱室與收集組(20)的 槽(23)相配。
      [0058] 在一個(gè)實(shí)施例中,加熱組(30)可與一個(gè)外配發(fā)熱裝置配合使用,以提供熱力予樣 品(圖8A)。在一個(gè)實(shí)施例中,外配發(fā)熱裝置為導(dǎo)流裝置或發(fā)熱板。加熱組(30)的平坦底 部直接放置在所述發(fā)熱裝置的頂部。熱力由所述發(fā)熱裝置轉(zhuǎn)移到加熱組的底部,最終到達(dá) 收集管(21),其中收集管(21)通過(guò)連接裝置(22)插入發(fā)熱室(31)內(nèi)。
      [0059] 在另一個(gè)實(shí)施例中,加熱組(30)還包括一個(gè)或多個(gè)安裝在加熱組(30)底部的發(fā) 熱元件(32),可以在不連接外配發(fā)熱裝置時(shí)提供熱力。如圖8B所示,個(gè)別的發(fā)熱元件(32) 安裝在加熱組(30)內(nèi)的發(fā)熱室(31)的下方,以直接向樣品提供熱力。發(fā)熱元件(32)還包 括放置在收集管附近的副發(fā)熱元件。發(fā)熱元件(32)可以是任何發(fā)熱元件,例如電阻式發(fā)熱 元件,包括但不限于金屬發(fā)熱元件、陶瓷發(fā)熱元件和合成發(fā)熱元件。在一個(gè)實(shí)施例中,發(fā)熱 元件(32)為熱電致冷器(Thermoelectric Cooling, TEC),印制電路板(PCB),軟性電路板 或陶瓷發(fā)熱器。
      [0060] 根據(jù)提取過(guò)程的需要,不管是否使用外配發(fā)熱裝置,可以通過(guò)加熱組(30)設(shè)置 并維持不同的溫度,從而提高提取或處理核酸的速度。在一個(gè)實(shí)施例中,溫度的范圍是 25°C -95°C。
      [0061] 通過(guò)維持一個(gè)加熱環(huán)境,本發(fā)明的裝置可以促進(jìn)細(xì)胞的裂解,特別是來(lái)自較粘稠 的痰的細(xì)胞。加熱環(huán)境還可以加速樣品中乙醇的
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