用于單外泌體裂解的裂解裝置的制造方法
【專(zhuān)利摘要】本案涉及用于單外泌體裂解的裂解裝置，包括：裂解室，其為貫通結(jié)構(gòu)，包括有相對(duì)設(shè)立的收縮端和開(kāi)闊端，所述收縮端的端部設(shè)有孔徑為50～100nm的納米孔；裂解電路，其包括第一電極、第二電極以及電源；所述第一電極位于所述裂解室的開(kāi)闊端，所述第二電極位于所述納米孔的外側(cè)。本案利用強(qiáng)電壓差對(duì)外泌體進(jìn)行裂解，并結(jié)合納米孔的結(jié)構(gòu)，使得外泌體只能單個(gè)通過(guò)納米孔被裂解，為后續(xù)的miRNA檢測(cè)提供了更加精確的檢測(cè)目標(biāo)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
用于單外泌體裂解的裂解裝置
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本實(shí)用新型涉及一種裂解裝置，特別涉及一種用于單外泌體裂解的裂解裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]最近幾年，一種叫做外泌體(Exosome)的小囊泡正受到大家廣泛的關(guān)注。外泌體是直徑約為30-150nm，密度在1.13_1.21g/ml的小囊泡。外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，外泌體是活細(xì)胞分泌的來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱(chēng)為多囊泡體)的膜性囊泡。外泌體在30年前被人們所發(fā)現(xiàn)。早期的研究認(rèn)為，外泌體執(zhí)行蛋白運(yùn)輸功能，特異靶定受體細(xì)胞，交換蛋白和脂類(lèi)或引發(fā)下游信號(hào)事件。直到2007年，研究人員發(fā)現(xiàn)外泌體也運(yùn)輸核酸，參與細(xì)胞間通訊?？傊涞鞍?、RNA和脂肪成分特異，且攜帶了一些重要的信號(hào)分子，有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用，這使得外泌體的市場(chǎng)也在快速擴(kuò)展，并成為熱門(mén)的研究對(duì)象。目前研究發(fā)現(xiàn)，外泌體內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，并且外泌體能夠通過(guò)生物屏障，在細(xì)胞間傳遞功能性核酸分子，從而發(fā)揮各種生物學(xué)功能。
[0003]在目前針對(duì)外泌體內(nèi)RNA的研究和檢測(cè)手段主要是將大量外泌體全部裂解，然后檢測(cè)混合樣品中的RNA:具體是用化學(xué)裂解液裂解外泌體，然后對(duì)混合物執(zhí)行RNA的提取。因?yàn)椴煌饷隗w攜帶的RNA蛋白是不同的，其對(duì)應(yīng)的細(xì)胞性質(zhì)也不同，因此，如何更細(xì)致更準(zhǔn)確的研究單個(gè)外泌體的性質(zhì)，即對(duì)單個(gè)外泌體的RNA等進(jìn)行分析，就顯得格外的重要。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0004]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本實(shí)用新型的目的在于提供一種用于對(duì)單個(gè)外泌體進(jìn)行裂解的裝置，以滿(mǎn)足對(duì)單個(gè)外泌體中的miRNA進(jìn)行充分研究的需求。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0006]—種用于單外泌體裂解的裂解裝置，包括:
[0007]裂解室，其為貫通管狀結(jié)構(gòu)，包括有相對(duì)設(shè)立的收縮端和開(kāi)闊端，所述收縮端的端部設(shè)有孔徑為50?10nm的納米孔；
[0008]裂解電路，其包括第一電極、第二電極以及電源;所述第一電極位于所述裂解室的開(kāi)闊端，所述第二電極位于所述納米孔的外側(cè)。
[0009]優(yōu)選的是，所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其中，所述納米孔的外側(cè)還設(shè)有多孔硅膜，所述多孔硅膜位于所述納米孔和第二電極之間。
[0010]優(yōu)選的是，所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其中，所述多孔硅膜的孔徑為50?10nmο
[0011]優(yōu)選的是，所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其中，所述納米孔的外側(cè)還設(shè)有多孔陶瓷層，所述多孔陶瓷層位于所述多孔硅膜和第二電極之間。
[0012]優(yōu)選的是，所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其中，所述多孔陶瓷層的孔徑為50?lOOnm。
[0013]優(yōu)選的是，所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其中，所述電源為交直流一體化電源。
[0014]本實(shí)用新型的有益效果是:本案利用強(qiáng)電壓差對(duì)外泌體進(jìn)行裂解，并結(jié)合納米孔的結(jié)構(gòu)，使得外泌體只能單個(gè)通過(guò)納米孔被裂解，為后續(xù)的miRNA檢測(cè)提供了更加精確的檢測(cè)目標(biāo)。
【附圖說(shuō)明】
[0015]圖1為用于單外泌體裂解的裂解裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書(shū)文字能夠據(jù)以實(shí)施。
[0017]如圖1所示，本案列出一實(shí)施例的用于單外泌體裂解的裂解裝置，包括:
[0018]裂解室I，其為貫通管狀結(jié)構(gòu)，包括有相對(duì)設(shè)立的收縮端2和開(kāi)闊端3，收縮端2的端部設(shè)有孔徑為50?10nm的納米孔4;
[0019]裂解電路，其包括第一電極5、第二電極6以及電源7;第一電極5位于裂解室I的開(kāi)闊端3，第二電極6位于納米孔4的外側(cè)，并正對(duì)納米孔4。
[0020]作為本案另一實(shí)施例，其中，納米孔4的外側(cè)還設(shè)有多孔硅膜8，多孔硅膜8位于納米孔4和第二電極6之間。多孔硅膜8的作用是濾除一些雜質(zhì)，以提高進(jìn)入裂解室I的外泌體純度。
[0021 ] 在上述實(shí)施例中，多孔硅膜8的孔徑優(yōu)選為50?lOOnm。
[0022]作為本案又一實(shí)施例，其中，納米孔4的外側(cè)還設(shè)有多孔陶瓷層9，多孔陶瓷層9位于多孔硅膜8和第二電極6之間。多孔陶瓷層9的作用是進(jìn)一步提高對(duì)外泌體的過(guò)濾效果。
[0023]在上述實(shí)施例中，多孔陶瓷層9的孔徑優(yōu)選為50?lOOnm。
[0024]本案所用電源7優(yōu)選為交直流一體化電源。該電源屬于現(xiàn)有技術(shù)，是市售產(chǎn)品，它的內(nèi)部集成了整流濾波器和逆變器，它的好處是可以自由控制切換交流和直流電流，當(dāng)需要交流電時(shí)就選擇交流電供電模式，當(dāng)需要直流電時(shí)就選擇直流電供電模式。
[0025]外泌體的裂解過(guò)程是:將裂解裝置置于溶液中，在納米孔4附近的溶液中注入待裂解的外泌體，由于外泌體在溶液中的擴(kuò)散速度很慢，因此，它不會(huì)從開(kāi)闊端3進(jìn)入到裂解室I中；此時(shí)，將電源7調(diào)為直流電源，由于外泌體本身帶電荷，因此它可被吸引進(jìn)入納米孔4內(nèi)，而由于納米孔4的孔徑限制，一次只能允許單個(gè)外泌體進(jìn)入，當(dāng)納米孔4的外側(cè)設(shè)有多孔硅膜8和多孔陶瓷層9時(shí)，外泌體在電場(chǎng)的驅(qū)動(dòng)下會(huì)先穿過(guò)這2層過(guò)濾層后再進(jìn)入到納米孔4內(nèi)；而至于如何判斷外泌體是否已經(jīng)進(jìn)入到裂解室I內(nèi)，則有多種方法可以判斷，例如可將外泌體進(jìn)行熒光修飾，借助熒光進(jìn)行標(biāo)記，可方便的觀察外泌體的軌跡;當(dāng)外泌體進(jìn)入納米孔4后，將電源7調(diào)整為交流電，利用交變電壓在納米孔附近產(chǎn)生強(qiáng)電壓差，將外泌體裂解。裂解后的外泌體可以繼續(xù)留在裂解室I內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)的miRNA的檢測(cè)。
[0026]盡管本實(shí)用新型的實(shí)施方案已公開(kāi)如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書(shū)和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本實(shí)用新型的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本實(shí)用新型并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的圖例。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于單外泌體裂解的裂解裝置，其特征在于，包括: 裂解室，其為貫通管狀結(jié)構(gòu)，包括有相對(duì)設(shè)立的收縮端和開(kāi)闊端，所述收縮端的端部設(shè)有孔徑為50?10nm的納米孔； 裂解電路，其包括第一電極、第二電極以及電源;所述第一電極位于所述裂解室的開(kāi)闊端，所述第二電極位于所述納米孔的外側(cè)。2.如權(quán)利要求1所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其特征在于，所述納米孔的外側(cè)還設(shè)有多孔硅膜，所述多孔硅膜位于所述納米孔和第二電極之間。3.如權(quán)利要求2所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其特征在于，所述多孔硅膜的孔徑為50?lOOnm。4.如權(quán)利要求2所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其特征在于，所述納米孔的外側(cè)還設(shè)有多孔陶瓷層，所述多孔陶瓷層位于所述多孔硅膜和第二電極之間。5.如權(quán)利要求4所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其特征在于，所述多孔陶瓷層的孔徑為50?I OOnm ο6.如權(quán)利要求1所述的用于單外泌體裂解的裂解裝置，其特征在于，所述電源為交直流一體化電源。
【文檔編號(hào)】C12M1/42GK205443319SQ201521003434
【公開(kāi)日】2016年8月10日
【申請(qǐng)日】2015年12月7日
【發(fā)明人】劉首鵬, 楊語(yǔ)諶
【申請(qǐng)人】中國(guó)科學(xué)院蘇州生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù)研究所