專利名稱：獲得高純度HMG－CoA還原酶抑制劑的方法
背景技術(shù)：
洛伐他汀，普伐他汀，美伐他汀，辛伐他汀，它們的衍生物及類似物已知是HMG-CoA還原酶抑制劑，并用作抗高膽固醇血癥制劑。通過用鑒別為屬于曲霉、紅曲霉、諾卡氏菌、Amycolatopsis、毛霉或青霉屬的不同種的微生物發(fā)酵可生產(chǎn)它們。
為生產(chǎn)安全和有效的藥物，活性成分的純度是一重要因素。如果如在治療或預(yù)防高血漿膽固醇癥的情況中需長期服用藥物時，藥物的最高可能純度尤為重要。低純度藥物中雜質(zhì)的積累可在臨床治療期間導(dǎo)致一些副作用。
以前專利申請中揭示的分離和純化抗高膽固醇血癥制劑的方法，包括提取，層析，內(nèi)酯化和結(jié)晶法的不同組合。通過這些方法獲得的終產(chǎn)物的純度低于99．6％。用這些方法得到較高純度的產(chǎn)物是可能的，但在用那些方法大工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)所需產(chǎn)物的產(chǎn)量方面太低。
專利申請WO92／16276中揭示的分離方法提供了獲得純度高于99．5％的HMG-CoA還原酶抑制劑的溶液，但需要使用高度復(fù)雜的工業(yè)高效親和層析(HPLC)設(shè)備。根據(jù)WO92／16276，將接近85％或更高純度的粗制HMG-CoA還原酶抑制劑溶于一有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑和水的溶液中。然后將此混合物緩沖至pH在2～9之間，并置于HPLC柱上。在收集相應(yīng)的HMG-CoA還原酶抑制劑峰值之后，除去一部分溶劑然后加入水或者除去2／3的溶劑混合物，以使HMG-CoA還原酶抑制劑結(jié)晶。最后通過此方法得到的產(chǎn)物純度至少99．5％，產(chǎn)量接近90％。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及一種新的從發(fā)酵肉湯中分離和純化純度高于99．6％，優(yōu)選高于99．7％的HMG-CoA還原酶抑制劑的工業(yè)方法。為達(dá)到此目的，對用屬于曲霉、紅曲霉、諾卡氏菌、Amycolatopsis、毛霉或青霉屬的不同微生物發(fā)酵期間產(chǎn)生的化合物的化學(xué)性質(zhì)，及其在不同pH不同溶劑中的性能進(jìn)行研究。由此，通過本發(fā)明的方法可實(shí)現(xiàn)前述目的，所述方法包括以下步驟--澄清菌絲體肉湯，并將此澄清肉湯濃縮為較小體積，--將此濃縮物酸化為pH值在4．5～7．5范圍內(nèi)，隨后用乙酸乙酯提取HMG-CoA還原酶抑制劑，--任選地進(jìn)行內(nèi)酯化，--從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶HMG-CoA還原酶抑制劑。
--從具有極限水混溶性或極限水溶性(limited miscibility orsolubility with water)的有機(jī)溶劑中結(jié)晶HMG-CoA還原酶抑制劑。
發(fā)明詳述

圖1分別示出在乙酸乙酯提取步驟中，HMG-CoA還原酶抑制劑(洛伐他汀)和雜質(zhì)的分配系數(shù)對pH的依賴性。
圖2，3和4分別示出作為粗提組合物經(jīng)乙酸乙酯提取之后，在從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶之后，和在具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中進(jìn)一步結(jié)晶之后，HMG-CoA還原酶抑制劑樣品的HPLC圖。
由于HMG-CoA還原酶抑制劑是典型的胞內(nèi)及胞外產(chǎn)物，非強(qiáng)制性地但優(yōu)選地將它們從菌絲體中有效地溶解于發(fā)酵液中。此溶解方法揭示于專利申請WO97／20834中，包括用強(qiáng)堿將發(fā)酵肉湯處理為pH11．5，并攪拌3小時。WO97／20834教導(dǎo)此溶解可用堿將發(fā)酵肉湯處理為pH10～13之間進(jìn)行。所用溫度在60～95℃之間。HMG-CoA還原酶抑制劑在pH高于9非常有效地自菌絲體中溶解出，但太長時間暴露于如此劇烈條件下，導(dǎo)致萘骨架上羥基和羧酸之間酯鍵的降解。在更劇烈條件下，HMG-CoA還原酶抑制劑和脫酰的HMG-CoA還原酶抑制劑之間平衡移動至脫酰產(chǎn)物。我們已意外地發(fā)現(xiàn)溫度在10～40℃，優(yōu)選在18～25℃如在室溫，時間少于1小時，優(yōu)選少于半小時，如大約10分鐘，pH在9．5～13之間，最優(yōu)選在9．5～11．5之間進(jìn)行溶解的效率，與在先前專利申請中闡述的在較高溫度進(jìn)行的不經(jīng)濟(jì)及耗時較多的方法獲得的效率是相同的。此溶解也可在pH低于9．5，尤其低于6的情況下進(jìn)行，但在此情況中必需使用大量的有機(jī)溶劑。
如果進(jìn)行溶解HMG-CoA還原酶抑制劑的這種優(yōu)選實(shí)施方案，隨后要用酸化劑，適當(dāng)?shù)赜脽o機(jī)酸處理發(fā)酵肉湯，以將pH值調(diào)節(jié)在7．5～8．5之間。適當(dāng)?shù)臒o機(jī)酸是磷酸，硫酸和鹽酸。HMG-CoA還原酶抑制劑在此pH范圍內(nèi)是穩(wěn)定的，且發(fā)酵肉湯也可在此步驟之后貯存一陣，如果必需或需要的話。
通過適當(dāng)?shù)姆蛛x步驟，如過濾和／或離心，將菌絲體從發(fā)酵肉湯中除去。優(yōu)選用過濾法，且作為過濾技術(shù)，除經(jīng)典過濾之外，微濾，超濾及滲濾也是適用的。然后用反向滲透或一些其它降低體積方法，將澄清的肉湯濃縮為較小體積，優(yōu)選濃縮5～10倍。
以下闡述的酸化和乙酸乙酯提取步驟，是純化方法的要點(diǎn)。
將所述濃縮物用酸化劑，適當(dāng)?shù)赜脽o機(jī)酸酸化，至pH值在4．5～7．5之間?？墒褂蒙鲜鎏峒暗臒o機(jī)酸的例子。然后用乙酸乙酯從所述pH經(jīng)調(diào)正的濃縮物中提取HMG-CoA還原酶抑制劑。通過用反流提取柱適當(dāng)進(jìn)行提取。HMG-CoA還原酶抑制劑和可溶于乙酸乙酯的雜質(zhì)之間的分配系數(shù)比在pH5．5～7．5，尤其在pH6．0～7．0最高，且在此步驟，一部分極性雜質(zhì)已被除去。在pH值低于5．0，尤其低于4進(jìn)行提取更有效，這是因?yàn)镠MG-CoA還原酶抑制劑的分配系數(shù)較高，但這會產(chǎn)生高水平的極性雜質(zhì)。在此pH值，可溶于乙酸乙酯的雜質(zhì)的分配系數(shù)也較高，如圖1所示。由于其低分配系數(shù)，在pH值在4．5～7．5之間，尤其在5．0以上，更尤其在5．5以上進(jìn)行提取入乙酸乙酯內(nèi)，產(chǎn)生較低水平的極性雜質(zhì)。在該pH值，HMG-CoA還原酶抑制劑從濃縮物至乙酸乙酯中的較差分配，可用較長反流提取柱補(bǔ)償。
如果需要，然后將所得乙酸乙酯提取物濃縮，并任選地在方法的此階段將HMG-CoA還原酶抑制劑內(nèi)酯化。當(dāng)pH在5．5～7．5之間時，HMG-CoA還原酶抑制劑的主要部分是游離酸形式。因而，如果HMG-CoA還原酶抑制劑在藥物中不用作內(nèi)酯，可省略濃縮和內(nèi)酯化步驟。通過將HMG-CoA還原酶抑制劑與催化量的無機(jī)或有機(jī)酸，最優(yōu)選與三氟乙酸(TFA)接觸，適當(dāng)?shù)倪M(jìn)行內(nèi)酯化。然后可將任選地內(nèi)酯化的HMG-CoA還原酶抑制劑直接從乙酸乙酯中結(jié)晶，將在以下闡述。或者，適當(dāng)?shù)耐ㄟ^汽化除去乙酸乙酯，并獲得任選地內(nèi)酯化的HMG-CoA還原酶抑制劑粗產(chǎn)物。
將由此獲得的粗HMG-CoA還原酶抑制劑任選地進(jìn)行吸附層析，優(yōu)選反相層析。作為吸附層析的流動相，可適當(dāng)?shù)氖褂靡译婊虻图壌迹缫掖?，甲醇或丙醇，或這些溶劑與水的混合物。優(yōu)選地，將粗HMG-CoA還原酶抑制劑溶于純乙腈或至少30％v／v乙腈的乙腈／水混合物中，并將所得溶液置于吸附層析柱上。此柱填充物包括但非限于基于辛基硅烷，二甲基硅烷，十八基硅烷，氰硅烷，聚苯乙烯二乙烯基苯共聚物或丙烯酸類聚合物的固定相。其它典型的固定相物質(zhì)也可使用，如二氧化硅，氧化鋁等等。將吸附的化合物用適當(dāng)?shù)牧鲃酉嗳缫译妫荻认疵?。收集相?yīng)的HMG-CoA還原酶抑制劑峰值，并除去流動相溶劑以使HMG-CoA還原酶抑制劑結(jié)晶。結(jié)晶的粗制HMG-CoA還原酶抑制劑的純度在80％～92％之間，并取決于發(fā)酵肉湯中的雜質(zhì)分布。也可用正常層析，急驟層析，工業(yè)HPLC，或用提取或結(jié)晶法代替任選的吸附層析。
以下將更詳細(xì)地闡述本發(fā)明特殊的組合結(jié)晶處理法。更具體地，其包括將HMG-CoA還原酶抑制劑從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶，和將HMG-CoA還原酶抑制劑從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶。這二個結(jié)晶的順序也可以反過來。水混溶性或水溶性的，或具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑的性質(zhì)，本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，并如參見于并入?yún)⒖嫉摹癠llmann’sEncyclopedia of Industrial Chemistry”，Vol．A24，5th版(1993)，pp．437-505中所述。在本發(fā)明中，術(shù)語“水混溶性或水溶性的”指基本上無限地，優(yōu)選與水100％混溶或溶解的有機(jī)溶劑；術(shù)語“具有極限水混溶性或極限水溶性”還包括不混溶于或不溶解于水的有機(jī)溶劑。另外，本發(fā)明的結(jié)晶概念尤其也包括沉淀。
基本的水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑的例子包括低級烷醇如甲醇，乙醇，丙醇或異丙醇，低級烷基酮如丙酮和甲乙酮，低級烷基乙二醇醚如甲基乙二醇，乙基乙二醇，丙基乙二醇和二乙基乙二醇，及偶極非質(zhì)子溶劑如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，N，N-二甲基乙酰胺(DMA)，和二甲基亞砜，包括這些溶劑的混合物。特別優(yōu)選的水混溶性的有機(jī)溶劑例如是丙酮和低級烷醇。具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑例如包括高級烷醇如丁醇，異丁醇，戊醇，己醇，2-乙基己醇，苯甲醇和環(huán)己醇；高級烷基酮如甲基·丁基酮，甲基·異丁基酮和環(huán)己酮；酯如乙酸甲酯，乙酸乙酯，正丙基(和異丙基)乙酸酯，正丁基(和異丁基或仲丁基)乙酸酯和乙酸戊酯；醚如二乙醚和二異丙醚；氯化烴如亞甲氯和氯仿，乙腈等等，包括這些溶劑的混合物。作為具有極限水混溶性或極限水溶性的溶劑特別優(yōu)選乙酸乙酯。
我們意外地發(fā)現(xiàn)，HMG-CoA還原酶抑制劑從水混溶性的有機(jī)溶劑如丙酮或低級烷醇中結(jié)晶，隨后從相同溶劑進(jìn)一步再結(jié)晶僅可除去少部分非極性和大部分的極性雜質(zhì)，從具有極限水混溶性的有機(jī)溶劑乙酸乙酯中結(jié)晶，隨后從相同溶劑再結(jié)晶，僅除去大部分非極性雜質(zhì)。這一點(diǎn)從粗制HMG-CoA還原酶抑制劑的HPLC圖中(圖2)，在從丙酮中結(jié)晶后HMG-CoA還原酶抑制劑的HPLC圖中(圖3)和從丙酮中結(jié)晶后，并從乙酸乙酯中進(jìn)一步再結(jié)晶獲得的HMG-CoA還原酶抑制劑的HPLC圖(圖4)中清晰可見。根據(jù)這一意想不到的認(rèn)識，本發(fā)明的最后步驟包括從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中和從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中組合結(jié)晶，這一步驟是獲得高純度HMG-CoA還原酶抑制劑的方法中不能缺少的。
根據(jù)本發(fā)明的組合結(jié)晶處理可如下進(jìn)行首先，將粗制的HMG-CoA還原酶抑制劑的晶體溶解于前述基本(優(yōu)選100％)水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中，尤其是丙酮或低級醇中，然后加入水使HMG-CoA還原酶抑制劑結(jié)晶或沉淀?；蛘撸瑢⑷苡诨旧纤烊苄曰蛩苄缘挠袡C(jī)溶劑中的粗制HMG-CoA還原酶抑制劑加入水中以被結(jié)晶或沉淀。如果需要，可用相同或其它水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑將這些步驟重復(fù)進(jìn)行，如根據(jù)起始粗制物的純度，重復(fù)1～4次。
然后將由此獲得的晶體溶解于前述具有極限水混溶性或極限水溶性的溶劑如乙酸乙酯中至合適濃度，優(yōu)選在10～35g／l范圍，最優(yōu)選在15～25g／l范圍內(nèi)。在除去1／3～3／4的溶劑后，HMG-CoA還原酶抑制劑結(jié)晶。如果需要，可重復(fù)進(jìn)行從相同或其它具有極限水混溶性或極限水溶性的溶劑中結(jié)晶，例如根據(jù)通過從水混溶性或水溶性的溶劑中結(jié)晶獲得的產(chǎn)物的純度重復(fù)1～3次。然后將此結(jié)晶的HMG-CoA還原酶抑制劑過濾，并干燥以產(chǎn)生純度至少為99．6％的產(chǎn)物。
如已提及的，結(jié)晶順序可以是相反的，即首先進(jìn)行從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶，然后進(jìn)行從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶。在本發(fā)明一優(yōu)選實(shí)施方案中，在乙酸乙酯提取步驟，或任選地，在上述內(nèi)酯化步驟之后，可合適地首先進(jìn)行從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑乙酸乙酯中的結(jié)晶。
用本發(fā)明的方法，可得到純度至少99．6％或甚至至少99．7％的產(chǎn)物。
在另一實(shí)施方案中，可以不同方式重復(fù)進(jìn)行不同種類的結(jié)晶。
在本發(fā)明的另一方面中，前述從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中，和從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中的結(jié)晶組合法，被用作任何分離和／或純化HMG-CoA還原酶抑制劑的方法的最終精制步驟。據(jù)此，該最終精制步驟也可用于常規(guī)獲得的HMG-CoA還原酶抑制劑的粗制品。由此可獲得純度至少99．6％，甚至至少99．7％的HMG-CoA還原酶抑制劑。
當(dāng)洛伐他汀被選作HMG-CoA還原酶抑制劑時，本發(fā)明的方法是特別適用的。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，上述方法用于分離和／或純化洛伐他汀。
根據(jù)本發(fā)明的方法獲得的基本純化的HMG-CoA還原酶抑制劑，如洛伐他汀，美伐他汀，普伐他汀和辛伐他汀以及它們的衍生物和類似物，可有助于用于制備預(yù)防和／或治療疾病的藥物。該獲得的抑制劑和藥物特別用作降低中風(fēng)，突發(fā)短暫缺血，動脈硬化和心肌梗塞的危險性的藥物或預(yù)防藥。
以下實(shí)施例例證了本發(fā)明的方法，而非限制權(quán)利要求中闡明的本發(fā)明的范圍。
然后將乙酸乙酯濃縮物(14l)置入反應(yīng)器(40 l)中并內(nèi)酯化。該內(nèi)酯化反應(yīng)由催化量的TFA(0．5ml TFA／1L濃縮物)起始。在40℃將內(nèi)酯化步驟持續(xù)2小時。在內(nèi)酯化之后，將濃縮物用14 l 5％碳酸氫銨水溶液沖洗2次。將水相排出，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中將有機(jī)相進(jìn)一步濃縮至干燥。所得油狀產(chǎn)物(1．51)含有133g洛伐他汀。
將所得油狀產(chǎn)物(161ml)溶于80ml乙腈中，并加樣于充填XAD-16的層析柱上(80cm，3．6cm)(XAD-16是Rohm&Hass公司的商品名，20-50目)。將此柱首先用40∶60乙腈／水(pH3，由HCl調(diào)正)以75ml／min速率洗脫。用UV檢測儀(236nm)監(jiān)測洗脫液，且在吸收開始下降時，將柱用55∶45乙腈／水(pH3，由HCl調(diào)正)洗脫。收集主要組分，并在吸收下降后，將柱用80∶20乙腈／水(pH3，由HCl調(diào)正)沖洗。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(50℃，150mbar)從主要組分中除去乙腈，并將所得晶體濾出。晶體的質(zhì)量是24．5g，且洛伐他汀的含量為50％w／w。HPLC純度為92．5％。
將所得晶體(24g)溶于350ml丙酮中，并在持續(xù)攪拌下加入700ml水。將此混合物置于4℃，30分鐘。濾出所得晶體，并在室溫下真空干燥。晶體質(zhì)量為12．7g，洛伐他汀含量為90％w／w。HPLC純度為98．8％。
在相同條件下重復(fù)從丙酮中結(jié)晶，獲得11．3g晶體，洛伐他汀含量為97％，HPLC純度是99．4％。
將從丙酮第二次結(jié)晶獲得的晶體(11．3g)溶于700ml乙酸乙酯中，并將乙酸乙酯真空蒸發(fā)至Lovaststin濃度為70g／l。將濃縮物置于8℃1小時。將所得洛伐他汀晶體濾出，然后真空干燥。晶體的質(zhì)量是9．4g，洛伐他汀含量為99．6％。HPLC純度為99．7％。
將所得晶體(2．1g)溶于50ml丙酮中，并加入85ml水。然后將此混合物置于10℃，30分鐘。濾出晶體，并在40℃真空干燥。所得晶體質(zhì)量為1．9g，洛伐他汀的含量為99％。HPLC純度是99．8％。
為進(jìn)一步分離，將油狀產(chǎn)物進(jìn)行吸附層析，并如實(shí)施例1進(jìn)行組合結(jié)晶。
權(quán)利要求
1．一種從菌絲體生物量中分離和純化HMG-CoA還原酶抑制劑的方法，其包括--澄清菌絲體肉湯，并將澄清的肉湯濃縮至較小體積，--將濃縮物的pH值酸化至4．5～7．5范圍內(nèi)，隨后用乙酸乙酯提取HMG-CoA還原酶抑制劑，--任選地進(jìn)行內(nèi)酯化，--從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶HMG-CoA還原酶抑制劑，和--從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶HMG-CoA還原酶抑制劑。
2．權(quán)利要求1的方法，還包括在澄清菌絲體生物量之前，將得自菌絲體生物量的HMG-CoA還原酶抑制劑在pH值在9．5～13之間溶于發(fā)酵液中，并將肉湯pH值調(diào)正至7．5～8．5之間。
3．權(quán)利要求2的方法，其中溶解步驟在溫度在10～40℃，時間不超過1小時條件下進(jìn)行。
4．前述任一權(quán)利要求的方法，其中澄清菌絲體肉湯通過過濾將菌絲體從肉湯中除去而進(jìn)行。
5．前述任一權(quán)利要求的方法，其中所述澄清的肉湯是通過反相滲透濃縮的。
6．前述任一權(quán)利要求的方法，其中濃縮物被酸化至pH值在5．5～7．5范圍內(nèi)。
7．權(quán)利要求6的方法，其中濃縮物被酸化至pH值在6．0～7．0范圍內(nèi)。
8．前述任一權(quán)利要求的方法，其中將提取自乙酸乙酯并任選地內(nèi)酯化的HMG-CoA還原酶抑制劑進(jìn)行吸附層析而純化。
9．權(quán)利要求8的方法，其中乙腈與水的混合物用作吸附層析的流動相。
10．前述任一權(quán)利要求的方法，其中結(jié)晶步驟的順序反過來。
11．前述任一權(quán)利要求的方法，其中用于結(jié)晶步驟中的水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑是丙酮或低級烷醇。
12．權(quán)利要求11的方法，其中結(jié)晶步驟包括將HMG-CoA還原酶抑制劑溶于丙酮中，然后向其中加入水。
13．前述任一權(quán)利要求的方法，其中從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶的步驟包括將HMG-CoA還原酶抑制劑以10～35g／l的濃度溶于所述有機(jī)溶劑中，并除去1／3～3／4所述有機(jī)溶劑。
14．前述任一權(quán)利要求的方法，其中用于結(jié)晶步驟的具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑是乙酸乙酯。
15．前述任一權(quán)利要求的方法，其中獲得的HMG-CoA還原酶抑制劑純度高于99．6％。
16．前述任一權(quán)利要求的方法，其中選擇的HMG-CoA還原酶抑制劑是洛伐他汀。
17．一種純化HMG-CoA還原酶抑制劑的方法，包括將HMG-CoA還原酶抑制劑進(jìn)行組合結(jié)晶步驟，包括從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶，及從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶。
18．權(quán)利要求17的方法，其中組合結(jié)晶步驟是獲得純度高于99．6％的HMG-CoA還原酶抑制劑的最終精制步驟。
19．權(quán)利要求18的方法，其中獲得的HMG-CoA還原酶抑制劑的純度高于99．7％。
20．權(quán)利要求17～19任一方法，其中丙酮或低級烷醇用作水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑。
21．權(quán)利要求20的方法，其中所述結(jié)晶包括將HMG-CoA還原酶抑制劑溶于丙酮中，然后向其中加入水。
22．權(quán)利要求17～21任一方法，其中從具有極限水混溶性或極限水溶性的所述有機(jī)溶劑中的所述結(jié)晶，包括將HMG-CoA還原酶抑制劑以10～35g／l濃度溶于所述有機(jī)溶劑中，并除去1／3～3／4的所述有機(jī)溶劑。
23．權(quán)利要求17～22的任一方法，其中乙酸乙酯用作具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑。
24．權(quán)利要求1或權(quán)利要求17的方法在分離和／或純化洛伐他汀中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明描述了一種從菌絲體生物量中分離和純化HMG－CoA還原酶抑制劑的方法,其包括:澄清菌絲體肉湯,并將澄清的肉湯濃縮至較小體積,將濃縮物的pH值酸化至4.5～7.5范圍內(nèi),隨后用乙酸乙酯提取HMG－CoA還原酶抑制劑,從水混溶性或水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶HMG－CoA還原酶抑制劑,和從具有極限水混溶性或極限水溶性的有機(jī)溶劑中結(jié)晶HMG－CoA還原酶抑制劑。結(jié)晶步驟也可以反過來。所述結(jié)晶步驟的組合的概念也可用于純化粗制HMG－CoA還原酶抑制劑。
文檔編號B01D11/02GK1291238SQ99803080
公開日2001年4月11日 申請日期1999年2月17日 優(yōu)先權(quán)日1998年2月18日
發(fā)明者茲拉特科·普夫勞姆, 杜尚·米利沃耶維奇, 達(dá)維德·塞尼察 申請人:萊克制藥與化學(xué)公司