上層液體的密度。
[0024]在本實施方式中,參見圖1所示,離心管包括管體1和蓋于管體1管口處的蓋體2,蓋體2上設(shè)有第一抽吸口 21和第二抽吸口 22。利用設(shè)置在離心管管口的蓋體2和專用的抽吸口來固定抽取管,可以防止離心過程中塵埃進(jìn)入管體內(nèi),從而減少污染,進(jìn)一步提高萃取液體的質(zhì)量。顯然,離心管本身也可以是敞口容器,而將抽取管用夾具固定,甚至,離心管可以是密閉容器,并可以利用其中一條抽取管來注入待離心的液體,另一條抽取管來保持內(nèi)外氣壓平衡。這些具體的擴展方案還有很多,在本文中不再予以贅述。
[0025]特別的,在本實施方式中,該待離心的液體為全血,并且,上浮標(biāo)3、下浮標(biāo)4、第一抽取管段5、第二抽取管段7構(gòu)成一個漂浮于全血上的漂浮體,漂浮體的密度小于全血離心后形成的白細(xì)胞層的密度,并大于全血離心后形成的血小板血漿層的密度。因此,利用本實施方式所提供的離心裝置提取去白細(xì)胞富血小板血漿的一種方法,其步驟可以如下所述:
[0026](1)樣本準(zhǔn)備:分別抽取抗凝劑和血液,充分混勻,得到待分離的全血。
[0027](2)第一次離心:取上述待分離的全血裝入離心管,在130g?180g的離心速度下離心10?20分鐘,形成自下而上分為三層的離心液。具體地說來,自下而上的三層離心液分別為紅色、無色和淡黃色,其中:紅色為紅細(xì)胞層,約占總體積的40?65%,其主要成分為紅細(xì)胞,此外還含有少量的白細(xì)胞和極少量血小板(具體說來,本層約包含紅細(xì)胞總數(shù)的100%、白細(xì)胞總數(shù)的10?20%、血小板總數(shù)的不足10% );無色的為白細(xì)胞層,其主要成分為白細(xì)胞;淡黃色層為血小板血漿層,約占總體積的35?60% (具體說來,本層不含白細(xì)胞和紅細(xì)胞,約包含血小板總數(shù)的50?90% );并且,血小板血漿層和白細(xì)胞層存在輕微的重合現(xiàn)象,其中白細(xì)胞層和重合層約占總體積的5% ;白細(xì)胞層以及與白細(xì)胞層重合的血小板層中的白細(xì)胞約占80?90%,血小板占總數(shù)的10?50%。
[0028](3)第一次抽取:從第一抽取管中向外抽吸,即可將位于下浮標(biāo)4之下的紅細(xì)胞層和白細(xì)胞層抽走,此時,剩余的上層離心液的體積約占原來的全血體積的1/3?2/3,這一上層離心液即為血小板血漿層。利用控制漂浮體的密度,本實施方式可以使得漂浮體精確地漂浮于白細(xì)胞層和血小板血漿層之間。此時,下浮標(biāo)4將位于白細(xì)胞層和血小板血漿層之間的重疊區(qū)域,從而在無需比對觀察兩個層間的顏色差異的前提下可以直接執(zhí)行抽取步驟。因此,本實施方式省去了目視調(diào)節(jié)的步驟,進(jìn)一步提高了制備效率。值得一提的是,在抽走紅細(xì)胞層的過程中,下浮標(biāo)4將緩緩下沉,此時,軟管段的可伸縮性能能夠使浮標(biāo)的下沉運動得到支持,防止浮標(biāo)在層間運動造成對離心液的擾動。
[0029](4)第二次離心:將剩余的血小板血漿層在250?400g的離心速度下離心10?20分鐘,形成底部血小板沉積和血漿上清液。此時,血小板將沉積于管底以及下浮標(biāo)4的上表面。此次離心操作之后,由于絕大多數(shù)血小板均沉積于離心管底,上清液為含有血小板不超過5%的血漿。
[0030](5)第二次抽取:通過第二抽取管抽取位于上浮標(biāo)3和下浮標(biāo)4之間的部分血漿上清液,使得剩余上清液的液位和上浮標(biāo)3持平。
[0031](6)重懸:使用剩余的血楽上清液重懸血小板沉積,剩余的血楽上清液的體積約占全血體積的1/5?1/15。
[0032](7)第三次抽取:通過第二抽取管抽取經(jīng)過重懸后的去白細(xì)胞富血小板血漿,即可得到所需成品。
[0033]在上述制備過程中,在對全血進(jìn)行第一次離心之后,血小板分布區(qū)域較寬、白細(xì)胞分布區(qū)域較窄,且兩者重合區(qū)域亦較窄,因此在完全去除白細(xì)胞后,即可實現(xiàn)對大部分血小板的回收。
[0034]本實施方式所述及的該種離心方法,利用同一離心裝置兩次離心,分別實現(xiàn)白細(xì)胞的去除和血小板的富集,從而能夠制備得到三大指標(biāo)均優(yōu)于現(xiàn)有產(chǎn)品的富血小板血漿。在該富血小板血漿中,通常平均血小板濃度約為1083.25±250.79 X 109/L,平均血小板富集度約為5.22±0.48倍,平均血小板回收率約為58.00±5.32 %,平均白細(xì)胞濃度約為0.68±0.49X107L,平均白細(xì)胞清除率約為98.73±0.91 %,各項指標(biāo)均優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù),且符合現(xiàn)有認(rèn)識。
[0035]因此,綜上所述,相對于現(xiàn)有技術(shù)而言,本實施方式通過利用下浮標(biāo)4來區(qū)分待離心的液體在離心后的分層區(qū)域,利用第一抽取管實現(xiàn)了對無用層的分層抽吸;并且,本實施方式還通過上浮標(biāo)3對剩余的有用層進(jìn)行標(biāo)注,利用第二抽取管實現(xiàn)了對有用層的部分萃??;從而使得本實施方式免去了更換離心管的操作步驟,提高了制備效率,防止了更換過程中可能造成的污染。
[0036]顯然,盡管上文中僅舉了從全血中提取去白細(xì)胞富血小板血漿的范例,但是,本實施方式所提供的離心裝置并不僅針對去白細(xì)胞富血小板血漿的提取而設(shè)計,任何在離心之后能夠出現(xiàn)分層現(xiàn)象的液體都可以通過本實施方式所提供的離心裝置來分離并獲取所需的部分。例如,該待離心的液體可以為全血,通過調(diào)節(jié)上浮標(biāo)3、下浮標(biāo)4、第一抽取管段5、第二抽取管段7所構(gòu)成的漂浮體的密度使之小于全血離心后形成的紅細(xì)胞層的密度,并大于全血離心后形成的白細(xì)胞層的密度,則可保留白細(xì)胞,從而從全血中提取富含白細(xì)胞的富血小板血漿。
[0037]本實用新型的第二實施方式涉及一種離心裝置。第二實施方式是第一實施方式的改進(jìn),主要改進(jìn)之處在于:在本實用新型的第二實施方式中,上浮標(biāo)3與下浮標(biāo)4的垂直距離為全血裝入離心管后的高度的1/15至1/5。
[0038]將這一距離控制在1/15至1/5,可以使得滿足這一距離下的液體體積和經(jīng)過第二次離心后需留下的血漿上清液的體積接近,從而更好地控制第二次抽取上清液的動作。具體地來說,將上浮標(biāo)3與下浮標(biāo)4的垂直距離控制為全血裝入離心管后的高度的1/10為最優(yōu)選擇。
[0039]在本實施方式中,第一抽取管段為硬質(zhì)管,上浮標(biāo)與下浮標(biāo)的垂直距離通過所述第一抽取管段相對固定。利用硬質(zhì)的第一抽取管段來固定,可以使得本實用新型實施方式提供的離心裝置的結(jié)構(gòu)更加簡單,并且,由于零件的減少,對漂浮體的密度控制也被進(jìn)一步簡單化了。但是,顯然,上浮標(biāo)與下浮標(biāo)的垂直距離也可以通過另外設(shè)置的支撐結(jié)構(gòu)來固定。這并不影響本實用新型技術(shù)目的的基本實現(xiàn)。
[0040]在本實施方式中,第一抽取管段5穿出下浮標(biāo)4的下表面部分的長度小于或等于2_。顯然,第一抽取管段5穿出的長度越小,則對處于下浮標(biāo)4之下的懸浮液的抽取越干凈,越不容易越位抽取。而如果第一抽取管段5較長,則上層的液體將可能會在抽取過程中流過下浮標(biāo)4進(jìn)入下浮標(biāo)4下方,此時將可能發(fā)生擾動,導(dǎo)致層間界限不清晰,進(jìn)而影響抽取效果。而2mm的長度接近常用的離心管底部彎曲部位的半徑,在小于2mm后,第一抽取管段5將在下浮標(biāo)4的支撐下懸停于離心管的底部,從而防止在第一次抽吸動作的最后因第一抽取管段5撐起下浮標(biāo)4,導(dǎo)致血小板和血漿層漏至下浮標(biāo)4的下方。
[0041]更進(jìn)一步地來說,參見圖1所示,在抽取管段5的出口端還可以形成斜切管口 51,其原理類似于飲料杯吸管。利用斜切管口 51可以使得第一抽取管對底層液體的抽吸更加干凈徹底。
[0042]本實用新型的第三實施方式涉及一種離心裝置。第三實施方式是第二實施方式的進(jìn)一步改進(jìn),主要改進(jìn)之處在于:在本實用新型第三實施方式中,第二抽取管段7與上浮標(biāo)3的連接處具有調(diào)節(jié)機構(gòu),調(diào)節(jié)機構(gòu)用于調(diào)節(jié)第二抽取管段7穿出上浮標(biāo)3的下表面的部分的長度。
[0043]顯然,在本實施方式中,第二抽取管段7穿出上浮標(biāo)3的下表面的部分也可以是固定設(shè)置的,此時,參見圖1所示,第二抽取管段7的管口