一種抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，是涉及一種抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]抗乙肝免疫核糖核酸是用乙肝疫苗作抗原免疫動(dòng)物的淋巴組織，以化學(xué)方法提取而成的生物制劑。目前，臨床上的抗乙肝免疫核糖核酸具有提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能、使乙肝抗原轉(zhuǎn)陰并促使乙肝抗體形成的功效，被廣泛用于乙肝、乙肝病毒攜帶、肝硬化、肝腫大、肝損傷、急慢性肝炎、迀延性肝炎、肝癌等疾病的治療。對(duì)于抗乙肝免疫核糖核酸的作用機(jī)理一般認(rèn)為是信息核糖核酸的作用和Ag-1RNA復(fù)合物的作用。最近的一項(xiàng)研宄表明，本品在體仙可誘生出高活性的內(nèi)源性干擾素，此內(nèi)源性干擾素于抗乙肝iRNA免疫核糧核酸注射后8h出現(xiàn)，24h達(dá)高峰，最高效價(jià)為800-1000IU/mL，44h下降至消失；在另一項(xiàng)抗乙肝iRNA對(duì)乙肝病毒前蛋白調(diào)控研宄中證明，抗乙肝免疫核糖核酸可以抑制乙肝病毒前S蛋白的轉(zhuǎn)錄，從而解離乙肝病毒與肝細(xì)胞的吸附。研宄表明，抗乙肝免疫核糖核酸具有既能傳遞細(xì)胞免疫反應(yīng)，又能傳遞體液免疫反應(yīng)的作用，全面提高受體的免疫功能，顯示出免疫核糖核酸的免疫潛能。
[0003]近年來，抗乙肝免疫核糖核酸已制成各種藥物劑型用于臨床治療，其中，以注射用抗乙肝免疫核糖核酸最為常用，市場(chǎng)需求量大。在藥物制劑生產(chǎn)過程中，注射用抗乙肝免疫核糖核酸被制成抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑?，F(xiàn)有的抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的制備方法包括:采用抗乙肝免疫核糖核酸、輔料和注射用水，經(jīng)凍干制成抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑。在凍干過程中，水分不經(jīng)過液體狀態(tài)而直接升華，這樣干燥后的物質(zhì)的物理、化學(xué)性能和形狀基本不變，有效成分損失小，密封保存周期長(zhǎng)。
[0004]但是，現(xiàn)有的制備方法不能控制產(chǎn)品中抗乙肝免疫核糖核酸的均勻性，使產(chǎn)品在使用過程中結(jié)塊或者溶解不徹底，從而使得到的產(chǎn)品存在復(fù)溶時(shí)間長(zhǎng)的問題，不利于產(chǎn)品的臨床應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的制備方法，本發(fā)明提供的制備方法能夠有效控制產(chǎn)品中抗乙肝免疫核糖核酸的均勻性，減少產(chǎn)品的復(fù)溶時(shí)間。
[0006]本發(fā)明提供了一種抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的制備方法，包括以下步驟:
[0007]a)將抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水混合，得到混合溶液A ;
[0008]b)將所述混合溶液A依次進(jìn)行過濾、冷凍和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑；
[0009]所述抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水的質(zhì)量比為1: (2?15): (200?600)。
[0010]優(yōu)選的，步驟a)中所述賦形劑包括右旋糖酐、甘露醇、乳糖一水合物、葡萄糖、甘氨酸和聚乙烯吡咯烷酮中的一種或多種。
[0011]優(yōu)選的，步驟a)中所述將抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水混合的過程具體為:
[0012]將抗乙肝免疫核糖核酸和注射用水的混合后，在攪拌的條件下加入賦形劑，得到混合溶液A。
[0013]優(yōu)選的，所述攪拌的溫度為20°C?30°C，時(shí)間為5min?lOmin。
[0014]優(yōu)選的，步驟b)中所述過濾的過程具體為:
[0015]將混合溶液A進(jìn)行兩次精濾；
[0016]所述第一次精濾的微孔濾芯孔徑為0.4 μπι?0.5 μπι ;所述第二次精濾的微孔濾芯的孔徑為0.2 μ m?0.25 μ m0
[0017]優(yōu)選的，步驟b)中所述冷凍的溫度為-40 0C?-30 °C，時(shí)間為Ih?4h。
[0018]優(yōu)選的，步驟b)中所述干燥的溫度為30 0C?40 °C，時(shí)間為2h?5h。
[0019]優(yōu)選的，步驟b)中所述干燥的過程具體為:
[0020]將冷凍后的混合溶液A升溫至干燥溫度，進(jìn)行干燥處理，得到抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑。
[0021]優(yōu)選的，所述升溫的速率為6°C /h?8°C /h。
[0022]本發(fā)明提供了一種抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的制備方法，包括以下步驟:a)將抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水混合，得到混合溶液A ;b)將所述混合溶液A依次進(jìn)行過濾、冷凍和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑；所述抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水的質(zhì)量比為1: (2?15): (200?600)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的制備方法能夠有效控制抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑中抗乙肝免疫核糖核酸的均勻性，減少產(chǎn)品的復(fù)溶時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用本發(fā)明提供的制備方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的復(fù)溶時(shí)間在12秒以內(nèi)。
【具體實(shí)施方式】
[0023]下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0024]本發(fā)明提供了一種抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的制備方法，包括以下步驟:
[0025]a)將抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水混合，得到混合溶液A ;
[0026]b)將所述混合溶液A依次進(jìn)行過濾、冷凍和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑；
[0027]所述抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水的質(zhì)量比為1: (2?15): (200?600)。
[0028]在本發(fā)明中，將抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水混合，得到混合溶液A。在本發(fā)明中，所述抗乙肝免疫核糖核酸為主藥，本發(fā)明對(duì)所述抗乙肝免疫核糖核酸的來源沒有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的市售商品即可。在本發(fā)明中，所述賦形劑優(yōu)選包括右旋糖酐、甘露醇、乳糖一水合物、葡萄糖、甘氨酸和聚乙烯吡咯烷酮中的一種或多種，更優(yōu)選為右旋糖酐和甘露醇中的一種或兩種，最優(yōu)選為右旋糖酐。在本發(fā)明中，所述抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水的質(zhì)量比為1: (2?15): (200?600)，更優(yōu)選為1: (5?10):(250?500)。在本發(fā)明提供的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水的質(zhì)量比為1:5:250 ;在本發(fā)明提供的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水的質(zhì)量比為1:10:500。
[0029]在本發(fā)明中，所述將抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水混合的過程優(yōu)選具體為:
[0030]將抗乙肝免疫核糖核酸和注射用水的混合后，在攪拌的條件下加入賦形劑，得到混合溶液A。
[0031]本發(fā)明對(duì)所述攪拌的方法沒有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的人工攪拌或機(jī)械攪拌均可。在本發(fā)明中，所述攪拌的溫度優(yōu)選為20°C?30°C，更優(yōu)選為25°C ;所述攪拌的時(shí)間優(yōu)選為5min?lOmin，更優(yōu)選為8min。
[0032]得到所述混合溶液A后，本發(fā)明將所述混合溶液A依次進(jìn)行過濾、冷凍和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑。在本發(fā)明中，將所述混合溶液A與第二注射用水混合。在本發(fā)明中，所述第一注射用水與第二注射用水的質(zhì)量比為6: (3?5)，優(yōu)選為3:2。在本發(fā)明中，采用分步驟加水的方式能夠使抗乙肝免疫核糖核酸與賦形劑混合均勻，避免抗乙肝免疫核糖核酸在溶解過程中結(jié)塊或溶解不徹底，從而在制備過程中出現(xiàn)降解，使產(chǎn)品雜質(zhì)含量增加。
[0033]在本發(fā)明中，將所述混合溶液A與第二注射用水混合后，依次進(jìn)行過濾、冷凍和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑。在本發(fā)明中，所述過濾的過程優(yōu)選具體為:
[0034]將混合溶液A與第二注射用水的混合溶液進(jìn)行兩次精濾。本發(fā)明對(duì)所述精濾的方法沒有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的微孔濾芯精濾的技術(shù)方案即可。在本發(fā)明中，所述第一次精濾的微孔濾芯孔徑優(yōu)選為0.4 μ m?0.5 μ m，更優(yōu)選為0.45 μ m ;所述第二次精濾的微孔濾芯的孔徑優(yōu)選為0.2 μ m?0.25 μ m，更優(yōu)選為0.22 μ m。
[0035]完成所述過濾后，本發(fā)明將過濾后的混合溶液進(jìn)行冷凍。本發(fā)明對(duì)所述冷凍的設(shè)備沒有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的凍干機(jī)。在本發(fā)明中，所述冷凍的溫度優(yōu)選為-40°C?-30 °C，更優(yōu)選為-35 °C，；所述冷凍的時(shí)間優(yōu)選為Ih?4h，更優(yōu)選為2h。
[0036]完成所述冷凍后，本發(fā)明將冷凍后的混合溶液進(jìn)行干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑。在本發(fā)明中，所述干燥的溫度優(yōu)選為30°C?40°C，更優(yōu)選為38°C ;所述干燥的時(shí)間優(yōu)選為2h?5h，更優(yōu)選為3h。在本發(fā)明中，所述干燥的過程優(yōu)選具體為:
[0037]將冷凍后的混合溶液A升溫至干燥溫度，進(jìn)行干燥處理，得到抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑。在本發(fā)明中，所述升溫的速率優(yōu)選為6°C /h?8°C /h，更優(yōu)選為7V /h。
[0038]本發(fā)明提供了一種抗乙肝免疫核糖核酸凍干粉針劑的制備方法，包括以下步驟:a)將抗乙肝免疫核糖核酸、賦形劑和注射用水混合，得到混合溶液A ;b)將所述混合溶液A依次進(jìn)行過濾、冷凍和干燥，得到抗乙肝免疫