專利名稱：一種高穩(wěn)定性酶促化學發(fā)光方法及其底物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種高穩(wěn)定性酶促化學發(fā)光方法及其底物。底物由特定比例的luminol、增強劑對碘苯酚、氧化劑過氧化脲，分別配制成的A液和B液組成。等量的A液和B液與免疫反應后的催化劑(如辣根過氧化物酶)標記物接觸，通過化學反應生成一種激發(fā)態(tài)的產物，它在回到基態(tài)的過程中，釋放出的能量轉變成光子從而產生發(fā)光現(xiàn)象。其優(yōu)點是具有發(fā)光靈敏度高、穩(wěn)定性好、結果準確、使用方便和成本低等。適用于全自動、半自動和手工分析?？蓮V泛用于臨床檢驗，生物學研究，法醫(yī)鑒定，農牧業(yè)及環(huán)境科學中對核酸及抗原抗體等生物大分子的檢測。
化學發(fā)光免疫分析方法因對環(huán)境無污染、對人體無毒無害等綜合優(yōu)勢和潛力，成為目前體外診斷試劑檢測方法中的佼佼者。
本發(fā)明的目的是進一步提高化學發(fā)光免疫分析底物的穩(wěn)定性，為產品的工業(yè)化生產和使用帶來更大的方便性和靈活性。
本發(fā)明的內容要點1、底物液制備0.2mol/L pH 8.6的Tris-HCl緩沖液分別配制A液和B液A液含5mg/ml的luminol，0.33mg/ml的增強劑對碘苯酚；B液含0.9g/ml的過氧化脲；2、儲存穩(wěn)定性高。A液和B液分別儲存。2～8℃保存有效期2年。
3、反應穩(wěn)定性高。在HRP標記的免疫反應后樣品管(孔)中加入等量混合的A液和B液，即刻～3小時(不包括即刻)內各時間點測定同一樣品孔發(fā)光值穩(wěn)定(

圖1)；即刻～3小時(包括即刻)內各時間點同一樣品孔被測物濃度值基本一致(圖2)。
權利要求
1.一種高穩(wěn)定性酶促化學發(fā)光方法及其底物，其特征是所說的高穩(wěn)定性酶促化學發(fā)光方法及其底物包括以下步驟(1)化學發(fā)光底物A液和B液的制備；(2)化學發(fā)光底物的儲存穩(wěn)定性；(3)化學發(fā)光底物的反應穩(wěn)定性。
2.按照權利要求1所述的高穩(wěn)定性酶促化學發(fā)光方法及其底物，其特征是(1)用Tris-HCl緩沖液分別配制A液和B液A液含luminol和增強劑對碘苯酚；B液含氧化劑過氧化脲；(2)A液和B液分別儲存，前者需要避光；(3)臨用前A液和B液等量混合，在HRP標記的免疫反應后加入樣品管(孔)中。
3.按照權利要求1所述的高穩(wěn)定性酶促化學發(fā)光方法及其底物，其特征是(1)儲存穩(wěn)定性，A液和B液分別儲存，2～8℃保存有效期2年。(2)反應穩(wěn)定性3小時，包括在HRP標記的免疫反應后樣品管(孔)中加入等量混合的A液和B液其發(fā)光值的穩(wěn)定性和被測物濃度值的穩(wěn)定性。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種高穩(wěn)定性酶促化學發(fā)光方法及其底物，該方法按照特定比例使用了化學發(fā)光底物A液和B液，并且在HRP標記的免疫反應后被加入混勻。其中A液中含有l(wèi)uminol(5′－氨基－2，3－二氫－1，4－酞嗪二酮)和增強劑對碘苯酚，B液中含過氧化脲。其優(yōu)點是具有發(fā)光靈敏度高、穩(wěn)定性好、結果準確、使用方便和成本低的特點，其2～8℃的儲存穩(wěn)定性可達到2年，反應穩(wěn)定性可達到加底物后3小時內各時間點測定發(fā)光值(不包括即刻)和濃度值(包括即刻)基本一致。適用于全自動、半自動和手工分析?？蓮V泛用于臨床檢驗，生物學研究，法醫(yī)鑒定，農牧業(yè)及環(huán)境科學中對核酸及抗原抗體等生物大分子的檢測。
文檔編號G01N33/50GK1661370SQ20041000575
公開日2005年8月31日 申請日期2004年2月23日 優(yōu)先權日2004年2月23日
發(fā)明者段夏安 申請人:西安君達生物科技有限公司