專利名稱：一種用高效液相色譜法測定阿達帕林中間體有關物質的方法
技術領域：
本發(fā)明屬涉及一種高效液相色譜分離分析方法，特別是一種用高效液相色譜法分 離分析阿達帕林中間體有關物質的方法。
背景技術：
阿達帕林是一種維甲酸類化合物，具有抗炎特性，是治療痤瘡的皮膚新藥。其中間 體結構式分子式C27H26O3,分子量398.50該化合物的HPLC分析方法現無文獻報告，也無專利申請報告。本法有效的對阿達帕林中間體進行純度分析，本試驗采用普通的色譜柱(C8色譜 柱)快速準確的實現了阿達帕林中間體有關物質的測定，從而實現了阿達帕林中間體雜質 的控制，保證了阿達帕林中間體的質量可控，在合成和制劑過程的質量控制方面具有重要 的現實意義。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種分離分析阿達帕林中間體有關物質的高效液相色譜 方法，從而實現對阿達帕林中間體的質量控制。申請人:發(fā)現，用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以緩沖鹽溶液-有機改 性劑為流動相，可以實現阿達帕林中間體與其中間體的分離與分析，從而可以準確控制阿 達帕林中間體及其制劑的質量。本發(fā)明所用的高效液相色譜法分離分析阿達帕林中間體的方法，選用辛烷基硅烷 鍵合硅膠為填充劑的色譜柱。本發(fā)明采用的緩沖鹽選自磷酸二氫鈉，醋酸銨，優(yōu)選自醋酸銨。本發(fā)明采用的有機改性劑選自乙腈、甲醇，最優(yōu)選的有機改性劑為甲醇。本發(fā)明采用的色譜柱為辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，型號為 250mmX 4. 6mm,5 μ m。本發(fā)明方法的流動相中，醋酸銨溶液-甲醇溶液的體積比為20 80 10 90， 進一步為12 88。本發(fā)明所述的分離分析方法，可按照以下方法實現(1)稱取阿達帕林中間體樣品適量，先用適量的四氫呋喃溶解，再用流動相稀釋至
3刻度，配制成每Iml約含阿達帕林中間體0. 2mg 2mg的樣品溶液。(2)設置流動相流速為0. 8 1. 2ml/min,檢測波長為2；34歷。(3)取步驟(1)的樣品溶液5-40 μ 1注入液相色譜儀，完成阿達帕林中間體的分離 與分析。其中高效液相色譜儀島津LC-10ATvp，SPD-IOAvp,SCL-IOAvp, D⑶-12A色譜柱辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱Q50mmX4. 6mm, 5 μ m)流動相醋酸銨溶液-甲醇=12 88流速L0ml/min檢測波長2;34nm柱溫室溫進樣體積10 μ 1本發(fā)明能夠有效測定阿達帕林中間體的有關物質，方法簡單快捷，分析靈敏度高， 結果準確可靠?？捎糜诎⑦_帕林中間體的質量控制，確保原料藥和制劑的質量可控。


圖1實施例1，醋酸銨溶液-甲醇(12 88)阿達帕林中間體與中間體混合樣品高 效液相色譜2實施例2，醋酸銨溶液-甲醇(12 88)阿達帕林中間體高效液相色譜圖
具體實施例方式以下實施例用于進一步理解本發(fā)明，但不限于本實施的范圍實施例1儀器與條件高效液相色譜儀日本島津LC-10ATvp，SPD-IOAvp色譜柱辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱Q50mmX4. 6mm, 5 μ m)流動相醋酸銨溶液-甲醇(12 88)流速L0ml/min檢測波長2;34nm柱溫室溫進樣體積10 μ 1實驗步驟稱取阿達帕林中間體10mg，中間體I，II，III各5mg，置于25ml容量瓶中，先用適 量的四氫呋喃溶解，搖勻，再用流動相稀釋至刻度，作為供試品溶液。取供試品溶液，在上述 色譜條件下進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，結果見附圖1。圖1中保留時間為6. 94分鐘的色譜峰為阿達帕林中間體的色譜峰，保留時間為 3.4、12.5、20.0分鐘色譜峰為中間體1，II，III的色譜峰。色譜圖表明阿達帕林中間體與 其中間體及雜質可以在同一色譜條件下達到良好的分離。實施例2儀器與條件高效液相色譜儀日本島津LC_10TAvp，SPD-IOAvp
色譜柱辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱O50mmX4. 6mm, 5 μ m)流動相醋酸銨溶液-甲醇(12 88)流速L0ml/min檢測波長2;34nm柱溫室溫進樣體積10 μ 1實驗步驟稱取阿達帕林中間體10mg，置于25ml容量瓶中，先用適量的四氫呋喃溶解，搖勻， 再用流動相稀釋至刻度，作為供試品溶液。取供試品溶液，在上述色譜條件下進行高效液相 色譜分析，記錄色譜圖，結果見附圖2。
權利要求
1.一種高效液相色譜法分離分析阿達帕林中間體有關物質的方法，其特征在于采用辛 烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以緩沖鹽溶液-有機改性劑為流動相。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述色譜柱為辛烷硅基烷鍵合硅膠為填充 劑的色譜柱，規(guī)格為250mmX4. 6mm，5 μ m。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述有機改性劑選自乙腈、甲醇。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于所述有機改性劑為甲醇。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述緩沖鹽選自醋酸銨，磷酸二氫鈉。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于所述緩沖鹽為醋酸銨。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于流動相中緩沖鹽溶液與有機改性劑的體積 比為12 88。
8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于包括以下步驟(1)稱取阿達帕林中間體樣品適量，先用適量的四氫呋喃溶解，再用流動相稀釋至刻 度，配制成濃度為0. 2mg/ml的溶液。(2)設置流動相流速為0.8 1. 2ml/min，檢測波長為234nm。(3)取步驟(1)的樣品溶液5-40μ 1注入液相色譜儀，完成阿達帕林中間體及其有關物 質的分離與分析。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種阿達帕林中間體有關物質的分離與分析測定方法，采用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑色譜柱250mm×4.6mm，5μm，以醋酸銨溶液-有機改性劑為流動相，用于分離分析阿達帕林中間體的有關物質。
文檔編號G01N30/02GK102116764SQ20091024438
公開日2011年7月6日 申請日期2009年12月30日 優(yōu)先權日2009年12月30日
發(fā)明者劉秋葉, 康彥龍, 張燕 申請人:北京德眾萬全醫(yī)藥科技有限公司