專利名稱：藥品、保健食品中摻雜吡唑酮類物質(zhì)的快速測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種吡唑酮類化學(xué)成分氨基比林及其類似物的檢測方法，具體是檢 測藥品和保健食品中，尤其是用于檢測抗風(fēng)濕類中藥制劑和保健食品中是否添加氨基比 林、安替比林及安乃近成分的方法。
背景技術(shù)：
吡唑酮類化學(xué)成分氨基比林及其結(jié)構(gòu)類似物解熱鎮(zhèn)痛作用較強，緩慢而持久， 消炎抗風(fēng)濕作用與阿司匹林相似。通過抑制下視丘前列腺素的合成和釋放，恢復(fù)體溫調(diào) 節(jié)中樞感受神經(jīng)元的反應(yīng)性而起退熱作用；通過抑制環(huán)氧化酶，選擇性抑制下丘腦體溫 調(diào)節(jié)中樞前列腺素的合成，導(dǎo)致外周血管擴張、出汗而達到解熱的作用；通過抑制前列 腺素等的合成和釋放，提高痛閾而起到鎮(zhèn)痛作用，屬于外周性鎮(zhèn)痛藥。氨基比林因能 引起骨髓抑制以及能形成亞硝胺致癌物質(zhì)，故單用制劑已淘汰，臨床常用的是其復(fù)方制 劑。
目前臨床常用的含氨基比林及其結(jié)構(gòu)類似物的復(fù)方制劑多為處方藥，患者需要 在醫(yī)生的指導(dǎo)下方能服用，國家相關(guān)部門對此類藥品的生產(chǎn)、經(jīng)營及使用進行了嚴(yán)格的 規(guī)定，對于氨基比林引起的藥物不良反應(yīng)如惡心、嘔吐、過敏性皮炎等也曾有過報道。 但近年來，一些抗風(fēng)濕類中成藥和保健食品中非法添加氨基比林的情況卻日趨嚴(yán)重，各 相關(guān)機構(gòu)也為此加大了監(jiān)察力度，打擊非法添加氨基比林的樣品。但非法添加氨基比林 的中藥制劑和保健食品主要在廣大的農(nóng)村和經(jīng)濟欠發(fā)達的中小城市銷售，由于這些地區(qū) 技術(shù)監(jiān)管能力薄弱，缺少必要的檢驗儀器和技術(shù)，導(dǎo)致非法添加藥品的濫用，給人民群 眾的用藥安全帶來隱患。
檢驗藥品和保健食品中非法添加氨基比林及其結(jié)構(gòu)類似物的方法主要有如下三 種
1、薄層色譜法
樣品中的待測成分用三氯甲烷提取，所得的供試品溶液和對照品溶液點在同一 塊薄層板上(薄層板通常由硅膠制成)，用展開劑展開，晾干后，薄層板在紫外燈下檢 示。不同物質(zhì)在薄層色譜板不同的位置上以斑點的形式出現(xiàn)(原因是不同的物質(zhì)有不同 的遷移速度，常以色譜遷移值表示展開后斑點到原點之間的距離)，根據(jù)待測樣品是否在 與對照品相應(yīng)位置上出現(xiàn)斑點這一實驗所得現(xiàn)象來判斷待測樣品中是否含有目標(biāo)成分。 氨基比林對照品溶液和樣品提取所得的供試品溶液在同一塊薄層色譜板上點樣，展開劑 展開，晾干后，薄層色譜板在紫外燈下檢示，如果供試品溶液薄層色譜圖在與氨基比林 對照品相應(yīng)的位置上出現(xiàn)斑點，則提示樣品中可能含有氨基比林。
方法取氨基比林及其結(jié)構(gòu)類似物適量，以三氯甲烷溶解配制成lOmg/ml 的溶液，吸取ΙΟμΙ，點于硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-乙醚-丙酮-氨水 (9:6:1: 0.01)為展開劑，展距為15.5cm。展開后，晾干，置紫外燈下Q54nm)檢 視，Rf= 0.57。
薄層色譜法的優(yōu)點是不需要使用昂貴的分析儀器。該方法缺點是(1)色譜分 辨率較低，中藥制劑成分復(fù)雜，干擾因素較多，易將某些成分誤判為氨基比林，某些共 存成分如果量較大且色譜遷移值與氨基比林接近則會干擾目標(biāo)成分的檢出。( 色譜展開 和晾干的時間長，不能滿足快速測定的要求。( 薄層色譜板需要干燥存放，環(huán)境的溫 度和濕度對分離效果的影響大。(4)要求實驗人員有較好的經(jīng)驗。(5)需要有固定的場 所，不適合做流動性大的現(xiàn)場檢測。
2、高效液相色譜法
高效液相色譜是現(xiàn)代常用的分析方法。在相同的色譜條件下，不同的物質(zhì)有不 同的色譜保留時間。在相同的色譜條件下氨基比林對照品溶液和樣品提取所得的供試品 溶液分別進樣，根據(jù)色譜保留時間可判斷待測樣品中是否含有氨基比林。
色譜條件色譜柱C18O50mmX4.6mm，5μ m)
流動相甲醇-1%醋酸溶液(以二乙胺調(diào)節(jié)pH至3.7) 66
流速l.Oml/min
檢測波長260nm
柱溫30°C
進樣體積20 μ 1
理論塔板數(shù)11458
保留時間13.35min
高效液相色譜法的優(yōu)點是色譜分離效率高，靈敏度高。缺點是(1)儀器價格 昂貴，樣品前處理時間長，色譜柱易受污染，分析成本高。( 當(dāng)共存成分的色譜保留時 間與氨基比林的色譜保留時間接近時容易作出錯誤的判斷。(3)儀器對使用環(huán)境要求高， 需要固定擺放，不適合做流動性大的現(xiàn)場檢測。
3、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法
高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法是一種分析成本比高效液相色譜法更高，操作比高 效液相色譜法更復(fù)雜的分析方法。以高效液相色譜儀作為分離器，質(zhì)譜儀作為分析器的 高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法適用于分析成分復(fù)雜、背景干擾嚴(yán)重的樣品，可提高檢測結(jié) 果的可靠性。
液質(zhì)聯(lián)用條件使用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的液相色譜柱(柱頭加裝相同 規(guī)格填料的預(yù)色譜柱)，以含有0.02mol/L乙酸銨-0.1%乙酸水溶液/乙腈(30 70)為 流動相，檢測波長為280nm，進樣量ΙΟμΙ，理論塔板數(shù)不小于1000，柱溫25°C，質(zhì)譜 裝配電噴霧電離源(E^D，源電壓5kV，毛細管溫度275°C，毛細管電壓15V，鞘氣流速 40arb,正離子檢測，掃描方式采用全掃描一級質(zhì)譜、全掃描二級質(zhì)譜(MS/MS)，質(zhì)量 采集范圍100 1000。
高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的缺點是儀器對使用環(huán)境的要求更高，需要固定擺 放，不適合做流動性大的現(xiàn)場檢測。
目前在實際檢測中采用的主要方法是高效液相色譜法和高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián) 用法。這兩種方法的分辨率和靈敏度均較高，但由于所需儀器價格昂貴，實驗操作復(fù) 雜，且儀器對使用環(huán)境的要求高等原因并不適合于快速篩查及流動性大的現(xiàn)場檢測。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種克服現(xiàn)有檢測技術(shù)的缺陷，分析成本低、不需要使 用貴重分析儀器、專屬性強、靈敏度高、適用于現(xiàn)場檢驗藥品和保健食品中是否添加氨 基比林及其類似物的快速檢驗方法。
本發(fā)明的另一目的在于提供上述方法在制備氨基比林及其類似物快速試驗試劑 盒的應(yīng)用。
本發(fā)明的另一目的在于提供上述方法在檢驗藥品、保健食品中是否添加氨基比 林及其類似物的篩查檢驗中的應(yīng)用。
本發(fā)明藥品、保健食品中摻雜氨基比林及其類似物的快速測定方法，依次由以 下步驟組成
(1)提取藥品和保健食品中的氨基比林及其類似物成分，得到提取液；
(2)進一步用溶劑萃取所述提取液，分別收集萃取液及萃取后的溶液，作為供試 品溶液；
(3)分別向所述供試品溶液中加入顯色劑。
其中，步驟(1)中用水提取藥品和保健食品中的氨基比林及其類似物成分；步 驟(2)中用乙酸乙酯萃取提取液；步驟( 中收集的萃取液經(jīng)濃縮后進一步用水溶解，作 為供試品溶液；步驟(3)中的顯色劑為硫酸高鐵銨。
氨基比林及其類似物安替比林、安乃近在常溫下即能被硫酸高鐵銨氧化進而生 成有色產(chǎn)物。
針對目前市場上的大多數(shù)藥品或保健食品，推薦取樣量如下
權(quán)利要求
1.一種藥品、保健食品中摻雜氨基比林及其類似物的快速測定方法，依次由以下步 驟組成(1)提取藥品和保健食品中的氨基比林及其類似物成分，得到提取液；(2)進一步用溶劑萃取所述提取液，分別收集萃取液及萃取后的溶液，作為供試品溶液；(3)分別向所述供試品溶液中加入顯色劑。
2.如權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟(1)中用水提取藥品和保健 食品中的氨基比林及其類似物成分。
3.如權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中的萃取溶劑為乙酸乙
4.如權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中收集的萃取液經(jīng)濃縮 后進一步用水溶解，作為供試品溶液。
5.如權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟(3)中的顯色劑為硫酸高鐵銨。
6.如權(quán)利要求5所述的測定方法，其特征在于，所述硫酸高鐵銨溶液的濃度為 3 % 。
7.如權(quán)利要求1所述的測定方法，依次由以下步驟組成(1)取藥品或保健食品，加水溶解，振搖使分散，靜置片刻，過濾除去不溶物，收集 濾液；(2)用乙酸乙酯萃取所述濾液，振搖后靜置片刻，分別收集乙酸乙酯萃取液及萃取后 的水層溶液；將乙酸乙酯萃取液濃縮得殘渣后進一步用水溶解，與所述萃取后的水層溶 液分別作為供試品溶液；(3)分別向所述供試品溶液中滴入硫酸高鐵銨溶液。
8.如權(quán)利要求7所述的測定方法，其特征在于，所述硫酸高鐵銨溶液的濃度為 3 % 。
9.權(quán)利要求1所述的測定方法在制備氨基比林及其類似物快速檢驗試劑盒中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1所述的測定方法在藥品和保健食品是否摻入氨基比林及其類似物的篩 查檢驗中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥品、保健食品中摻雜氨基比林及其類似物的快速測定方法。該方法由以下步驟組成(1)提取藥品和保健食品中的氨基比林及其類似物成分，得到提取液；(2)進一步用溶劑萃取所述提取液，分別收集萃取液及萃取后的溶液，作為供試品溶液；(3)分別向所述供試品溶液中加入顯色劑。本發(fā)明檢驗方法快速、簡便，專屬性強、準(zhǔn)確率高，反應(yīng)靈敏，適用范圍廣，適用于現(xiàn)場檢驗藥品、保健食品是否摻入了氨基比林及其類似物。根據(jù)本發(fā)明制成氨基比林及其類似物的快速檢驗試劑盒，將能滿足廣大農(nóng)村地區(qū)和檢驗技術(shù)條件落后的中小城市開展藥品、保健食品監(jiān)督檢驗的需要。
文檔編號G01N1/28GK102023157SQ20101022647
公開日2011年4月20日 申請日期2010年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月13日
發(fā)明者宋曼銅, 王玨, 王鐵杰, 肖麗和, 趙承兵, 鐘敏, 魯藝 申請人:深圳市藥品檢驗所