專利名稱：蒺藜總皂苷的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蒺藜提取物的檢測(cè)方法，屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
白蒺藜(Tribulus Terrestris L)為蒺藜科蒺藜屬植物，具有活血通絡(luò)、平肝潛 陽(yáng)、祛濕化痰、宣痹通陽(yáng)、補(bǔ)益肝腎等功效。歷代本草多有記載，《本草綱目》日“蒺藜?xì)馕?苦溫，其性宣通，治胸痹痞滿，利肝腎?！薄侗窘?jīng)》載“蒺藜主惡血，破積聚?！薄侗静菰傩隆贰耙?氣化痰，散濕。，，《本草匯言》謂其“去風(fēng)下氣，行水化瘀之藥也?！陛疝伎傇碥张R床已被應(yīng)用 多年以治療心血管疾病。臨床及實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)都證明可改善心功能、縮小心肌梗塞面積、緩解 心絞痛的癥狀、延長(zhǎng)心絞痛的發(fā)作間期、減少心絞痛的發(fā)作次數(shù)，對(duì)陳舊性心肌梗塞伴左室 功能異常者亦能減輕其胸悶、氣促和心悸等癥狀，增加左室收縮功能和排血量。目前，現(xiàn)有技術(shù)并沒(méi)有公開(kāi)蒺藜提取物的指紋圖譜的檢測(cè)方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種蒺藜提取物的檢測(cè)方法。本發(fā)明目的在于提供一種蒺藜總皂苷的檢測(cè)方法。本發(fā)明提供一種蒺藜提取物的高效液相_蒸發(fā)光散射指紋圖譜檢測(cè)方法，該方法 包括如下步驟色譜條件室溫，相對(duì)濕度25-40%;以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以60 90 %乙腈溶液為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫，流速0. 4 0. 6ml/min，柱溫25 45°C ；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度105 120°C，氣體流速1 3L/min。
權(quán)利要求
一種蒺藜提取物的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于該方法為色譜條件為室溫，相對(duì)濕度25 40％；以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以60～90％乙腈溶液為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，梯度洗脫，流速0.4～0.6ml/min，柱溫25～45℃；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的條件為漂移管溫度105～120℃，氣體流速1～3L/min；取蒺藜提取物制成每1ml含3 6mg的溶液；注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
2.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于梯度洗脫過(guò)程為第0.01分 鐘流動(dòng)相A乙腈溶液為24%，流動(dòng)相B水為76% ；第8分鐘流動(dòng)相A乙腈溶液為32%， 流動(dòng)相B水為68% ；第45分鐘流動(dòng)相A乙腈溶液為40%，流動(dòng)相B水為60% ；第75分 鐘流動(dòng)相A乙腈溶液為55 %，流動(dòng)相B水為45 %。
3.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于供試品溶液的制備方法為稱 取蒺藜提取物適量，加水適量，超聲處理5-20分鐘，放冷，濾過(guò)，制成每Iml含3-6mg的溶 液。
4.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于色譜條件中室溫為20°C;相對(duì) 濕度為35%0
5.如權(quán)利要求3所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于供試品溶液的制備中超聲處理 10分鐘；制成每Iml含5mg的溶液。
6.如權(quán)利要求2所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于梯度洗脫過(guò)程為第0. 01分鐘流動(dòng)相A乙腈溶液為24%，流動(dòng)相B水為76% ；第8分鐘流動(dòng)相A乙 腈溶液為32 %，流動(dòng)相B水為68 % ；第45分鐘流動(dòng)相A乙腈溶液為40 %，流動(dòng)相B水為 60% ；第75分鐘流動(dòng)相A乙腈溶液為55%，流動(dòng)相B水為45% ；第80分鐘流動(dòng)相A乙 腈溶液為75%，流動(dòng)相B水為25%;第120分鐘流動(dòng)相A乙腈溶液為75%，流動(dòng)相B水為 25%。
7.如權(quán)利要求2所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于蒺藜提取物指紋圖譜中為10 個(gè)共有峰，與蒺藜呋留皂苷甲為對(duì)照品色譜峰相對(duì)應(yīng)的8號(hào)峰為參照峰，計(jì)算各共有峰的 相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積比值，相對(duì)保留時(shí)間1#0. 35-0. 43、2#0· 40-0. 48、3#0· 40-0. 50、 4#0· 65-0. 79、5#0· 67-0. 81、6#0· 83-1. 01、7#0· 87-1. 07、8#1· 00、9#1· 21-1. 47、10#1· 30-1. 60 ； 相對(duì)峰面積1#0. 4 1. 0、2#0· 2 0. 3、4#0· 2 0. 4、6#0· 2 0. 4、8#1. OOUOflO. 2 0. 4。
8.如權(quán)利要求6所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于蒺藜提取物指紋圖譜中為13 個(gè)共有峰，與蒺藜呋留皂苷甲為對(duì)照品色譜峰相對(duì)應(yīng)的8號(hào)峰為參照峰，計(jì)算各共有峰的 相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積比值，相對(duì)保留時(shí)間1#0. 35-0. 43、2#0· 40-0. 48、3#0· 40-0. 50、 4#0· 65-0. 79、5#0· 67-0. 81、6#0· 83-1. 01、7#0· 87-1. 07、8#1· 00、9#1· 21-1. 47、10#1· 30-1. 60、 11#1· 38-1. 86、12#1· 44-1. 94、13#1· 73-2. 33 ；相對(duì)峰面積1#0. 4 1. 0、2#0· 2 0. 3、 4#0· 2 0. 4、6#0· 2 0. 4、8#1. OOUOflO. 2 0. 4、12#0· 5 0. 9。
9.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于所述蒺藜提取物由如下方法制 備取蒺藜草分別加水5 15倍量，煎煮1 5次，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮放冷，加 入乙醇，攪勻，靜置，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，加水稀釋，濾過(guò)，濾液通過(guò)已處理好 的大孔吸附樹(shù)脂柱，再用水洗至流出液近無(wú)色澄清，繼用60% 85%乙醇洗脫至洗脫液無(wú) 苦味，收集洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮，即得蒺藜提取物。
10.如權(quán)利要求9所述的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于所述蒺藜提取物由如下方法制備所述蒺藜皂苷更優(yōu)選由如下方法制備取蒺藜草切段，分別加水5 15倍量，煎煮 1 5次，每次1 4h，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至50 60°C相對(duì)密度1. 1 1. 25，放 冷，加入80% 99%乙醇，攪勻，靜置1 5h，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，加水稀釋， 濾過(guò)，濾液通過(guò)已處理好的大孔吸附樹(shù)脂柱，藥液流速控制在400 700L/h，再用水洗至流 出液近無(wú)色澄清，繼用60% 85%乙醇洗脫至洗脫液無(wú)苦味，收集洗脫液，減壓回收乙醇， 濃縮至50 60°C相對(duì)密度1. 05 1. 15，得蒺藜皂苷濃縮液，干燥，得蒺藜皂苷。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種蒺藜提取物的檢測(cè)方法，該方法為色譜條件室溫，相對(duì)濕度25-40％；以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以60～90％乙腈溶液為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫，流速0.4～0.6ml/min，柱溫25～45℃；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度105～120℃，氣體流速1～3L/min。本方法具有良好的精密性、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性。
文檔編號(hào)G01N30/36GK101953868SQ20101028347
公開(kāi)日2011年1月26日 申請(qǐng)日期2010年9月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月15日
發(fā)明者劉巍, 孫東成, 孫申國(guó), 朱天全, 沈麗娟, 王國(guó)棟, 程志國(guó), 鄒兆鵬, 錢本余 申請(qǐng)人:吉林敖東洮南藥業(yè)股份有限公司