專利名稱：一種具有天然活性的重組人胱抑素c蛋白及其制備方法
—種具有天然活性的重組人胱抑素C蛋白及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種具有天然活性的重組人胱抑素C蛋白及其制備方法。
背景技術(shù)：
胱抑素C (Cystatin C，CysC)又稱為半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C，分子量為13kD， 含有120個(gè)氨基酸殘基，是一種非糖基化的橢圓形小分子蛋白，其前體分子含有26個(gè)氨基酸的信號(hào)肽。其廣泛存在于各種體液中如血液、腦脊液、唾液、精液、尿液等，以腦脊液中含量最高，尿液最低，并且所有的有核細(xì)胞都能穩(wěn)定地產(chǎn)生胱抑素C。在生理?xiàng)l件下，胱抑素 C的重要功能是抑制內(nèi)源性的半胱氨酸蛋白酶的活性。對(duì)于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)換，骨膠原的降解，蛋白質(zhì)前體的分離有重要作用。胱抑素C可參與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，參與炎癥過程及一些神經(jīng)性疾病。在這些疾病中，半胱氨酸蛋白酶與其抑制物是否處于平衡狀態(tài)，一旦失衡，將造成一些病理?yè)p傷。
因胱抑素C是一種低分子量蛋白質(zhì)，可經(jīng)腎小球自由過濾，在近曲小管被重吸收并降解，腎臟是清除循環(huán)中胱抑素C的唯一器官，所以血清胱抑素C濃度主要由腎小球?yàn)V過率(GFR)決定，由此可見胱抑素C是一種理想的反映GFR變化的內(nèi)源性標(biāo)志物。同時(shí)有研究報(bào)道 應(yīng)用兔抗胱抑素C抗體建立的酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)技術(shù)檢測(cè)了急性心肌梗塞病人急性期、恢復(fù)期及正常對(duì)照組血清胱抑素C水平，發(fā)現(xiàn)急性期與恢復(fù)期的自身對(duì)照并無顯著性差異，但有意義的是這兩者的胱抑素C水平均顯著低于正常對(duì)照組。提示胱抑素C的血清濃度改變，在一定程度上可以作為急性心肌梗塞診斷參考指標(biāo)。
急性腎功能衰竭(ARF)傳統(tǒng)的診斷方法主要是根據(jù)血肌酐(SCr)水平，但SCr水平受多種因素的影響，不能精確反映GFR，特別是在輕中度腎功能損傷時(shí)。Villa等對(duì)50例重癥監(jiān)護(hù)病房(I⑶)患者進(jìn)行研究，通過觀察比較SCr、血清CysC和GFR，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Cys C 與GFR相關(guān)性更好，在25例ARF患者中，19例血清Cys C濃度升高，而SCr升高僅5例，提示在診斷ARF方面Cys C可能比SCr更具價(jià)值。
血清胱抑素C濃度的測(cè)定具有重要的診斷意義，但目前我國(guó)還沒有自主研發(fā)的胱抑素C診斷試劑。究其原因制備胱抑素C診斷試劑盒需要特異性強(qiáng)和靈敏度高的胱抑素C 單克隆抗體或多抗血清，而要得到該單克隆抗體或多抗血清就必須得到高純度的胱抑素C 蛋白，傳統(tǒng)的從胎盤、尿液等組織中提取的胱抑素C蛋白濃度低，純度差，批間差大，無法用做免疫原制備單抗或多抗，即使用做免疫原制備用于免疫比濁等方法的診斷產(chǎn)品，也存在較嚴(yán)重的交叉問題，要提取高純度的免疫原，純化成本相當(dāng)高。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有天然活性的重組胱抑素C蛋白及其制備方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開了一種得到具有天然活性的重組胱人抑素C蛋白的制備方法，該方法包括將人胱抑素C核酸序列與表達(dá)載體重組后轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主細(xì)胞,培養(yǎng)宿主細(xì)胞后收集純化重組表達(dá)的人胱抑素C蛋白，再將該蛋白進(jìn)行蛋白酶酶切處理。
上述蛋白酶可選自胰蛋白酶、纖溶酶、凝血酶、內(nèi)肽酶Lys-C、Xa因子、內(nèi)肽酶 Arg-C中的任一種。
所述蛋白酶包括天然提取及其基因工程重組蛋白酶。
所述蛋白酶酶切中重組人胱抑素C蛋白與蛋白酶質(zhì)量比為50 I 1000 I。
所述酶切處理的條件為30 37°C切割5-30分鐘，或3 5°C條件下作用20-28 小時(shí)。
本發(fā)明中優(yōu)選蛋白酶為胰蛋白酶，所述胰蛋白酶包括天然提取和基因工程重組的胰蛋白酶，可優(yōu)選用重組人胰蛋白酶。
本發(fā)明中優(yōu)選的，所述重組人胱抑素C蛋白具有SEQ ID NO 2所示氨基酸序列。
本發(fā)明中的一個(gè)實(shí)施例公開的所述重組人胱抑素C蛋白可由SEQ ID N0:1所示核酸序列編碼表達(dá)。
上述表達(dá)載體為原核表達(dá)載體，且該原核表達(dá)載體的融合蛋白標(biāo)簽可利用金屬螯合原理親和純化人胱抑素C蛋白，優(yōu)選原核表達(dá)載體為PET-15b。
上述表達(dá)宿主細(xì)胞為能夠表達(dá)所述重組表達(dá)質(zhì)粒的宿主細(xì)胞，且具有可幫助表達(dá)蛋白二硫鍵形成和增加可溶性的特征，優(yōu)選表達(dá)宿主細(xì)胞為大腸桿菌Origami B (DE3)。
本發(fā)明還公開了上述制備得到的重組人胱抑素C蛋白在制備單克隆抗體、多抗血清或標(biāo)準(zhǔn)品方面的應(yīng)用。
本發(fā)明公開了一種利用上述方法制備的重組人胱抑素C蛋白作為免疫原，免疫動(dòng)物制備多抗血清的方法。
所述制備羊多抗血清所用的動(dòng)物優(yōu)選為山羊或綿羊，更優(yōu)選為黑山羊。
本發(fā)明還公開了利用上述方法得到的重組人胱抑素C蛋白制備診斷試劑用標(biāo)準(zhǔn)品，將本發(fā)明制備的重組人胱抑素C蛋白用適當(dāng)緩沖液稀釋到合適濃度。
所述的合適濃度為5-15mg/L,優(yōu)選為10mg/ml,以此標(biāo)準(zhǔn)品按梯度稀釋,在O. 4mg/ L 8. Omg/L范圍內(nèi)，線性偏差< 10%。
本發(fā)明的創(chuàng)新和有益效果是本發(fā)明運(yùn)用基因工程技術(shù)表達(dá)純化得到的重組人胱抑素C蛋白具有很極佳的可溶性，可以大量穩(wěn)定生產(chǎn)，利用蛋白酶切割后獲得的重組人胱抑素C蛋白，具有與天然人胱抑素C蛋白一致的活性，可用于免疫制備單克隆抗體和多抗血清，為制備穩(wěn)定的人胱抑素C檢測(cè)試劑及其質(zhì)控品提供了優(yōu)良的原料，解決了我國(guó)人胱抑素C免疫檢測(cè)試劑盒自主研發(fā)的關(guān)鍵問題。


圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中制備人胱抑素C蛋白的流程示意圖2是本發(fā)明實(shí)施例5中制備的人胱抑素C診斷標(biāo)準(zhǔn)品評(píng)價(jià)結(jié)果；
圖3是本發(fā)明實(shí)施例6中重組蛋白免疫制備的羊多抗和天然蛋白免疫制備的羊多抗測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品曲線對(duì)比圖。
具體實(shí)施方式
采用傳統(tǒng)的從胎盤、尿液等組織中提取天然胱抑素制備得到胱抑素C蛋白的方法存在效率低、純度低、純化成本高等問題，具體來說，天然提取的人胱抑素C蛋白一般來源于新鮮人血清中，血清來源受到限制，而且存在未知的潛在風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)純化步驟復(fù)雜，要得到高純度蛋白難度很大，用這種天然蛋白免疫制備的多抗血清，和人血清中其他組分的交叉也比較嚴(yán)重，這給產(chǎn)品性能優(yōu)化帶來較大困難。而本發(fā)明不同于傳統(tǒng)方法，采用了基因工程大腸桿菌重組表達(dá)胱抑素C蛋白，并將該重組蛋白通過蛋白酶酶切處理，得到具有與天然胱抑素C蛋白活性一致的重組胱抑素C蛋白。該方法表達(dá)的重組蛋白活性高、產(chǎn)量高、易純化，且生產(chǎn)周期短、成本低，可實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明中制備人胱抑素C蛋白的具體步驟主要包括合成人胱抑素C的DNA序列， 并將其與表達(dá)質(zhì)粒重組，重組子經(jīng)過DNA測(cè)序驗(yàn)證，質(zhì)粒酶切驗(yàn)證，確定重組表達(dá)質(zhì)粒的序列和閱讀框均正確。再將所獲得的重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主細(xì)胞，培養(yǎng)宿主細(xì)胞并從細(xì)胞質(zhì)中回收和純化可溶性重組人胱抑素C蛋白。接著用蛋白酶切割所獲得的重組人胱抑素 C蛋白，得到具有天然活性的重組人胱抑素C蛋白。
本發(fā)明人經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用原核表達(dá)方式表達(dá)得到的胱抑素C蛋白，在未經(jīng)酶切處理時(shí)，其酶活和免疫原性多比天然胱抑素C蛋白要差很多，無法滿足其作為免疫試劑原料的要求。而通過將表達(dá)后的胱抑素C蛋白通過蛋白酶酶切處理，很好的解決了胱抑素C 蛋白的酶活性和免疫原性不足的問題，使其具有與天然胱抑素C蛋白相當(dāng)?shù)幕钚运健?br> 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，優(yōu)選胰蛋白酶為切割胱抑素C蛋白的蛋白酶，該胰蛋白酶可為任何物種的、包括天然提取和基因工程重組的胰蛋白酶，本發(fā)明中優(yōu)選重組人胰蛋白酶。該酶價(jià)格便宜，運(yùn)用廣泛，來源豐富，并且?guī)в蠬is純化標(biāo)簽的重組人胰蛋白酶可以在酶切完成后，通過鎳柱(Ni柱)親和純化一步去除，同時(shí)在酶切過程中，使用胰蛋白酶切割，目的蛋白最終的損失也是最小的。
采用胰蛋白酶切割重組人胱抑素C的方法具體為在純化的蛋白樣品中加入胰蛋白酶，重組人胱抑素C蛋白胰蛋白酶質(zhì)量比為50 I 1000 1，30-37度切割5-30min， 亦或4度作用20-28h (優(yōu)選24h)。產(chǎn)生具有天然活性重組人胱抑素C蛋白。在該比例范圍內(nèi)，如果胰蛋白酶用量提高，則相應(yīng)的切割速率會(huì)提高，作用時(shí)間應(yīng)縮短，否則有可能導(dǎo)致目的蛋白的大量降解。此外，胰蛋白酶過高會(huì)導(dǎo)致酶切過程難以控制，重復(fù)性差，而過少則會(huì)導(dǎo)致酶切不徹底，作用時(shí)間過長(zhǎng)，蛋白活性受到損失。
使用本發(fā)明其他蛋白酶在用量和酶切條件上會(huì)有細(xì)微差別，但基本涵蓋在本發(fā)明使用重組人胰蛋白酶所列的條件范圍之內(nèi)。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中采用的蛋白酶為凝血酶。
本發(fā)明中，優(yōu)選人胱抑素C蛋白具有SEQ ID NO :2所示氨基酸序列，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述人胱抑素C蛋白由SEQ ID NO:1所示核酸序列編碼表達(dá)。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該知曉，本發(fā)明中所述重組的人胱抑素C蛋白不僅局限于SEQ ID NO :2所示氨基酸序列，在其他報(bào)道中公開的、與本發(fā)明中SEQ ID NO :2所示序列類似的人胱抑素C蛋白氨基酸序列也同樣適用于本發(fā)明。同理，適用于本發(fā)明的編碼表達(dá)的人胱抑素C蛋白的核酸序列也不僅限于SEQ ID NO :1，本領(lǐng)域技術(shù)人員也可以采用現(xiàn)有報(bào)道中或人工合成其他類似SEQ ID NO 1的核酸序列。
本發(fā)明中采用的表達(dá)載體為能與人胱抑素C蛋白的基因序列重組并形成表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)載體，具體地，表達(dá)載體為原核表達(dá)載體，該原核表達(dá)載體的融合蛋白標(biāo)簽可利用金屬螯合原理親和純化人胱抑素C蛋白，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，該原核表達(dá)載體優(yōu)選 PET-15b。
本發(fā)明中采用的表達(dá)宿主細(xì)胞為能夠表達(dá)所述重組表達(dá)質(zhì)粒的宿主細(xì)胞，且具有可幫助表達(dá)蛋白二硫鍵形成和增加可溶性的特征，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，優(yōu)選用大腸桿菌Origami B (DE3)。所述培養(yǎng)宿主細(xì)胞所用的培養(yǎng)基采用含抗生素基礎(chǔ)培養(yǎng)基擴(kuò)增培養(yǎng)宿主細(xì)胞，培養(yǎng)溫度35-40度，培養(yǎng)時(shí)間4-16h，誘導(dǎo)溫度20-37度，誘導(dǎo)時(shí)間3_6h，誘導(dǎo)物異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)終濃度為O. 2-lmM。篩選宿主細(xì)胞中高效表達(dá)的陽(yáng)性表達(dá)菌株作為工程菌，重組可溶性人胱抑素C蛋白通過工程菌誘導(dǎo)培養(yǎng)后、離心收集菌體，超聲破碎后離心分離上清，經(jīng)過Ni柱親和純化得到重組人胱抑素C蛋白。
本發(fā)明還公開了上述制備得到的重組人胱抑素C蛋白在制備單克隆抗體、多抗血清和標(biāo)準(zhǔn)品方面的應(yīng)用。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，公開了一種利用上述方法制備的重組胱抑素C蛋白作為免疫原，免疫動(dòng)物制備多抗血清的方法。所述制備羊多抗血清所用的動(dòng)物優(yōu)選為山羊或綿羊，更優(yōu)選為黑山羊。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中還公開了制備的重組人胱抑素C蛋白制備診斷試劑用標(biāo)準(zhǔn)品的方法，即將本發(fā)明制備的重組人胱抑素C蛋白用適當(dāng)緩沖液稀釋到合適濃度。所述的合適濃度為5-15mg/L，優(yōu)選為10mg/ml，以此標(biāo)準(zhǔn)品按梯度稀釋，在 O. 4mg/L 8. Omg/L范圍內(nèi)，線性偏差< 10%。
下面通過具體實(shí)施例并結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。以下實(shí)施例僅僅對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的說明，不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1制備重組人胱抑素C蛋白
(I)人工合成人胱抑素C基因并構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒
按照已報(bào)道的胱抑素C基因序列，設(shè)計(jì)重疊PCR引物人工合成人胱抑素C基因，其序列如SEQ ID N0:1所述。將該基因和PMD18-T載體連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，挑取單克隆，PCR 鑒定正確的陽(yáng)性質(zhì)粒，提取質(zhì)粒酶切鑒定。將PCR鑒定和酶切鑒定都正確的質(zhì)粒送invagen 公司測(cè)序，結(jié)果和設(shè)計(jì)序列完全一致。將測(cè)序正確的質(zhì)粒用設(shè)計(jì)在其兩端的酶切位點(diǎn)相應(yīng)的酶進(jìn)行酶切，切出的目的序列連入PET-15b載體中，構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒 PET-15bCysC，轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌Origami B (DE3)。
(2)篩選高效表達(dá)重組人胱抑素C蛋白菌株
取適量轉(zhuǎn)化后宿主菌涂布于帶抗性的LB固體培養(yǎng)基中，37°C，培養(yǎng)過夜，第二天挑取5株以上在抗性培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的菌落，接種于2ml帶抗性的LB液體培養(yǎng)基中，37°C， 200rpm培養(yǎng)過夜，同時(shí)取轉(zhuǎn)化有空載體PET_15b的宿主菌做對(duì)照。加入終濃度為ImM的 IPTG，37°C，190rpm誘導(dǎo)培養(yǎng)6h。離心收集菌體，用50 μ I 20mM PBS緩沖液重懸菌體，加入 Buffer，沸水煮10分鐘后，SDS-PAGE電泳。考馬斯亮蘭染色，轉(zhuǎn)化進(jìn)PET_15bCysC質(zhì)粒的菌株在預(yù)測(cè)的分子量位置有一條較濃的蛋白條帶，而只轉(zhuǎn)化進(jìn)PET-15b質(zhì)粒的菌株沒有該條帶。進(jìn)一步將誘導(dǎo)后菌體超聲破碎后離心取上清和沉淀，SDS-PAGE電泳顯示，目的蛋白主要以可溶形式存在于上清中。
(3)擴(kuò)大培養(yǎng)及目的蛋白的純化
將1%的轉(zhuǎn)化宿主菌接種于IOml加有抗性的LB培養(yǎng)基中，37°C，200rpm培養(yǎng)過夜，第二天按5%接菌量接種于500ml，帶抗性的LB培養(yǎng)基中，37°C，200rpm培養(yǎng)5_6小時(shí)至0D0. 6-0. 8，加入IPTG至終濃度為ImM，37°C，200rpm誘導(dǎo)5_6h。離心收集菌體，加入適量裂解緩沖液，超聲破碎后離心取上清，用50%硫酸銨沉淀蛋白，離心收集沉底，用20mM PBS復(fù)溶沉淀，用O. 45 μ M膜過濾備用。
鎳瓊脂糖凝膠FF柱親和純化目的蛋白，用10倍柱體積20mM PBS平衡柱子，上述過濾上清直接上柱，4-10°C結(jié)合lh。用20mM PBS洗滌結(jié)合后柱子，至0D280吸收值至基線， 用Elusion Bufer (20mM PBS，200mM咪唑，pH7. 4)洗脫，收集洗脫峰，SDS-PAGE分析純度，結(jié)果顯示純度達(dá)95%以上，蛋白濃度約2-2. 5mg/ml。
(4)胰蛋白酶切割重組人胱抑素C蛋白
將上述純化的重組人胱抑素C蛋白用酶切緩沖液(20mM Tris-HCl，150mMNaCl， pH8. O)透析過夜，按重組胱抑素C蛋白胰蛋白酶質(zhì)量比100 I的比例加入重組胰蛋白酶，37°C水浴酶切20min。酶切完樣品用O. 5M NaOH調(diào)pH至9. 5，4°C放置I小時(shí)，以使胰蛋白酶徹底滅活。酶切后蛋白用20mM PBS透析過夜，上鎳瓊脂糖凝膠FF柱結(jié)合lh，反向親和除去帶有his標(biāo)簽的切除部分和殘留的重組胰蛋白酶，收集結(jié)合完后的流穿蛋白樣品，即為最終純化的重組人胱抑素C蛋白，SDS-PAGE電泳分析，蛋白純度達(dá)95%以上。
(5)免疫雙擴(kuò)散評(píng)價(jià)重組人胱抑素C蛋白活性
瓊脂板的制備將載玻片置于水平桌面上，取已溶化的鹽水瓊脂4ml，傾注于載玻片上，使其自然流成水平面。待瓊脂凝固后，用打孔器在中間打一孔，周圍對(duì)稱打6空，孔徑 3mm，孑匕距距15mm。
加樣于中央孔加入羊抗人胱抑素C血清(Dako)，將未經(jīng)酶切處理的重組胱抑素 C蛋白、酶切處理后的重組胱抑素C蛋白及天然胱抑素C蛋白分別以起始濃度1. Omg/ml,由 I 2開始對(duì)倍稀釋加入周圍5孔中，6孔加入生理鹽水作對(duì)照。
擴(kuò)散將瓊脂板放入濕盒內(nèi)置37°C溫箱中24小時(shí)后取出觀察結(jié)果(表一)。
表一 PET-15bCysC酶切前后活性比較
權(quán)利要求
1.一種人胱抑素C蛋白的制備方法，其特征在于，所述方法包括將人胱抑素C核酸序列與表達(dá)載體重組后轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主細(xì)胞，培養(yǎng)宿主細(xì)胞后收集純化重組表達(dá)的人胱抑素C蛋白，再將得到的重組人胱抑素C蛋白進(jìn)行蛋白酶酶切處理。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述蛋白酶選自胰蛋白酶、纖溶酶、凝血酶、內(nèi)肽酶Lys-C、Xa因子、內(nèi)肽酶Arg-C中的任一種；所述蛋白酶包括天然提取及其基因工程重組蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述蛋白酶酶切中重組人胱抑素C蛋白與蛋白酶的質(zhì)量比為50 I 1000 I。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述蛋白酶酶切于30 37°C切割5-30分鐘，或3 5°C條件下切割20-28小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述重組表達(dá)的人胱抑素C蛋白具有SEQ ID NO 2所不氣基酸序列。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述重組表達(dá)的人胱抑素C蛋白的核酸序列如SEQ ID NO 1所示。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，表達(dá)載體為原核表達(dá)載體，且該原核表達(dá)載體的融合蛋白標(biāo)簽可利用金屬螯合原理親和純化人胱抑素C蛋白，所述原核表達(dá)載體進(jìn)一步優(yōu)選為PET-15b。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述表達(dá)宿主細(xì)胞為能夠表達(dá)所述重組表達(dá)質(zhì)粒的宿主細(xì)胞，且具有可幫助表達(dá)蛋白二硫鍵形成和增加可溶性的特征，所述表達(dá)宿主細(xì)胞進(jìn)一步優(yōu)選大腸桿菌Origami B (DE3)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到的重組人胱抑素C蛋白。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所得到的重組人胱抑素C蛋白在制備單克隆抗體、多抗血清或標(biāo)準(zhǔn)品方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有天然活性的重組人胱抑素C蛋白及其制備方法。本發(fā)明運(yùn)用基因工程技術(shù)表達(dá)純化大量穩(wěn)定的重組人胱抑素C蛋白，并利用蛋白酶切割重組人胱抑素C蛋白使其具有天然活性。該重組人胱抑素C蛋白可用于免疫制備單克隆抗體和多抗血清，為制備穩(wěn)定的胱抑素C檢測(cè)試劑及其質(zhì)控品提供了優(yōu)良的原料。
文檔編號(hào)G01N33/68GK103014047SQ20111030178
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2011年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月27日
發(fā)明者崔鵬, 李泓彥, 何志強(qiáng), 胡鵬, 楊耿周, 范凌云 申請(qǐng)人:深圳市菲鵬生物股份有限公司