專利名稱：測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，屬于釀酒技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
黃水是固態(tài)釀造生產(chǎn)白酒過程中，逐漸滲于窖底部的棕黃色液體，又稱黃漿水。黃水好壞基本上能反映出窖池發(fā)酵是否正常，配料是否合理，操作是否細(xì)致，出酒率和優(yōu)質(zhì)酒率的高低等。因此， 對黃水的品質(zhì)進(jìn)行評判，可以為下排配料以及制定技術(shù)措施提供依據(jù)。目前分析黃水品質(zhì)的判斷多采用感官評價，主要指標(biāo)是黃水的色澤。一般正常黃水的顏色為黑褐色、菜油色、櫻桃色或金黃色。然而感官評價主要是依靠專業(yè)人士的感覺器官和經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行質(zhì)量的評價或判斷，需要經(jīng)驗(yàn)非常豐富的技術(shù)人員才能做出判斷，且結(jié)果因人而異，容易受主觀性影響，缺乏科學(xué)性和準(zhǔn)確性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種檢測結(jié)果準(zhǔn)確的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，包括如下步驟取黃水，加入乙醇浸提15飛Omin，離心，取上清液，稀釋，在250 290nm處測吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算為黃水色度；其中，乙醇的濃度> 95%。優(yōu)選的，所述檢測波長為26(T280nm。最優(yōu)選的，所述檢測波長為260nm。進(jìn)一步的，黃水乙醇體積比為I :廣4。優(yōu)選的，黃水乙醇體積比為I : 2。進(jìn)一步的，浸提時間為30min。進(jìn)一步的，浸提溫度為2(T50°C。優(yōu)選的，浸提溫度為30°C。進(jìn)一步的,所述的離心速度為3000 6000r/min,離心時間為5 20min。優(yōu)選的，所述的離心速度為5000r/min。優(yōu)選的，所述的離心時間為lOmin。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明方法提供了一種黃水色度檢測方法，填補(bǔ)了釀酒領(lǐng)域黃水色度檢測的技術(shù)空白。本發(fā)明方法操作簡單，科學(xué)可靠，重復(fù)性好，檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可
O


圖1標(biāo)準(zhǔn)色度液全波長掃描2不同色度標(biāo)準(zhǔn)液25(T350nm波長掃描圖1和圖2中的曲線，從下往上依次為色度為10、20、30、40、50、100、200、300、400度的標(biāo)準(zhǔn)液的掃描結(jié)果。圖3、色度標(biāo)準(zhǔn)曲線，橫坐標(biāo)代表的是標(biāo)準(zhǔn)色度溶液的色度，單位是度。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的技術(shù)方案是測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，包括如下步驟取黃水，加入乙醇浸提15飛Omin，離心，取上清液，稀釋，在250 290nm處測吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算為黃水色度；其中，乙醇的濃度> 95%。優(yōu)選的，所述檢測波長為26(T280nm。最優(yōu)選的，所述檢測波長為260nm。進(jìn)一步的，黃水乙醇體積比為I :廣4。·優(yōu)選的，黃水乙醇體積比為I : 2。進(jìn)一步的，浸提時間為30min。進(jìn)一步的，浸提溫度為2(T50°C。優(yōu)選的，浸提溫度為30°C。進(jìn)一步的,所述的離心速度為3000 6000r/min,離心時間為5 20min。優(yōu)選的，所述的離心速度為5000r/min。優(yōu)選的，所述的離心時間為lOmin。黃水成分復(fù)雜，其中含有可溶性淀粉、還原糖、微生物和其他多種成分，這些成分都會干擾黃水色度的測定，因此不能直接用分光光度法進(jìn)行測定，必須先提取黃水中的色素。為了使色素的提取效果好，發(fā)明人選用了多種的溶液來進(jìn)行浸提實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，采用乙醇的浸提效果好，且能排除其它雜質(zhì)的干擾。經(jīng)分析，主要原因在于色素易溶于乙醇，且乙醇能使黃水中的其它成分沉淀，因此選擇乙醇溶液作為溶劑進(jìn)行黃水色素的提取。此外，乙醇價廉易得且危害性小，提取色素的效果也較好。發(fā)明人經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)使用95%的乙醇已經(jīng)能達(dá)到較好的色素提取效果，能使黃水中的蛋白質(zhì)等成分很快變性沉淀，利于后面的分離步驟。乙醇提取后的上清液需要進(jìn)行稀釋，以免待測樣品色度太高，使得檢測結(jié)果不夠精確。本方法測定色度的最適范圍為100度以內(nèi)，然而黃水來源不同(如發(fā)酵期或者配料不同的黃水)，色度相差比較大，可在檢測前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定合適的稀釋倍數(shù)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算得到的色度還應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)，最終得到樣品的色度。在進(jìn)行浸提條件的優(yōu)化時，發(fā)明人對各個因素進(jìn)行了多次實(shí)驗(yàn)，以獲得優(yōu)選的浸提條件。由于優(yōu)化過程較長，因此，僅在實(shí)施例I中出示了最終優(yōu)化的過程和結(jié)果。實(shí)施例I浸提條件的優(yōu)化a、浸提時間的確定分別吸取5mL同樣的黃水樣品于4個25mL比色管中，加入20mL95%乙醇。分別浸提15min、30min、45min、60min后，吸取上清液采用紫外/可見分光光度計(jì)進(jìn)行全波長掃描，結(jié)果顯示，浸提15飛Omin時，樣品的最大吸光度比較接近，即說明樣品中的色素已基本全部浸提出來了。特別在浸提30min后最大吸光度值最高，即說明浸提30min已將黃水中的色素物質(zhì)全部浸提出來了。b、浸提乙醇用量的確定分別吸取5mL同樣的黃水樣品于4個25mL比色管中，分別按照I : 1、1 : 2、1 3、1 4的比例加入95%乙醇。浸提30min后，吸取上清液采用紫外/可見分光光度計(jì)進(jìn)行全波長掃描，結(jié)果表明黃水乙醇體積比為I :廣4時，黃水樣品的最大吸光度的值比較接近，且在黃水乙醇體積比為I : 2時最大吸光度的值為最大。由此說明，黃水乙醇體積比為I :廣4時，浸提效果好，尤其以黃水乙醇體積比為I :
2時達(dá)到最佳。C、浸提溫度的確定分別吸取5mL同樣的黃水樣品于4個25mL比色管中，各加入10mL95%乙醇，分別在20°C、30°C、4(TC、5(rC的水浴鍋中浸提30min后，吸取上清液采用紫外/可見分光光度計(jì)進(jìn)行全波長掃描，結(jié)果表明浸提溫度為2(T60°C時，黃水樣品的最大吸光度的值比較接近，且在浸提溫度為30°C時后最大吸光度值達(dá)最大。由此說明浸提溫度以2(T60°C為宜，優(yōu)選 30°C。d、離心條件的確定吸取5mL黃水，加入95%乙醇10mL，30°C浸提30min后，吸取
上清液進(jìn)行全波長掃描，將剩余的浸提液離心處理后全波長掃描，比較離心前后最大吸收 波長，發(fā)現(xiàn)離心后更接近標(biāo)準(zhǔn)液的最大吸收波長，因此表明離心處理后有利于雜質(zhì)沉淀，測定結(jié)果更能真實(shí)反應(yīng)浸提液吸光度值。吸取5mL黃水，加入95%乙醇IOmL, 30°C浸提30min后，在4000r/min分別離心5min、lOmin、15min、20min,取上清液進(jìn)行全波長掃描,結(jié)果表明離心IOmin效果最佳。吸取5mL 黃水，加入 95% 乙醇 10mL，30°C浸提 30min 后，分別在 3000r/min、4000r/min、5000r/min、6000r/min離心IOmin后取上清液進(jìn)行全波長掃描，結(jié)果表明離心速度為5000r/min效果最佳。實(shí)施例2檢測波長的選擇色度標(biāo)準(zhǔn)液精稱確取I. 246g六氯鉬酸鉀(K2PtCl6)和I. OOOg六水氯化鈷(CoCl2 ·6Η20)，溶于約500mL水中，加入IOOmL濃鹽酸(Ρ=1· 18g/mL)后定容至IOOOmL,此
溶液色度相當(dāng)于500度。將上述色度標(biāo)準(zhǔn)液依次稀釋是色度為10、20、30、40、50、100、200、300、400度，進(jìn)
行全波長掃描，結(jié)果見圖I和圖2。由圖I可知，標(biāo)準(zhǔn)液的吸收波長主要集中在25(T350nm ；由圖2可知，色度在100度以內(nèi)時，最大吸收波長約為260nm，當(dāng)色度大于100度時，最大吸收波長發(fā)生較大偏移，因此在測定樣品色度時，最好能將樣品進(jìn)行稀釋至色度在100度以內(nèi)。實(shí)施例3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制色度標(biāo)準(zhǔn)儲備液精稱確取I. 246g六氯鉬酸鉀(K2PtCl6)和I. OOOg六水氯化鈷(CoCl2 ·6Η20)，溶于約500mL水中，加入IOOmL濃鹽酸(Ρ=1· 18g/mL)后定容至IOOOmL,此
溶液色度相當(dāng)于500度。色度標(biāo)準(zhǔn)溶液分別吸取0mL、0. 5mL、L OmLU. 5mL,2. OmL,2. 5mL標(biāo)準(zhǔn)液于25mL比色管中并用水定容至刻度，混合均勻，此時溶液的色度分別為O度、10度、20度、30度、40度、50度。建立標(biāo)準(zhǔn)曲線將上述色度標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全波長掃描以確定最大吸收波長，在最大吸收波長260nm下測定色度標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸光度。以色度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，得到色度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為y=0. 0239x+0. 0626，R2=O. 9846。則色度=(吸光度-0. 0626)/0. 0239，R2=O. 9846。實(shí)施例4采用本發(fā)明方法測定黃水色度取發(fā)酵35天、45天、55天的黃水，置于取樣瓶中，各吸取5mL于25mL比色管中，力口Λ 10mL95%乙醇，混合后蓋上塞子，30°C浸提30min,上清液5000r/min離心lOmin,由于色度最大吸收波長隨著色度增大發(fā)生偏移，標(biāo)準(zhǔn)曲線適合于測定色度在100度以內(nèi)的樣品。故取離心后上清液稀釋到70度(共稀釋約30倍)以內(nèi)，在260nm處測定吸光度值，測定結(jié)果% =A1 (35 天)=0·919，Α2 (45 天)=1·057，Α3 (55 天)=1. 117，經(jīng)計(jì)算，對應(yīng)的色度分別 35. 83度、41. 61度、44. 12度，乘以稀釋倍數(shù)得到的黃水平均色度分別為C1 (35天)=1075. OO度，C2 (45 天)=1248. 20 度，C3 (55 天)=1323. 51 度。實(shí)施例5采用本發(fā)明方法測定黃水色度濃香型白酒采用的是續(xù)糟發(fā)酵，每甑糟醅都要加入新的糧食和糠后，進(jìn)行混合蒸餾，投糧量就是加入糧食的重量，一般糧糟比為1:Γ :5. 5。取正常發(fā)酵，糠殼用量不同(糠用量分別為投糧量的22%、24%、26%)的三種黃水。置于取樣瓶中，各吸取5mL于25mL比色管中，加入10mL95%乙醇,混合后蓋上塞子,30°C浸提30min,上清液5000r/min離心IOmin后取上清液稀釋到100度(稀釋30倍)以內(nèi)，在260nm處測定吸光度值，測定結(jié)果為=A1 (22%)=1.038，A2 (24%) =1. 109，A3 (26%) =1. 126，根據(jù)計(jì)算，對應(yīng)的色度為 40. 81 度、43. 78 度、44. 49度，乘以稀釋倍數(shù)得到的對應(yīng)的黃水平均色度分別為Cl=1224. 35度，C2=1313. 47度， C3=1334. 81 度。試驗(yàn)例I驗(yàn)證本發(fā)明方法測定結(jié)果的準(zhǔn)確性平行實(shí)驗(yàn)隨機(jī)取一種黃水按照本發(fā)明提取、稀釋后檢測色度，目的是驗(yàn)證本方法測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，結(jié)果見表I。從表中的數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明方法的測定結(jié)果準(zhǔn)確性高。表I平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于包括如下步驟取黃水，加入乙醇浸提15飛Omin，離心，取上清液，稀釋，在250 290nm處測吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算為黃水色度；其中，乙醇的濃度 彡95%。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述檢測波長為 260 280nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述的黃水乙醇體積比為I :廣4。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述黃水乙醇體積比為1:2。
5.根據(jù)權(quán)利要求Γ4任一項(xiàng)所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述的浸提時間為30min。
6.根據(jù)權(quán)利要求Γ5任一項(xiàng)所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述的浸提溫度為2(T50°C。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述的浸提溫度為30°C。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述的離心速度為300(T6000r/min，離心時間為5 20min。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述的離心時間為IOmin。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，其特征在于所述的離心速度為 5000r/min。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，屬于釀酒技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是測定固態(tài)發(fā)酵黃水色度的方法，包括如下步驟取黃水，加入乙醇浸提15~60min，離心，取上清液，稀釋，在250～280nm處測吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算為黃水色度；其中，乙醇的濃度≥95%。本發(fā)明方法可用于黃水色度的檢測，填補(bǔ)了釀酒領(lǐng)域黃水色度檢測的技術(shù)空白。
文檔編號G01N21/33GK102890068SQ20121041045
公開日2013年1月23日 申請日期2012年10月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月24日
發(fā)明者尹小滿, 張宿義, 敖宗華, 稅梁揚(yáng), 劉向陽 申請人:瀘州品創(chuàng)科技有限公司