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      檢測(cè)螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素的試紙條的制作方法

      文檔序號(hào):5996293閱讀:345來(lái)源:國(guó)知局
      專利名稱:檢測(cè)螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素的試紙條的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      檢測(cè)螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素的試紙條技術(shù)領(lǐng)域[0001]本實(shí)用新型涉及一種檢測(cè)牛奶中螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素的試紙條。
      技術(shù)背景[0002]鏈霉素、慶大霉素、新霉素屬于氨基糖苷類抗生素,被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物疾病的治療,由于這些藥物具有神經(jīng)毒性和腎臟毒性,在動(dòng)物食品中的殘留會(huì)影響人類健康,歐美國(guó)家及我國(guó)均要求其限量使用。螺旋霉素為大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,可用于治療由革蘭氏陽(yáng)性菌和某些革蘭氏陰性菌引起的耳、鼻、喉和呼吸道感染。由于肝膽系統(tǒng)是乙酰螺旋霉素排泄的主要途徑,故嚴(yán)重肝功能不全患者慎用該品。農(nóng)業(yè)部第235號(hào)文件《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量》中規(guī)定鏈霉素在牛奶中殘留限量為200yg/L,慶大霉素在牛奶中殘留限量為 200 μ g/L,新霉素在牛奶中殘留限量為500μ g/L。歐盟在動(dòng)物源性食品最高殘留限量規(guī)定 2377/90/EC規(guī)定螺旋霉素在牛奶中最大殘留限量為200 μ g/kg。[0003]目前,氨基糖甙類抗生素、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素殘留監(jiān)控中免疫測(cè)定法仍是最常見(jiàn)的分析手段,免疫分析方法與儀器檢測(cè)方法相比,樣品前處理過(guò)程較簡(jiǎn)單,適合進(jìn)行大規(guī)?,F(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等。膠體金免疫層析試紙條已廣泛用于藥物殘留檢測(cè)中,具有 操作簡(jiǎn)便、快速、不需要任何設(shè)備等優(yōu)點(diǎn),目前已成為免疫學(xué)檢測(cè)發(fā)展方向之一。實(shí)用新型內(nèi)容[0004]本實(shí)用新型的目的是提供一種靈敏度高、成本低、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短的檢測(cè)螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素的試紙條。[0005]本實(shí)用新型的試紙條,其包括凍干有螺旋霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、鏈霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、慶大霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、新霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑和試紙,試紙由底板、附著在底板上依次緊密相連的樣品吸收墊、反應(yīng)膜、吸水墊和保護(hù)膜組成,所述反應(yīng)膜上具有包被羊抗鼠抗抗體構(gòu)成的質(zhì)控線印跡“ I ”,包被有螺旋霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物、鏈霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物、慶大霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物、新霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物構(gòu)成的四條檢測(cè)線印跡, 這四條檢測(cè)線印跡平行。樣品吸收墊位于底板始端,吸水墊位于底板末端,四條檢測(cè)線和質(zhì)控線平行,均呈與試紙的長(zhǎng)相垂直的條帶狀,質(zhì)控線位于距離吸水墊末端(底板末端)3.7cm 處,距離質(zhì)控線由近及遠(yuǎn)分別為四條檢測(cè)線TpTyI^T1,四條檢測(cè)線間距分別為0.5cm。試紙樣品吸收墊為檢測(cè)端,粘貼有保護(hù)膜,保護(hù)膜上有MAX標(biāo)記線,微孔試劑上具有微孔塞。[0006]為了便于運(yùn)輸和使用,試紙條盛裝于具有密封蓋的試劑桶中,試劑桶放置于具有固定用具的盒體中。[0007]本實(shí)用新型試紙條中試紙底板可為PVC底板或其他硬質(zhì)不吸水的材料;樣品吸收墊可為吸濾紙或全血濾膜;吸水墊為吸水紙;反應(yīng)膜可為硝酸纖維素膜;保護(hù)膜為PE材質(zhì)保護(hù)膜;試劑桶為塑料試劑桶;固定用具為硬質(zhì)支撐材料;盒體為硬紙盒。[0008]本實(shí)用新型試紙條具有如下有益效果:[0009]1.靈敏度高。螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素快速檢測(cè)試紙條以膠體金標(biāo)記 高親和力的單克隆抗體為基礎(chǔ)制備而成,金標(biāo)抗體中金顆粒與抗體分子之間無(wú)價(jià)健形成, 二者通過(guò)異性電荷間的范德華力相結(jié)合,膠體金對(duì)單克隆抗體特異性和親和力影響很小, 且具有較高的標(biāo)記率。將螺旋霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、鏈霉素單克隆抗體-膠體 金標(biāo)記物、慶大霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、新霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物凍干在 微孔試劑中,在檢測(cè)過(guò)程中,能夠使金標(biāo)抗體與待檢樣品液充分接觸,充分反應(yīng),從而減少 誤差,增加整個(gè)體系的反應(yīng)靈敏度。因此,本實(shí)用新型試紙條具有較高的特異性和靈敏度。 本試紙條對(duì)牛奶中螺旋霉素檢測(cè)限為20 μ g/L、鏈霉素檢測(cè)限為80 μ g/L、慶大霉素檢測(cè)限 為20 μ g/L、新霉素檢測(cè)限為500 μ g/L。[0010]2.顯示檢測(cè)結(jié)果形象、直觀準(zhǔn)確。檢測(cè)時(shí)試紙以檢測(cè)線是否顯示紅色線“ I ”印 跡作為陽(yáng)性和陰性標(biāo)記,即當(dāng)硝酸纖維素膜上的質(zhì)控線和檢測(cè)線顯示紅色線“ I ”印跡表示 在被檢測(cè)樣本液中藥物含量低于試紙條對(duì)藥物的最低檢測(cè)限,當(dāng)質(zhì)控線顯示紅色線“ I ”印 跡,而檢測(cè)線不顯示紅色線“ I ”印跡,表示被檢測(cè)樣本液中藥物含量高于或等于試紙條對(duì) 藥物的最低檢測(cè)限;結(jié)果判定形象、直觀、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單明了,不容易出現(xiàn)結(jié)果誤判。[0011 ] 3.成本低,投資少。使用本實(shí)用新型試紙條,使現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)一步到位,成本低廉,投資 少,見(jiàn)效快。[0012]4.易于大范圍推廣應(yīng)用。試紙條操作簡(jiǎn)單,能較好滿足牛奶檢測(cè)的需求,具有廣闊 的市場(chǎng)前景和較大的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)效益。


      [0013]圖1為本實(shí)用新型試紙結(jié)構(gòu)示意圖;[0014]圖2為本實(shí)用新型試紙俯視圖;[0015]圖3為本實(shí)用新型微孔試劑圖;[0016]圖4a_4k為本實(shí)用新型試紙檢測(cè)結(jié)果判定圖;[0017]圖5為本實(shí)用新型試劑桶結(jié)構(gòu)示意圖;[0018]圖6為本實(shí)用新型固定用具俯視圖;[0019]圖7為本實(shí)用新型盒體與固定用具側(cè)視圖。
      具體實(shí)施方式
      [0020]一、螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素檢測(cè)試紙條的組裝制備[0021]I)試紙[0022]樣品吸收墊1、反應(yīng)膜2、吸水墊3和保護(hù)膜7依次按順序黏貼在所述底板6上, 樣品吸收墊位于底板始端,吸水墊位于底板末端,樣品吸收墊的末端與反應(yīng)膜始端相連,反 應(yīng)膜的末端與吸水墊相連,樣品吸收墊的始端與底板的始端對(duì)齊,吸水墊的末端與底板的 末端對(duì)齊,試紙樣品吸收墊為檢測(cè)端,粘貼有保護(hù)膜,保護(hù)膜上印有MAX標(biāo)記線,檢測(cè)線4-1 包被有螺旋霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物,檢測(cè)線4-2包被有鏈霉素半抗原-載體蛋白偶 聯(lián)物,檢測(cè)線4-3包被有慶大霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物,檢測(cè)線4-4包被有新霉素半抗 原-載體蛋白偶聯(lián)物,質(zhì)控線5包被有羊抗鼠抗抗體。[0023]底板為PVC底板,樣品吸收墊為全血濾膜,反應(yīng)膜為硝酸纖維素膜,吸水墊為吸水紙,保護(hù)膜為PE材質(zhì)保護(hù)膜。[0024]2)微孔試劑[0025]微孔試劑8具有微孔塞9,微孔試劑中凍干有螺旋霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、鏈霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、慶大霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、新霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物。[0026]3)將I)試紙和2)微孔試劑組裝成試紙條,裝入具有密封蓋的塑料試劑桶10,將塑料試劑桶放置于盒體12內(nèi)的固定用具11中。[0027]二、試紙條的使用[0028]待檢牛奶樣品溶液滴加200 μ I到微孔中,混勻后,室溫(20°C -25°C)孵育5min, 將印有“MAX”線端朝下插入孵育后的微孔試劑后計(jì)時(shí),室溫孵育5min,觀察結(jié)果。[0029]三、檢測(cè)結(jié)果分析[0030]藥物在樣本中的含量高于或等于試紙條對(duì)其的最低檢測(cè)限時(shí),藥物單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物分別與藥物結(jié)合,金標(biāo)抗體上的抗原結(jié)合位點(diǎn)被封閉,從而因?yàn)楦?jìng)爭(zhēng)反應(yīng),不會(huì)與藥物半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物結(jié)合檢測(cè)線不出現(xiàn)紅色條帶。陰性樣本在檢測(cè)過(guò)程中由于缺少抗原抗體競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng),將會(huì)在檢測(cè)線和質(zhì)控線上出現(xiàn)紅色條帶。如圖4a_4k所/Jn ο[0031]陰性:當(dāng)質(zhì)控線C顯示一條紅色條帶,檢測(cè)線T1-T4均顯示出紅色條帶,判為陰性, 如圖4a所示。[0032]陽(yáng)性:當(dāng)質(zhì)控線C顯示一條紅色條帶,而檢測(cè)線T1-T4不顯色,表示牛奶中螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素濃度分別等于或高于試紙條對(duì)螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、 新霉素的檢測(cè)限,判為陽(yáng)性,如圖4b所示。[0033]螺旋霉素陽(yáng)性:當(dāng)質(zhì)控線C顯示一條紅色條帶,而檢測(cè)線T1不顯色,表示牛奶中螺旋霉素濃度等于或高于試紙條對(duì)螺旋霉素的檢測(cè)限,判為陽(yáng)性,如圖4c所示。[0034]鏈霉素陽(yáng)性:當(dāng)質(zhì)控線C顯示一條紅色條帶,而檢測(cè)線T2不顯色,表示牛奶中鏈霉素濃度等于或高于試紙條對(duì)鏈霉素的檢測(cè)限,判為陽(yáng)性,如圖4d所示。[0035]慶大霉素陽(yáng)性:當(dāng)質(zhì)控線C顯示一條紅色條帶,而檢測(cè)線T3不顯色,表示牛奶中慶大霉素濃度等于或高于試紙條對(duì)慶大霉素的檢測(cè)限,判為陽(yáng)性,如圖4e所示。[0036]新霉素陽(yáng)性:當(dāng)質(zhì)控線C顯示一條紅色條帶,而檢測(cè)線T4不顯色,表示牛奶中新霉素濃度等于或高于試紙條對(duì)新霉素的檢測(cè)限,判為陽(yáng)性,如圖4f所示。[0037]無(wú)效:當(dāng)質(zhì)控線C不顯示紅色條帶,則無(wú)論檢測(cè)線!^-!^顯示出紅色條帶與否,該試紙均判為無(wú)效,如圖4g-4k所示。[0038]四、檢測(cè)試紙條中用到的材料制備方法[0039]1.抗原制備[0040]( I)螺旋霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物的制備[0041]a、半抗原的合成[0042]0.85g螺旋霉素在5ml 二甲基亞砜(DMSO)中的混合物,60°C下緩慢滴加入0.5ml 乙二胺和0.5ml吡啶在IOml DMSO的混合液中,滴加完畢后,繼續(xù)反應(yīng)10小時(shí),旋蒸除去溶劑和未反應(yīng)的乙二胺,定量得到螺旋霉素的乙二胺單縮合物。[0043]b、免疫原的制備[0044]取半抗原30mg用2.7ml N, N- 二甲基甲酰胺(DMF)溶解完全,制成I液;取50% 戊二醛(GA) 300y 1,加入I液中,反應(yīng)I小時(shí)得到II液;取牛血清白蛋白(BSA) 120mg用 7ml 0.lmol/L PBS (PH7.0)溶解完全,制成III液;將II液加入III液中,室溫反應(yīng)24小時(shí),用0.01mol/L PBS透析三天,每天換液三次,得免疫原。[0045]C、包被原的制備[0046]同上,將牛血清白蛋白(BSA)換成卵清白蛋白(0VA),制備得到包被原。[0047](2)鏈霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物的制備[0048]a、半抗原的合成[0049]1.0g鏈霉素、0.3g鄰苯二甲酸酐和Iml吡啶在20ml DMSO中的混合液,在80°C下 攪拌反應(yīng)24小時(shí),蒸除溶劑,乙醇-水體系中多次重結(jié)晶得到鄰苯二甲酸單鏈霉素酯。[0050]b、免疫原的制備[0051]取半抗原40mg用2ml DMF溶解完全,制成IV液;取83々80mg用7ml 0.lmol/L PBS (pH7.5)溶解完全,制V液;將~液加入V液中,制成VI液;取碳化二亞胺(EDC)IOOmg用Iml 水溶解后緩沖加入VI液中,室溫?cái)嚢?小時(shí);用0.0111101/1 PBS透析三天,每天換液三次,得免疫原。[0052]C、包被原的制備[0053]同上,將BSA換成OVA,制備得到包被原。[0054](3)慶大霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物的制備[0055]a、半抗原的合成[0056]0.39g溴乙酸叔丁酯在5ml DMSO中的溶液,40°C下緩慢滴加入0.90g慶大霉素和 Iml吡啶在IOml DMSO中的混合物中。滴加完畢后,繼續(xù)反應(yīng)6小時(shí)后,蒸除溶劑。簡(jiǎn)單柱 層析分離后,除去溶劑,加入20ml DMSO和5ml甲酸,室溫反應(yīng)20小時(shí),蒸除溶劑,乙醇-水 體系中重結(jié)晶得到羧甲基慶大霉素。[0057]b、免疫原的制備[0058]取半抗原35mg用2ml DMF溶解完全,制成A液;取BSA IOOmg用7ml 0.lmol/L PBS (ρΗ7.5)溶解完全,制成B液;將A液加入B液中,制成C液;取EDC IOOmg用Iml水溶 解后緩沖加入C液中,室溫?cái)嚢?小時(shí),用0.01mol/L PBS透析三天,每天換液三次,得免疫原。[0059]C、包被原的制備[0060]同上,將BSA換成OVA,制備得到包被原。[0061](4)新霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物的制備[0062]a、半抗原的合成[0063]0.61g新霉素和10ml DMSO的混合液,室溫下緩慢滴加入到0.14g對(duì)苯二甲醛的 10ml DMSO溶液中,滴加完畢后室溫至60°C反應(yīng)2_4小時(shí),除去溶劑,乙醇-水體系中重結(jié) 晶得到新霉素對(duì)苯二甲醛單縮合物。[0064]b、免疫原的制備[0065]取半抗原30mg用3ml DMF溶解完全,制成D液;取BSA IOOmg用7ml 0.lmol/L PBS (PH7.0)溶解完全,制成E液;將D液加入E液中,制成F液,室溫反應(yīng)24小時(shí);用0.0lmol/ L PBS透析三天,每天換液三次,得免疫原。[0066]C、包被原的制備[0067]同上,將BSA換成0VA,制備得到包被原。[0068](5)藥物半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物的鑒定[0069]將載體蛋白、螺旋霉素半抗原、螺旋霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物用PH7.4的PBS 配成0.5mg/mL的溶液,以0.01mol/L pH7.4 PBS調(diào)零,用紫外分光光度計(jì)在波長(zhǎng)20(T800nm 范圍內(nèi)掃描,得到載體蛋白、螺旋霉素半抗原、螺旋霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物的吸收曲線。三者出現(xiàn)不同的吸收曲線,表明螺旋霉素半抗原與載體蛋白偶聯(lián)成功。用同樣的方法鑒定鏈霉素半抗原與載體蛋白、慶大霉素半抗原與載體蛋白、新霉素半抗原與載體蛋白偶聯(lián)物是否偶聯(lián)成功。[0070]2.單克隆抗體的制備[0071](1)動(dòng)物免疫[0072]將上述制備得到的免疫原分別注入Balb/c小鼠體內(nèi),免疫劑量為150 μ g/只,使其產(chǎn)生抗血清。[0073](2)細(xì)胞融合和克隆化[0074]取免疫Balb/c小鼠脾細(xì)胞,按8:1 (數(shù)量配比)比例與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選得到穩(wěn)定分泌螺旋霉素單克隆抗體的螺旋霉素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株、分泌鏈霉素單克隆抗體的單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株、分泌慶大霉素單克隆抗體的慶大霉素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株、分泌新霉素單克隆抗體的新霉素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株。[0075](3)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇[0076]將雜交瘤細(xì)胞用凍存液制成5X IO6個(gè)/ml的細(xì)胞懸液,在液氮中長(zhǎng)期保存。復(fù)蘇時(shí)取出凍存管,立即放入37 °C水浴中速融,離心去除凍存液后,移入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)。[0077](4)單克隆抗體的制備與純化[0078]增量培養(yǎng)法:將雜交瘤細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)基中,在37°C條件下進(jìn)行培養(yǎng),用辛酸-飽和硫酸銨法將得到的培養(yǎng)液進(jìn)行純化,得到單克隆抗體,_20°C保存。[0079]所述細(xì)胞培養(yǎng)基為向RPMI1640培養(yǎng)基中添加小牛血清和碳酸氫鈉,使小牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基中的終濃度為20% (質(zhì)量百分含量),使碳酸氫鈉在細(xì)胞培養(yǎng)基中的終濃度為0.2% (質(zhì)量百分含量);所述細(xì)胞培養(yǎng)基的pH為7.4。[0080]3.羊抗鼠抗抗體的制備[0081]以羊作為免疫動(dòng)物,以鼠源抗體為免疫原對(duì)無(wú)病原體羊進(jìn)行免疫,得到羊抗鼠抗抗體。[0082]4.四種單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物的制備[0083](I)膠體金的制備[0084]用雙蒸去離子水將1%氯金酸稀釋成0.01% (質(zhì)量百分含量),取IOOml置于錐形瓶中,用恒溫電磁攪拌器加熱至沸騰,在持續(xù)高溫、持續(xù)攪拌下加入2.5ml 1%檸檬酸三鈉,繼續(xù)勻速攪拌加熱至溶液呈透亮的紅色時(shí)停止,冷卻至室溫后用去離子水恢復(fù)到原體積,4°C 保存。制備好的膠體金外觀純凈、透亮、無(wú)沉淀和漂浮物。[0085](2)分別制備四種單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物[0086]分別制備單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物,在磁力攪拌下,用0.2mol/L碳酸鉀調(diào)膠體金的pH值至7.2,按每毫升膠體金溶液中加入1(Γ50μ g抗體的標(biāo)準(zhǔn)向膠體金溶液中分別加入上述單克隆抗體,繼續(xù)攪拌混勻IOminJPA 10%牛血清白蛋白(BSA)使其在膠體金溶液中的終濃度為1% (體積百分含量),靜置lOmin。12000rpm,4°C離心40min,棄上清液,沉淀用復(fù)溶緩沖液洗滌兩次,用體積為初始膠體金體積1/10的復(fù)溶緩沖液將沉淀重懸,置4°C 備用。[0087]復(fù)溶緩沖液:含牛血清白蛋白(BSA) 0.29Π).5% (體積百分含量)、吐溫_80 0.059Γ0.2% (質(zhì)量百分含量)、pH7.2的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液。[0088]5.將四種單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物凍干到微孔試劑上[0089]向微孔試劑微孔中分別加入50μ I螺旋霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、50μ I鏈霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、50 μ I慶大霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、50 μ I新霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物,放入冷凍干燥機(jī)中,在冷阱溫度為_(kāi)50°C條件下,預(yù)凍3h后, 再真空干燥15h,即可取出,得到凍干有螺旋霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、鏈霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、慶大霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、新霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑,密封保存。[0090]6.樣品吸收墊的制備[0091]將樣品吸收墊置于含牛血清白蛋白(牛血清白蛋白在緩沖液中的終濃度為0.5% (體積百分含量))、pH7.2,0.lmol/L磷酸鹽緩沖液中浸泡2h,37°C烘2h備用。[0092]7.反應(yīng)膜的制備包被過(guò)程:分別用磷酸緩沖液將螺旋霉素半抗原-卵清白蛋白偶聯(lián)物、鏈霉素半抗原-卵清白蛋白偶聯(lián)物、慶大霉素半抗原-卵清白蛋白偶聯(lián)物、新霉素半抗原-卵清白蛋白偶聯(lián)物稀釋到lmg/mL,用Isoflow點(diǎn)膜儀將其包被于硝酸纖維素膜上的檢測(cè)線,包被量為1.0 μ 1/cm ;用0.0lmol/L、ρΗ7.4的磷酸鹽緩沖液將羊抗鼠IgG抗體稀釋到200 μ g/mL, 用Isoflow點(diǎn)膜儀將其包被于硝酸纖維素膜上的質(zhì)控線,包被量為1.0 μ Ι/cm。將包被好的反應(yīng)膜置于37°C條件下干燥2h,備用。
      權(quán)利要求1.一種檢測(cè)螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素的試紙條,其特征在于試紙條包括微 孔試劑和試紙,試紙由底板、附著在底板上依次緊密相連的樣品吸收墊、反應(yīng)膜、吸水墊和 保護(hù)膜組成,所述樣品吸收墊位于底板始端,吸水墊位于底板末端,所述反應(yīng)膜上建立的質(zhì) 控線印跡位于距離吸水墊始端3.7cm處,距離質(zhì)控線由近及遠(yuǎn)分別為四條檢測(cè)線印跡T4、 T3、T2、T1,四條檢測(cè)線間距分別為0.5cm。
      2.如權(quán)利要求1所述的試紙條,其特征在于所述反應(yīng)膜上具有包被羊抗鼠抗抗體構(gòu)成 的質(zhì)控線印跡“ I ”,包被有螺旋霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物、鏈霉素半抗原-載體蛋白偶 聯(lián)物、慶大霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物、新霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物構(gòu)成的四條檢測(cè) 線印跡,這四條檢測(cè)線印跡平行。
      3.如權(quán)利要求2所述的試紙條,其特征在于所述四條檢測(cè)線和質(zhì)控線平行,均呈與試 紙的長(zhǎng)相垂直的條帶狀。
      4.如權(quán)利要求1所述的試紙條,其特征在于所述試紙樣品吸收墊為檢測(cè)端,粘貼有保 護(hù)膜,保護(hù)膜上有MAX標(biāo)記線。
      5.如權(quán)利要求1所述的試紙條,其特征在于所述底板可為PVC底板或其他硬質(zhì)不吸水 的材料,樣品吸收墊可為吸濾紙或全血濾膜,吸水墊為吸水紙,反應(yīng)膜可為硝酸纖維素膜, 保護(hù)膜為PE材質(zhì)保護(hù)膜。
      6.如權(quán)利要求1所述的試紙條,其特征在于所述微孔試劑上具有微孔塞。
      7.如權(quán)利要求1所述的試紙條,其特征在于所述微孔試劑中分別凍干有螺旋霉素單克 隆抗體-膠體金標(biāo)記物、鏈霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、慶大霉素單克隆抗體-膠體金 標(biāo)記物、新霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物。
      8.如權(quán)利要求1所述的試紙條,其特征在于所述試紙條盛裝于具塞試劑桶中,試劑桶 放置于具有固定用具的盒體中,試劑桶為塑料試劑桶,固定用具為硬質(zhì)支撐材料,盒體為硬 紙盒。
      專利摘要本實(shí)用新型提供了一種檢測(cè)螺旋霉素、鏈霉素、慶大霉素、新霉素的試紙條,試紙條包括微孔試劑和試紙,試紙由底板、附著在底板上依次緊密相連的樣品吸收墊、反應(yīng)膜、吸水墊和保護(hù)膜組成,螺旋霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、鏈霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、慶大霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、新霉素單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物凍干在微孔試劑中,反應(yīng)膜上具有包被有螺旋霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物、鏈霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物、慶大霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物、新霉素半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物構(gòu)成的四條檢測(cè)線印跡和包被羊抗鼠抗抗體構(gòu)成的質(zhì)控線印跡。本實(shí)用新型試紙條具有便攜性好,靈敏度高,檢測(cè)時(shí)間短等特點(diǎn)。
      文檔編號(hào)G01N33/577GK203069592SQ20122050966
      公開(kāi)日2013年7月17日 申請(qǐng)日期2012年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月29日
      發(fā)明者何方洋, 馮才偉, 楊秀賢, 劉葉, 吳小勝, 趙正苗, 汪善良 申請(qǐng)人:北京勤邦生物技術(shù)有限公司
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