專利名稱：一種從硫酸新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥品原料的制備方法，特別是指一種從硫酸新霉素發(fā)酵 液中提取硫酸弗拉菌素的方法。
背景技術(shù)：
硫酸弗拉菌素(硫酸新霉素B)是從硫酸新霉素中分離提取的一種氨基糖 苷類抗生素，對金黃色葡萄球菌屬、棒狀桿菌屬有良好抗菌作用，對大腸埃 希菌、克雷伯菌屬、變形桿菌屬等腸桿菌亦有良好的作用，克服了硫酸新霉 素的副作用，可制成針劑，粉劑，膏劑。硫酸弗拉菌素常采用的制備方法是 從硫酸新霉素發(fā)酵液分離得到。硫酸新霉素發(fā)酵液由硫酸新霉素B和硫酸新 霉素C及一些雜質(zhì)構(gòu)成，其中硫酸新霉素B和硫酸新霉素C 二者互為立體異 構(gòu)體，其中硫酸新霉素B的含量為75-82%;硫酸新霉素C的含量為15-18%, 其它部分是雜質(zhì)。硫酸新霉素B的抗菌活性是新霉素C的60倍。硫酸新霉素 C幾乎無抗菌活性。但其毒性是硫酸新霉素B的300倍，將硫酸新霉素中C的 含量降至3.0%以下，就得到硫酸弗拉菌素(此過程中其它雜質(zhì)也降低)。硫酸 弗拉菌素的抗菌活性是硫酸新霉素的1. 3倍，.但其毒性只相當(dāng)于硫酸新霉素 的1/60。該方法通常包括發(fā)酵、過濾、脫色、吸附、解析、濃縮、脫色、結(jié) 晶、干燥工序，即將硫酸新霉素發(fā)酵液用樹脂吸附后用洗脫液解析后得到解 析液，解析液在經(jīng)過濃縮脫色，再在甲醇中結(jié)晶，干燥得硫酸弗拉菌素。上 述方法存在許多不足之處，例如，以前所使用的樹脂型號(hào)吸附量小，解析收 率低，原材料消耗大，成本高。結(jié)晶過程用甲醇，成本高，對環(huán)境造成污染, 產(chǎn)品中有機(jī)溶劑殘留高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種改進(jìn)的從硫酸新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉 菌素的方法，該方法生產(chǎn)效率高、成本低、產(chǎn)品質(zhì)量好、環(huán)境污染小。 本發(fā)明的整體技術(shù)解決方案是
一種從硫酸新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法，包括將硫酸新霉
素發(fā)酵液經(jīng)強(qiáng)酸性離子樹脂吸附、解析、濃縮；還包括如下工藝步驟
a、 將濃縮后的硫酸新霉素濃縮液經(jīng)弱酸性陽離子交換樹脂吸附；
b、 用0. 1M-1. OM氨水對a步驟中的飽和樹脂中的硫酸新霉素B進(jìn)行洗脫；
c、 對b步驟中的洗脫液進(jìn)行濃縮、酸化、脫色、噴霧干燥、微粉化。 本發(fā)明中的具體的工藝條件和工藝參數(shù)是
步驟a是將硫酸新霉素濃縮液調(diào)pH值至5-9，加入到弱酸性陽離子樹脂 處理柱的頂部，每柱加入硫酸新霉素濃縮液與樹脂的質(zhì)量體積比為10%，弱酸 性陽離子樹脂包括但不局限于選用D113、 D151、 HD-1、 HD-2、 D152中的一種。
所述的步驟b是硫酸新霉素濃縮液經(jīng)弱酸性陽離子交換樹脂吸附后，用 0. 1M-1. 0M的氨水溶液對飽和樹脂中的硫酸新霉素進(jìn)行第一次洗脫去雜，流速 為每分鐘1/500-1/300樹脂體積；雜質(zhì)洗脫完畢后，用0.2M-1. 0M的氨水溶 液進(jìn)行第二次洗脫硫酸新霉素C，洗脫過程中監(jiān)測溶液的旋光度出現(xiàn)最高點(diǎn)并 開始下降時(shí)，用離子色譜檢測器進(jìn)行監(jiān)測，當(dāng)洗脫液中硫酸新霉素C的含量 降至10%時(shí)，開始接收洗脫液，當(dāng)洗脫液中旋光度降至0時(shí)停止洗脫。
步驟b中第一次洗脫的氨水濃度優(yōu)選釆用0.1-0. 4M。
步驟b中第二次洗脫的氨水濃度優(yōu)選釆用0. 2-0. 8M。
步驟c中的濃縮優(yōu)選釆用將步驟b中的洗脫液經(jīng)薄膜蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮， 蒸汽溫度60°C-80°C，真空度>0. 08MPa，濃縮后的濃度> 230000ug/ml。
步驟c中的酸化是用硫酸調(diào)pH=5-9。
步驟c中的脫色是將所得的濃縮液用活性炭脫色。
步驟c中的微粉化優(yōu)選將噴霧干燥后的物料粉經(jīng)氣流粉碎機(jī)粉碎成微粉。 本發(fā)明所取得的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的技術(shù)進(jìn)步在于 釆用硫酸新霉素發(fā)酵液為原料，用樹脂進(jìn)行吸附、洗脫和解析時(shí)，因硫 酸新霉素B、 C組分在樹脂中的交換難易程度不一致，所釆用的樹脂為弱酸性
陽離子樹脂，提高了樹脂吸附選擇性，篩選出最佳氨水濃度進(jìn)行解析，減少 了洗脫液的用量。釆用噴霧干燥，去掉結(jié)晶步驟，不使用有機(jī)溶劑，產(chǎn)品中無有機(jī)溶劑殘留，減少環(huán)境污染，提高收率，提高產(chǎn)品質(zhì)量，生產(chǎn)成本低。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述，但不作為對本發(fā)明的限定。 實(shí)施例1
將硫酸新霉素發(fā)酵液經(jīng)強(qiáng)酸性陽離子樹脂吸附，用水漂洗，除去雜質(zhì)，
用0. 2M氨水解析，解析液經(jīng)濃縮、脫色，制備成的新霉素濃縮液總單位為19-20 萬單位/亳升，調(diào)pH值至5-9，每柱加入硫酸新霉素濃縮液與樹脂的質(zhì)量體積 比為10%,,加入到弱酸性陽離子樹脂處理柱的頂部，打開出液閥，控制流速 約50ml/min，硫酸新霉素濃縮液經(jīng)弱酸性陽離子吸附后，用0. 1M的氨水溶液 洗脫硫酸新霉素C，除去雜質(zhì)。流速控制在每分鐘1/500-1/300樹脂體積。雜 質(zhì)洗脫完畢后，用0. 1M的氨水溶液繼續(xù)洗脫硫酸新霉素C，隨時(shí)監(jiān)測溶液的旋 光度，當(dāng)旋光度出現(xiàn)最高點(diǎn)并開始下降時(shí)，用離子色譜檢測器進(jìn)行監(jiān)測，當(dāng)
洗脫液中新霉素c的含量降至ioy。時(shí)，開始接收洗脫液至洗脫液接收罐。當(dāng)洗 脫液中旋光度降至o時(shí)停止洗脫。.
洗脫液經(jīng)過薄膜濃縮至19-20萬單位/亳升，向濃縮液中加入10M硫酸溶 液調(diào)pH6-7.5;然后按O. 03公斤/十億單位加入活性炭脫色，壓濾；得到的脫 色液于80-13(TC噴霧干燥，得到硫酸弗拉菌素。噴霧干燥粉子經(jīng)氣流粉碎機(jī) 進(jìn)行微粉。再經(jīng)檢驗(yàn)、包裝即為硫酸弗拉菌素成品，效價(jià)650IU/mg。收率64%。
實(shí)施例2
將硫酸新霉素發(fā)酵液經(jīng)強(qiáng)酸性陽離子樹脂吸附，用水漂洗，除去雜質(zhì)， 用0.2M氨水解析，解析液經(jīng)濃縮，制備成的新霉素濃縮液總單位為19-20萬 單位/亳升，調(diào)PH值至5-9，每柱加入硫酸新霉素濃縮液與樹脂的質(zhì)量體積比 為10%，加入到弱酸性陽離子樹脂處理柱的頂部，打開出液閥，控制流速約 50ml/min,新霉素濃縮液經(jīng)弱酸性陽離子吸附后，用0. 5M的氨水溶液洗脫， 除去雜質(zhì)。流速控制在每分鐘1/500-1/300樹脂體積。雜質(zhì)洗脫完畢后，用 0. 5M的氨水溶液繼續(xù)洗脫新霉素C,隨時(shí)監(jiān)測溶液的旋光度，當(dāng)旋光度出現(xiàn)最 高點(diǎn)并開始下降時(shí)，用離子色譜檢測器進(jìn)行監(jiān)測，當(dāng)洗脫液中硫酸新霉素C
的含量降至ioy。時(shí)，開始接收洗脫液至洗脫液接收罐。當(dāng)洗脫液中旋光度降至 o時(shí)停止洗脫。.
洗脫液經(jīng)過薄膜濃縮至19-20萬單位/亳升，向濃縮液中加入10M硫酸溶 液調(diào)6-7.5;然后按O. 03公斤/十億單位加入活性炭脫色，壓濾；得到的脫色 液于80-13(TC噴霧干燥，得到硫酸弗拉菌素。噴霧干燥粉子經(jīng)氣流粉碎機(jī)進(jìn) 行微粉。再經(jīng)檢驗(yàn)、包裝即為硫酸弗拉菌素成品，效價(jià)648IU/mg。收率68%。
實(shí)施例3
將新霉素發(fā)酵液經(jīng)強(qiáng)酸性陽離子樹脂吸附，用水漂洗，除去雜質(zhì)，用0. 2M 氨水解析，解析液經(jīng)濃縮、脫色，制備成的新霉素濃縮液總單位為19-20萬 單位/毫升，調(diào)PH值至5-9,每柱加入硫酸新霉素濃縮液與樹脂的質(zhì)量體積比 為10%，用泵打到弱酸性陽離子樹脂處理柱的頂部，打開出液閩，控制流速約 50ml/niin,新霉素濃縮液經(jīng)弱酸性陽離子吸附后，用0. 8M的氨水溶液洗脫， 除去雜質(zhì)，流速控制在每分鐘1/500-1/300樹脂體積。雜質(zhì)洗脫完畢后，用 0. 5M的氨水溶液繼續(xù)洗脫硫酸新霉素C,隨時(shí)監(jiān)測溶液的旋光度，當(dāng)旋光度出 現(xiàn)最高點(diǎn)并開始下降時(shí)，用離子色譜檢測器進(jìn)行監(jiān)測，當(dāng)洗脫液中硫酸新霉 素C的含量降至10。/。時(shí)，開始接收洗脫液至洗脫液接收罐。當(dāng)洗脫液中旋光度 降至O時(shí)停止洗脫。.
洗脫液經(jīng)過薄膜濃縮至19-20萬單位/亳升，向濃縮液中加入10M硫酸溶 液調(diào)6-7.5;然后按O. 03公斤/十億單位加入活性炭脫色，壓濾；得到的脫色 液于80-13(TC噴霧干燥，得到硫酸弗拉菌素。噴霧干燥粉子經(jīng)氣流粉碎機(jī)進(jìn) 行微粉。再經(jīng)檢驗(yàn)、包裝即為硫酸弗拉菌素成品，效價(jià)657IU/mg。收率68%。
權(quán)利要求
1、一種從硫酸新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法，包括將硫酸新霉素發(fā)酵液經(jīng)強(qiáng)酸性離子樹脂吸附、解析、濃縮；其特征在于還包括如下工藝步驟a、將濃縮后的硫酸新霉素濃縮液經(jīng)弱酸性陽離子交換樹脂吸附；b、用0.1M-1.0M氨水對a步驟中的飽和樹脂中的硫酸新霉素B進(jìn)行洗脫；c、對b步驟中的洗脫液進(jìn)行濃縮、酸化、脫色、噴霧干燥、微粉化。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從硫酸新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法，其特征在于所述的步驟a是將硫酸新霉素濃縮液調(diào)pH值至5-9,加入到弱酸性陽離子樹脂處理柱的頂部，每柱加入硫酸新霉素濃縮液與樹脂的質(zhì)量體積比為10%,弱酸性陽離子樹脂選用D113、 D151、 HD-1、 HD-2、 D152中的一種。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的從新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法， 其特征在于所述的步驟b是硫酸新霉素濃縮液經(jīng)弱酸性陽離子交換樹脂吸附后，用0. 1M-1. 0M的氨水溶液對飽和樹脂中的硫酸新霉素進(jìn)行第一次洗脫去 雜，流速為每分鐘1/500-1/300樹脂體積；雜質(zhì)洗脫完畢后，用0. 2M-1.0M 的氨水溶液進(jìn)行第二次洗脫硫酸新霉素C，洗脫過程中監(jiān)測溶液的旋光度出現(xiàn) 最高點(diǎn)并開始下降時(shí)，用電化學(xué)進(jìn)行監(jiān)測，當(dāng)洗脫液中硫酸新霉素C的含量 降至10%時(shí)，開始接收洗脫液，當(dāng)洗脫液中旋光度降至O時(shí)停止洗脫。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的從硫酸新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法，其特征在于所述的步驟b中第一次洗脫的氨水濃度為0. 1-0. 4M。
5、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的從硫酸新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法，其特征在于所述的步驟b中第二次洗脫的氨水濃度為0.2-0.8M。
6、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的從新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法， 其特征在于所述的步驟c中的濃縮是將步驟b中的洗脫液經(jīng)薄膜蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮，蒸汽溫度60°C-80°C，真空度>0. 08MPa，濃縮后的濃度 ≥230000ug/ml。
7、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的從新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法，其特征在于所述的步驟c中的酸化是用硫酸溶液調(diào)pH=5-9。
8、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法， 其特征在于所述的步驟c中的脫色是將所得的濃縮液用活性炭脫色。
9、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法， 其特征在于所述的步驟c中的微粉化是將噴霧干燥后的物料粉經(jīng)氣流粉碎機(jī) 粉碎成微粉。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥品原料的制備方法，特別是指一種從硫酸新霉素發(fā)酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法。包括將硫酸新霉素發(fā)酵液經(jīng)強(qiáng)酸性離子樹脂吸附、解析、濃縮、脫色；將濃縮、脫色后的硫酸新霉素濃縮液經(jīng)弱酸性陽離子交換樹脂吸附；用0.1M-1.0M氨水對a步驟中的飽和樹脂中的硫酸新霉素B進(jìn)行洗脫；洗脫液進(jìn)行濃縮、酸化、脫色、噴霧干燥、微粉化制成硫酸弗拉菌素。本發(fā)明解決了現(xiàn)有技術(shù)存在的解析收率低，原材料消耗大，成本高。結(jié)晶過程用甲醇，成本高，對環(huán)境造成污染，產(chǎn)品中有機(jī)溶劑殘留高的問題。具有提高了樹脂吸附選擇性，減少了洗脫液的用量，產(chǎn)品中無有機(jī)溶劑殘留，減少環(huán)境污染，提高收率，提高產(chǎn)品質(zhì)量，生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61P31/00GK101343295SQ20081007925
公開日2009年1月14日 申請日期2008年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月25日
發(fā)明者李瑞民, 楊彥芬, 亮 趙, 閆貴霞, 陳學(xué)軍 申請人:石家莊華曙制藥集團(tuán)有限公司