專利名稱：一種辣椒制品中辣椒素含量快速比色測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品分析檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種辣椒制品中辣椒素含量快速比色測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
隨著大眾日常消費(fèi)辣椒制品量的不斷增大，以及人們對(duì)不同辣度辣椒制品需求的變化，產(chǎn)品的辣度成為消費(fèi)者選擇辣椒制品的主要參考因素。所以，準(zhǔn)確快速方便檢測(cè)辣椒制品的辣度對(duì)于辣椒制品的生產(chǎn)和消費(fèi)具有重要的意義和應(yīng)用前景。辣椒制品辣度主要是由辣椒素含量決定的，通過(guò)測(cè)定辣椒素含量可以基本判斷產(chǎn)品的辣度。目前國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中用于辣椒素含量檢測(cè)的方法主要是高效液相色譜法，此法準(zhǔn)確度高，但是成本高，耗時(shí)長(zhǎng)，儀器設(shè)備投入大，對(duì)場(chǎng)地和操作人員要求苛刻，不方便，不能滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)辣椒制品中辣椒素含量的需求。因此，在實(shí)際生產(chǎn)和生活中，急需建立一種操作簡(jiǎn)便易學(xué)、反應(yīng)快速、測(cè)定較 準(zhǔn)確、價(jià)格便宜、對(duì)環(huán)境和人員要求不高的辣度測(cè)定方法。到目前為止，國(guó)內(nèi)外尚無(wú)相關(guān)的研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種辣椒制品中辣椒素含量快速比色測(cè)定方法，建立一種簡(jiǎn)便、快速、半定量的辣椒素檢測(cè)方法。本發(fā)明所述的一種辣椒制品中辣椒素含量快速比色測(cè)定方法，通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)
(1)制備碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液分別配制濃度為O.lmol/L的碳酸鈉溶液和1.Omol/L的磷鑰酸-磷鎢酸溶液，將碳酸鈉溶液與磷鑰酸-磷鎢酸溶液按體積比30:1混合，即得碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液，濃度為1. Omol/L的磷鑰酸-磷鎢酸溶液的配制方法為稱取IOOg鎢酸鈉和20g磷鑰酸，加入60mL體積比濃度為85%的磷酸和700mL蒸懼水，煮沸2h,冷卻后過(guò)濾,用蒸懼水定容至IOOOmL ；
(2)制作標(biāo)準(zhǔn)比色板采用濃度梯度0,0.02,0. 05,0. 08,0. 10,0. 20，0. 40，0. 60，0. 80，1. 00,2. 00mg/mL的辣椒素甲醇溶液，分別與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比I 3混合顯色，根據(jù)反應(yīng)后的顏色及對(duì)應(yīng)的辣椒素濃度制作標(biāo)準(zhǔn)比色板；
(3)樣品處理對(duì)于含有蛋白質(zhì)的辣椒制品，首先將體積比濃度為65-75%的乙醇溶液與稱取的含有蛋白質(zhì)的辣椒制品，按50 mL lg的比例混合，在超聲功率為80-120 ，溫度45-55°C條件下處理35-45min以去除蛋白質(zhì),處理后反應(yīng)物分層，分離去掉蛋白質(zhì)后的辣椒制品，用甲醇與四氫呋喃1:1體積比混合液萃取其中的辣椒素10-20min，過(guò)濾后殘?jiān)僦貜?fù)萃取一次，合并濾液并按每10_20g樣品定容至IOOmL的比例定容，得待測(cè)辣椒素溶液；對(duì)于不含有蛋白質(zhì)的辣椒制品，直接稱取辣椒制品，用甲醇與四氫呋喃1:1體積比混合液萃取其中的辣椒素10_20min,過(guò)濾后殘洛再重復(fù)萃取一次,合并濾液并按每5_10g樣品定容至IOOmL的比例定容，得待測(cè)辣椒素溶液；
(4)將待測(cè)辣椒素溶液與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比1:3混合顯色，通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)比色板，得出辣椒素濃度。
上述方法步驟(2 )辣椒素甲醇溶液與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比1:3混合顯色后，可利用測(cè)色儀測(cè)定顯色后的L*、a*、b*值，記錄對(duì)應(yīng)的辣椒素濃度，將其帶入Photoshop軟件中制作出對(duì)應(yīng)的顏色,從而制成標(biāo)準(zhǔn)比色板,步驟(4)相應(yīng)用測(cè)色儀測(cè)定顏色，根據(jù)Λ L*和Λ b*值的變化得出辣椒素濃度。步驟(3 )所述不含有蛋白質(zhì)的辣椒制品包括辣椒油樹(shù)脂、辣椒素晶體以及辣椒油。本發(fā)明測(cè)定待測(cè)辣椒素溶液中辣椒素含量的范圍是O. 02-2. 00 mg/mL，其中最低檢出濃度為O. 02 mg/mL。加標(biāo)對(duì)照試驗(yàn)中，本發(fā)明與高效液相色譜法所測(cè)結(jié)果的相對(duì)誤差均在23%以下，最高為22. 84%，平均相對(duì)誤差為11. 37%，RSD為18. 28%。實(shí)際應(yīng)用中，測(cè)定一次需要用時(shí)50min，本發(fā)明測(cè)定辣椒素含量的相對(duì)誤差在30%以內(nèi)，其最大值為29. 82%，可以作為辣椒素含量的半定量測(cè)定。對(duì)于辣椒素含量超過(guò)2mg/mL的待測(cè)辣椒素溶液則需先按一定比例稀釋，再進(jìn)行測(cè)定。對(duì)于辣度的判斷結(jié)果則與高效液相色譜法的判斷結(jié)果完全一致。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明方法簡(jiǎn)便易學(xué)、反應(yīng)快速，測(cè)定一次只需要用時(shí)50min，測(cè)定較準(zhǔn)確、價(jià)格便宜，對(duì)環(huán)境和人員要求不高，可以克服高效液相色譜法成本高、耗時(shí)長(zhǎng)(3-4h)、儀器設(shè)備投入大、對(duì)場(chǎng)地和操作人員要求苛刻、不方便、不能滿足現(xiàn)場(chǎng)快速測(cè)定辣椒制品中辣椒素含量的不足。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。分別配制濃度為O. lmol/L的碳酸鈉溶液和1. Omol/L的磷鑰酸-磷鎢酸溶液，將碳酸鈉溶液與磷鑰酸-磷鎢酸溶液按體積比30:1混合，即得碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液，濃度為1. 0mol/L的磷鑰酸-磷鎢酸溶液的配制方法為稱取IOOg鎢酸鈉和20g磷鑰酸，加入60mL體積比濃度為85%的磷酸和700mL蒸餾水，煮沸2h，冷卻后過(guò)濾，用蒸餾水定容至 IOOOmL ；
按發(fā)明內(nèi)容所述方法制作標(biāo)準(zhǔn)比色板，0，0. 02,0. 05,0. 08,0. 10,0. 20,0. 40,0. 60，
0. 80，1. 00，2. 00mg/mL濃度梯度辣椒素甲醇溶液與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比1: 3混合顯色后，用測(cè)色儀測(cè)定顯色后的L*、a*、b*值，記錄對(duì)應(yīng)的辣椒素濃度，將其帶入Photoshop軟件中制作出對(duì)應(yīng)的顏色,從而制成標(biāo)準(zhǔn)比色板。實(shí)施例1 :不含有蛋白質(zhì)辣椒制品中辣椒素含量的測(cè)定。稱取辣椒油樹(shù)脂、辣椒素晶體以及辣椒油各10g，分別進(jìn)行如下操作于IOOmL高型燒杯中，加入甲醇與四氫呋喃1:1體積比混合液40mL萃取辣椒素lOmin，過(guò)濾后殘?jiān)僦貜?fù)萃取一次(IOmin)，合并濾液并定容至IOOmL,再與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比1: 3混合顯色，通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)比色板，進(jìn)行顏色的感官評(píng)定，并測(cè)定色差儀數(shù)據(jù)AL*和Ab*值的變化得出結(jié)果。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算平均值，與高效液相色譜法準(zhǔn)確測(cè)定的辣椒制品中辣椒素進(jìn)行比較得出辣椒油樹(shù)脂、辣椒素晶體以及辣椒油中辣椒素含量測(cè)定相對(duì)誤差分別為 4. 45%,5. 37% 和 14. 19%。本發(fā)明方法的精密度試驗(yàn)取辣椒素濃度為0.06mg/mL的辣椒素甲醇溶液，用本發(fā)明方法重復(fù)測(cè)定6次，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)比色板的顏色對(duì)照，辣椒素含量分別為0. 05mg/mL, O. 05mg/mL, 0. 08mg/mL, 0. 08mg/mL, 0. 08mg/mL, 0. 05mg/mL,計(jì)算出其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=O. 015。對(duì)于辣椒油樹(shù)脂、辣椒素晶體以及辣椒油這類不含有蛋白質(zhì)干擾的辣椒制品，本發(fā)明方法可以用作辣椒素含量的快速、半定量測(cè)定，其相對(duì)誤差在15%以內(nèi)，精密度RSD為O. 015。實(shí)施例2 :含有蛋白質(zhì)辣椒制品中辣椒素含量的測(cè)定。將13種不同辣度含有蛋白質(zhì)的辣椒制品各稱取20g，分別進(jìn)行如下操作首先 與1000 mL體積比濃度為70%的乙醇溶液混合，在超聲功率為100w，溫度50°C條件下處理40min以去除蛋白質(zhì)，辣椒制品中蛋白質(zhì)的去除率達(dá)到92. 00%，處理后反應(yīng)物分層，分離去掉蛋白質(zhì)后的辣椒制品，于IOOmL高型燒杯中，加入甲醇與四氫呋喃1:1體積比混合液40mL萃取辣椒素20min,過(guò)濾后殘洛再重復(fù)萃取一次(20min),合并濾液并定容至IOOmL,再與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比1: 3混合顯色，通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)比色板，進(jìn)行顏色的感官評(píng)定，并測(cè)定色差儀數(shù)據(jù)△!>和Ab*值的變化得出結(jié)果；根據(jù)測(cè)得的辣椒素含量，采用斯科維爾指數(shù)(Scoville Heat Units, SHU)法對(duì)辣椒制品的辣度進(jìn)行評(píng)價(jià)。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算平均值，與高效液相色譜法準(zhǔn)確測(cè)定的辣椒制品中辣椒素進(jìn)行比較，具體結(jié)果如表I所示
表I含有蛋白質(zhì)辣椒制品中辣椒素含量的測(cè)定結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種辣椒制品中辣椒素含量快速比色測(cè)定方法，其特征在于通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn) (1)制備碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液分別配制濃度為O.lmol/L的碳酸鈉溶液和1. Omol/L的磷鑰酸-磷鎢酸溶液，將碳酸鈉溶液與磷鑰酸-磷鎢酸溶液按體積比30:1混合，即得碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液，濃度為1. Omol/L的磷鑰酸-磷鎢酸溶液的配制方法為稱取IOOg鎢酸鈉和20g磷鑰酸，加入60mL體積比濃度為85%的磷酸和700mL蒸懼水，煮沸2h,冷卻后過(guò)濾,用蒸懼水定容至IOOOmL ； (2)制作標(biāo)準(zhǔn)比色板采用濃度梯度0，0.02，0. 05，0. 08，0. 10，0. 20，0. 40，0. 60，0.80，1. 00,2. 00mg/mL的辣椒素甲醇溶液，分別與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比I 3混合顯色，根據(jù)反應(yīng)后的顏色及對(duì)應(yīng)的辣椒素濃度制作標(biāo)準(zhǔn)比色板； (3)樣品處理對(duì)于含有蛋白質(zhì)的辣椒制品，首先將體積比濃度為65-75%的乙醇溶液與稱取的含有蛋白質(zhì)的辣椒制品，按50 mL lg的比例混合，在超聲功率為80-120 ，溫度45-55°C條件下處理35-45min以去除蛋白質(zhì),處理后反應(yīng)物分層，分離去掉蛋白質(zhì)后的辣椒制品，用甲醇與四氫呋喃1:1體積比混合液萃取其中的辣椒素10-20min，過(guò)濾后殘?jiān)僦貜?fù)萃取一次，合并濾液并按每10_20g樣品定容至IOOmL的比例定容，得待測(cè)辣椒素溶液；對(duì)于不含有蛋白質(zhì)的辣椒制品，直接稱取辣椒制品，用甲醇與四氫呋喃1:1體積比混合液萃取其中的辣椒素10_20min,過(guò)濾后殘洛再重復(fù)萃取一次,合并濾液并按每5_10g樣品定容至IOOmL的比例定容，得待測(cè)辣椒素溶液； (4)將待測(cè)辣椒素溶液與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比1:3混合顯色，通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)比色板，得出辣椒素濃度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種辣椒制品中辣椒素含量快速比色測(cè)定方法，其特征在于步驟(2)辣椒素甲醇溶液與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鑰酸顯色液按體積比1: 3混合顯色后，利用測(cè)色儀測(cè)定顯色后的L*、a*、b*值,記錄對(duì)應(yīng)的辣椒素濃度,將其帶入Photoshop軟件中制作出對(duì)應(yīng)的顏色，從而制成標(biāo)準(zhǔn)比色板，步驟(4)相應(yīng)用測(cè)色儀測(cè)定顏色，根據(jù)AL*和Ab*值的變化得出辣椒素濃度。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種辣椒制品中辣椒素含量快速比色測(cè)定方法，其特征在于步驟(3)所述不含有蛋白質(zhì)的辣椒制品是指辣椒油樹(shù)脂、辣椒素晶體或辣椒油。
全文摘要
一種辣椒制品中辣椒素含量快速比色測(cè)定方法，首先制備碳酸鈉-磷鎢酸-磷鉬酸顯色液，然后將不同濃度梯度辣椒素甲醇溶液與之混合顯色，制作標(biāo)準(zhǔn)比色板，最后將待測(cè)辣椒素溶液與碳酸鈉-磷鎢酸-磷鉬酸顯色液混合顯色，通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)比色板，得出辣椒素濃度，測(cè)定待測(cè)辣椒素溶液中辣椒素含量的范圍是0.02-2.00mg/mL。本發(fā)明方法簡(jiǎn)便易學(xué)、反應(yīng)快速，測(cè)定一次只需要用時(shí)50min，測(cè)定較準(zhǔn)確、價(jià)格便宜，對(duì)環(huán)境和人員要求不高，可以克服高效液相色譜法成本高、耗時(shí)長(zhǎng)(3-4h)、儀器設(shè)備投入大、對(duì)場(chǎng)地和操作人員要求苛刻、不方便、不能滿足現(xiàn)場(chǎng)快速測(cè)定辣椒制品中辣椒素含量的不足。
文檔編號(hào)G01N21/29GK103018242SQ201310001798
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2013年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月5日
發(fā)明者闞建全, 宋家芯, 張甫生, 鄭炯, 劉雄, 李帥 申請(qǐng)人:西南大學(xué)