一種草果與草豆蔻的指紋圖譜鑒別方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種可用于快速鑒別草果與草豆蔻的指紋圖譜鑒別方法。該法以乙酸乙酯、石油醚或二氯甲烷為萃取溶劑，采用超聲輔助萃取或冷浸法提取制備供試液，應(yīng)用GC-MS方法在一定條件下測(cè)得指紋圖譜并用于草果與草豆蔻的鑒別。科學(xué)試驗(yàn)證明，該法操作簡(jiǎn)便、快速；測(cè)得的指紋圖譜重復(fù)性高，特征性強(qiáng)，可用于草果和草豆蔻的快速鑒別與質(zhì)量控制。
【專利說(shuō)明】一種草果與草豆蔻的指紋圖譜鑒別方法

【技術(shù)領(lǐng)域】 _
[0001] 本發(fā)明涉及中藥鑒別領(lǐng)域，具體涉及一種草果與草豆蔻藥材的指紋圖譜鑒別方 法。

【背景技術(shù)】
[0002] 草果別名草果子，草果仁，始載于《本草綱目》，2〇1〇年版《中國(guó)藥典》記載草果為 姜科植物草果Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire的干燥成熟果實(shí)，具燥濕溫中，除痰截 皰的功效；而草豆蔻為姜科植物Alpinia Katsumadai Hayata的干燥近成熟的種子，具燥濕 行氣，溫中止嘔的功效；草果與草豆蘧功效不同，臨床應(yīng)用也有差異，但由于兩者同為姜科 藥材，其外形、氣味非常相似，常常容易混淆使用。為區(qū)別鑒定草果與草豆蔻，余南才等人從 性狀，來(lái)源，顯微，薄層色譜等方面對(duì)草果與草豆蘧進(jìn)行了鑒別比較。
[0003] 目前草果與草豆蔻藥材的鑒別主要是根據(jù)外觀氣味及顯微形態(tài)特征等傳統(tǒng)方法 來(lái)進(jìn)行，這些方法有的比較繁瑣，有的不夠客觀，有時(shí)仍不容易準(zhǔn)確鑒別；因此，建立一種與 國(guó)際接軌的、客觀先進(jìn)、快速準(zhǔn)確的草果與草豆蔻藥材的指紋圖譜鑒別方法，具有重要的意 義。
[0004] 近年來(lái)，色譜指紋圖譜已成為國(guó)際公認(rèn)的用于鑒別與控制中藥材質(zhì)量的最有效的 手段，它是現(xiàn)代分析科學(xué)的優(yōu)秀成果與中醫(yī)藥整體綜合觀的有機(jī)融合，是一種到目前為止 在國(guó)際上較為認(rèn)可的利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段所能達(dá)到的用于表現(xiàn)中藥復(fù)雜體系特性的最 好方法。GC-MS指紋圖譜是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的用于中藥揮發(fā)油成分分析與鑒別的一種方法， 與普通色譜指紋圖譜相比，它不僅可給出類似普通色譜指紋圖譜的峰型特征，還可同時(shí)對(duì) 各色譜峰的多個(gè)組份同時(shí)進(jìn)行快速定性，給出各個(gè)特征指紋峰的成分以及結(jié)構(gòu)。因此，在中 藥定性與鑒別方面，GC-MS指紋圖譜比普通色譜指紋圖譜的選擇性更強(qiáng)，具有更多的優(yōu)勢(shì)。 最近曾有應(yīng)用水蒸汽蒸餾或超臨界流體提取草果或草豆蔻揮發(fā)油，然后用GC-MS方法測(cè)定 其揮發(fā)油指紋圖譜的報(bào)道，但由于這些方法通常所需的藥材量較多，提取過(guò)程比較麻煩，提 取時(shí)間一般都比較長(zhǎng)；而且水蒸汽蒸餾法因?yàn)闇囟雀?、提取時(shí)間長(zhǎng)，可能還會(huì)造成部分有效 成分的破壞及損失，均不適用于作為藥材的快速鑒別方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] f發(fā)明的目的是提供一種可用于準(zhǔn)確快速鑒別草果與草豆蔻的指紋圖譜鑒別方 法。該法采用乙酸乙酯、二氯甲烷或石油醚為萃取溶劑，采用超聲輔助萃取或冷浸提取制備 供試品溶液，用GC-MS方法在一定條件下測(cè)得指紋圖譜并用于草果與草豆蔻的鑒別?？茖W(xué) 試驗(yàn)證明，該法簡(jiǎn)便、快速；所需藥材量少，測(cè)得的指紋圖譜特征及差異明顯，重復(fù)性高，可 用于草果和草豆蔻的準(zhǔn)確快速鑒別與質(zhì)量控制。
[0006]本發(fā)明的草果與草豆蔻藥材的指紋圖譜鑒別方法具體包括以下步驟：
[0007] ⑴供試品溶液的制備：取草果和草豆蔻藥材粉末4-6克，精密稱定，分置于兩個(gè) 錐形瓶中，分別加入乙酸乙酯、二氯甲烷或石油醚20-30ml，冷浸24小時(shí)或超聲輔助提取 30-40分鐘，放冷，加相應(yīng)溶劑補(bǔ)足失去的重量，過(guò)濾，取續(xù)濾液置離心管中，用無(wú)水硫酸鈉 千燥去除水分，以l3〇〇〇r/min離心10分鐘，取上清液，即得草果和草豆蔻藥材的供試品溶 液；
[0008] (2)色譜分析條件：彈性石英毛細(xì)管色譜柱，以高純He為載氣，流量1. 〇ml/min ; 進(jìn)樣口溫度230°C -25〇°C ;不分流進(jìn)樣；采用程序升溫進(jìn)行分析；
[0009] (3)質(zhì)譜分析條件：電離方式為EI，電子能量70eV，檢測(cè)器溫度250? -280°c，離 子源溫度230Γ，四級(jí)桿溫度150°C，倍增電壓1782v，發(fā)射電流34. 6μΑ，掃描質(zhì)量范圍： 50-500amu ;溶劑延遲 3. Omin ;
[0010] ⑷測(cè)定方法：分別取草果和草豆蔻的供試液各1 μ 1，注入GC-MS聯(lián)用儀，測(cè)定草 果和草豆蔻的總離子流圖，即得兩藥材的鑒別用指紋圖譜。
[0011] 經(jīng)過(guò)研究，本發(fā)明優(yōu)化的草果與草豆蓮藥材的指紋圖譜鑒別方法按以下步驟實(shí) 施：
[0012] (1)供試品溶液的制備：取草果和草豆蔻藥材粉末5克，精密稱定，分置于兩個(gè)錐 形瓶中，分別加入乙酸乙酯20ml，超聲輔助提取30分鐘，放冷，加乙酸乙酯補(bǔ)足失去的重 量，過(guò)濾，取續(xù)濾液置離心管中，用無(wú)水硫酸鈉干燥去除水分，以13〇〇〇r/min離心10分鐘， 取上清液，即得草果和草豆蔻藥材的供試品溶液；
[0013] (2)色譜分析條件：HP-5MS UI彈性石英毛細(xì)管色譜柱，其規(guī)格為 3〇111\0.2511111^0.254111;載氣為高純拖，純度彡 99.99%，流量1.〇1111/1^11;進(jìn)樣口溫度 250°C ;不分流進(jìn)樣；程序升溫程序?yàn)椋撼跏紲囟?0°C，保持3min，以6°C /min升至180°C， 保持3min ;
[0014] ⑶質(zhì)譜分析條件：電離方式為EI，電子能量70eV，檢測(cè)器溫度280°C，離子源溫度 2 3〇°C，四級(jí)桿溫度l5〇°C，倍增電壓1782v，發(fā)射電流34. 6μ A，掃描質(zhì)量范圍：50-500amu ; 溶劑延遲3. Omin ;
[0015] (4)測(cè)定方法：分別取草果和草豆蔻的供試液各1 μ 1，注入GC-MS聯(lián)用儀，測(cè)定草 果和草豆蘧的總離子流圖，即得兩藥材的鑒別用指紋圖譜；
[0016] (5)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立：測(cè)定10批不同產(chǎn)地草果與草豆蔻的GC-MS指紋圖譜， 應(yīng)用計(jì)算機(jī)對(duì)指紋圖譜的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析對(duì)比，計(jì)算得出草果與草豆蔻的GC-MS指紋圖譜的 共有模式，作為草果與草豆蔻藥材的鑒別用標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；草果指紋圖譜共有模式中具有 16個(gè)共有特征指紋峰，各特征峰對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分分別是1號(hào)峰： α -蒎烯；2號(hào)峰：β -菠 烯；3號(hào)峰：α -水芹烯；4號(hào)峰：桉油精；5號(hào)峰：α -松油醇；6號(hào)峰：順式-檸檬醛；7號(hào) 峰：香葉醇；9 號(hào)峰：反式-抒檬醛；10 號(hào)峰：trans-2,3,3α，7a-tetr-ahydro-lH-indene -4-carbaldehyde ;11 號(hào)峰：cis-2,3,3a，7a -tetr-ahydro-lH-indene-4-carbaldehyde ; l2號(hào)峰：2,3-二氫-1H-茚-4-甲醛；13號(hào)峰：乙酸香葉酯；14號(hào)峰：順式-環(huán)癸烯；15號(hào) 峰：反式-2-十二烯醛；16號(hào)峰：橙花叔醇。其中以桉油精的相對(duì)含量為最高。草豆蔻指紋 圖譜共有模式有13個(gè)共有特征峰，各特征峰對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分分別是1號(hào)峰： α -蔽烯；2號(hào) 峰：莰烯；3號(hào)峰：α -水芹烯；4號(hào)峰：對(duì)-聚傘花烴；5號(hào)峰：桉油精；6號(hào)峰：樟腦；7號(hào)峰： L-(-)-龍腦；8號(hào)峰：(-)-4-萜品醇；9號(hào)峰：4-苯基-2-丁酮；10號(hào)峰：反式-桂皮醛；11 5峰：α -石竹痛；I2號(hào)峰：δ -杜松烯；I3號(hào)峰：金合歡醇。其中以金合歡醇的相對(duì)含量為 最高。
[0017] (6)應(yīng)用：將待測(cè)藥材樣品的GC-MS指紋圖譜分別與草果與草豆蔻藥材的標(biāo)準(zhǔn)指 紋圖譜進(jìn)行對(duì)比，根據(jù)特征指紋峰位及主要特征峰面積的大小，即可確定藥材的品種與質(zhì) 量。
[0018] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其主要優(yōu)點(diǎn)及積極效果在于：
[0019] ⑴本發(fā)明草果和草豆蔻藥材GC-MS指紋圖譜的鑒別方法，系采用超聲輔助提取 的方法制備供試品溶液，與現(xiàn)有水蒸汽蒸餾法或超臨界流體法提取草果和草豆蘧揮發(fā)油測(cè) 定指紋圖譜的技術(shù)相比，所需藥材量要少得多，提取分析過(guò)程更加簡(jiǎn)單快捷，從供試品制備 到完成指紋圖譜分析所需時(shí)間不到1個(gè)小時(shí)，并可避免水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油過(guò)程中由于 提取溫度高、提取時(shí)間長(zhǎng)所造成的部分化學(xué)成分的破壞與損失，方法重復(fù)性及穩(wěn)定性更好。
[0020] ⑵與傳統(tǒng)鑒別方法相比，本法操作簡(jiǎn)便，過(guò)程簡(jiǎn)單且易于控制，方法重復(fù)性及與 準(zhǔn)確性好，特征性強(qiáng)，只需通過(guò)視覺(jué)直觀辨識(shí)待測(cè)圖譜與標(biāo)準(zhǔn)圖譜的異同便可進(jìn)行藥材的 快速鑒別，結(jié)果更加客觀準(zhǔn)確。
[0021] (3)本發(fā)明的草果和草豆蔻藥材的指紋圖譜鑒別方法，不僅可給出色譜指紋圖譜 的特征峰型，還可同時(shí)給出各特征指紋峰的成分以及結(jié)構(gòu)，方法特征性更好，具有更多的優(yōu) 勢(shì)。
[0022] ⑷本發(fā)明的指紋圖譜鑒別方法，通過(guò)觀察待測(cè)藥材特征指紋峰的有無(wú)及主要成 分特征峰面積的大小，可用于判斷藥材質(zhì)量的優(yōu)劣，保證藥材質(zhì)量的穩(wěn)定、均一和可控。 [0023]本發(fā)明的檢測(cè)方法，是通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)摸索得到的切實(shí)可行的方法，具有可重復(fù)性 和較好的穩(wěn)定性，根據(jù)本發(fā)明所公開(kāi)的技術(shù)內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員將很清楚本發(fā)明的其它 實(shí)施方案，但只要使用本發(fā)明所述的檢測(cè)方法，均在本發(fā)明保護(hù)范圍之內(nèi)。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】：
[0024] 附圖1草果GC-MS指紋圖譜共有模式
[0025] 附圖2草豆蔻GC-MS指紋圖譜共有模式
[0026] 附圖3石油醚超聲輔助萃取測(cè)得的草果GC-MS指紋圖譜
[0027]附圖4二氯甲烷超聲輔助萃取測(cè)得的草果GC-MS指紋圖譜
[0028] 附圖5乙酸乙酯超聲輔助萃取測(cè)得的草果GC-MS指紋圖譜
[0029] 附圖6乙酸乙酯冷浸提取法測(cè)得的草果GC-MS指紋圖譜 [0030]附圖7乙酸乙酯回流提取法測(cè)得的草果 GC-MS指紋圖譜

【具體實(shí)施方式】
[0031]下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，本發(fā)明的實(shí)施例僅作為示例，旨在說(shuō) 明本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。
[0032]實(shí)施例1草果與草豆蔻藥材的指紋圖譜共有模式的測(cè)定 [0033] 1實(shí)驗(yàn)材料
[0034] 1.1實(shí)驗(yàn)藥材：實(shí)驗(yàn)用草果、草豆蔻藥材購(gòu)于全國(guó)各省市的大藥房。草果藥材經(jīng) 廣西中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室蔡毅教授鑒定為姜科豆蔻屬植物草果（Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire)的干燥成熟果實(shí)；草豆蔻為姜科山姜屬植物草豆蔻（Alpinia Katsumadai Hayata)的干燥成熟果實(shí)。
[0035] 1· 2實(shí)驗(yàn)藥材的前處理：取各產(chǎn)地草果、草豆蘧果仁，用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)40目篩網(wǎng)， 備用。
[0036] 1.3實(shí)驗(yàn)試劑：乙酸乙酯（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），無(wú)水硫酸鈉（分 析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠）。
[0037] 2.實(shí)驗(yàn)儀器：美國(guó)安捷倫公司6890Ν-5973Ν氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀；HP-5MS UI彈性 石英毛細(xì)管色譜柱（30mX0_25mmX0_25ym) :LG16_WA臺(tái)式高速離心機(jī)（北京醫(yī)用尚心機(jī) 廠）；離心管；KQ5200B型超聲波清洗器（250W,頻率50KHz)，40目篩網(wǎng)，G1701DA MSD化學(xué) 工作站。
[0038] 3. GC-MS 分析條件
[0039] 3. 1色譜條件：載氣He (彡99· 99% )流量（1. Oml/min);進(jìn)樣口溫度25〇°C ;不分 流進(jìn)樣；氣化溫度250? ;進(jìn)樣量1 μ 1 ;溶劑延遲3. Omin ;程序升溫：初始溫度8〇°C,保持 3min，以 6°C /min 升至 180°C保持 3min。
[0040] 3.2質(zhì)譜條件：電離方式EI，電子能量70eV，檢測(cè)器溫度：280°C，離子源溫度 230°C，四級(jí)桿溫度150°C，倍增電壓1782v，發(fā)射電流34.6μΑ，掃描質(zhì)量范圍：50-500amu。
[0041] 4.供試品溶液的制備：取草果，草豆蘧藥材粉末5g，精密稱定，置錐形瓶中，加入 20ml乙酸乙酯，超聲提取 3〇min，提取液補(bǔ)足失重后用濾紙過(guò)濾，取續(xù)濾液置離心管中，用 無(wú)水硫酸鈉干燥去除水分，以13〇〇〇r/min離心10分鐘，取上清液備測(cè)。
[0042] 5.測(cè)定方法：分別取草果和草豆蔻的供試液各1 μ 1，注入GC-MS聯(lián)用儀，測(cè)定草果 和草豆蘧的總離子流圖，即得。
[0043] 6.草果與草豆蔻GC-MS特征指紋峰的確定
[0044] 通過(guò)對(duì)10批不同產(chǎn)地草果藥材測(cè)得的指紋圖譜進(jìn)行分析比對(duì)，確定了草果藥材 具有16個(gè)特征指紋峰，分別為1號(hào)峰：α -菔烯；2號(hào)峰：β -蔽痛；3號(hào)峰：α -水芳^希；4號(hào) 峰：桉油精；5號(hào)峰：α -松油醇；6號(hào)峰：順式-檸檬醛；7號(hào)峰：香葉醇；8號(hào)峰：未知；9號(hào) 峰：反式-梓檬醛；1〇 號(hào)峰：trans_2,3,3a，7α -tetr-ahydro-lH-indene-4-carbaldehyd e ;11 號(hào)峰：cis-2,3,3α，7α -tetr-ahydro-lH-indene-4-carbaldehyde ;12 號(hào)峰：2,3-二 氫-1H-茚-4-甲醛；13號(hào)峰：乙酸香葉酯；14號(hào)峰：順式-環(huán)癸烯；15號(hào)峰：反式-2-十二 烯醛；16號(hào)峰：橙花叔醇。通過(guò)對(duì)測(cè)得的各產(chǎn)地草豆蔻藥材指紋圖譜的分析對(duì)比，確定了 草豆蓮藥材具有13個(gè)特征指紋峰，各特征峰對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分分別是1號(hào)峰：α -蒎烯；2號(hào) 峰：茨?。?號(hào)峰：α -水斧燥；4號(hào)峰：對(duì)-聚傘花烴；5號(hào)峰：桉油精；6號(hào)峰：樟腦；7號(hào)峰： L-龍腦；8號(hào)峰：(-)-4-萜品醇；9號(hào)峰：4_苯基-2-丁酮；10號(hào)峰：反式-桂皮醛；11 號(hào)峰：α -石竹烯；12號(hào)峰：δ -杜松烯；13號(hào)峰：金合歡醇。
[0045] 7.指紋圖譜方法學(xué)考察及結(jié)果
[0046] 草果指紋圖譜中13號(hào)峰為乙酸香葉酯，是草果的主要成分之一，且此峰在指紋圖 譜中位置居中，峰面積穩(wěn)定，分離度良好，故選取乙酸香葉酯作為草果指紋圖譜的參照峰 (S)，用來(lái)計(jì)算各特征峰與參比峰的保留時(shí)間比值（相對(duì)保留時(shí)間）和各特征峰與參比峰的 峰面積比值（相對(duì)峰面積）。在儀器精密度考察中各特征峰與參照峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD 值在0· 01%?0· 04%之間，相對(duì)峰面積的RSD值在0. 95%?2. 8%之間；在方法重復(fù)性考 察中各特征峰與參比峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD值在0· 01%?0. 07%之間，相對(duì)峰面積的RSD 值在1. 2%?2. 9%之間；在穩(wěn)定性考察中各特征峰與參比峰在24小時(shí)內(nèi)其相對(duì)保留時(shí)間 RSD值在0· 02%?0· 11 %之間，相對(duì)峰面積的RSD值在1. 1 %?2. 8%之間，符合指紋圖譜 測(cè)定的相關(guān)技術(shù)要求。
[0047] 8.草果及草豆蘧藥材GC-MS指紋圖譜共有模式的測(cè)定
[0048] 分別取10批不同產(chǎn)地的草果與草豆蘧按"供試品溶液的制備"方法制備供試品溶 液，按"GC-MS分析條件"注入儀器檢測(cè)分析，用峰面積歸一化法計(jì)算各特征指紋峰成分的相 對(duì)百分含量。
[0049] 應(yīng)用計(jì)算機(jī)對(duì)測(cè)得的10批草果與草豆蔻的GC-MS指紋圖譜的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析對(duì)比， 計(jì)算得出草果與草豆蔻的GC-MS指紋圖譜的共有模式，分別見(jiàn)附圖1與附圖2。
[0050]將草果與草豆蔻的GC-MS指紋圖譜中各特征指紋峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖通過(guò)用伩器配 置的化學(xué)工作站NIST〇8標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)進(jìn)行檢索，并結(jié)合相關(guān)質(zhì)譜文獻(xiàn)進(jìn)行分析比對(duì)，鑒定得出 草果與草豆蔻GC-MS指紋圖譜共有模式中各特征指紋峰所對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分名稱，分別見(jiàn)表 1和表2。
[0051] 表1草果GC-MS指紋圖譜中16個(gè)特征指紋峰特征成分表
[0052]

【權(quán)利要求】
1. 一種草果與草豆蘧的指紋圖譜鑒別方法，其特征在于該法是一種采用溶劑超聲輔助 萃取或冷浸提取制備供試液，采用GC-MS方法在一定條件下測(cè)得指紋圖譜并用于鑒別的方 法，具體包括以下測(cè)定條件及步驟： (1)供試品溶液的制備：取草果和草豆蘧藥材粉末4-6克，精密稱定，分置于兩個(gè)錐形 瓶中，分別加入萃取溶劑20-30ml，冷浸24小時(shí)或超聲輔助萃取30-40分鐘，放冷，加萃取 溶劑補(bǔ)足失去的重量，過(guò)濾，取續(xù)濾液置離心管中，用無(wú)水硫酸鈉干燥去除水分，以13000r/ min離心10分鐘，取上清液，即得草果和草豆蘧藥材的供試品溶液； ⑵色譜分析條件：HP-5MS Π 彈性石英毛細(xì)管色譜柱，其規(guī)格為 30mX0. 25mmX0. 25μπι;載氣為高純He，純度彡99. 99 %，流量1. Oml/min ;進(jìn)樣口溫度 250°C ;不分流進(jìn)樣；程序升溫程序?yàn)椋撼跏紲囟?0°C，保持3min，以6°C /min升至180°C， 保持3min ; (3)質(zhì)譜分析條件：電離方式為EI，電子能量70eV，檢測(cè)器溫度280°C，離子源溫度 230°C，四級(jí)桿溫度150°C，倍增電壓1782v，發(fā)射電流34. 6μΑ，掃描質(zhì)量范圍：50-500amu; 溶劑延遲3. Omin ; ⑷測(cè)定法：分別取草果和草豆蘧的供試液各1 μ 1，注入GC-MS聯(lián)用儀，測(cè)定草果和草 豆蘧的總離子流圖，即得兩藥材的GC-MS指紋圖譜； (5) 標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立：測(cè)定10批不同產(chǎn)地草果與草豆蘧的GC-MS指紋圖譜，應(yīng)用 計(jì)算機(jī)對(duì)指紋圖譜的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析對(duì)比，計(jì)算得出草果與草豆蘧的GC-MS指紋圖譜的共有 模式，作為草果與草豆蘧藥材的鑒別用標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜； (6) 應(yīng)用：將待測(cè)樣品的GC-MS指紋圖譜分別與草果與草豆蘧藥材的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn) 行對(duì)比，根據(jù)特征指紋峰位及主要特征峰面積的大小，即可確定藥材的品種與質(zhì)量。
2. 如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜鑒別方法，其特征在于所述的萃取溶劑是乙酸乙酯、 二氯甲烷或石油醚。
3. 如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜鑒別方法，其特征在于所述的最佳萃取溶劑為乙酸乙 酯，所需最佳萃取溶劑量為藥材的4-5倍，超聲萃取時(shí)間為30分鐘。
4. 如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜鑒別方法，其特征在于：草果指紋圖譜共有模式中具 有16個(gè)共有特征峰，各特征峰對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分分別是：1號(hào)峰：α -菔烯，2號(hào)峰：β -菔烯， 3號(hào)峰：α -水療烯，4號(hào)峰：桉油精，5號(hào)峰：α -松油醇，6號(hào)峰：順式-朽1檬醒，7號(hào)峰：香 葉醇，9 號(hào)峰：反式-朽1 樣醒，10 號(hào)峰：trans-2, 3, 3 α，7 α -tetr-ahydro-lH-indene-4-ca rbaldehyde，11 號(hào)峰：cis_2,3,3 α，7 a-tetr-ahydr〇-lH-indene-4-ca;rbaldehyde，12 號(hào) 峰：2, 3-二氫-1H-茚-4-甲醒，13號(hào)峰：乙酸香葉酯，14號(hào)峰：順式-環(huán)癸烯，15號(hào)峰：反 式-2-十二烯醛，16號(hào)峰：橙花叔醇，其中以桉油精的相對(duì)含量為最高；草豆蘧指紋圖譜共 有模式中具有13個(gè)共有特征峰，各特征峰對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分分別是1號(hào)峰：α -菔烯，2號(hào) 峰：莰烯，3號(hào)峰：α -水芹烯，4號(hào)峰：對(duì)-聚傘花烴，5號(hào)峰：桉油精，6號(hào)峰：樟腦，7號(hào)峰： L-(-)_龍腦，8號(hào)峰：(-)-4-萜品醇，9號(hào)峰：4_苯基-2-丁酮，10號(hào)峰：反式-桂皮醛，11 號(hào)峰：α -石竹烯，12號(hào)峰：δ -杜松烯，13號(hào)峰：金合歡醇；其中以金合歡醇的相對(duì)含量為 最1?。
5. 權(quán)利要求1所述的指紋圖譜鑒別方法在草果和草豆蘧藥材的鑒別與質(zhì)量控制方面 的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK104297373SQ201410528048
【公開(kāi)日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2014年10月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月10日
【發(fā)明者】覃潔萍, 何俏明, 李耀華, 梁臣艷 申請(qǐng)人:廣西中醫(yī)藥大學(xué)