本發(fā)明涉及一種便攜式展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電化學(xué)傳感器，屬于快速檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

展青霉素(patulin，pat)，又稱展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素，它是由曲霉和青霉等真菌產(chǎn)生的一種次級代謝產(chǎn)物，展青霉素具有廣譜的抗生素特點。然而，由于它的毒性作用，對胃具有刺激作用，導(dǎo)致反胃和嘔吐，毒理學(xué)試驗表明，展青霉素具有影響生育、致癌和免疫等毒理作用，同時也是一種神經(jīng)毒素。展青霉素具有致畸性，對人體的危害很大，導(dǎo)致呼吸和泌尿等系統(tǒng)的損害，使人神經(jīng)麻痹、肺水腫、腎功能衰竭。展青霉素首先在霉?fàn)€蘋果和蘋果汁中發(fā)現(xiàn)，廣泛存在于各種霉變水果和青貯飼料中。鑒于展青霉素的嚴(yán)重危害性，目前世界上已有十幾個國家制定了水果及其制品中展青霉素的最高限量標(biāo)準(zhǔn)。國際上建議人類食用的蘋果產(chǎn)品中的展青霉素殘留量小于50μg/kg，而很多國家將果汁中的展青霉素殘留量調(diào)整在更為嚴(yán)格的范圍。2004年4月，由歐盟委員會通過的果汁準(zhǔn)入新標(biāo)準(zhǔn)已在歐盟各成員國施行。果汁、特別是蘋果汁及含蘋果汁的酒精飲料中，展青霉素最大限量為50μg/kg，固體蘋果產(chǎn)品中，展青霉素最大限量為25μg/kg，兒童用蘋果汁和嬰兒食品中，展青霉素最大限量為10μg/kg。相對于我國國家標(biāo)準(zhǔn)gb14974-2003《蘋果和山楂制品中展青霉素限量》中的相應(yīng)規(guī)定(50μg/kg)，歐盟新的標(biāo)準(zhǔn)對我國的蘋果汁質(zhì)量提出了更高的要求。與其他真菌毒素不同，現(xiàn)在還沒有商品化的展青霉素elisa試劑盒。展青霉素霉素檢測的常見方法包括薄層色譜法(tlc)、氣相色譜法(gc)和高效液相色譜法(hplc)。其中，hplc結(jié)合紫外檢測器分析檢測展青霉素已經(jīng)逐漸成為常規(guī)的方法。然而傳統(tǒng)的hplc方法的樣品處理方法以及產(chǎn)品中共存的干擾物5-羥甲基糠醛嚴(yán)重影響了展青霉素檢測的速度和準(zhǔn)確性。所以，研究開發(fā)檢測速度快、精確度高、檢測限低并具有較高特異性的檢測方法勢在必行。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，本發(fā)明提供了一種用于快速檢測的便攜式展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印電化學(xué)傳感器并將其用于展青霉素檢測。

本發(fā)明的第一個目的是提供一種分子印跡絲網(wǎng)印刷電極，所述子印跡絲網(wǎng)印刷電極是先在工作絲網(wǎng)印刷電極表面修飾碳量子點和殼聚糖，然后在工作絲網(wǎng)印刷電極表面電鍍沉積金納米粒子，再通過金硫鍵修飾對巰基苯胺；將得到的修飾了對巰基苯胺的絲網(wǎng)印刷電極浸置在與待測物質(zhì)具有相似結(jié)構(gòu)的模板分子溶液中，孵育一段時間，再置于電聚合液中，電鍍聚合，洗脫模板分子，工作絲網(wǎng)印刷電極表面形成分子印跡聚合物膜，即得到分子印跡絲網(wǎng)印刷電極。

在一種實施方式中，所述在電極表面修飾碳量子點和殼聚糖，是制備含有殼聚糖和碳量子點的碳量子點---殼聚糖修飾液，然后吸取修飾液滴加到工作電極上，干燥。

在一種實施方式中，所述電鍍沉積金納米粒子，具體是：將工作電極置于2.43mmol·l^-1氯金酸和0.1mol·l^-1硫酸溶液中，在電位-0.2v電壓下，電沉積時間為120s，以完成電鍍。

在一種實施方式中，所述通過金硫鍵修飾對巰基苯胺，具體是：將電鍍沉積金納米粒子后的絲網(wǎng)印刷電極浸置于60mmol·l^-1對巰基苯胺乙醇溶液中，室溫浸泡24h，之后用乙醇和水徹底清洗去除未吸附的對巰基苯胺，氮氣吹干備用。

在一種實施方式中，所述模板分子溶液的濃度為10mmol·l^-1。

在一種實施方式中，所述電鍍聚合具體是：將靜電吸附后的絲網(wǎng)印刷電極浸入10ml含有60mmol·l^-1對巰基苯胺，50mmol·l^-1四丁基高氯酸銨，10mmol·l^-1模板分子和0.2g·l^-1氯金酸，采用循環(huán)伏安法掃描，電聚合電壓為：-0.2v-1.2v，掃描速率為：50mv/s，掃描圈數(shù)為：15。

在一種實施方式中，所述待測物質(zhì)為展青霉素，模板分子為2-吲哚酮。

本發(fā)明的第二個目的是提供一種檢測展青霉素的方法，所述方法是利用本發(fā)明分子印跡絲網(wǎng)印刷電極制備電化學(xué)傳感器進行檢測。

在一種實施方式中，所述方法是將含有待測樣品的電導(dǎo)液60～100μl滴加到展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極表面，靜置吸附50～210s，然后將展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極水平插入電化學(xué)檢測器中；檢測器在設(shè)置一定的電壓下，由對電極發(fā)出電子流經(jīng)電導(dǎo)液，再從工作電極流回工作站時形成的電流值會被記錄，根據(jù)產(chǎn)生的電流峰值與標(biāo)準(zhǔn)樣品中展青霉素的濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，最終計算得到待測樣品中展青霉素的濃度。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的獲得方法是：制備含有不同已知濃度的展青霉素電導(dǎo)液，滴加到展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極表面，并插入到電化學(xué)檢測器中，檢測電子從對電極，經(jīng)過電導(dǎo)液，再從工作電極流回工作站時形成的電流峰值，以展青霉素濃度為橫坐標(biāo)，峰電流值為縱坐標(biāo)，即得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；其中電導(dǎo)液中展青霉素濃度范圍：1×10^-12～1×10^-9moll^-1。

在一種實施方式中，電化學(xué)檢測器的電壓設(shè)置范圍：0.0v～0.2v，記錄掃描中的電流峰值；展青霉素濃度與電流峰值之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線i(μa)＝-21.111logc(moll^-1)–125.74(r²＝0.9907)。

在一種實施方式中，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線已內(nèi)置于電化學(xué)檢測器程序中，展青霉素濃度與電流峰值之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線i(μa)＝-21.111logc(moll^-1)–125.74(r²＝0.9907).。進行計算，最后將測得的樣品中展青霉素濃度顯示在led屏上。

在一種實施方式中，所述電化學(xué)檢測器為便攜式電化學(xué)檢測器，是簡易式電化學(xué)工作站，配備led顯示屏，展青霉素濃度與電流峰值之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線已內(nèi)置于便攜式電化學(xué)檢測器程序中，待測樣品中目標(biāo)物質(zhì)濃度能顯示于led顯示屏上。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述含有待測樣品的電導(dǎo)液是待測樣品溶液與2.5mmol·l^-1[fe(cn)6]^3/4和0.1mol·l^-1kcl溶液的混合。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述電導(dǎo)液是待測樣品溶液與導(dǎo)電溶液(2.5mmol·l^-1[fe(cn)6]^3/4和0.1mol·l^-1kcl溶液)按照體積比1:9混合。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述含有待測樣品的電導(dǎo)液滴加到分子印跡絲網(wǎng)印刷電極表面的體積是60μl。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述靜置吸附時間為200s。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述方法，還包括先插入標(biāo)準(zhǔn)品分子印跡絲網(wǎng)印刷電極，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線校正便攜式電化學(xué)檢測器的檢測結(jié)果，然后再插入滴加有待測樣品的展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極檢測待測樣品中展青霉素濃度。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述方法是插入兩個以上的標(biāo)準(zhǔn)品分子印跡絲網(wǎng)印刷電極對檢測器進行校正。

本發(fā)明的第三個目的是提供一種便攜式展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電化學(xué)傳感器，包括外插型一次性展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極和便攜式電化學(xué)檢測器，其運行方式是將含有待測樣品的電導(dǎo)液60～100μl滴加到展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極表面，靜置吸附時間為50～200s，然后將一次性電極水平插入便攜式電化學(xué)檢測儀卡槽內(nèi)，檢測讀數(shù)；所述便攜式電化學(xué)檢測器的電壓設(shè)置范圍：0.0v～0.2v，記錄掃描中的電流峰值，根據(jù)展青霉素濃度與電流峰值之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行計算，最后將測得的樣品中展青霉素的濃度顯示在led屏上。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極的制備方法如前面所述。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述分子印跡絲網(wǎng)印刷電極，包括電極基片、接線端子、電極連線、工作電極、對電極、絕緣層；所述工作電極表面電鍍了展青霉素分子印跡聚合物膜。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述分子印跡絲網(wǎng)印刷電極，電極基片為一次性消費基片，工作電極，對電極與參比電極由電極連線導(dǎo)出，形成凸型三線式插口，可插入便攜式電化學(xué)檢測器，檢測讀數(shù)。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述分子印跡絲網(wǎng)印刷電極，其電極基片印制了接線端子、電極連線與工作電極連成一體的一條電極基體和接線端子、電極連線與對電極連成一體的另一條電極基體，兩條電極連線相互平行，電極連線在電極基體的中間部分，其表面涂覆一層pvc絕緣體。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述分子印跡絲網(wǎng)印刷電極，工作電極的形狀為圓形塊狀，對電極的形狀為與工作電極同心相離的半圓環(huán)形塊狀，工作電極表面電鍍聚合展青霉素分子印跡膜。

本發(fā)明的優(yōu)點和效果：

(1)便攜式檢測器主要突出快速、小巧、靈敏三大特征。應(yīng)用范圍廣泛，只需要更改分子印跡膜，重新設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以完成大多數(shù)能夠制備分子印跡的化學(xué)物質(zhì)的檢測。

(2)本發(fā)明在修飾材料上進行了創(chuàng)新，碳量子點是一種粒徑小于10nm、微觀近乎準(zhǔn)球形、有熒光性能的碳納米顆粒。具備天然的的環(huán)境友好性和生物相容性，同時碳量子點表面豐富的官能團不僅使其具有良好的溶劑分散性，而且易于其它功能化修飾。采用碳量子點，殼聚糖，金納米粒子三重修飾，改善了絲網(wǎng)印刷電極的穩(wěn)定性，提高了靈敏度；本發(fā)明檢測的目標(biāo)物展青霉素具有一定的電化學(xué)活性，在電聚合過程種，結(jié)構(gòu)可能會有一定的改變，因此在此理論基礎(chǔ)上，本發(fā)明采用了與展青霉素具有相似結(jié)構(gòu)的2-吲哚酮作為模板分子，進行電鍍聚合，結(jié)果也表明在此方法基礎(chǔ)上的分子印跡絲網(wǎng)印刷電極傳感器對展青霉素具有很高的選擇性。

(3)可以用于多種物質(zhì)的檢測，只需要替換電鍍聚合不同被檢測物的分子印跡模板分子，就可以制備得到各種需要檢測的分子印跡膜的絲網(wǎng)印刷電極，在有已知濃度標(biāo)準(zhǔn)物分子印跡絲網(wǎng)印刷電極片的設(shè)置下，可以使得便攜式電化學(xué)檢測儀得到校正，然后檢測所需要檢測的分子印跡模板分子的量。同時每次檢驗都需要更換分子印跡絲網(wǎng)印刷電極片，避免重復(fù)使用帶來的不穩(wěn)定性。

(4)絲網(wǎng)印刷電極表面復(fù)合修飾納米碳材料和電鍍納米金，用于增強而后電鍍聚合的分子印跡聚合膜的接觸比表面積，同時增加電子傳遞速率，而增大靈敏度。

(5)采用分子印跡聚合膜來作為識別靶點，檢測特異性強，同時分子印跡電化學(xué)傳感器兼具有可以實現(xiàn)現(xiàn)場檢測，不受樣品顏色、濁度的影響，樣品可以不經(jīng)復(fù)雜處理、無需分離的優(yōu)點。結(jié)合能夠快速靈敏檢測的電化學(xué)分析方法，加上絲網(wǎng)印刷電極的低成本、高性能，使得能夠快速、便捷的檢測樣品中的展青霉素。

(6)本發(fā)明的檢測儀是一種能夠真正的解決市場需要，能夠滿足工商部門，質(zhì)檢機構(gòu)，科研高校等機構(gòu)的檢測需要的快速檢測產(chǎn)品，可用于生產(chǎn)經(jīng)營企業(yè)、質(zhì)控人員、進出口檢商、政府管理部門、醫(yī)院甚至個人家庭的使用，適用于食品工業(yè)、飼料行業(yè)、環(huán)境保護、醫(yī)學(xué)藥篩和生物化學(xué)等領(lǐng)域。

附圖說明

圖1：展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極片的制備示意圖；

圖2：復(fù)合修飾碳量子點，殼聚糖，金納米粒子的電化學(xué)行為表征；(a)spe，(b)aunps/spe，(c)aunps/cs/spe，(d)aunps/cs-cds/spe，掃描速度：0.05vs；

圖3：(a)絲網(wǎng)印刷分子印跡聚合膜在2moll^-1h2so4中洗脫不同時間的dpv響應(yīng)值(b)絲網(wǎng)印刷分子印跡膜在2.5×10^-10moll^-1展青霉素中孵育不同時間后的dpv響應(yīng)值；

圖4：便攜式展青霉素分子印跡電化學(xué)傳感器結(jié)構(gòu)圖；(a)工作電極；(b)對電極；(c)參比電極；(d)絕緣層；(e)電極基片；(f)導(dǎo)電銀漿；

圖5：便攜式展青霉素分子印跡電化學(xué)傳感器標(biāo)準(zhǔn)曲線檢測：絲網(wǎng)印刷分子印跡膜在不同濃度展青霉素中孵育200s后的dpv響應(yīng)值(a–k)1×10^-13，5×10^-13，1×10^-12，5×10^-12，1×10^-11，5×10^-11，1×10^-10，5×10^-10，1×10^-9,，5×10^-9和1×10^-8moll^-1；

圖6：便攜式展青霉素分子印跡電化學(xué)傳感器選擇性；在展青霉素及其類似物溶液中孵育200s后的電流變化值；其中，patulin代表展青霉素，hmp代表5-羥甲基糠醛，aoh代表交聯(lián)孢酚、ame代表交鏈孢霉甲基醚。

具體實施方案

下面是對本發(fā)明進行具體描述。

實施例1展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極的制備

展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極的制備示意圖如圖1所示。具體制備方法如下：

(1)在工作絲網(wǎng)印刷電極表面修飾碳量子點：取碳量子點溶液(7ml)加入1.0％的殼聚糖乙酸溶液(3ml)，制備成碳量子點---殼聚糖修飾液，然后吸取10μl滴加到工作電極上，室溫干燥。

(2)在工作絲網(wǎng)印刷電極表面電鍍沉積金納米粒子，電鍍方法：工作電極置于2.43mmol·l^-1氯金酸和0.1mol·l^-1硫酸溶液中，在電位-0.2v電壓下，電鍍時間為120s，以完成電鍍；

(3)通過金硫鍵修飾對巰基苯胺，修飾方法：將電鍍沉積金納米粒子的絲網(wǎng)印刷電極浸置于60mmol·l^-1對巰基苯胺乙醇溶液中，室溫浸泡24h，之后用乙醇和水徹底清洗去除未吸附的對巰基苯胺，氮氣吹干備用；

(4)再將修飾了對巰基苯胺的絲網(wǎng)印刷電極浸置10mmol·l^-12-吲哚酮溶液中，室溫孵育4h，乙醇和超純水洗滌后，氮氣吹干備用；再將靜電吸附后的絲網(wǎng)印刷電極浸入10ml含有60mmol·l^-1對巰基苯胺，50mol·l^-1四丁基高氯酸銨，10mol·l^-12-吲哚酮和0.2g·l^-1氯金酸，采用循環(huán)伏安法掃描，電聚合電壓為：-0.2v-1.2v，掃描速率為：50mv/s，掃描圈數(shù)為：15；

(5)最后洗脫模板分子，將電聚合展青霉素分子印跡膜的絲網(wǎng)印刷電極浸置于2mol·l^-1h2so4中浸泡12min，然后將絲網(wǎng)印刷電極用超純水淋洗，以完成展青霉素分子印跡膜的絲網(wǎng)印刷電極的制備。

將含有待測樣品的電導(dǎo)液60～100μl滴加到展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極表面，靜置吸附時間為50～200s，然后將一次性電極水平插入便攜式電化學(xué)檢測儀卡槽內(nèi)，檢測讀數(shù)；所述便攜式電化學(xué)檢測器的電壓設(shè)置范圍：0.0v～0.2v，記錄掃描中的電流峰值，根據(jù)展青霉素濃度與電流峰值之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行計算，最后將測得的樣品中展青霉素的濃度顯示在led屏上。

本發(fā)明的展青霉素分子印跡電化學(xué)傳感技術(shù)與其他展青霉素檢測方法的結(jié)果比較：

根據(jù)與已經(jīng)報道的其他展青霉素檢測方法(如表1所示)，本發(fā)明方法制備的傳感器具有較大的檢測范圍，且具有較低的檢出限。

表1展青霉素檢測方法比較

實施例2展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極的制備條件對檢測效果的影響

(1)復(fù)合修飾碳量子點，殼聚糖，金納米粒子的電化學(xué)行為表征

為了提高絲網(wǎng)印刷裸電極的穩(wěn)定性和靈敏度，本發(fā)明對裸電極進行了三重修飾碳量子點，殼聚糖和金納米粒子。如圖2所示，通過對比裸電極spe，金納米粒子/裸電極aunps/spe，殼聚糖/金納米粒子/裸電極aunps/cs/spe，碳量子點—殼聚糖/金納米粒子/裸電極aunps/cs-cds/spe的cv響應(yīng)值發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過碳量子點—金納米粒子雙重修飾的電極cv響應(yīng)值最高，導(dǎo)電性最好。

(2)洗脫條件以及孵育時間的優(yōu)化

本方法中首先選擇醋酸，硫酸和硝酸作為洗脫溶劑，結(jié)果表明醋酸不能有效的敲除模板分子，而硝酸則容易將印記膜洗脫過度，因此選擇硫酸作為有效的洗脫溶劑。設(shè)置一系列的不同濃度的硫酸溶液對聚合印記膜進行洗脫，在濃度為2mol·l^-1時，模板分子能夠從印跡聚合物中有效脫除。設(shè)置不同的洗脫時間，通過dpv峰值電流優(yōu)化洗脫時間(如圖3)。隨著洗脫時間的增加，印記絲網(wǎng)印刷電極在[fe(cn)6]^3-/^4-的電流響應(yīng)逐漸增大并在12min分鐘達(dá)到最大，之后保持穩(wěn)定，這是由于隨著洗脫時間的延長，模板分子的溶出而留下的印記位點逐漸增多，印跡位點作為傳質(zhì)通道使[fe(cn)6]^3-/^4-擴散到電極表面產(chǎn)生的峰電流逐漸增大，當(dāng)洗脫時間超過12分鐘，峰電流保持穩(wěn)定，說明模板分子已全部或有效溶出，再增加洗脫時間，印記膜可能遭到破壞，因此選擇12分鐘作為洗脫時間。

孵育時間會影響目標(biāo)物在印記膜上的吸附。為了確定目標(biāo)物展青霉素的檢測最佳時間，將印記絲網(wǎng)印刷電極在2.5×10^-10moll^-1中孵育不同時間。隨著富集時間的延長，印記絲網(wǎng)印刷電極在[fe(cn)6]^3-/^4-的響應(yīng)逐漸減小并在200s達(dá)到穩(wěn)定(如圖3)。表明目標(biāo)物分子的吸附達(dá)到飽和，這是由于目標(biāo)物展青霉素通過氫鍵作用重新進入到印記膜中與其結(jié)構(gòu)相匹配的孔穴中，導(dǎo)致電極表面的空穴減少，因此選擇展青霉素的最佳孵育時間為200s。

實施例3展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極的應(yīng)用

所述便攜式展青霉素分子印跡電化學(xué)檢測儀結(jié)構(gòu)圖如圖4所示，構(gòu)造如下：.

分子印跡絲網(wǎng)印刷電極包括電極基片、導(dǎo)電銀漿、電極連線、工作電極、對電極、絕緣層；所述工作電極表面電鍍了分子印跡聚合物膜；電極基片為一次性消費基片，工作電極，對電極與參比電極由電極連線導(dǎo)出，形成凸型三線式插口，可插入便攜式電化學(xué)檢測器，檢測讀數(shù)。其電極基片印制了接線端子、電極連線與工作電極連成一體的一條電極基體和接線端子、電極連線與對電極連成一體的另一條電極基體，兩條電極連線相互平行，電極連線在電極基體的中間部分，其表面涂覆一層pet絕緣體。工作電極的形狀為圓形塊狀，對電極的形狀為與工作電極同心相離的半圓環(huán)形塊狀，工作電極表面電鍍聚合展青霉素分子印跡膜。

便攜式電化學(xué)檢測儀為已設(shè)定電壓的簡易式電化學(xué)工作站，配備由led顯示屏，用于記錄由對電極流出的電子，流經(jīng)樣品或電導(dǎo)液，再從工作電極流回工作站時形成的電流值。該電流會被電化學(xué)檢測器記錄，通過與標(biāo)準(zhǔn)濃度的展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極制備得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算，以濃度的形式顯示在led顯示屏上。

其中，展青霉素濃度與峰電流之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線已內(nèi)置于檢測器程序。

該標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法：制備不同已知濃度(濃度范圍：1×10^-12～1×10^-9moll^-1)的展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電極插入到檢測器中，檢測電子從對電極，經(jīng)過電導(dǎo)液，再從工作電極流回工作站時形成的電流峰值，電化學(xué)檢測器的電壓設(shè)置范圍：0.0v～0.2v，采用差脈沖伏安法(dpv)模式，記錄掃描中的電流峰值；以展青霉素濃度為橫坐標(biāo)，峰電流值為縱坐標(biāo)，即得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖5所示，得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：

i(μa)＝-21.111logc(moll^-1)–125.74(r²＝0.9907).，檢測限為7.57×10^-13moll^-1。

將得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線通過計算機程序內(nèi)置于檢測器，即得到展青霉素專用便攜式電化學(xué)檢測器。

檢測待測樣品時，先使用2個以上展青霉素標(biāo)準(zhǔn)品分子印跡絲網(wǎng)印刷電極進行校正，然后在檢測待測樣品溶液。便攜式檢測器可以根據(jù)內(nèi)部設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，最終直接將待測樣品中展青霉素的濃度顯示在檢測器的led顯示屏上。

實施例4便攜式展青霉素傳感器的性能測試

樣品測試步驟如下：

首先用標(biāo)準(zhǔn)(已知濃度的展青霉素)分子印跡絲網(wǎng)印刷電極插入到便攜式檢測器，校正便攜式檢測器的檢測結(jié)果。然后將蘋果汁樣品與電導(dǎo)液等體積混合，電導(dǎo)液的配置：2.5mmol·l^-1[fe(cn)6]^3/4和0.1mol·l^-1kcl溶液，滴加蘋果汁樣品與電導(dǎo)液混合液60μl在制備好的展青霉素分子印跡膜的絲網(wǎng)印刷電極表面，靜置吸附時間為：100s，電壓設(shè)置范圍：0.0v～0.2v，記錄掃描中的電流峰值，根據(jù)內(nèi)置于展青霉素專用便攜式檢測器內(nèi)的展青霉素濃度與電流峰值之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行計算，最后將測得的樣品中展青霉素的濃度顯示在led屏上。檢測結(jié)果如表2所示。

表2青霉素傳感器的性能測試

從表2可以看出，回收率在96.0％-98.7％，說明本發(fā)明的檢測展青霉素含量的方法，精確度高，穩(wěn)定性高，可重復(fù)性高。

展青霉素分子印跡絲網(wǎng)印刷電化學(xué)傳感器(mim)的選擇性：

傳感器的選擇性是基于模板和結(jié)合位點之間特異性的相互作用，這是傳感器定性定量檢測目標(biāo)物的重要因素。本方法中選擇了展青霉素的三種結(jié)構(gòu)類似物5-羥甲基糠醛、交聯(lián)孢酚、交鏈孢霉甲基醚作為干擾物進行選擇性實驗測試。(圖6)印跡電極分別置于1×10^-12～1×10^-9moll^-15-羥甲基糠醛、交聯(lián)孢酚、交鏈孢霉甲基醚和展青霉素溶液中孵育200s后檢測dpv電流響應(yīng)。選擇δi/i0作為分析指標(biāo)來評價傳感器的選擇性，其中δi＝i0-ic，如圖所示在濃度范圍內(nèi)展青霉素引起了[fe(cn)6]^3/4峰電流的明顯改變(δi/i0從0.18變化至0.71)，而其它結(jié)構(gòu)類似物幾乎不引起[fe(cn)6]^3/4峰值電流的改變。這說明制備的mim傳感器對目標(biāo)物分子展青霉素具有良好的選擇性。

雖然本發(fā)明已以較佳實施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技術(shù)的人，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可做各種的改動與修飾，因此本發(fā)明的保護范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書所界定的為準(zhǔn)。