本發(fā)明涉及黃曲霉毒素評估，尤其涉及一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法。

背景技術：

1、真菌毒素是一種由絲狀真菌產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，具有致癌性，黃曲霉毒素主要由絲狀真菌黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生，是致癌能力最強的化合物之一，對食用受污染食品的人或動物的健康產(chǎn)生不利影響，被認為是全世界十大最恐怖的真菌之一。

2、食品加工過程中主要的烹飪方式為熱處理，熱處理可以提高食品質(zhì)量、營養(yǎng)價值和風味物質(zhì)，其中煎炸水產(chǎn)品備受眾多消費者的喜愛，而花生油具有較高的營養(yǎng)價值，所以煎炸水產(chǎn)品時多采用花生油。煎炸后水產(chǎn)品會進行包裝，然后進行儲藏，煎炸水產(chǎn)品在儲藏期間受環(huán)境因素影響可能產(chǎn)生化學危害物質(zhì)，比如煎炸水產(chǎn)品發(fā)生霉變產(chǎn)生真菌毒素，人或動物食用霉變的煎炸水產(chǎn)品會對健康產(chǎn)生不利影響。因此，開發(fā)煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法從而對黃曲霉毒素污染進行早起預警變得迫在眉睫。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，建立貝葉斯分類模型對煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素進行評估，在水產(chǎn)品中黃曲霉毒素污染的防控、監(jiān)測、預警和風險評估方面起到重要作用。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案如下：

3、一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，包括以下步驟：

4、(1)將清理好的水產(chǎn)品放入油溫為120-130℃的食用油中煎炸，炸至表面為金黃色撈出；

5、(2)將撈出的水產(chǎn)品冷卻至室溫后，放入溫度為25-30℃的儲藏箱中進行儲藏30天；

6、(3)對儲藏期間的水產(chǎn)品進行取樣，用高速粉碎機將樣品粉碎，過篩，使其粒徑小于2mm，加入提取溶劑，高速震蕩后離心，取上清液；

7、(4)將獲得的上清液通過免疫親和柱凈化和富集，凈化液濃縮、定容和過濾后經(jīng)液相色譜分離，得到分離產(chǎn)物；

8、(5)將分離產(chǎn)物進行串聯(lián)質(zhì)譜檢測，對其進行毒素含量標定，從而獲得煎炸水產(chǎn)品的黃曲霉毒素的含量；

9、(6)根據(jù)煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素含量進行評估，從而進行早期預警。

10、進一步地，在步驟(1)中，食用油的具體制作步驟為：按料液比為1.00g：5.00ml加入正己烷，在45℃水浴中進行攪拌浸提4.5h，抽濾分離固體殘渣，將其旋轉蒸發(fā)以除去正己烷，然后加熱至115℃脫水得到食用油。

11、進一步地，食用油為花生油、菜籽油、玉米油、大豆油中的任意一種。

12、進一步地，在步驟(3)中，取樣為在儲藏的第5、10、15、20、25、30天對煎炸水產(chǎn)品進行取樣。

13、進一步地，在步驟(3)中，加入提取溶劑的具體操作為：每10.00樣品加入200μl同位素內(nèi)標工作液，靜置35min后加入40.00ml乙腈水溶液或甲醇水溶液，渦旋均勻。

14、進一步地，在步驟(3)中，高速震蕩的頻率為1800次/min，時間為20min，離心速度為6000r/min，離心時間為8min。

15、進一步地，乙腈-水溶液的體積比為83：15，甲醇-水溶液的體積比為6：2。

16、進一步地，在步驟(4)中，液相色譜分離的流動相為：6mmol/l乙酸溶液和乙腈-甲醇溶液，乙腈-甲醇體積比為1:1。

17、進一步地，在步驟(4)中，液相色譜分離的流速為0.3ml/min，液相色譜柱為c18柱，液相色譜柱的溫度為40℃，進樣體積為10μl。

18、本發(fā)明由于采用了上述技術方案，具有以下有益效果：

19、本發(fā)明采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進行測量黃曲霉毒素含量，主要對儲藏期間的煎炸水產(chǎn)品進行測定，為更加準確評估煎炸水產(chǎn)品受黃曲霉毒素污染情況提供可靠的早期預警。

技術特征：

1.一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：在步驟(1)中，食用油的具體制作步驟為：按料液比為1.00g：5.00ml加入正己烷，在45℃水浴中進行攪拌浸提4.5h，抽濾分離固體殘渣，將其旋轉蒸發(fā)以除去正己烷，然后加熱至115℃脫水得到食用油。

3.根據(jù)權利要求2所述的一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：食用油為花生油、菜籽油、玉米油、大豆油中的任意一種。

4.根據(jù)權利要求1所述的一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：在步驟(3)中，取樣為在儲藏的第5、10、15、20、25、30天對煎炸水產(chǎn)品進行取樣。

5.根據(jù)權利要求1所述的一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：在步驟(3)中，加入提取溶劑的具體操作為：每10.00樣品加入200μl同位素內(nèi)標工作液，靜置35min后加入40.00ml乙腈水溶液或甲醇水溶液，渦旋均勻。

6.根據(jù)權利要求1所述的一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：在步驟(3)中，高速震蕩的頻率為1800次/min，時間為20min，離心速度為6000r/min，離心時間為8min。

7.根據(jù)權利要求6所述的一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：乙腈-水溶液的體積比為83：15，甲醇-水溶液的體積比為6：2。

8.根據(jù)權利要求1所述的一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：在步驟(4)中，液相色譜分離的流動相為：6mmol/l乙酸溶液和乙腈-甲醇溶液，乙腈-甲醇體積比為1:1。

9.根據(jù)權利要求1所述的一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，其特征在于：在步驟(4)中，液相色譜分離的流速為0.3ml/min，液相色譜柱為c18柱，液相色譜柱的溫度為40℃，進樣體積為10μl。

技術總結
本發(fā)明提供一種煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素評估方法，屬于黃曲霉毒素評估技術領域，包括以下步驟：將清理好的水產(chǎn)品放入油溫為120?130℃的食用油中煎炸，炸至表面為金黃色撈出；將撈出的水產(chǎn)品冷卻至室溫后，放入溫度為25?30℃的儲藏箱中進行儲藏30天；對儲藏期間的水產(chǎn)品進行取樣，用高速粉碎機將樣品粉碎，過篩，使其粒徑小于2mm，加入提取溶劑，高速震蕩后離心，取上清液；將獲得的上清液通過免疫親和柱凈化和富集，凈化液濃縮、定容和過濾后經(jīng)液相色譜分離，得到分離產(chǎn)物；將分離產(chǎn)物進行串聯(lián)質(zhì)譜檢測，對其進行毒素含量標定，從而獲得煎炸水產(chǎn)品的黃曲霉毒素的含量；根據(jù)煎炸水產(chǎn)品儲藏期間黃曲霉毒素含量進行評估，從而進行早期預警。

技術研發(fā)人員：馬華威,郭愛玲,呂敏,尹濤,蔣光正,牙詩雅,羅旭
受保護的技術使用者：廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)科學研究院（廣西壯族自治區(qū)漁業(yè)病害防治環(huán)境監(jiān)測和質(zhì)量檢驗中心、廣西壯族自治區(qū)水生野生動物救護中心）
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/5