專利名稱：癌癥尿檢試劑及判定標(biāo)準(zhǔn)色板的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種癌癥普查篩檢及病情追蹤的尿檢試劑，它包括由Hg+、Hg2+及硒(Se)組成的酸性溶液，及應(yīng)用時(shí)用于判定的標(biāo)準(zhǔn)色板。它屬于醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，也屬于生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，其國(guó)際專利分類號(hào)分別為A61、C12。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人群研究表明，腫瘤的發(fā)生是長(zhǎng)時(shí)間、分階段的，從正常細(xì)胞發(fā)展到臨床可診斷出癌癥，一般要經(jīng)過無癥狀的臨床前癌期。因此，就需要應(yīng)用快速、簡(jiǎn)便的篩檢試驗(yàn)，將表觀健康而處于臨床前癌期的人，同那些可能無癌的人區(qū)分開來。篩檢不是診斷，對(duì)篩檢試驗(yàn)陽性或可疑陽性者，需進(jìn)一步明確診斷，以便及時(shí)治療，從而提高治愈率，減少癌癥治療難度或癌癥死亡。
篩檢試驗(yàn)中以生物學(xué)標(biāo)志物為指標(biāo)的研究尚處于實(shí)驗(yàn)室階段，主要原因是目前發(fā)現(xiàn)的一些標(biāo)志物例如癌基因、腫瘤抗原等作為篩查指標(biāo)缺乏必要的敏感性及特異性，且操作復(fù)雜、專業(yè)化程度要求高等原因而無法廣泛應(yīng)用。
尿中腫瘤標(biāo)志物的研究已有報(bào)道，如尿中多胺的檢測(cè)，含巰基化合物的檢測(cè)，某些氨基酸代謝產(chǎn)物的檢測(cè)等。葉應(yīng)嫵等在《臨床實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)》(1989，人民衛(wèi)生出版社，1594頁，405～406頁)提出，癌癥患者尿中酪氨酸代謝產(chǎn)物對(duì)羥基苯丙酮酸含量可能升高，可用米倫試劑來測(cè)定，但實(shí)際應(yīng)用中存在許多不易克服的缺陷，原因是尿中無機(jī)鹽濃度高，可使米倫試劑內(nèi)汞沉淀而失去效用。
美國(guó)專利說明書US-5066601針對(duì)米倫試劑不能直接測(cè)定尿中酪氨酸衍生物，提出了一種用Hg2+首先結(jié)合尿中無機(jī)鹽，防止其干擾整個(gè)反應(yīng)過程的方法，用于腫瘤的診斷，但因其試劑的配制比例不當(dāng)，致使其應(yīng)用效果不佳。
歐洲專利0341803A、中國(guó)專利CN1096374A(1994年12月14日公開)則提出了一些改進(jìn)方法，但由于其配比組成仍存在一些問題而未能得到應(yīng)用。
對(duì)于實(shí)際應(yīng)用中出現(xiàn)的各種顏色反應(yīng)如何判定，上述專利中均未給出明確解決辦法，因而更加限制了這些試劑的應(yīng)用推廣。
本發(fā)明的目的是提供一種供癌癥篩檢用尿檢試劑及判定標(biāo)準(zhǔn)比色板，它應(yīng)可以方便地從尿中檢測(cè)出被測(cè)者是否可能患有癌癥，也可用于檢測(cè)病人有無復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，評(píng)價(jià)治療效果等。
為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所采取的技術(shù)措施利用Hg+，Hg2+和Se的酸性溶液，測(cè)定尿中酪氨酸的某些代謝物及含巰基化合物，后者在尿中的排泄量隨著癌癥的有無及病情變化而變化，并將實(shí)際獲得的試劑與尿標(biāo)本反應(yīng)的狀況拍成照片，作為比色標(biāo)準(zhǔn)色板。
本尿檢試劑的組成中，Hg+與上述代謝物的苯酚基發(fā)生顏色反應(yīng)，Hg2+除去尿中無機(jī)鹽并平衡體系內(nèi)反應(yīng)，Se參與時(shí)，與尿中含巰基化合物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，其中Hg+、Hg2+與Se的比例為1∶0.1-3.0∶0.001-0.05。
標(biāo)準(zhǔn)比色板制作用配制好的尿檢試劑與健康人3-5名、各類已確診的癌癥患者10-20名的尿樣反應(yīng)，觀察所產(chǎn)生沉淀，各類選擇一個(gè)沉淀量及其顏色特征明顯的樣本拍制成照片或繪制成色板，稱為判定標(biāo)準(zhǔn)比色板。
本發(fā)明的使用方法取尿液3ml，滴加本發(fā)明試劑0.5ml，立即有沉淀生成，振蕩放置2分鐘后，與本發(fā)明中的判定標(biāo)準(zhǔn)色板對(duì)比，淺于標(biāo)準(zhǔn)色板顏色1號(hào)為陰性，深于標(biāo)準(zhǔn)色板顏色2號(hào)為陽性。8-9號(hào)為黃疸干擾。
與已有技術(shù)相比較，本發(fā)明的效果表現(xiàn)在下述幾個(gè)方面1.利用本試劑用于癌癥普查篩檢，及癌癥病情、治療效果監(jiān)測(cè)，簡(jiǎn)便易行，操作性強(qiáng)，檢測(cè)無創(chuàng)傷，無痛苦。
2.應(yīng)用本試劑對(duì)112例新入院、未作任何治療的各類癌癥病人進(jìn)行檢測(cè)，檢查出93例陽性，檢測(cè)結(jié)果與最后病理學(xué)診斷及其它影象學(xué)診斷對(duì)比，準(zhǔn)確率平均可為83％。
3.應(yīng)用本試劑對(duì)195便工人作普查，2例弱陽性，2例強(qiáng)陽性，陽性率為2.05％。其中2例強(qiáng)陽性被最終確診患有早期癌癥(一例胃癌，一例乳癌)。
4.應(yīng)用本試劑對(duì)50例健康獻(xiàn)血者進(jìn)行檢測(cè)，1例陽性，陽性率2.0％。
5.根據(jù)上述結(jié)果可計(jì)算出敏感性＝陽性檢出數(shù)/被檢癌癥病人總數(shù)＝83％；特異性＝陰性檢出數(shù)/被檢人群總數(shù)＝97.9％；陽性預(yù)示值＝真陽性數(shù)/陽性檢出總數(shù)＝82.6％；陰性預(yù)示值＝真陰性數(shù)/陰性檢出總數(shù)＝92.7％。


圖1是癌檢的標(biāo)準(zhǔn)色板。
圖中顏色1號(hào)表示陰性；顏色2-7號(hào)表示陽性；顏色8-9表示黃疸干擾。
實(shí)施例A液配制將15克HgSO4加入到100ml 6N H2SO4中，攪拌溶解，溶液呈無色透明液。
B液配制將80克Hg2(NO3)2·2H2O加入100ml濃HNO3中，溶解后呈綠色透明液。
C液配制將10克金屬硒溶于20ml 6N HNO3中，不加熱，放置過夜，呈淺黃色透明液體。
將A、B、C液按體積比1∶3∶0.01混合而得無色透明液體的尿檢試劑。
權(quán)利要求
1.一種用于癌癥普查篩檢及病情追蹤的癌癥尿檢試劑及判定標(biāo)準(zhǔn)色板，其特征在于它包括由Hg+、Hg2+及Se的酸性水溶液按一定配比組成的癌癥尿檢試劑和被檢測(cè)者尿樣發(fā)生沉淀反應(yīng)所產(chǎn)生沉淀物顏色的標(biāo)準(zhǔn)色板所構(gòu)成；
2.按權(quán)利1所述的試劑及色板，其特征在于本發(fā)明試劑中Hg+、Hg2+與Se的比例為1∶≥0.1到3.0∶≥0.001到0.05；
3.按權(quán)利要求1所述的試劑及標(biāo)準(zhǔn)色板，其特征在于標(biāo)準(zhǔn)比色板制作是以癌癥尿檢試劑與各類被測(cè)者尿樣發(fā)生沉淀反應(yīng)所產(chǎn)生沉淀物顏色變化的色板，根據(jù)實(shí)測(cè)結(jié)果選擇有代表性的樣本拍照或繪制后剪裁而得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種癌癥尿檢試劑及判定標(biāo)準(zhǔn)色板，它包括由Hg
文檔編號(hào)G01N33/574GK1151525SQ9610543
公開日1997年6月11日 申請(qǐng)日期1996年5月7日 優(yōu)先權(quán)日1996年5月7日
發(fā)明者皮勇建 申請(qǐng)人:皮勇建