一種熒光淬滅分離鑒定化合物的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種分離化合物的方法，具體涉及一種熒光淬滅分離鑒定化合物的方法。
【背景技術】
[0002]薄層色譜,英文為thin layer chromatography,色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術，屬固一液吸附色譜，兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點，一方面適用于少量樣品(幾到幾微克，甚至0.01微克)的分離；另一方面在制作薄層板時，把吸附層加厚加大，因此，又可用來精制樣品，此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質。是將吸附劑、載體或其他活性物質均勻涂鋪在平面板(如玻璃板、塑料片、金屬片等)上，形成薄層(常用厚度為0.25毫米左右)后，在此薄層上進行層析分離的分析方法。
[0003]定量分析可分為洗脫測定法，薄層層析法和原位掃描法:
[0004]洗脫測定法
[0005]①洗脫測定法，將展開后的組分斑點處的吸附劑刮下，用適宜溶劑將組分洗脫溶出，然后用適當方法進行定量測定。常用方法為比色法、紫外一可見分光光度法，也可用電化學分析法等。
[0006]原位掃描法
[0007]②原位掃描法，將展開后的薄層板放在光密度計內，以一定波長的光照射，同時使斑點移過光路，由于斑點對光的吸收，可繪出峰形曲線，由峰面積與標準樣品的吸收相比較而求出含量。
[0008]薄層層析法
[0009]薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為硅膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣，除吸附法外，也可進行分配、離子交換、分子排阻等機理的層析，即將鋪制薄層的材料相應換為涂以固定相的載體、離子交換劑、凝膠等，其操作與吸附法基本相同。
[0010]一些化合物無顏色，也無熒光，也沒有合適的顯色劑可與之顯色，又無可生成熒光生物的條件，比較難以測定。

【發(fā)明內容】

[0011]本發(fā)明的目的在于，提供一種熒光淬滅分離鑒定化合物的方法，以克服現有技術所存在的上述缺點和不足。
[0012]一些化合物無顏色，也無熒光，也沒有合適的顯色劑可與之顯色，又無可生成熒光生物的條件，此時長將這類化合物點在含有無機熒光物質，如錳激活的硅酸鋅或銀激活的硫化鋅、硫化鎘(ZnS、CdS、Ag)的薄層板即熒光板上進行分離，分離后置薄層板即熒光板上進行分離，分離后薄層于紫光燈下觀察，此時薄層背景呈熒光，對紫外光有吸收的化合物斑點處，由于一部分光被化合物吸收，照射到薄層上的紫外光強度有所減弱，故產生的熒光減弱，化合物呈暗色斑點，用這種方法可以鑒定化合物的Rf值，也可在定量時測定斑點熒光減弱程度測定化合物的含量，但在定量時更多的是熒光淬滅的方法來定被測物的位置，然后用紫外區(qū)的波長來測定其含量，用熒光薄層分離后定位。
[0013]本發(fā)明所需要解決的技術問題，可以通過以下技術方案來實現:
[0014]一種熒光淬滅分離鑒定化合物的方法，其特征在于，包括以下步驟:
[0015](I)對照品溶液的制備:取對照品，加60-90°C石油醚制成每Iml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；
[0016](2)供試品溶液的制備:取樣品適量，混勻，取0.2g，精密稱定，置25ml量瓶中，力口60-90°C石油醚10ml，在50°C水浴上加熱數分鐘融化，放冷，加60_90°C石油醚稀釋至刻度，搖勻，離心，取上清液，即得；
[0017](3)展開劑的制備:60-90°C石油醚-乙酸乙酯；
[0018](4)薄層條件:GF254薄層板，點樣，展開；
[0019](5)檢視；取出，晾干后，于254nm紫外燈光下檢視。
[0020]步驟⑷，點樣時，吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5 μ I。
[0021]步驟(3)，展開劑為60_90°C石油醚-乙酸乙酯，其體積比為17:3。
[0022]所述樣品為桂皮醛。
[0023]本發(fā)明的有益效果:
[0024]本發(fā)明采用熒光淬滅的方法來定被測物的位置，然后用紫外區(qū)的波長來測定其含量，用熒光薄層分離后定位。
[0025]本發(fā)明可以連續(xù)進行觀測，連續(xù)進行數據存儲?？梢詫Y果進行分析、對比。
【附圖說明】
[0026]圖1為薄層層析結果。樣品:1.供試品130519 2.供試品130524 3.供試品1305264.桂皮醛對照品5.供試品130519 6.供試品130524 7.供試品130526。
[0027]圖2為薄層層析結果。樣品:1.供試品130519 2.供試品130524 3.供試品1305264.桂皮醛對照品5.供試品空白。
[0028]圖3為薄層層析結果。樣品:6.供試品130519 7.供試品130524 8.供試品1305269.桂皮醛對照品10.供試品空白。
[0029]圖4為薄層層析結果。樣品:1.供試品130519 2.供試品130524 3.供試品1305264.桂皮醛對照品5.供試品空白。
[0030]圖5為薄層層析結果。樣品:6.供試品130519 7.供試品130524 8.供試品1305269.桂皮醛對照品10.供試品空白。
[0031]圖6為薄層層析結果。樣品:1.供試品130519 2.供試品130524 3.供試品1305264.桂皮醛對照品5.供試品空白。
【具體實施方式】
[0032]以下結合具體實施例，對本發(fā)明作進步說明。應理解，以下實施例僅用于說明本發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的范圍。
[0033]實施例1
[0034]一種熒光淬滅分離鑒定化合物的方法，以桂皮醛的薄層色譜鑒別方法為例。
[0035]桂皮醛為揮發(fā)性成分，分別從樣品處理方法、展開劑、檢視方法等方面分別考察，以選擇桂皮醛的最優(yōu)薄層鑒別方法。
[0036]1、供試品溶液制備方法的選擇
[0037]方法一:取本品適量，混勻，取0.2g,精密稱定，置25ml量瓶中，加石油醚(60-900C ) 10ml，在50°C水浴上加熱數分鐘使融化，放冷，加石油醚^0_90°C )稀釋至刻度，搖勻，離心，取上清液，即得。點樣量5μ1。
[0038]方法二:采用市售藥品八仙油、百草油質量標準中桂皮醛薄層鑒別供試品制備方法制備，即藥典揮發(fā)油提取方法。點樣量0.5μ1。
[0039]如圖1所示，方法二樣品:1.供試品130519 2.供試品130524 3.供試品130526。