中，所述受體激動劑選自鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、妥布特 羅、特布他林、非諾特羅、福莫特羅、萊克多巴胺、異丙喘寧中的一種或多種。
[0039] 其中，在鹽酸特倫特羅的分析中，以m/z 259. 1±0. 1作為定性離子和以m/ z 203. 0±0. 1作為定量離子是基于以下考慮：克倫特羅分子在正離子DART離子化方式 下，產(chǎn)生質(zhì)子化的分子離子[M+H]+，m/z 277. 1 ±0.1及m/z 279. 1 ±0.1，前者為含Cl元 素的同位素35±0. 1，后者為Cl元素的同位素37±0. 1。在三級四級桿質(zhì)譜的碰撞活化 室內(nèi)，發(fā)生的分子離子碰撞活化，[M+H]+，m/z 277.1±0.1產(chǎn)生子離子m/z 259.1±0.1 及 m/z 203.1±0.1。同樣，[M+H]+，m/z 279·1±0·1 產(chǎn)生子離子 m/z 261·1±0·1 及 m/ z 205. 1±0. 1。我們選用含Cl元素的同位素35±0. 1的克倫特羅的分子離子[M+H]+m/ z277. 1±0. 1作為母離子，其產(chǎn)生的子離子m/z 259. 1±0. 1作為定性離子，而m/z 203. 1±0. 1作為定量離子。
[0040] 其中，以m/z 203. 0±0. 1作為研宄對象，根據(jù)信噪比（S/N)大于3作為 檢出限和信噪比大于10作為定量限評判標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)試驗計算得出本申請的檢出限為 0· 0050±0· 0005 μ g/mL，定量限為(λ 010±0· 001 μ g/mL。
[0041] 本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解的是，本申請的上述檢出限（約為5ppb)和定量限（約 IOppb)是在樣品不經(jīng)任何富集、制備、分離的情況下，以尿樣直接采集分析待測物質(zhì)的信號 而獲得的。相比其他現(xiàn)有的繁瑣、冗長的方法，要達到一致或類似或甚至更好的檢出限和定 量限的范圍，本申請的方法要更為直接、更為快速。
[0042] 本領(lǐng)域的技術(shù)人員還將理解的是，本申請的質(zhì)譜分析方法及快速定性和定量分析 方法也可以用于其它受體激動劑的分析檢測中，必要時，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以根據(jù) 其技術(shù)常識并通過常規(guī)的實驗手段來進一步優(yōu)化具體檢測樣品的測試條件。
[0043] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本申請的β -受體激動劑的快速定性和定量檢測的方法具有不 需要對檢測樣品進行前處理的突出的有益效果，及以下的有益效果：
[0044] 1、無基質(zhì)效應(yīng)；
[0045] 2、定性及定量檢測結(jié)果可靠性及準(zhǔn)確性高；
[0046] 3、便于實時、無損、現(xiàn)場采樣和檢測；
[0047] 4、方法實施簡便，分析操作人員不需要特別的專業(yè)質(zhì)譜學(xué)知識；
[0048] 5、方法不使用溶劑或色譜耗材，大大減少對溶劑和耗材的依賴，綠色、低碳、經(jīng)濟。
【附圖說明】
[0049] 附圖用來提供對本申請的進一步理解，構(gòu)成本申請的一部分，本申請的示意性實 施例及其說明用于解釋本申請，但其并不構(gòu)成對本申請的不當(dāng)限定。在附圖中：
[0050] 圖1是實時直接分析質(zhì)譜裝置的示意圖，其中1為DART，2為載樣玻棒，3為軌道， 4為真空泵，5為串聯(lián)的質(zhì)譜儀；
[0051] 圖2顯示用50%的乙腈水溶液配制的鹽酸克倫特羅溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
[0052] 圖3Α-Β分別顯示以m/z 203. 0±0. 1定量離子峰為研宄對象，用于測定方法的檢 出限（0· 005±0· 0005 μ g/mL，η = 3, S/N>3. 0)和定量限（0· 010±0· 001 μ g/mL，η = 3, S/ Ν> 10. 0)的圖；
[0053] 圖4顯示溫度對質(zhì)譜圖中的m/z 203. 0±0. 1離子所對應(yīng)的信號的峰面積的影響 (η = 3,取平均值）；
[0054] 圖5顯示用空白豬尿中配制的不同濃度的鹽酸克倫特羅溶液（0. 05、0. 10、0. 25、 0. 50 μ g/mL，η = 3)的多反應(yīng)監(jiān)測譜圖；
[0055] 圖6為顯示用50%的乙腈水溶液配制的不同濃度的鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液和用 空白豬尿配制的不同濃度的鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液的m/z 203. 0±0. 1定量離子的峰面積 的柱形圖（η = 3,取平均值）。
【具體實施方式】
[0056] 下面通過實施例來描述本申請的實施方式，本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)認識到，這些 具體的實施例僅表明為了達到本申請的目的而選擇的實施技術(shù)方案，并不是對技術(shù)方案的 限制。根據(jù)本申請的教導(dǎo)，結(jié)合現(xiàn)有技術(shù)對本申請技術(shù)方案的改進是顯然的，均屬于本申請 保護的范圍。
[0057] 儀器與試劑
[0058] API 5000三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀（美國AB SCIEX公司）；實時直接分析離子源 (DART，美國IonSense公司）；鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品購自Sigma ;乙腈（高效液相色譜級，美 國Merck公司）；實驗室用水為經(jīng)Milli-Q凈水系統(tǒng)（0. 22 μ m過濾膜）過濾的去離子水； 豬尿樣品取自北京某養(yǎng)殖場。
[0059] 進樣方式
[0060] 采用中通量液體自動樣品進樣模塊進樣方式：樣品管蘸取樣品，每一個樣品重復(fù) 3根樣品管。將樣品管置于DART-MS離子源氣流出口與質(zhì)譜進樣口之間，即可得到該豬尿樣 品的實時質(zhì)譜圖。
[0061] 在以下實例中，僅以鹽酸克倫特羅為例，其他β_受體激動劑也可以按照與以下 的方法相類似的方法來檢測，必要時，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以根據(jù)其技術(shù)常識并通過常規(guī) 的實驗手段來進一步優(yōu)化具體檢測樣品的測試條件。
[0062] 實施例1
[0063] 樣品中的鹽酸克倫特羅的定性分析
[0064] 使用實時直接分析串聯(lián)三級四極桿質(zhì)譜儀（DART-MS/MS)(如圖1所示）（其中串 聯(lián)的質(zhì)譜儀為API 5000MS/MS)在正離子模式下對樣品中的鹽酸克倫特羅進行檢測，得到 包括各種碎片離子的信號的質(zhì)譜圖，以其中的m/z 259. 1±0. 1作為定性離子來判斷檢測 樣品中是否含有鹽酸克倫特羅，其中所述DART實時直接分析離子源的測試條件為：氦氣作 為反應(yīng)氣，流速為2. 5L/min，表頭壓力為0. 55MPa ;離子源加熱器溫度350°C;去簇電壓50V ; 軌道移動速度0. 4mm/s。
[0065] 所述檢測樣品為未經(jīng)任何前處理的豬尿中，重復(fù)3次（η = 3)。
[0066] 其中，鹽酸克倫特羅的質(zhì)譜條件如表1所示。
【主權(quán)項】
1. 一種用于快速分析e-受體激動劑的方法，所述方法使用實時直接分析串聯(lián)質(zhì)譜儀 對樣品中的e-受體激動劑進行檢測。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法使用實時直接分析串聯(lián)三級四極桿質(zhì)譜 儀在正離子模式下，優(yōu)選在正離子多級反應(yīng)監(jiān)測掃描模式下，對樣品中的e-受體激動劑 進行檢測。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述方法使用實時直接分析串聯(lián)三級四極桿質(zhì)譜 儀在正離子模式下對樣品中的鹽酸克倫特羅進行檢測，得到包括各種碎片離子的信號的質(zhì) 譜圖，以其中的m/z259. 1±0. 1作為定性母離子來判斷檢測樣品中是否含有鹽酸克倫特 羅，其中實時直接分析離子源的測試條件為：氦氣作為反應(yīng)氣，流速為2. 5-3.OL/min;離子 源加熱器溫度為350°C-400°C;優(yōu)選地，離子源加熱器溫度為350°C。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中用于控制實時直接分析的進樣的軌道移動速度為 0. 2-〇. 6mm/s〇
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的方法，其中用于檢測的樣品為動物的尿液、血液、 飼料、組織或生鮮熟食制品。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，在所得到的包括各種碎片離子的信號的質(zhì)譜圖中，以 其中的m/z203. 0±0. 1為定量離子，并對m/z203. 0±0. 1所對應(yīng)的信號的峰面積進行積 分，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和m/z203. 0±0. 1所對應(yīng)的信號的峰面積來計算檢測樣品中的鹽 酸克倫特羅的含量。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中標(biāo)準(zhǔn)曲線方程的獲得包括以下步驟： 配制濃度為 〇? 〇25、0. 05、0. 1、0. 25、0. 5、1. 0、5. 0、10. 0、50. 0、100. 0yg/mL的鹽酸克 倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液； 除了將檢測樣品換成鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液以外，實施如權(quán)利要求1-6中任一項所述 的方法，得到包括各種碎片離子的信號的質(zhì)譜圖，以其中的m/z203. 0±0. 1為定量離子， 并對m/z203. 0±0. 1所對應(yīng)的信號的峰面積進行積分，以m/z203. 0±0. 1所對應(yīng)的信號 的峰面積對鹽酸克倫特羅的濃度作圖，并對圖中符合線性范圍的點實行線性擬合，得到鹽 酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中用30% -70%的乙腈水溶液來配制鹽酸克倫特羅 標(biāo)準(zhǔn)溶液。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中用50%的乙腈水溶液來配制鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶 液。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述e-受體激動劑選自鹽酸克倫特羅、沙丁胺 醇、妥布特羅、特布他林、非諾特羅、福莫特羅、萊克多巴胺、異丙喘寧中的一種或多種。
【專利摘要】一種快速分析樣品中的β-受體激動劑的方法，所述方法使用實時直接分析串聯(lián)質(zhì)譜儀對樣品中的β-受體激動劑進行檢測。本申請的方法不需要對檢測樣品進行特殊的前處理，無基質(zhì)效應(yīng)，并且可以快速地定性及定量地檢測β-受體激動劑如鹽酸克倫特羅，檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性高。
【IPC分類】G01N27-62
【公開號】CN104792855
【申請?zhí)枴緾N201510174088
【發(fā)明人】劉春勝
【申請人】華質(zhì)泰科生物技術(shù)（北京）有限公司
【公開日】2015年7月22日
【申請日】2015年4月13日