-孔平板的孔中混合了 20 yL通用檢 測劑顆?；驈娀瘷z測劑顆粒（OD5)、20 y L細(xì)菌裂解物和20 y L含有去污劑的運行緩沖劑。 將0. 5cm量尺插入每個孔中并孵育直至所有液體流入量尺中，所述量尺是從使用相同抗體 涂成條帶并且碾壓成上層吸收芯的Millipore硝基纖維素膜卡片上切割得到的。使用一槽 100 y L的PBS來清洗量尺，使得可以以1-12等級相對于強度標(biāo)準(zhǔn)（顆粒的沉積稀釋）來針 對信號強度進(jìn)行視覺上的分級（表1和圖2)。
[0079] 表1 :通用檢測劑顆粒相對于強化檢測劑顆粒的信號強度
[0080]
【主權(quán)項】
1. 用于檢測樣品中的細(xì)菌的側(cè)向流動裝置，該裝置包括用于樣品的流動通道，并且進(jìn) 一步包括特異性結(jié)合細(xì)菌抗原的全類屬結(jié)合劑，其中所述全類屬結(jié)合劑固定于一群特定大 小的有色顆粒上；和捕獲所述顆粒群的捕獲結(jié)合劑，其中所述捕獲結(jié)合劑固定于流動通道 上，并且其中所述可檢測顆粒群沿著所述流動通道排列，使得樣品在接觸捕獲結(jié)合劑之前 接觸有色顆粒群。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述可檢測顆粒是選自金、銀和鉑顆粒中的一種或多 種的有色顆粒。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2的裝置，其中所述有色顆粒是金顆粒。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2的裝置，其中所述顆粒直徑為約60至約120nm。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4的裝置，其中所述顆粒直徑為約80nm。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3的裝置，其中所述顆粒直徑為約60至約120nm。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6的裝置，其中所述顆粒直徑為約80nm。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述結(jié)合劑是全類屬抗體。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述全類屬結(jié)合劑特異性地結(jié)合革蘭氏陽性細(xì)菌抗 原。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10的裝置，其中所述全類屬結(jié)合劑是結(jié)合脂磷壁酸（LTA)的多克隆 抗體。
12. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述全類屬結(jié)合劑特異性地結(jié)合革蘭氏陰性細(xì)菌抗 原。
13. 根據(jù)權(quán)利要求12的裝置，其中所述全類屬結(jié)合劑是結(jié)合細(xì)菌脂多糖結(jié)構(gòu)（LPS)的 全類屬多克隆抗體。
14. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中至少一種全類屬結(jié)合劑特異性地結(jié)合革蘭氏陽性細(xì) 菌抗原而至少一種全類屬結(jié)合劑特異性地結(jié)合革蘭氏陰性細(xì)菌抗原。
15. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述全類屬結(jié)合劑結(jié)合三個或更多個屬的細(xì)菌。
16. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述全類屬結(jié)合劑通過銜接物固定于有色顆粒上。
17. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述全類屬結(jié)合劑包含兩種或更多種全類屬抗體，其 中每種全類屬抗體特異性地結(jié)合細(xì)菌抗原，其中每種全類屬抗體固定于有色顆粒的分開亞 群上；并且其中至少一種全類屬抗體固定于一群特定大小的有色顆粒上。
18. 根據(jù)權(quán)利要求9的裝置，其中所述全類屬抗體選自多克隆抗體和單克隆抗體中的 一種或多種。
19. 根據(jù)權(quán)利要求18的裝置，其中所述全類屬抗體是多克隆的，并且結(jié)合多種細(xì)菌抗 原。
20. 根據(jù)權(quán)利要求18的裝置，其中所述全類屬抗體是多克隆的，并且結(jié)合多種革蘭氏 陽性細(xì)菌抗原。
21. 根據(jù)權(quán)利要求18的裝置，其中全類屬抗體是多克隆的，并且結(jié)合多種革蘭氏陰性 細(xì)菌抗原。
22. 根據(jù)權(quán)利要求17的裝置，其中至少一種全類屬抗體是單克隆全類屬抗體而至少一 種全類屬抗體是多克隆全類屬抗體。
23. 根據(jù)權(quán)利要求22的裝置，其中所述全類屬抗體特異性地結(jié)合革蘭氏陽性細(xì)菌抗 原。
24. 根據(jù)權(quán)利要求22的裝置，其中所述全類屬抗體特異性地結(jié)合革蘭氏陰性細(xì)菌抗 原。
25. 根據(jù)權(quán)利要求17的裝置，其中至少一種全類屬抗體特異性地結(jié)合革蘭氏陽性細(xì)菌 抗原而至少一種全類屬抗體特異性地結(jié)合革蘭氏陰性細(xì)菌抗原。
26. 根據(jù)權(quán)利要求17的裝置，其中所述全類屬抗體結(jié)合三個或更多個屬的細(xì)菌。
27. 根據(jù)權(quán)利要求17的裝置，其中所述全類屬抗體通過銜接物固定于有色顆粒上。
28. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中該裝置包括至少三種特異性地結(jié)合革蘭氏陽性細(xì)菌 抗原的全類屬結(jié)合劑，每種全類屬結(jié)合劑固定于有色顆粒的分開亞群上；以及至少三種特 異性地結(jié)合革蘭氏陰性細(xì)菌抗原的全類屬結(jié)合劑，每種全類屬結(jié)合劑固定于有色顆粒的分 開亞群上。
29. 根據(jù)權(quán)利要求28的裝置，其中每個顆粒亞群選自金、銀和鉑顆粒中的一種或多種。
30. 根據(jù)權(quán)利要求29的裝置，其中每個顆粒亞群是金顆粒。
31. 根據(jù)權(quán)利要求28的裝置，其中至少一種全類屬結(jié)合劑是抗體。
32. 根據(jù)權(quán)利要求31的裝置，其中至少一種全類屬抗體是單克隆抗體。
33. 根據(jù)權(quán)利要求28的裝置，其中所述顆粒亞群是不同大小的。
34. 根據(jù)權(quán)利要求33的裝置，其中至少一個金顆粒群包含直徑約60nm至約120nm的顆 粒。
35. 根據(jù)權(quán)利要求34的裝置，其中至少一個金顆粒群包含80nm金顆粒。
36. 根據(jù)權(quán)利要求33的裝置，其中至少一個金顆粒群包含40nm金顆粒。
37. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述捕獲結(jié)合劑是特異性地結(jié)合細(xì)菌抗原的全類屬 抗體。
38. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述捕獲結(jié)合劑與所述全類屬結(jié)合劑相同。
39. 根據(jù)權(quán)利要求37的裝置，其中所述捕獲結(jié)合劑固定于所述樣品流動通道上的兩個 或更多個位置上。
40. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中所述樣品流動通道是吸收膜。
41. 根據(jù)權(quán)利要求40的裝置，其中所述吸收膜是硝基纖維素。
42. 根據(jù)權(quán)利要求1的裝置，其中在安置在吸收膜上方并且與膜的上表面接觸的固體 支持物表面內(nèi)干燥所述有色顆粒。
43. 用于檢測樣品中的細(xì)菌的方法，包括使樣品與細(xì)菌抗原特異性的全類屬結(jié)合劑接 觸，其中所述全類屬結(jié)合劑固定于特定大小的有色顆粒上，并且其中所述樣品在允許所述 全類屬結(jié)合劑和所述抗原之間結(jié)合的條件下與所述全類屬結(jié)合劑接觸，并且進(jìn)一步包括使 固定的捕獲結(jié)合劑在允許所述固定的捕獲結(jié)合劑和帶有所述全類屬結(jié)合劑的所述有色顆 粒之間結(jié)合的條件下與所述有色顆粒接觸，其中通過捕獲結(jié)合劑捕獲帶有全類屬結(jié)合劑的 有色顆粒表明所述樣品中存在細(xì)菌。
44. 根據(jù)權(quán)利要求43的方法，進(jìn)一步包括將可溶性全類屬結(jié)合劑添加到樣品中。
45. 根據(jù)權(quán)利要求43的方法，其中該方法包括將根據(jù)權(quán)利要求1的裝置在允許捕獲抗 體與帶有全類屬抗體的有色顆粒結(jié)合的條件下與樣品接觸，其中通過捕獲抗體捕獲顆粒表 明所述樣品中存在細(xì)菌。
46. 根據(jù)權(quán)利要求43的方法，其中所述樣品已經(jīng)經(jīng)過預(yù)處理。
47. 根據(jù)權(quán)利要求45的方法，其中所述捕獲結(jié)合劑與所述全類屬抗體結(jié)合。
48. 根據(jù)權(quán)利要求43的方法，其中所述樣品是血液或血液制品。
49. 根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中所述血液或血液制品選自：全血、白細(xì)胞、造血干細(xì) 胞、血小板、紅細(xì)胞、血漿、骨髓和血清。
50. 根據(jù)權(quán)利要求43的方法，其中所述樣品是透析樣品。
51. 根據(jù)權(quán)利要求42的方法，其中所述透析樣品選自血液透析流體和腹膜透析流體。
52. 根據(jù)權(quán)利要求43的方法，其中所述樣品是其中已經(jīng)貯存了組織的流體樣品。
53. 根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述組織選自：血細(xì)胞培養(yǎng)物、干細(xì)胞培養(yǎng)物、骨和 軟骨移植材料。
54. 用于結(jié)合試驗中的試劑，其包含選自金顆粒、銀顆粒和鉑顆粒的顆粒，其中所述顆 粒大小為約60nm至約120nm，并且其中所述顆粒結(jié)合到多價結(jié)合劑上。
55. 根據(jù)權(quán)利要求54的試劑，其中所述顆粒大小為約80nm。
56. 根據(jù)權(quán)利要求54的試劑，其中所述全類屬結(jié)合劑通過銜接物結(jié)合到顆粒上。
57. 根據(jù)權(quán)利要求56的試劑，其中所述銜接物選自蛋白A、蛋白G和蛋白L。
58. 根據(jù)權(quán)利要求57的試劑，其中所述銜接物是蛋白A。
59. 根據(jù)權(quán)利要求54的試劑，其中所述顆粒是金顆粒。
60. 根據(jù)權(quán)利要求54的方法，其中所述多價結(jié)合劑是全類屬結(jié)合劑。
61. 用于檢測多分析物樣品中的物質(zhì)的方法，包括將所述樣品與根據(jù)權(quán)利要求54的試 劑混合，其中所述物質(zhì)與所述試劑的結(jié)合形成可檢測復(fù)合物；和檢測所述復(fù)合物。
62. 根據(jù)權(quán)利要求59的方法，其中該方法是免疫試驗。
63. 權(quán)利要求1的側(cè)向流動裝置，其中所述可檢測顆粒選自化學(xué)發(fā)光、發(fā)光、熒光、磁或 有色顆粒。
【專利摘要】本發(fā)明涉及使用全類屬抗體檢測樣品中的細(xì)菌的裝置和方法。
【IPC分類】G01N33-569, G01N33-543, G01N33-551
【公開號】CN104823051
【申請?zhí)枴緾N201380060002
【發(fā)明人】G·M·勞倫斯, L·施內(nèi)菲爾德
【申請人】韋拉克斯生物醫(yī)學(xué)股份有限公司
【公開日】2015年8月5日
【申請日】2013年10月7日
【公告號】EP2904394A1, US20150241424, WO2014055995A1