樣本分析裝置及樣本分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種通過(guò)測(cè)定由尿或體液等樣本與試劑混合而成的測(cè)定試樣來(lái)分析樣本的樣本分析裝置和樣本分析方法。
【背景技術(shù)】
[0002]對(duì)采自生物體的血液或尿等樣本所含有的成分進(jìn)行分析的樣本分析在臨床檢查領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，近年來(lái)，能自動(dòng)分析樣本的樣本分析裝置獲得應(yīng)用。
[0003]專利文獻(xiàn)I公開了一種用流式細(xì)胞技術(shù)分析細(xì)胞的細(xì)胞分析裝置。此專利文獻(xiàn)I中記述的細(xì)胞分析裝置將含有核酸被染色的細(xì)胞的測(cè)定試樣放入流動(dòng)室，激光照射該流動(dòng)室，在流經(jīng)流動(dòng)室的測(cè)定試樣上形成測(cè)定試樣流動(dòng)方向的直徑(寬)3~8 ym的射束點(diǎn)，用此時(shí)焚光信號(hào)的脈沖面積(積分值)區(qū)分出核大小為10~15 μπι的異常細(xì)胞和核大小為5~7 μπι的正常細(xì)胞。
[0004]專利文獻(xiàn)
專利文獻(xiàn)1:特開(日本專利公開)2009-103687號(hào)公報(bào)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題
尿和體液中不僅有白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、異型細(xì)胞等較大細(xì)胞，有時(shí)還含有細(xì)菌等小細(xì)胞。例如，白細(xì)胞直徑大約10~15μπι，其核直徑約為ΙΟμπι。與此相對(duì)，細(xì)菌直徑僅約0.4-2 μ mo即細(xì)菌比白細(xì)胞的核還要小很多。
[0006]專利文獻(xiàn)I所記述的細(xì)胞分析裝置適用于分析含有大型細(xì)胞的樣本，但不適合分析諸如尿或體液那種既含有大型細(xì)胞也含有小型細(xì)胞的、所含有的細(xì)胞大小差異大的樣本。
[0007]本發(fā)明正是有鑒于此，其目的在于提供一種能分析含有從大細(xì)胞到小細(xì)胞的、細(xì)胞大小差異大的尿或體液等樣本的樣本分析裝置和樣本分析方法。
[0008]解決技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)本發(fā)明第一形態(tài)涉及的樣本分析裝置具有:混合樣本和核酸染色試劑制備測(cè)定試樣的試樣制備部件、用光照射所述測(cè)定試樣所含有的細(xì)胞，接收細(xì)胞所發(fā)出的熒光，輸出熒光信號(hào)的光學(xué)檢測(cè)部件、從所述光學(xué)檢測(cè)部件輸出的熒光信號(hào)獲取細(xì)胞熒光脈沖面積和熒光強(qiáng)度的信號(hào)處理部件、以及能夠根據(jù)熒光脈沖面積檢測(cè)所述測(cè)定試樣所含有的白細(xì)胞，根據(jù)熒光強(qiáng)度檢測(cè)所述測(cè)定試樣所含有的細(xì)菌的信息處理部件。
[0009]由此，能夠根據(jù)熒光脈沖面積正確檢測(cè)出白細(xì)胞這一大型細(xì)胞，根據(jù)熒光強(qiáng)度正確檢測(cè)出細(xì)菌這種小型細(xì)胞。
[0010]在上述發(fā)明中還可以如下設(shè)計(jì):所述信息處理部件能夠根據(jù)熒光脈沖面積進(jìn)一步檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的上皮細(xì)胞。以此，還能夠根據(jù)熒光脈沖面積正確檢測(cè)出上皮細(xì)胞這一大型細(xì)胞。
[0011]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述信息處理部件能夠根據(jù)熒光脈沖面積進(jìn)一步檢測(cè)出所述測(cè)定試樣中所含有的與白細(xì)胞和上皮細(xì)胞不同的異型細(xì)胞。由此，根據(jù)熒光脈沖面積也能夠正確檢測(cè)出異型細(xì)胞這種大型細(xì)胞。
[0012]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述信息處理部件能夠根據(jù)熒光強(qiáng)度進(jìn)一步檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的真菌。由此，還能夠根據(jù)熒光強(qiáng)度正確地檢測(cè)真菌這一小型細(xì)胞。
[0013]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述信息處理部件能夠根據(jù)熒光強(qiáng)度進(jìn)一步檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的精子。由此，還能夠根據(jù)熒光強(qiáng)度正確地檢測(cè)精子這一小型細(xì)胞。
[0014]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述信息處理部件能夠根據(jù)熒光強(qiáng)度進(jìn)一步檢測(cè)出所述測(cè)定試樣中所含有的毛滴蟲。由此，還能夠根據(jù)熒光強(qiáng)度正確地檢測(cè)毛滴蟲這一小型細(xì)胞。
[0015]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述光學(xué)檢測(cè)部件包括形成測(cè)定試樣的試樣流的流動(dòng)室、以及向所述流動(dòng)室照射光并形成射束點(diǎn)的光源，所述試樣流流動(dòng)方向的射束點(diǎn)直徑為3 μ m以上8 μ m以下。由此，射束點(diǎn)直徑小于大型細(xì)胞、大于小型細(xì)胞，根據(jù)熒光脈沖面積就能正確檢測(cè)大型細(xì)胞，根據(jù)熒光強(qiáng)度就能正確檢測(cè)小型細(xì)胞。
[0016]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述光學(xué)檢測(cè)部件接收細(xì)胞所發(fā)出的散射光，輸出散射光信號(hào)，所述信息處理部件能夠根據(jù)基于散射光信號(hào)的細(xì)胞的參數(shù)和所述熒光脈沖面積檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的白細(xì)胞。由此，不僅使用熒光脈沖面積，還使用基于散射光信號(hào)的細(xì)胞的參數(shù)，能夠更準(zhǔn)確地檢測(cè)白細(xì)胞。
[0017]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述信息處理部件能夠根據(jù)基于散射光信號(hào)的細(xì)胞的參數(shù)和所述熒光強(qiáng)度檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的細(xì)菌。由此，不僅使用熒光強(qiáng)度，還使用基于散射光信號(hào)的細(xì)胞的參數(shù)，能夠更準(zhǔn)確地檢測(cè)細(xì)菌。
[0018]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述光學(xué)檢測(cè)部件能夠用第一檢測(cè)靈敏度和靈敏度高于第一檢測(cè)靈敏度的第二檢測(cè)靈敏度輸出熒光信號(hào)，所述信息處理部件能夠根據(jù)以第一檢測(cè)靈敏度輸出的熒光信號(hào)的熒光脈沖面積檢測(cè)白細(xì)胞，根據(jù)以第二檢測(cè)靈敏度輸出的熒光信號(hào)的熒光強(qiáng)度檢測(cè)細(xì)菌。由此，根據(jù)細(xì)胞大小使用適當(dāng)靈敏度的熒光信號(hào)，能夠更準(zhǔn)確地檢測(cè)白細(xì)胞和細(xì)菌。
[0019]本發(fā)明另一形態(tài)的樣本分析裝置具有:混合樣本和核酸染色試劑制備測(cè)定試樣的試樣制備部件、具有光源和流動(dòng)室，在所述光源光照下的所述流動(dòng)室內(nèi)形成所述測(cè)定試樣的試樣流，以此從所述測(cè)定試樣所含有的細(xì)胞獲取反映細(xì)胞大小或核直徑的參數(shù)以及細(xì)胞的熒光脈沖面積和熒光強(qiáng)度的測(cè)定部件、根據(jù)熒光脈沖面積識(shí)別具有在所述一定值以上的所述參數(shù)的細(xì)胞的種類，根據(jù)熒光強(qiáng)度識(shí)別具有不到一定值的所述參數(shù)的細(xì)胞的種類的信息處理部件。
[0020]由此，能夠根據(jù)反映細(xì)胞大小或核直徑的參數(shù)值適當(dāng)使用熒光脈沖面積和熒光強(qiáng)度，得以正確檢測(cè)各種大小或各種核直徑的細(xì)胞。
[0021]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述信息處理部件將具有一定值以上的所述參數(shù)且具有在一定范圍內(nèi)的熒光脈沖面積的細(xì)胞識(shí)別為白細(xì)胞、上皮細(xì)胞或異型細(xì)胞，將具有不到一定值的所述參數(shù)且具有在一定范圍內(nèi)的熒光強(qiáng)度的細(xì)胞識(shí)別為細(xì)菌、真菌、精子或毛滴蟲。由此，能夠用熒光脈沖面積正確檢測(cè)出白細(xì)胞、上皮細(xì)胞或異型細(xì)胞這種大型細(xì)胞，用熒光強(qiáng)度正確檢測(cè)細(xì)菌、真菌、精子或毛滴蟲這種小型細(xì)胞。
[0022]在上述形態(tài)下還可以如下設(shè)計(jì):所述測(cè)定部件包括:接收所述試樣流中所含有的細(xì)胞的散射光，輸出散射光信號(hào)的散射光受光部件、接收熒光并輸出熒光信號(hào)的熒光受光部件，所述信息處理部件將所述散射光信號(hào)作為所述反映細(xì)胞大小或核直徑的參數(shù)使用。
[0023]本發(fā)明的另一形態(tài)提供一種樣本分析裝置，包括:混合樣本和核酸染色試劑，制備測(cè)定試樣的試樣制備部件；用光照射所述測(cè)定試樣中所含有的細(xì)胞，接收細(xì)胞所發(fā)出的熒光，輸出熒光信號(hào)的光學(xué)檢測(cè)部件；從所述光學(xué)檢測(cè)部件輸出的熒光信號(hào)獲取細(xì)胞熒光脈沖面積和熒光強(qiáng)度的信號(hào)處理部件；處理器；及儲(chǔ)存有計(jì)算機(jī)程序以便使所述處理器進(jìn)行以下處理的存儲(chǔ)部件:根據(jù)熒光脈沖面積檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的白細(xì)胞；根據(jù)熒光強(qiáng)度檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的細(xì)菌。
[0024]優(yōu)選地，所述樣本是尿。
[0025]本發(fā)明其他形態(tài)涉及一種樣本分析方法，其具有以下步驟:混合樣本和核酸染色試劑，制備測(cè)定試樣的步驟；讓所制備的測(cè)定試樣流過(guò)流動(dòng)室，用光照射所述流動(dòng)室中的測(cè)定試樣的試樣流的步驟；輸出與測(cè)定試樣中的細(xì)胞在光照下發(fā)出的熒光相應(yīng)的熒光信號(hào)的步驟；從熒光信號(hào)中獲取細(xì)胞的熒光脈沖面積和熒光強(qiáng)度的步驟；根據(jù)熒光脈沖面積檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的白細(xì)胞的步驟；根據(jù)熒光強(qiáng)度檢測(cè)所述測(cè)定試樣中所含有的細(xì)菌的步驟。
[0026]本發(fā)明的另一形態(tài)提供一種樣本分析方法，包括以下步驟:混合樣本和核酸染色試劑，制備測(cè)定試樣的步驟；用光照射制備的所述測(cè)定試樣的步驟；根據(jù)所述測(cè)定試樣中的細(xì)胞在光照下發(fā)出的光，獲取反映細(xì)胞大小或核直徑的參數(shù)以及細(xì)胞的熒光脈沖面積和熒光強(qiáng)度的步驟；根據(jù)熒光脈沖面積識(shí)別具有一定值以上的所述參數(shù)的細(xì)胞種類的步驟；根據(jù)熒光強(qiáng)度識(shí)別具有不到一定值的所述參數(shù)的細(xì)胞種類的步驟。
[0027]發(fā)明的有益效果采用本發(fā)明，能夠正確分析含有從大型細(xì)胞到小型細(xì)胞的、大小差距大的細(xì)胞的尿或體液等樣本。
【附圖說(shuō)明】
[0028]圖1為實(shí)施方式涉及的尿樣本分析裝置的整體結(jié)構(gòu)斜視圖；
圖2為試樣制備部件和光學(xué)檢測(cè)部件簡(jiǎn)要功能的結(jié)構(gòu)圖；
圖3為光學(xué)檢測(cè)部件的結(jié)構(gòu)圖；
圖4為實(shí)施方式涉及的尿樣本分析裝置的結(jié)構(gòu)框圖；
圖5為信息處理部件的結(jié)構(gòu)框圖；
圖6為實(shí)施方式涉及的尿樣本分析裝置的樣本測(cè)定處理步驟的流程圖；
圖7為測(cè)定試樣制備處理步驟的流程圖；
圖8為有核成分測(cè)定處理步驟的流程圖；
圖9A為說(shuō)明光學(xué)信號(hào)強(qiáng)度的示意圖；
圖9B為說(shuō)明光學(xué)信號(hào)脈沖幅度的示意圖；
圖9C為說(shuō)明光學(xué)信號(hào)脈沖面積的示意圖；
圖10為測(cè)定數(shù)據(jù)分析處理步驟的流程圖；
圖11為說(shuō)明尿中有核成分大小與核酸量關(guān)系的示意圖；
圖12A為說(shuō)明從大型有形成分獲得的熒光信號(hào)脈沖面積的示意圖； 圖12B為說(shuō)明從小型有形成分獲得的熒光信號(hào)脈沖面積的示意圖；
圖13為前向散射光強(qiáng)度和前向散射光脈沖幅度所規(guī)定的特征參數(shù)空間中有核成分的出現(xiàn)區(qū)域的示意圖；
圖14為前向散射光強(qiáng)度和第一高靈敏度熒光強(qiáng)度所規(guī)定的特征參數(shù)空間中有核成分出現(xiàn)區(qū)域的示意圖；
圖15為前向散射光脈沖幅度和低靈敏度熒光脈沖面積所規(guī)定的特征參數(shù)空間中有核成分出現(xiàn)區(qū)域的示意圖；
圖16A為白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果一例的散點(diǎn)圖；
圖16B為上皮細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果一例的散點(diǎn)圖；
圖16C為異型細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果一例的散點(diǎn)圖；
圖17為前向散射光強(qiáng)度和第一高靈敏度熒光強(qiáng)度所規(guī)定的特征參數(shù)空間中有核成