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      樣本分析裝置及樣本分析方法_3

      文檔序號(hào):8556679閱讀:來(lái)源:國(guó)知局
      r>[0053]圖6為尿樣本分析裝置100的樣本測(cè)定處理步驟的流程圖。首先,用戶(hù)通過(guò)信息處理部件13的輸入部件408輸入測(cè)定實(shí)施指示(步驟SlOl)。收到此指示,CPU401向測(cè)定單元10發(fā)送指示開(kāi)始測(cè)定的指示數(shù)據(jù)(步驟S102)。測(cè)定單元10收到指示數(shù)據(jù)(步驟S103)后,微型計(jì)算機(jī)11實(shí)施測(cè)定試樣制備處理(步驟S104)、無(wú)核成分測(cè)定處理(步驟S105)和有核成分測(cè)定處理(步驟S106)。
      [0054]圖7為測(cè)定試樣制備處理步驟的流程圖。在測(cè)定試樣制備處理中,首先微型計(jì)算機(jī)11控制樣本分配部件1,讓吸管17從試管T吸一定量尿樣本,并分別向反應(yīng)槽2u和反應(yīng)槽2b分裝一定量尿樣本(步驟S201、S202)。
      [0055]微型計(jì)算機(jī)11控制試樣制備部件2實(shí)施以下步驟S203~S207。在步驟S203和步驟S204,向反應(yīng)槽2u定量分裝一定量稀釋液19u和染色液18u (步驟S203及步驟S204)。在步驟S205及步驟S206,向反應(yīng)槽2b定量分裝一定量稀釋液19b和染色液18b(步驟S205及步驟S206)。反應(yīng)槽2u和反應(yīng)槽2b分別被無(wú)圖示加熱器加熱到一定溫度,在此狀態(tài)下,在步驟S207中用螺旋槳狀的攪拌器(無(wú)圖示)攪拌各槽內(nèi)的混合物(步驟S207)。以此在反應(yīng)槽2u制備無(wú)核成分測(cè)定用第一測(cè)定試樣,在反應(yīng)槽2b制備有核成分測(cè)定用第二測(cè)定試樣。步驟S207的處理結(jié)束后,微型計(jì)算機(jī)11將處理返回主程序。
      [0056]在無(wú)核成分測(cè)定處理(步驟S105)中,與鞘液一起,第一測(cè)定試樣從反應(yīng)槽2u供應(yīng)到流動(dòng)室51,在流動(dòng)室51形成鞘液包裹下的第一測(cè)定試樣的試樣流。然后,光源53向形成的試樣流照射激光光束,在流動(dòng)室51形成射束點(diǎn)。每當(dāng)粒子通過(guò)射束點(diǎn)時(shí)就會(huì)產(chǎn)生前向散射光、焚光和側(cè)向散射光。前向散射光、焚光和側(cè)向散射光分別被第一散射光受光部件55、熒光受光部件59和第二散射光受光部件58接收并轉(zhuǎn)換為電信號(hào),輸出FSC、FLH、FLL和SSCo輸出的FSC、FLH、FLL和SSC被放大線(xiàn)路50放大。
      [0057]放大線(xiàn)路50放大的FSC、FLH、FLL和SSC由過(guò)濾線(xiàn)路6進(jìn)行過(guò)濾處理后,由A/D轉(zhuǎn)換器7轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號(hào),由數(shù)字信號(hào)處理線(xiàn)路8施以一定的信號(hào)處理。以此對(duì)每個(gè)通過(guò)流動(dòng)室51的粒子提取前向散射光強(qiáng)度(FSCP)、前向散射光脈沖幅度(FSCW)、熒光強(qiáng)度(FLHP)、熒光脈沖幅度(FLLW)及側(cè)向散射光強(qiáng)度(SSCP)等分析用參數(shù)。分析用參數(shù)作為測(cè)定數(shù)據(jù)存入存儲(chǔ)器9,結(jié)束無(wú)核成分測(cè)定處理。
      [0058]下面就有核成分測(cè)定處理(步驟S106)進(jìn)行說(shuō)明。圖8為有核成分測(cè)定處理步驟的流程圖。在有核成分測(cè)定處理中,首先微型計(jì)算機(jī)11以第一設(shè)定值設(shè)定第一散射光受光部件55、第二散射光受光部件58和熒光受光部件59的靈敏度及放大線(xiàn)路50的增益(步驟S311)。此第一設(shè)定值是用于測(cè)定白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、真菌等比細(xì)菌大且有核的有核細(xì)胞的設(shè)定值。微型計(jì)算機(jī)11驅(qū)動(dòng)無(wú)圖示的壓縮機(jī)向流動(dòng)室51輸送鞘液(步驟S312)。在如此向流動(dòng)室51輸送鞘液的狀態(tài)下,微型計(jì)算機(jī)11驅(qū)動(dòng)無(wú)圖示的壓縮機(jī)從反應(yīng)槽2b向流動(dòng)室51供應(yīng)第二測(cè)定試樣(步驟S313)。
      [0059]由此,在流動(dòng)室51形成被鞘液包被的第二測(cè)定試樣的試樣流。形成的試樣流受到來(lái)自光源53的激光光束照射(步驟S314),在流動(dòng)室51形成射束點(diǎn)。粒子每次通過(guò)射束點(diǎn),就會(huì)產(chǎn)生前向散射光、焚光和側(cè)向散射光。前向散射光、焚光和側(cè)向散射光分別被第一散射光受光部件55、熒光受光部件59和第二散射光受光部件58接收并轉(zhuǎn)換為電信號(hào)(步驟
      S315)。熒光受光部件59將受光水平轉(zhuǎn)換為電信號(hào)時(shí)的靈敏度根據(jù)在步驟S311設(shè)定的有核細(xì)胞測(cè)定用第一設(shè)定值而定。
      [0060]第一散射光受光部件55、熒光受光部件59和第二散射光受光部件58將與受光水平相應(yīng)的電信號(hào)作為FSC、FL及SSC輸出。光學(xué)檢測(cè)部件5將FL分成FLH和FLL并輸入放大線(xiàn)路50。輸入的信號(hào)被放大線(xiàn)路50放大。放大線(xiàn)路50的信號(hào)放大率根據(jù)步驟S311設(shè)定的有核細(xì)胞測(cè)定用第一設(shè)定值而定。
      [0061]第一設(shè)定值與后述第二設(shè)定值相比靈敏度更低。換言之,當(dāng)設(shè)定為第一設(shè)定值時(shí),F(xiàn)L以低于設(shè)定為第二設(shè)定值時(shí)的放大率放大。具體而言,當(dāng)設(shè)定為第一設(shè)定值時(shí),粒子發(fā)出的熒光被熒光受光部件59以低靈敏度進(jìn)行光電轉(zhuǎn)換后輸出。此時(shí)光學(xué)檢測(cè)部件5輸出的FLH和FLL分別由放大線(xiàn)路50的高倍放大器和低倍放大器以高放大率和低放大率放大。其結(jié)果,獲得以低放大率放大的低靈敏度熒光信號(hào)(FLL)和以高放大率放大的第一高靈敏度焚光信號(hào)(以下稱(chēng)“FLH1”)兩種焚光信號(hào)。
      [0062]放大的FSC、FLL、FLH1及SSC由過(guò)濾線(xiàn)路6施以過(guò)濾處理后,由A/D轉(zhuǎn)換器7轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號(hào),由數(shù)字信號(hào)處理線(xiàn)路8施以一定的信號(hào)處理。
      [0063]數(shù)字信號(hào)處理線(xiàn)路8通過(guò)信號(hào)處理從光學(xué)信號(hào)(FSC、SSC、FLL、FLHl)提取用于分析處理的參數(shù)。分析用參數(shù)包括:前向散射光強(qiáng)度(以下稱(chēng)“FSCP”)、前向散射光脈沖幅度(以下稱(chēng)“ FSCW”)、側(cè)向散射光強(qiáng)度(以下稱(chēng)“ SSCP ”)、低靈敏度熒光強(qiáng)度(以下稱(chēng)“ FLLP ”)、低靈敏度熒光脈沖幅度(以下稱(chēng)“FLLW”)、低靈敏度熒光脈沖面積(以下稱(chēng)“FLLA”)、第一高靈敏度熒光強(qiáng)度(以下稱(chēng)“FLHP1”)、第一高靈敏度熒光脈沖幅度(以下稱(chēng)“FLHW1”)和第一高靈敏度熒光脈沖面積(以下稱(chēng)“FLHA1 ”)。
      [0064]下面根據(jù)圖9A~圖9C說(shuō)明分析用參數(shù)的提取。分析用參數(shù)就各光學(xué)信號(hào)而言有“強(qiáng)度”、“脈沖幅度”和“脈沖面積”三種。強(qiáng)度用P表示。脈沖幅度用W表示。脈沖面積用A表示。FSCP、SSCP, FLLP和FLHPl等光學(xué)信號(hào)強(qiáng)度分別獲取的是圖9A所示脈沖的峰值高度PP。FSCW,FLLff和FLHWl等光學(xué)信號(hào)脈沖幅度如圖9B所示,分別獲取的是脈沖從超過(guò)一定閾值的時(shí)間Tl到低于閾值的時(shí)間T2的間隔PW。FLLA和FLHAl等光學(xué)信號(hào)脈沖面積如圖9C所示,獲取的是信號(hào)強(qiáng)度的時(shí)間積分值,即用信號(hào)脈沖波形線(xiàn)L1、表示脈沖高度取一定閾值時(shí)的時(shí)間的直線(xiàn)L2、L3以及表示光學(xué)信號(hào)強(qiáng)度值為O的直線(xiàn)L4包圍的區(qū)域(圖中畫(huà)斜線(xiàn)的區(qū)域)PA的面積。
      [0065]在此所示分析用參數(shù)的提取方法僅為一例,可以用其他不同的提取方法。脈沖面積只要是反映脈沖時(shí)間曲線(xiàn)下面積的值就可以,也可以是近似值,并不限于時(shí)間積分值。例如,脈沖面積可以是脈沖幅度與峰值高度的積,也可以是從脈沖幅度與峰值高度求出的三角形面積。在提取時(shí)間積分值的方式中,底邊也可以不是強(qiáng)度為O的直線(xiàn),可適當(dāng)設(shè)定。比如,也可以以圖9C所示的一定閾值為底邊,或者以只有鞘液流入流動(dòng)室51時(shí)的脈沖值為基準(zhǔn)值,以此為底邊。
      [0066]再次參照?qǐng)D8,如上所述從光學(xué)信號(hào)提取的參數(shù)作為測(cè)定數(shù)據(jù)存入存儲(chǔ)器9 (步驟
      S316)o
      [0067]從第二測(cè)定試樣供給流動(dòng)室51起經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后,微型計(jì)算機(jī)11便將熒光受光部件59的靈敏度和放大線(xiàn)路50的增益變?yōu)榈诙O(shè)定值(步驟S317)。此第二設(shè)定值為測(cè)定細(xì)菌用的設(shè)定值。
      [0068]在熒光受光部件59和放大線(xiàn)路50以第二設(shè)定值設(shè)定的狀態(tài)下,測(cè)定部件1a測(cè)定第二測(cè)定試樣(步驟S318)。由此,熒光受光部件59以依第二設(shè)定值而定的靈敏度輸出FL,第一散射光受光部件55、第二散射光受光部件58和熒光受光部件59的輸出信號(hào)以按第二設(shè)定值設(shè)定的放大率被放大線(xiàn)路50放大。
      [0069]第二設(shè)定值比上述第一設(shè)定值靈敏度高。換言之,當(dāng)設(shè)定為第二設(shè)定值時(shí),F(xiàn)L以高于設(shè)定為第一設(shè)定值時(shí)的放大率放大。當(dāng)設(shè)定為第二設(shè)定值時(shí),熒光受光部件59進(jìn)行光電轉(zhuǎn)換的受光靈敏度設(shè)定為第一設(shè)定值的數(shù)倍。放大線(xiàn)路50的放大率與第一設(shè)定值中的放大率相同。在設(shè)定為第二設(shè)定值的狀態(tài)下,熒光受光部件59輸出的FL由放大線(xiàn)路50中的高倍放大器放大,并獲取其作為第二高靈敏度熒光信號(hào)(以下稱(chēng)“FLH2”)。
      [0070]熒光受光部件59在第二設(shè)定值中的靈敏度是熒光受光部件59在第一設(shè)定值中的靈敏度的5倍。這是因?yàn)榧?xì)菌比白細(xì)胞和上皮細(xì)胞等有核細(xì)胞小,熒光量比有核細(xì)胞小。將熒光受光部件59的靈敏度調(diào)到高于測(cè)定有核細(xì)胞時(shí)的靈敏度,使之達(dá)到適于細(xì)菌的靈敏度,這樣能夠精確地檢測(cè)出細(xì)菌。在本實(shí)施方式中,在第二設(shè)定值中,為了使放大率達(dá)到5倍,僅提高了熒光受光部件59的靈敏度,但也可以使熒光受光部件59的靈敏度和放大線(xiàn)路50的放大率兩者同時(shí)提高。比如,在第二設(shè)定值中,可以將熒光受光部件59的靈敏度設(shè)定為第一設(shè)定值中靈敏度的2.5倍,同時(shí)將放大線(xiàn)路50的放大率設(shè)定為第一設(shè)定值中放大率的2倍。
      [0071]放大后的FSC、FLH2和SSC由過(guò)濾線(xiàn)路6進(jìn)行過(guò)濾處理后,由A/D轉(zhuǎn)換器7轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號(hào),再由數(shù)字信號(hào)處理線(xiàn)路8進(jìn)行一定的信號(hào)處理。通過(guò)這種信號(hào)處理,從FSC提取FSCP和FSCW,從SSC提取SSCP。再提取FLH2的峰值作為第二高靈敏度熒光強(qiáng)度(以下稱(chēng)“FLHP2”)。提取FLH2的脈沖幅度作為第二高靈敏度熒光脈沖幅度(以下稱(chēng)“FLHW2”)。提取FLH2的脈沖面積作為第二高靈敏度熒光脈沖面積(以下稱(chēng)“FLHA2”)。以此就通過(guò)流動(dòng)室51的各個(gè)粒子獲取分析用參數(shù)。就各粒子提取的參數(shù)數(shù)據(jù)作為測(cè)定數(shù)據(jù)存入存儲(chǔ)器9 (步驟S319)。上述處理完成后,微型計(jì)算機(jī)11將處理返回主程序。
      [0072]上述有核成分測(cè)定處理后,微型計(jì)算機(jī)11將無(wú)核成分測(cè)定處理和有核成分測(cè)定處理生成的測(cè)定數(shù)據(jù)發(fā)送至信息處理部件13 (步驟S107),結(jié)束處理。
      [0073]信息處理部件13接收測(cè)定數(shù)據(jù)(步驟S108)后,CPU401
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