一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)學生物實驗裝置，尤其涉及一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾。
【背景技術(shù)】
[0002]免疫染色是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，檢測特定蛋白(抗原)的表達情況，是發(fā)現(xiàn)機體在生理或病理狀態(tài)下功能變化最常用的方法之一，最常用的是免疫組織化學染色和免疫熒光染色。在實驗過程中，經(jīng)常需要研究至少兩種抗原/蛋白在同一細胞或組織標本中的表達，以便明確它們各自的定位或共表達情況。目前最常采用的方法是采用流式細胞術(shù)，但這種技術(shù)需要的細胞量較大，且經(jīng)過固定和石蠟包埋的組織用于流式細胞術(shù)檢測效果不佳，不能準確顯示各種抗原在組織和細胞在體內(nèi)的自然分布狀況。如果組織標本量極少(如細針穿刺標本)或組織內(nèi)待檢測細胞量極少，則很難進行流式細胞術(shù)檢測。通過在組織切片上對同一標本進行多次免疫染色，研究多種抗原的表達，則能解決這個問題。例如，對組織切片進行抗原A的免疫熒光染色后，由于抗原與抗體的結(jié)合為非共價結(jié)合，并不牢固，可以把組織放入緩沖液中，適當加熱，就可使已經(jīng)與抗原A結(jié)合的抗體及相應(yīng)的顯色劑脫離下來，又可以進行抗原B的免疫熒光染色，采用同樣的方法還能進行抗原C、抗原D的染色。目前已經(jīng)出現(xiàn)針對組織切片的多重免疫染色技術(shù)，即對同一組織切片進行一次染色，研究多種抗原表達，如一種基于同種屬來源第一抗體的免疫熒光雙重標記方法(CN201410099873.2)，這種方法的缺點是，在具體實施過程中，需要進行標記的抗原常不僅僅是兩種，多數(shù)情況下是5-10種，甚至達20余種，這種多重染色方法不能滿足需要，需要進行多次染色。當然，可將多重染色與多次染色方法結(jié)合起來，能提高工作效率。一個重要的問題是，即使是單次的免疫染色，組織切片脫離載玻片已是經(jīng)常發(fā)生的問題，多次染色更容易導(dǎo)致組織切片脫離載玻片，導(dǎo)致實驗無法進行。一種防脫玻片裝置(CN201220446225.6)雖然提供了一種可行的防止組織切片脫離載玻片的措施，但并不適用于多次免疫染色。因而，提供一種能使組織切片經(jīng)受多次免疫染色的裝置十分必要。
[0003]另外，在多次染色過程中，需要對組織進行每次染色后拍照，將多次的染色照片進行比對，才能弄清楚同一個細胞究竟表達哪些蛋白，因而，所提供的裝置還要便于在顯微鏡下拍照。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有載玻片在用于多次免疫染色時組織切片容易脫離載玻片的問題，提供一種用于對組織切片進行多次(5~20次)免疫染色的載片夾。
[0005]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題采用的技術(shù)方案是:一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾，包括相延續(xù)的上片和下片兩部分組成。作為優(yōu)選的方案，所述上片由向上隆起的厚邊和內(nèi)部的篩狀蓋片組成，篩狀蓋片厚度為0.13mm~0.16mm，有細密的孔，孔徑能保證讓大分子蛋白質(zhì)(如鼠IgG)自由通過而正常細胞不能通過，最佳孔徑為3μπι~5μπι，孔間距與孔徑相等，厚邊的厚度以為最佳；作為次選的方案，所述上片的內(nèi)部篩狀蓋片的部分可以沒有孔，結(jié)構(gòu)與下述的下片相同，但這個方案的缺點是染色液僅能從四周的縫隙通過擴散到達組織切片，會帶來染色所需時間長和染色不均勻的問題。所述下片由向下隆起的厚邊和內(nèi)部的載片組成，載片類似于市售組織病理學檢查使用的蓋玻片，能保證良好的透光性，適合在顯微鏡下觀察和拍照，最適厚度為0.13mm~0.16mm，無孔，厚邊的厚度以為最佳。上片和下片相對面平整，大小和形狀一致，可為長方形或正方形及其他形狀，以正方形和長方形為佳，可參考現(xiàn)有市售蓋玻片的大小制作成多種規(guī)格，如24mmX32mm、18mmX 18mm。上片和下片的相對應(yīng)的邊中有一條邊相延續(xù)，使載片夾類似于書的形狀，當充分翻開上片時，能把組織切片順利的放置于下片上，當把上片向下與下片緊緊靠攏時，上片與下片之間形成一個寬度為4 μπι~6 μπι的縫隙，能將組織切片夾在其中而不能位移。所述載片夾采用硬塑料制成，該塑料制品的硬度在100R~135R之間，無色透明，耐酸堿及有機溶劑，耐100°C的高溫。該載片夾除用于免疫染色外，還可用于原位雜交及其相關(guān)的生物醫(yī)學檢測。
[0006]本發(fā)明提供了一種結(jié)構(gòu)簡單，成本低廉，能較好的保證組織切片的穩(wěn)定性以及抗體與組織接觸反應(yīng)有效性，便于拍照。
【附圖說明】
[0007]圖1是一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾的平面視圖；
圖2是一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾縱切面的示意圖。
[0008]具體實施方法
下面結(jié)合附圖和具體實例對本發(fā)明進行詳細說明。
[0009]如圖1和圖2所示，一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾，包括相延續(xù)的上片3和下片4兩部分組成。上片3由向上隆起的厚邊I和內(nèi)部的篩狀蓋片組成，篩狀蓋片厚度為0.15mm，孔徑為4 μ m，孔間距為4 μπι，厚邊I的厚度2mm。所述下片4由向下隆起的厚邊I和內(nèi)部的載片組成，載片的厚度為0.15mm，厚邊I的厚度為2mm。上片和下片的相對面平整，為長方形，大小均為24_X32mm。上片3和下片4的相對應(yīng)的左側(cè)邊在連接6處相延續(xù)，將上片3充分翻開，把組織切片2放置于下片4上后，把上片3向下與下片4緊緊靠攏，用橡皮筋捆縛或用夾子夾住開口 5 —側(cè)，上片與下片之間形成一個寬度為4 μ m的縫隙，能將厚度為4 μπι的組織切片2夾在其間。所述載片夾采用硬塑料制成，該塑料制品的硬度在110R，無色透明，耐酸堿及有機溶劑，耐100°C的高溫。在進行免疫染色時，可取石蠟切片或冰凍切片，將組織切片平整的放置在下片4的上面中央，將上片3靠攏下片4，用橡皮筋捆縛或用夾子夾住開口 5 —側(cè)，即可按照說明書操作，直接將染色相關(guān)試劑依次滴加在上片3的上方，試劑自由擴散至組織切片進行染色，在需要洗去已滴加的試劑時，直接將該載片夾放入清洗液中。在完成對一種抗原的染色后，將載片夾的下片4 一側(cè)對著顯微鏡物鏡，聚焦于組織切片，即可通過連接顯微鏡的照相機采集到組織切片染色后的照片。在將上一次染色的抗體及相關(guān)顯色試劑洗去后，可繼續(xù)進行另一種抗原的染色。
【主權(quán)項】
1.一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾，其特征在于包括相延續(xù)的上片和下片兩部分組成，由無色透明的硬塑料制成，上片和下片相對面平整，大小和形狀一致，上片和下片的相對應(yīng)的邊中有一條邊相延續(xù)，使載片夾類似于書的形狀，當充分翻開上片時，能把組織切片順利的放置于下片上，當把上片向下與下片緊緊靠攏時，上片與下片之間形成一個寬度為4 μηι~6 μ??的縫隙，能將組織切片夾在其中而不能位移。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的上片，其特征在于由向上隆起的厚邊和內(nèi)部的篩狀蓋片組成，篩狀蓋片有細密的孔，能保證讓大分子蛋白質(zhì)自由通過而正常細胞不能通過。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的下片，其特征在于由向下隆起的厚邊和內(nèi)部無孔的載片組成，具有良好的透光性。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾，其特征在于上片和下片向?qū)γ嫫秸笮『托螤钜恢?，上片和下片的相對?yīng)的邊中有一條邊相延續(xù)，使載片夾類似于書的形狀，當充分翻開上片時，能把組織切片順利的放置于下片上，當把上片向下與下片緊緊靠攏時，上片與下片之間形成一個寬度為4 μπι~6 μπι的縫隙，能將組織切片夾在其中而不能位移。
【專利摘要】一種用于對組織切片進行多次免疫染色的載片夾，包括相延續(xù)的上片和下片兩部分組成，其特征在于所述載片夾由無色透明的硬塑料制成，上片和下片相對面平整，大小和形狀一致，上片和下片的相對應(yīng)的邊中有一條邊相延續(xù)，使載片夾類似于書的形狀，當充分翻開上片時，能把組織切片順利的放置于下片上，當把上片向下與下片緊緊靠攏時，上片與下片之間形成一個寬度為4μm~6μm的縫隙，能將組織切片夾在其中而不能位移。本發(fā)明提供了一種結(jié)構(gòu)簡單，成本低廉，能較好的保證組織切片的穩(wěn)定性以及抗體與組織接觸反應(yīng)有效性，便于拍照。
【IPC分類】G01N33/58
【公開號】CN105021816
【申請?zhí)枴緾N201510478579
【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請人】南昌德漫多科技有限公司
【公開日】2015年11月4日
【申請日】2015年8月7日