一種莠去津殘留藥害的快速鑒定方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于農(nóng)藥檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種莠去津殘留藥害的快速鑒定方法及 其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 莠去津（atrazine)為均三嗪類除草劑，主要用于防除玉米、高粱和甘蔗等作物田 防除各種闊葉雜草及禾本科雜草。由于其對(duì)玉米、甘蔗等作物具有高度的選擇性和殺草譜 廣、使用方便、價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)，成為田間普遍使用的除草劑。我國(guó)從20世紀(jì)60年代開始 引進(jìn)莠去津，隨著使用年限的增加，以及對(duì)這種除草劑的過(guò)度依賴及頻繁使用，導(dǎo)致田間雜 草逐漸產(chǎn)生抗藥性。但是，為了達(dá)到預(yù)期的防除效果，農(nóng)民會(huì)不斷的加大藥劑使用劑量和次 數(shù)，此舉最終導(dǎo)致更加嚴(yán)重的后果，除草劑的成分絕大部分都游離存在于土壤中，經(jīng)常導(dǎo)致 后茬作物出現(xiàn)藥害，常表現(xiàn)為植株生長(zhǎng)受抑制、整株枯死，最終產(chǎn)量顯著下降。由于除草劑 的種類較多，藥害癥狀特別是抑制生長(zhǎng)或植株枯死的藥害癥狀相似，因此，在生產(chǎn)上僅從植 株外觀形態(tài)上較難準(zhǔn)確判斷是哪種除草劑產(chǎn)生的殘留藥害。本發(fā)明針對(duì)莠去津，建立了一 種準(zhǔn)確、快速的鑒定方法，對(duì)于正確選擇補(bǔ)救藥劑具有重要意義。本發(fā)明方法中涉及利用 IMAGING-PAM早期檢測(cè)具備科學(xué)、直觀、快速、簡(jiǎn)單、可靠的優(yōu)點(diǎn)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種莠去津殘 留藥害的快速鑒定方法。該方法能快速、有效且不受濃度限制地鑒定作物體內(nèi)莠去津的殘 留藥害影響，特別是對(duì)作物光合作用的影響。
[0004] 本發(fā)明另一目的在于提供上述方法在農(nóng)田作物、土壤和水體中莠去津殘留藥害早 期鑒定中的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的目的通過(guò)下述方案實(shí)現(xiàn)：
[0006] -種莠去津殘留藥害的快速鑒定方法，該方法通過(guò)檢測(cè)作物葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度變化 進(jìn)行鑒定。
[0007] 本發(fā)明方法通過(guò)檢測(cè)作物前后兩次的熒光強(qiáng)度變化進(jìn)行鑒定，前后兩次檢測(cè)的時(shí) 間間隔不小于24h。
[0008] 本發(fā)明方法優(yōu)選利用IMAGING-PAM檢測(cè)儀檢測(cè)作物葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度變化進(jìn)行鑒 定。
[0009] 所述作物優(yōu)選為黃瓜或豇豆。
[0010] 所述檢測(cè)的部位優(yōu)選為葉片或莖基部。
[0011] 所述的葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度優(yōu)選指光合參數(shù)最大光合效率（Fv/Fm)和實(shí)際光合效率 (ΠΙ)。
[0012] 上述方法具體包括以下步驟：
[0013] 直接檢測(cè)待測(cè)作物前后兩次的葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度，比較前后兩次的光合參數(shù)最大光 合效率（Fv/Fm)和實(shí)際光合效率（YII)，鑒定待測(cè)作物的莠去津殘留藥害。
[0014] 或?qū)o(wú)藥害作物種子，播種于待測(cè)土壤中，培養(yǎng)至作物長(zhǎng)出葉片，檢測(cè)作物前后兩 次的葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度，比較前后兩次的光合參數(shù)最大光合效率（Fv/Fm)和實(shí)際光合效率 (YII)，鑒定待測(cè)作物的莠去津殘留藥害。
[0015] 或?qū)o(wú)藥害作物種子，播種于待測(cè)水中，培養(yǎng)至作物長(zhǎng)出葉片，檢測(cè)作物前后兩 次的葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度，比較前后兩次的光合參數(shù)最大光合效率（Fv/Fm)和實(shí)際光合效率 (YII)，鑒定待測(cè)作物的莠去津殘留藥害。
[0016] 前后兩次檢測(cè)的時(shí)間間隔不小于24h。
[0017] 上述的培養(yǎng)至作物長(zhǎng)出葉片優(yōu)選為培養(yǎng)5天。
[0018] 所述葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度優(yōu)選通過(guò)IMAGING-PAM檢測(cè)儀進(jìn)行檢測(cè)得到。
[0019] 為了獲得更合適的光強(qiáng)，測(cè)定Fv/Fm時(shí)，所述工藝條件優(yōu)選為：先照射一個(gè)光強(qiáng)小 于1 μ moL · m 2 · s 1的測(cè)量光，再照射飽和脈沖光10000 μ moL · m 2 · s 1O
[0020] 為了獲得更合適的光強(qiáng)，測(cè)定YII時(shí)，所述工藝條件優(yōu)選為：內(nèi)源光化光為 133 μ moL · m 2 · s、
[0021] 所述的無(wú)藥害作物種子優(yōu)選在播種前預(yù)先催芽露白至0. 5~1cm。
[0022] 所述培養(yǎng)優(yōu)選在光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行，溫度優(yōu)選為28/25Γ (白天/晚上）。
[0023] Fv/Fm反映了植物潛在的最大光合作用能力；YII反映了植物實(shí)際光合能力的大 小。當(dāng)Fv/Fm和YII均出現(xiàn)下降時(shí)，可鑒定作物受到藥害，且受害程度越嚴(yán)重，下降越明顯， 說(shuō)明其生長(zhǎng)環(huán)境中莠去津的濃度越高。且，本發(fā)明方法鑒定藥害的最低濃度為0. 09ppm，相 比目測(cè)藥害鑒定的濃度的0. 9ppm，檢測(cè)下限更低，具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確特點(diǎn)，可以作為農(nóng)田 作物、土壤和水體中是否存在莠去津殘留藥害診斷的一種新手段。
[0024] 普通目測(cè)鑒定莠去津藥害的現(xiàn)象一般為：作物下胚軸逐漸出現(xiàn)失綠，下胚軸近生 長(zhǎng)點(diǎn)部位出現(xiàn)斷裂，且從作物受到藥害到出現(xiàn)上述藥害現(xiàn)象至少需要10~11天。而本發(fā) 明方法時(shí)間短，對(duì)于農(nóng)田作物，只需監(jiān)測(cè)1天前后的熒光強(qiáng)度即可鑒定得到結(jié)果，對(duì)于未栽 種作物土壤或水體，只需6天即可鑒定其藥害。
[0025] 本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，具有如下的優(yōu)點(diǎn)及有益效果：
[0026] (1)本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠。
[0027] (2)本發(fā)明鑒定結(jié)果速度快，且鑒定下限低，可快速、準(zhǔn)確鑒定藥害。
【附圖說(shuō)明】
[0028] 圖1為不同濃度莠去津處理5天對(duì)黃瓜下胚軸及根長(zhǎng)的影響。
[0029] 圖2為不同濃度莠去津處理5天對(duì)黃瓜最大光合效率的影響。
[0030] 圖3為不同濃度莠去津處理5天對(duì)黃瓜實(shí)際光合效率的影響。
[0031] 圖4為不同濃度莠去津處理11天對(duì)黃瓜最大光合效率的影響。
[0032] 圖5為不同濃度莠去津處理11天對(duì)黃瓜實(shí)際光合效率的影響。
[0033] 圖6為不同濃度莠去津處理11天對(duì)豇豆下胚軸及根長(zhǎng)的影響。
[0034] 圖7為不同濃度莠去津處理11天對(duì)豇豆最大光合效率的影響。
[0035] 圖8為不同濃度莠去津處理11天對(duì)豇豆實(shí)際光合效率的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0036] 下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限 于此。
[0037] 實(shí)施例1
[0038] (1)將消毒后無(wú)藥害黃瓜種子放入種子發(fā)芽盒中，置于28~30°C的生化培養(yǎng)箱中 進(jìn)行催芽，直至作物發(fā)芽芽長(zhǎng)約〇. 5~lcm，取出備用。
[0039] (2)莠去津梯度濃度溶液的配置：利用常規(guī)完全營(yíng)養(yǎng)液配置不同濃度梯度的莠去 津溶液 〇· 009mg a. i. /L、0. 09mg a. i. /L、0. 45mg a. i. /L、0. 9mg a. i. /L、I. 8mg a. i. /L。
[0040] (3)分別取IOOmL不同濃度的莠去津溶液，加入5粒發(fā)芽種子，空白培養(yǎng)液為對(duì)照， 置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：溫度為白天/晚上：28/25°C，光照周期為：12h/12h，光 照強(qiáng)度為3500~40001x。
[0041] (4)培養(yǎng)5天后，將作物幼苗從光照培養(yǎng)箱中取出后暗適應(yīng)15~20min，然后放入 測(cè)定箱中，采用IMAGING-ΡΑΜ檢測(cè)儀測(cè)定作物葉片和莖基部熒光參數(shù)PS II最大光合效率 (Fv/Fm)、PS II實(shí)際光合效率（YII)，得到最低檢測(cè)下限0· 09ppm。
[0042] 實(shí)施例2
[0043] (1)將消毒后無(wú)藥害黃瓜種子放入種子發(fā)芽盒中，置于28~30°C的生化培養(yǎng)箱中 進(jìn)行催芽，直至作物發(fā)芽芽長(zhǎng)約〇. 5~lcm，取出備用。
[0044] (2)莠去津梯度濃度溶液的配置：利用完全營(yíng)養(yǎng)液配置不同濃度梯度的莠去津溶 液 0· 009mg a. i. /L、0. 09mg a. i. /L、0. 45mg a. i. /L、0. 9mg a. i. /L、L 8mg a. i. /L0
[0045] (3)分別取IOOmL不同濃度的溶液，加入5顆發(fā)芽種子，置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，兩 組四個(gè)重復(fù)，一組培養(yǎng)5天，一組培養(yǎng)11天，培養(yǎng)條件：溫度為白天/晚上：28/25°C，光照周 期為：12h/12h，光照強(qiáng)度為3500~40001x。
[0046] (4)分別培養(yǎng)5天和11天后，將作物幼苗從光照培養(yǎng)箱中取出后，量取根長(zhǎng)，下胚 軸長(zhǎng)度，并觀察植株生長(zhǎng)狀況，暗適應(yīng)15~20min，然后放入測(cè)定箱中，采用IMAGING-PAM 檢測(cè)儀測(cè)定作物葉片和莖基部熒光參