一種利巴韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于材料技術領域，設及一種電位型傳感器的制備方法，具體設及利己韋 林分子印跡電位型傳感器的制備方法，可應用于食品、藥品、環(huán)境樣品中利己韋林的分析。
【背景技術】 陽00引利己韋林化ibavirin)是一種廣譜抗病毒的藥物，可W抑制多種DNA或RNA病毒的生長，臨床上被廣泛應用于治療慢性丙型肝炎、甲型或乙型流感病毒、 帶狀瘤疹、病毒引起的鼻炎、咽炎、急性上呼吸道感染等巧eddyKRJournalof Hepatology, 2009, 50:402 - 411 ;余文英，亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2010,6(11) : 175-177 ;梁益輝等， 中醫(yī)臨床研究，2012, 4(20) : 46-47)。由于利己韋林是人用藥，用于動物病毒性疾病缺乏科 學、有效的實驗數據，因此中國在2005年禁止將利己韋林應用于動物上（余文英，亞太傳 統(tǒng)醫(yī)藥，2010, 6 (11) : 175-177)。在2012年，我國發(fā)生了 "速生雞"事件，有些養(yǎng)殖戶為了提 高自身利益，違規(guī)將利己韋林作為獸藥使用或者添加到飼料中給白羽雞喂食，使它能快速 生長。不幸的是利己韋林會在動物體內殘留，人類食用運些雞肉會間接攝入利己韋林，易在 人體內產生耐藥性，還可能會產生溶血性貧血、致崎、生殖毒性等不良反應，對人體健康造 成損害。因此，開發(fā)一種簡便快速、經濟、可靠的方法用于日常監(jiān)控利己韋林藥物制劑和飼 料質量、藥物檢測對實驗室有重要的意義。 W03]目前，有關利己韋林的檢測方法主要有紫外分光光度計（林紅等，兒 科藥學雜志，2003,9 (5): 21-22)、毛細管電泳法（MichaelC，Electrophores is, 2004, 25:1615-1622)、高效液相色譜法-串聯質譜法（MargaritaM，Journal of曲armaceuticalandBiomedicalAnalysis, 2009, 49:1233 - 1240)、液相色 譜-串聯質譜法值arlingtonD,ClinicaQiimicaActa, 2011, 12:2332-233f5)、 高效液相色譜法（AntonioDA,Journalof化armaceuticalandBiomedical Analysis, 2012,66:376-380)、膠束液相色譜法（MohieSED,JournalofLiquid Qiromatography&RelatedTechnologies, 2014, 37:1785-1804)等。但運些方法的分析時間 長，需要復雜的前處理，且所用儀器昂貴，選擇性不高。
[0004] 電位傳感器由一臺電位計和一對電極（指示電極和參比電極）組成，是一種 儀器設備最簡單的檢測技術之一。電位傳感器具有操作簡單，易于微型化，所使用儀器 價格低廉，具有選擇性高、線性范圍寬、分析時間短、可用于實時監(jiān)測的優(yōu)點，且樣品不 需要復雜的前處理。目前用于電位傳感器測試的選擇性指示電極主要有氣離子選擇性 電極、氯離子電位傳感器、鉛離子電位傳感器等。由于商品可用的指示電極多為無機陰 陽離子，種類少，嚴重限制了其在生產實際中的應用。為解決運一問題，人們開發(fā)了分 子印跡電化學傳感器，如諾氣沙星分子印跡電位傳感器（Felis分鐘aTC,Mic;rochim Acta, 2011, 172:15-23)、沒食子酸分子印跡電化學傳感器（YanM,Biosensorsand Bioelectronics, 2011，28:291-297)、克倫特羅分子印跡電位傳感器化iangRN,ChinJ Anal化em，2012, 40 (3) ,354-358)、茶堿分子印跡膜電化學傳感器（譚學才等，化學學報， 2012, 70巧）：1088-1094)等，但文獻報道多為分子印跡伏安傳感器，分子印跡電位傳感器 很少，主要原因是分子印跡電位傳感器存在響應不夠快，檢出限相對高。為加快響應時間， Basoz油al提出在制備分子印跡聚合物敏感膜時，加入陽離子或陰離子交換劑等措施降低 陰離子的干擾，提高膜的導電性和靈敏度，其線性范圍為1. 0X10 6~1. 0X10 2mol/l，斜 率29.OmV/decade，檢出限1. 12X10 6mol/L，響應時間小于20秒，抑使用范圍為3~5， 使用壽命為10天，應用于酒和魚樣品中組胺的檢測，加標回收率在99. 3%~101. 7%之間 (BasozabalI,BiosensorsandBioelectronics, 2014, 58:138-144)。

【發(fā)明內容】

[0005] 為了解決電位傳感器存在響應不夠快，檢出限相對高的問題，本發(fā)明的目的在于 提供一種利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法，所制備的利己韋林分子印跡電位型 傳感器能應用于飼料、利己韋林注射液、利己韋林片劑的檢測，建立一種簡便快速、經濟、可 靠的檢測飼料、利己韋林注射液、利己韋林片劑樣品中利己韋林的方法。
[0006] 本發(fā)明所述的一種利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法，其包括W下步 驟：A.將利己韋林、甲基丙締酸溶于N，N-二甲基甲酯胺中，調抑值，超聲10分鐘，通氮氣 10分鐘，密封，于20-25°C進行自組裝8小時；B.將乙二醇二甲基丙締酸醋、偶氮二異下臘 加入上述混合物中，超聲10分鐘，通氮氣10分鐘，密封，水浴下攬拌反應，得到利己韋林分 子印跡聚合物；C.將聚合物用體積比為6:2:2的甲醇：乙酸：水混合液洗脫，然后用乙醇、 水洗至中性，干燥；D.取聚氯乙締、癸二酸二辛醋和氧化石墨締，溶于四氨巧喃，超聲分散 石墨締，再加入利己韋林分子印跡聚合物，攬拌混合均勻，倒入燒杯中揮發(fā)，得到利己韋林 分子印跡聚合物敏感膜化將敏感膜切成直徑為8mm的圓形切片，用導電膠將敏感膜粘在 聚氯乙締管頂端，得到利己韋林分子印跡電位型傳感器；電極的內充液為含化C1的緩沖溶 液和利己韋林標準溶液。
[0007] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟A中，利己韋林的量為0. 1~0.2mmol，甲基丙締酸的量為利己韋林摩爾用量的 5倍，N，N-二甲基甲酯胺的量為18~22血，調抑值是用冰醋酸調至抑4~5。
[0008] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟B中，乙二醇二甲基丙締酸醋加入量為利己韋林摩爾用量的18倍，偶氮二異下 臘加入量為20~25mg。
[0009] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟B中，水浴溫度為50~55°C，攬拌反應時間為20~30小時。
[0010] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟C中，干燥是在40~45°C真空干燥箱中進行，干燥時間為36小時。
[0011] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟D中，聚氯乙締的量為380~450mg，癸二酸二辛醋的用量為聚氯乙締用量的2 倍，氧化石墨締的量為10~15mg。
[0012] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟D中，四氨巧喃的用量為17~25mU超聲時間為40~60分鐘。
[0013] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟B中，加入利己韋林分子印跡聚合物的量為80~lOOmg。
[0014] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟D中，攬拌采用磁力攬拌方式，攬拌速度為3(K)r/min，攬拌時間為30~40分 鐘；倒入燒杯為平均倒在4個lOmL燒杯中；敏感膜的厚度為0. 3~0. 4mm。
[0015] 根據本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進一步特征在 于，所述步驟E中，電極內充化C1溶液