一種祁門紅茶中含氮化合物的鑒定方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種祁門紅茶中含氮化合物的鑒定方法，屬于分析檢測技術領域，包括一個提取祁門紅茶中含氮化合物的步驟；一個利用氣相色譜?氮磷檢測器?質譜聯(lián)用技術檢測分析上述所得到的祁門紅茶中的含氮化合物，并對其進行定性定量分析的步驟。本發(fā)明采用靜態(tài)頂空固相微萃取結合氣相色譜?氮磷檢測器?質譜聯(lián)用技術分析祁門紅茶茶湯中的含氮化合物，形成了一套祁門紅茶中含氮化合物的定性定量分析方法，操作簡單、易行，適用性廣泛。
【專利說明】
一種祁門紅茶中含氮化合物的鑒定方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明屬于分析檢測技術領域，尤其涉及一種分析茶類含氮化合物的方法，特別 是一種祁門紅茶中含氮化合物的檢測方法。
【背景技術】
[0002] 祁門紅茶是中國歷史名茶，距今已有百余年的生產歷史；祁門紅茶是著名的紅茶 精品，簡稱祁紅，產于安徽省祁門、東至、貴池、石臺、黟縣，以及江西的浮梁一帶。祁紅外形 條索緊細勻整，鋒苗秀麗，色澤烏潤(俗稱"寶光"）；香氣酷似果香，又帶蘭花香(號稱"祁門 香"），馥郁持久；湯色紅艷明亮，滋味甘鮮醇厚，葉底(泡過的茶渣)紅亮。祁門紅茶，是"紅 茶"中的佼佼者，向以"香高、味醇、形美、色艷"四絕馳名于世;似花、似果、似蜜的"祁門香" 以聞名于世，位居世界三大高香名茶之首;又因祁門紅茶有一種特殊的芳香;故外國人稱祁 門紅茶為"祁門香"，"王子香"，"群芳最"，"紅茶皇后"。
[0003] 祁門紅茶中的含氮化合物與其他物質一樣是構成祁門紅茶風味的重要因素，決定 祁門紅茶的風味和典型性。國內外研究者采用定性定量的辦法已經鑒定出許多種決定祁門 紅茶風味的物質。近些年對祁門紅茶風味物質的研究發(fā)現(xiàn)雖然含氮化合物在祁門紅茶中含 量甚微，然該類化合物風味閾值低，具有堅果香和焙烤香等怡人風味，并對其他香味物質有 明顯的烘托疊加作用，是祁門紅茶中一類重要的風味化合物，但目前國內外對祁門紅茶中 的含氮化合物的研究仍處于起步階段，應用常規(guī)的氣相色譜法(FID檢測器)直接進樣分析 存在一定困難。本發(fā)明旨在采用靜態(tài)頂空固相微萃取結合氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用 技術，對市面上祁門紅茶茶樣中的含氮化合物進行分析研究，建立一套祁門紅茶中含氮化 合物的定性定量分析方法，操作簡單、易行，適用性廣泛。
【發(fā)明內容】
[0004] 針對現(xiàn)有技術中的上述技術問題，本發(fā)明提供了一種祁門紅茶中含氮化合物的鑒 定方法，所述的這種方法要解決現(xiàn)有技術中測定祁門紅茶中的含氮化合物成份和濃度不準 確的技術問題。
[0005] 本發(fā)明一種祁門紅茶中含氮化合物的檢測方法，包括下列步驟：
[0006] 1) 一個提取祁門紅茶中含氮化合物的步驟:先將蒸餾水于80°C的恒溫水浴鍋中平 衡lOmin，加入祁門紅茶，所述的祁門紅茶與蒸餾水的質量比為1:10,搖勾，浸泡lOmin后篩 網過濾，茶湯冷卻后放入4°C冰箱中備用;然后取5g該茶湯，添加lg氯化鈉、添加10yL濃度為 4m g//L的2-甲氧基-3-甲基吡嗪置于15mL或20mL頂空瓶中，頂空瓶用硅膠墊皮密封，SPME條 件為:將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上3~4cm，恒溫水浴溫度45~50°C 下，萃取50~55min;萃取完成后，迅速將萃取頭插入氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用儀進 樣口，于250°C下解吸3~5min;
[0007] 2)-個利用氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用技術檢測分析步驟1)所得到的祁門 紅茶茶湯中的含氮化合物的步驟：
[0008] 氣相色譜條件:DB-5毛細管色譜柱，其參數為60m X 0.25mm，0.25μL?;手動不分流進 樣，進樣口溫度250 °C ;程序升溫:初始溫度40 °C，保持6min，以3 °C/min的速率升至100 °C，不 保持，以5°C/min的速率升至230°C，保持lOmin;
[0009] NPD溫度：250 °C ;氫氣流速：2 . OmL/min;空氣流速：60mL/min;載氣He，流速30mL/ min；
[0010] MS條件:El電離源，電子能量70eV，掃描范圍30~450amu，離子源溫度230°C;傳輸 線溫度280°C ;四極桿溫度150°C ;
[0011] 3) -個對檢出的含氮化合物進行定性分析的步驟，未知化合物的質譜通過與 wiley7n，NIST 11及標準品對比進行定性；
[0012] 4)-個對檢出的含氮化合物進行定量分析的步驟，稱取一定量標準品，配制于蒸 餾水中作為單標貯備液，準確吸取一定量的標準貯備液用蒸餾水配制成一系列濃度的混合 標樣;其中內標物質為2-甲氧基-3-甲基吡嗪。
[0013] 進一步的，所述的分析檢測儀器為氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用儀。
[0014] 進一步的，所述的定量方法為內標標準曲線法定量。
[0015] 本發(fā)明采用了靜態(tài)頂空固相微萃取結合氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用技術，對 祁門紅茶中的含氮化合物進行分析研究，建立一套適用于祁門紅茶中含氮化合物的有效定 性定量分析方法。本發(fā)明操作簡單、易行，達到了滿足生產快速檢測需求的目的，適用性廣 泛。
【附圖說明】
[0016] 圖1為市售祁門紅茶所得茶湯中的含氮化合物色譜圖。
【具體實施方式】
[0017] 為進一步闡釋采用靜態(tài)頂空固相微萃取結合氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用技 術快速檢測并定性定量祁門紅茶中含氮化合物的方法，下面結合實例作更詳盡的說明。
[0018] 實施例1
[0019] 本方法主要采用靜態(tài)頂空固相微萃取結合氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用技術 對祁門紅茶中含氮化合物進行快速檢測及定性定量，具體步驟如下：
[0020] 1) 一個提取祁門紅茶中含氮化合物的步驟:首先準備祁門紅茶茶湯，先稱量80g80 °C的蒸餾水于250mL的具塞錐形瓶中，于80°C的恒溫水浴鍋中平衡lOmin，加入8g茶樣，每隔 2min搖勻，浸泡lOmin，篩網過濾，茶湯迅速冷卻，放入4°C冰箱中備用。然后取5g該茶湯，添 加lg氯化鈉、添加l〇yL濃度為4mg/L的2-甲氧基-3-甲基吡嗪置于15mL頂空瓶中，頂空瓶用 硅膠墊皮密封，SPME條件為:將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上3.2cm，恒 溫水浴溫度50°C下，萃取55min;萃取完成后，迅速將萃取頭插入氣相色譜-氮磷檢測器-質 譜聯(lián)用儀進樣口，于250°C下解吸5min;
[0021] 2)用氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用技術檢測分析步驟1)所得到的祁門紅茶中 的含氮化合物、并對其含氮化合物進行定性定量分析：
[0022] 氣相色譜條件:DB-5毛細管色譜柱，其參數為60m X 0.25mm，0.25μπι;手動不分流進 樣，進樣口溫度250 °C ;程序升溫:初始溫度40 °C，保持6min，以3 °C/min的速率升至100 °C，不 保持，以5°C/min的速率升至230°C，保持lOmin;
[0023] NPD溫度：250 °C ;氫氣流速：2 . OmL/min;空氣流速：60mL/min;載氣He，流速30mL/ min；
[0024] MS條件:El電離源，電子能量70eV，掃描范圍30~450amu，離子源溫度230°C;傳輸 線溫度280°C ;四極桿溫度150°C ;
[0025] 3)檢出物質的定性:未知化合物的質譜通過與wiley7n，NIST 11及標準品對比進 行定性；
[0026] 4)定量分析:稱取一定量標準品，配制于蒸餾水中作為單標貯備液，準確吸取一定 量的標準貯備液用蒸餾水配制成一系列濃度的混合標樣;其中內標物質為2-甲氧基-3-甲 基吡嗪。
[0027] 表1本發(fā)明方法祁門紅茶中的含氮化合物鑒定結果
[0030]由表1可知，利用氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用技術共鑒定出祁門紅茶中14種 含氮化合物，其中噻唑類3種、吡嗪類9種、吡咯類2種。該方法能快速定性出多種含氮化合 物，準確測定出祁門紅茶中含氮化合物的含量。
【主權項】
1. 一種祁門紅茶中含氮化合物的鑒定方法，其特征在于包括下列步驟： 1) 一個提取祁門紅茶中含氮化合物的步驟:先將蒸餾水于80°c的恒溫水浴鍋中平衡 lOmin，加入祁門紅茶，所述的祁門紅茶與蒸餾水的質量比為1:10,搖勻，浸泡lOmin后篩網 過濾，茶湯冷卻后放入4 °C冰箱中備用；然后取5g該茶湯，添加 lg氯化鈉、添加10yL濃度為 4mg//L的2-甲氧基-3-甲基吡嗪置于15mL或20mL頂空瓶中，頂空瓶用硅膠墊皮密封，SPME條 件為:將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上3~4cm，恒溫水浴溫度45~50°C 下，萃取50~55min;萃取完成后，迅速將萃取頭插入氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用儀進 樣口，于250°C下解吸3~5min; 2) -個利用氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用技術檢測分析步驟1)所得到的祁門紅茶 茶湯中的含氮化合物的步驟： 氣相色譜條件:DB-5毛細管色譜柱，其參數為60m X 0.25mm，0.25μπι;手動不分流進樣， 進樣口溫度250°C ;程序升溫:初始溫度40°C，保持6min，以3°C/min的速率升至100°C，不保 持，以5°C/min的速率升至230°C，保持lOmin; NPD溫度:250 °C ;氫氣流速:2. OmL/min;空氣流速:60mL/min;載氣He，流速30mL/min; MS條件:EI電離源，電子能量70eV，掃描范圍30~450amu，離子源溫度230°C ;傳輸線溫 度280 °C;四極桿溫度150 °C; 3) -個對檢出的含氮化合物進行定性分析的步驟，未知化合物的質譜通過與wiley7n， NIST 11及標準品對比進行定性； 4) 一個對檢出的含氮化合物進行定量分析的步驟，稱取一定量標準品，配制于蒸餾水 中作為單標貯備液，準確吸取一定量的標準貯備液用蒸餾水配制成一系列濃度的混合標 樣;其中內標物質為2-甲氧基-3-甲基吡嗪。2. 根據權利要求1所述的一種祁門紅茶中含氮化合物的鑒定方法，其特征在于:所述的 分析檢測儀器為氣相色譜-氮磷檢測器-質譜聯(lián)用儀。3. 根據權利要求1所述的一種祁門紅茶中含氮化合物的鑒定方法，其特征在于:所述的 定量方法為內標標準曲線法定量。
【文檔編號】G01N30/06GK106018623SQ201610552952
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年7月14日
【發(fā)明人】肖作兵, 王紅玲, 牛云蔚, 馬寧, 朱建才
【申請人】上海應用技術學院