一種快速定量檢測(cè)amh的試紙的制作方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于臨床醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域，具體涉及一種用于定量檢測(cè)抗苗勒氏管激素(AMH)的試紙。
【【背景技術(shù)】】
[0002]抗苗勒氏管激素(AMH)是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β超家族的成員之一，由兩個(gè)相同的70kb亞基通過(guò)二硫鍵連接組成的二聚糖蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量為140X 103，主要由處于生長(zhǎng)期卵泡中顆粒細(xì)胞所分泌。AMH在調(diào)控卵泡生長(zhǎng)和發(fā)育，維持卵巢儲(chǔ)備功能中發(fā)揮重要作用，是評(píng)估卵巢儲(chǔ)備功能的客觀(guān)準(zhǔn)確指標(biāo)。
[0003]而臨床上主要是根據(jù)年齡、竇卵泡數(shù)目、濾泡刺激激素和雌激素水平等來(lái)評(píng)估卵巢功能。這些傳統(tǒng)方法檢查容易受到各種因素影響而產(chǎn)生誤差，同時(shí)容易受到檢測(cè)者主觀(guān)判斷而產(chǎn)生結(jié)果偏倚;此外，還受到月經(jīng)周期的時(shí)限制約，且其檢測(cè)數(shù)值根據(jù)月經(jīng)周期的波動(dòng)而波動(dòng)，因而無(wú)法準(zhǔn)確及時(shí)給予判斷。此外還可以通過(guò)酶聯(lián)免疫技術(shù)(ELISA)檢測(cè)抗苗勒氏管激素(AMH)，但同樣存在以下缺點(diǎn):檢測(cè)設(shè)備要求高，成本高;干擾因素較多，重復(fù)性不好;檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)。因此酶聯(lián)免疫技術(shù)檢測(cè)抗苗勒氏管激素(AMH)不適合臨床快速診斷。
[0004]鑒于目前尚無(wú)快速的定量檢測(cè)方法，本實(shí)用新型的目的是提供一種可用于快速定量檢測(cè)抗苗勒氏管激素(AMH)的試紙以及一種可用于快速定量檢測(cè)抗苗勒氏管激素(AMH)的試紙盒，所述試紙和試紙盒具有方便快捷、操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。
【【實(shí)用新型內(nèi)容】】
[0005]本實(shí)用新型的一個(gè)目的是提供一種快速定量檢測(cè)AMH的試紙，本實(shí)用新型所述快速定量檢測(cè)AMH的試紙具有方便快捷、操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，適于臨床快速診斷。
[0006]本實(shí)用新型的技術(shù)方案是:
[0007]—種用于定量檢測(cè)AMH的試紙，包括支撐墊片I，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，另一端上方層疊連接偶合物墊片4，所述偶合物墊片上方層疊連接樣本墊片5，所述樣本墊片另一端部的下方設(shè)有第一固定部件6，上方設(shè)有第二固定部件7，其特征在于，所述硝酸纖維素膜2中間部位設(shè)有檢測(cè)線(xiàn)8并包被有AMH蛋白抗體，檢測(cè)線(xiàn)兩邊分別設(shè)有控制線(xiàn)9，所述偶合物墊片4上涂布有金標(biāo)記的AMH單克隆抗體或多克隆抗體以及控制線(xiàn)偶合物。
[0008]進(jìn)一步地，所述控制線(xiàn)9包被有抗DNP抗體，所述控制線(xiàn)偶合物為DNP-BSA標(biāo)記的膠體金。
[0009]進(jìn)一步地，所述第一固定部件6為雙面膠，第二固定部件7為單面膠。
[0010]進(jìn)一步地，所述試紙外還包括一外殼10，所述外殼包裹所述試紙外，露出樣本墊片
5、硝酸纖維素膜2上的檢測(cè)線(xiàn)8和兩條控制線(xiàn)9、以及吸水墊3。
[0011]所述外殼優(yōu)選塑料外殼。
[0012]進(jìn)一步地，所述兩條控制線(xiàn)9與檢測(cè)線(xiàn)8為平行設(shè)置。
[0013]本實(shí)用新型所述的試紙盒具有方便攜帶和貯存的優(yōu)點(diǎn)。
[0014]本實(shí)用新型所述的快速定量檢測(cè)AMH的試紙或試紙盒的工作原理是:采用雙向側(cè)流免疫反應(yīng)原理，通過(guò)雙抗體夾心法制備而成。檢驗(yàn)時(shí)樣本中的AMH抗原首先與偶合墊上的AMH抗體偶合物發(fā)生免疫反應(yīng)，形成免疫復(fù)合物。其后免疫復(fù)合物隨著樣本在硝基纖維素膜上層析流動(dòng)，當(dāng)免疫復(fù)合物層析至硝基纖維素膜上的檢測(cè)區(qū)(AMH檢測(cè)線(xiàn))時(shí)，與預(yù)先包被在硝基纖維素膜上的抗AMH抗體發(fā)生反應(yīng)從而被固定在硝基纖維素膜的檢測(cè)線(xiàn)上。血液中的AMH越多，檢測(cè)線(xiàn)上的復(fù)合物越多，條帶上的光密度值就越高。同時(shí)，在檢測(cè)過(guò)程中，控制線(xiàn)偶合物(即DNP-BSA標(biāo)記的膠體金)，也會(huì)隨樣本在硝基纖維素膜上層析，當(dāng)層析至硝基纖維素膜的控制線(xiàn)時(shí)，DNP-BSA膠體金會(huì)與預(yù)先包被在硝基纖維素膜上的抗DNP抗體發(fā)生反應(yīng)從而被固定在對(duì)照區(qū)(控制線(xiàn))上。由于膠體金為紅色，因而固定在硝基纖維素膜控制線(xiàn)上的抗DNP中的DNP-BSA膠體金免疫復(fù)合物將顯示紅色。當(dāng)樣本中不含AMH時(shí)，則只顯示兩條控制線(xiàn)。當(dāng)樣本含AMH時(shí)，檢測(cè)線(xiàn)就會(huì)清晰的顯示出來(lái)。
[0015]當(dāng)反應(yīng)結(jié)束后，利用多功能免疫檢測(cè)儀(瑞萊生物工程(深圳)有限公司)將控制線(xiàn)和檢測(cè)線(xiàn)的光密度進(jìn)行分析，并將所分析得到的結(jié)果進(jìn)行運(yùn)算，從而得到相對(duì)光密度值(RI)。然后檢測(cè)儀根據(jù)已預(yù)先設(shè)置在檢測(cè)儀內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)AMH的濃度進(jìn)行計(jì)算并顯示結(jié)果，以ng/mL為單位表示。
【【附圖說(shuō)明】】
[0016]圖1是本實(shí)用新型所述快速定量檢測(cè)AMH的試紙的一種優(yōu)選實(shí)施方式的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0017]其中，1:支撐墊片，2:硝酸纖維素膜，3:吸水墊，4:偶合物墊片，5:樣本墊片，6:第一固定部件，7:第二固定部件，8:檢測(cè)線(xiàn)，9:控制線(xiàn)。
[0018]圖2是本實(shí)用新型所述快速定量檢測(cè)AMH的試紙盒的一種優(yōu)選實(shí)施方式的示圖。
[0019]其中，3:吸水墊，5:樣本墊片，8:檢測(cè)線(xiàn)，9:控制線(xiàn)，10:外殼。
【【具體實(shí)施方式】】
[0020]以下結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型所述快速定量檢測(cè)AMH的試紙或試紙盒進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，不能理解為是對(duì)本實(shí)用新型的限制。以下實(shí)施例中所使用的材料和試劑除特別說(shuō)明外，均為普通市售。
[0021 ]【實(shí)施例1】制備快速定量檢測(cè)AMH的試紙
[0022]如圖1所示的試紙結(jié)構(gòu)，包括支撐墊片I，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，另一端上方層疊連接偶合物墊片4，所述偶合物墊片遠(yuǎn)離硝酸纖維素膜2的一端上方層疊連接樣本墊片5，所述樣本墊片另一端部的下方粘接第一固定部件6，優(yōu)選雙面膠，上方粘接第二固定部件7，優(yōu)選單面膠，其特征在于，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測(cè)線(xiàn)8包被有AMH抗體，檢測(cè)線(xiàn)兩邊分別設(shè)有控制線(xiàn)9，所述偶合物墊片4上涂布有金標(biāo)記的AMH單克隆抗體以及控制線(xiàn)偶合物。
[0023]所述控制線(xiàn)9包被有抗DNP抗體，所述控制線(xiàn)偶合物為DNP-BSA標(biāo)記的膠體金。
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