含有不可消化寡糖的發(fā)酵配方物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含不可消化寡糖的發(fā)酵嬰兒配方物或第二階段配方物，其用于減少嬰兒哭泣持續(xù)時間、降低嬰兒哭泣發(fā)作以及絞痛發(fā)病率。
【專利說明】
含有不可消化寡糖的發(fā)酵配方物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于嬰兒營養(yǎng)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 出生后，嬰兒的消化道必須適應(yīng)完全的腸道喂養(yǎng)。同時仍未成熟的消化道必須發(fā) 育并成熟。對嬰兒而言，人乳是優(yōu)選的喂養(yǎng)方法。然而，也有使母乳喂養(yǎng)不可能進(jìn)行或不太 期望進(jìn)行的情況。在這些情況下，嬰兒配方物可被視為替代品。調(diào)節(jié)現(xiàn)代嬰兒配方物的組成 以使其符合快速生長和發(fā)育的嬰兒的許多特殊營養(yǎng)需求。
[0003] 嬰兒絞痛在嬰兒中是普遍的臨床問題。它是所有早期兒科醫(yī)生訪診的10至20%的 原因并常常導(dǎo)致父母親的疲憊和緊張。已觀察到產(chǎn)婦產(chǎn)后抑郁癥的風(fēng)險增加。在10至30% 原本健康的嬰兒中觀察到嬰兒絞痛。嬰兒絞痛通常發(fā)生在2周至4個月的年齡。
[0004] 嬰兒絞痛的原因尚未完全了解，這使得難以找到好的預(yù)防或治療方法。有時使用 抗膽堿能藥如雙環(huán)胺和雙環(huán)維林，但是由于嚴(yán)重的副作用，它們是不被推薦的。營養(yǎng)的作用 已是研究的主題，在牛乳過敏是絞痛的潛在原因的那些情況下，低敏配方物可以解決該問 題。然而，牛乳過敏僅存在于小部分患有絞痛的嬰兒中。
[0005] EP 2 520 181公開了發(fā)酵的或部分發(fā)酵的嬰兒配方物用于促進(jìn)腸健康的用途，尤 其包括絞痛或痙攣的治療和/或預(yù)防。Savino等，2006，Eur J Clin Nutr 60,1304-1310公 開了在患有絞痛的嬰兒中使用部分水解配方物7和14天后使作為哭泣發(fā)作而測量的絞痛發(fā) 作減少，所述部分水解配方物補充有果寡糖（f rue to-oli go saccharides)和半乳寡糖 (galacto-oligosaccharides)并包含低乳糖和在β-位增加的棕櫚酸。EP1685763公開了 GOS 和聚果糖（polyfructose)的結(jié)合物用于尤其是絞痛和/或腹部痙攣的用途。W0 2010/ 008278公開了抗生素或益生菌用于治療腸運動紊亂的用途。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，當(dāng)將包含至少兩種不可消化寡糖的部分發(fā)酵嬰兒配方物給予嬰兒 時，與僅給與不含不可消化寡糖的部分發(fā)酵嬰兒配方物或含有不可消化寡糖的非發(fā)酵嬰兒 配方物的對照相比，絞痛發(fā)病率和每天哭泣發(fā)作次數(shù)在統(tǒng)計上顯著降低。所述降低出乎意 料地比當(dāng)給予不含不可消化寡糖的部分發(fā)酵嬰兒配方物時，或當(dāng)給予含有不可消化寡糖的 非發(fā)酵嬰兒配方物時所觀察到的要高得多。
【具體實施方式】
[0007] 因此，本發(fā)明涉及降低嬰兒絞痛發(fā)病率的方法，其包括給予所述嬰兒嬰兒配方物 或第二階段配方物(follow on formula)，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含：
[0008] -發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，
[0009] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0010] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總的乳酸和乳酸鹽的總和 計。
[0011]換言之，本發(fā)明涉及發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，和不可消化寡糖 在生產(chǎn)用于降低嬰兒絞痛發(fā)病率的嬰兒配方物或第二階段配方物中的應(yīng)用，其中所述嬰兒 配方物或第二階段配方物包含：
[0012] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0013] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總的乳酸和乳酸鹽的總和 計。
[0014] 本發(fā)明也可被表述為用于降低嬰兒絞痛發(fā)病率的嬰兒配方物或第二階段配方物， 其包含：
[0015] -發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，
[0016] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0017] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總的乳酸和乳酸鹽的總和 計。
[0018] 優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物用于向年齡為6個月或以下的嬰兒提 供營養(yǎng)。在一個實施方案中，所述嬰兒患有絞痛或有發(fā)展為絞痛的風(fēng)險。在一個實施方案 中，所述嬰兒患有絞痛。
[0019] 本發(fā)明還涉及降低嬰兒每天哭泣發(fā)作次數(shù)的方法，其包括給予所述嬰兒嬰兒配方 物或第二階段配方物，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含：
[0020] -發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，
[0021] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0022] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計。 [0023]換言之，本發(fā)明還涉及發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，和不可消化寡 糖在生產(chǎn)用于降低嬰兒每天哭泣發(fā)作次數(shù)的嬰兒配方物或第二階段配方物中的用途，其中 所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含：
[0024] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0025] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計。
[0026] 本發(fā)明也可被表述為用于降低嬰兒每天哭泣發(fā)作次數(shù)的嬰兒配方物或第二階段 配方物，其包含：
[0027] -發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，
[0028] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0029] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計。 [0030]在一個實施方案中，用于降低每天哭泣發(fā)作次數(shù)的用途是用于降低嬰兒絞痛發(fā)病 率。
[0031 ]術(shù)語降低每天哭泣發(fā)作次數(shù)也可稱為減少哭泣。
[0032] 本發(fā)明還涉及減少嬰兒哭泣持續(xù)時間的方法，包括給予所述嬰兒嬰兒配方物或第 二階段配方物，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含：
[0033] -發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，
[0034] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0035] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計。 [0036]換言之，本發(fā)明還涉及發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，和不可消化寡 糖在生產(chǎn)用于減少嬰兒哭泣持續(xù)時間的嬰兒配方物或第二階段配方物中的用途，其中所述 嬰兒配方物或第二階段配方物包含：
[0037] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0038] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計。
[0039] 本發(fā)明也可被表述為用于減少嬰兒哭泣持續(xù)時間的嬰兒配方物或第二階段配方 物，其包含：
[0040] -發(fā)酵成分，特別是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，
[0041 ] -0.5至20重量％的不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重 計，以及
[0042] -0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方 物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計。
[0043] 在一個實施方案中，所述用于減少哭泣持續(xù)時間的用途是用于降低嬰兒絞痛發(fā)病 率。
[0044] 優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物用于向年齡為6個月或以下的嬰兒提 供營養(yǎng)。在一個實施方案中，所述嬰兒患有哭泣發(fā)作或有發(fā)展為哭泣發(fā)作的風(fēng)險。在一個實 施方案中，所述嬰兒患有哭泣發(fā)作。
[0045] 發(fā)酵成分
[0046] 發(fā)酵是利用內(nèi)源性電子受體(通常為有機化合物)從碳水化合物(如乳中存在的乳 糖）的氧化中得到能量的過程。這與細(xì)胞呼吸相反，在細(xì)胞呼吸中，通過電子傳遞鏈將電子 提供給外源性電子受體，如氧。在本發(fā)明中，通過產(chǎn)乳酸菌進(jìn)行的組合物的發(fā)酵具有將所述 組合物中存在的碳水化合物轉(zhuǎn)化成有機酸的通常含義。除乳酸外，所形成的這些有機酸還 可包括其他有機酸如乙酸。在本發(fā)明的上下文中，有機酸被理解為包括相應(yīng)的共輒堿(例如 乳酸可包括乳酸鹽，以及乙酸可包括乙酸鹽）。
[0047] 因此，根據(jù)本發(fā)明，使用發(fā)酵成分。所述發(fā)酵成分是通過乳酸菌發(fā)酵的組合物。優(yōu) 選地，所述通過乳酸菌發(fā)酵的組合物包含乳糖和/或蛋白質(zhì)，優(yōu)選地，所述通過乳酸菌發(fā)酵 的組合物至少包含乳糖。在另一個優(yōu)選的實施方案中，所述通過乳酸菌發(fā)酵的組合物包含 乳糖和蛋白質(zhì)。更優(yōu)選地，所述通過乳酸菌發(fā)酵的組合物為來自乳的組合物。被發(fā)酵的碳水 化合物優(yōu)選為乳糖。在本發(fā)明的上下文中，無論何處提及'發(fā)酵'，都表示'通過乳酸菌發(fā) 酵，。
[0048] 乳酸菌也稱為產(chǎn)乳酸菌，包括鏈球菌屬（Streptococcus)、乳球菌屬 (Lactococcus)、乳桿菌屬（Lactobacillus)、明串珠菌屬（Leuconostoc)、腸球菌屬 (Enterococcus)、酒球菌（Oenococcus)屬、片球菌屬（Pediococcus)和雙歧桿菌屬 (Bifidobacterium)的細(xì)菌。
[0049] 根據(jù)本發(fā)明，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含發(fā)酵成分。在本發(fā)明的方法 或用途中的嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包含發(fā)酵的來自乳的組合物。所述發(fā)酵的來 自乳的組合物是通過對乳(例如脫脂乳)或來自乳的產(chǎn)品（例如乳清）與至少一種乳酸菌菌 株(例如乳球菌屬、乳桿菌屬、鏈球菌屬和雙歧桿菌屬）的結(jié)合物進(jìn)行孵育而得到的，優(yōu)選 地，所述發(fā)酵的來自乳的組合物是通過與至少一種選自乳球菌屬、乳桿菌屬和鏈球菌屬的 菌株，優(yōu)選與至少一種選自鏈球菌屬的菌株進(jìn)行孵育而得到的。優(yōu)選地，使用進(jìn)行同型乳酸 發(fā)酵(homolactic fermentation)的乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵，因為在這種情況下，每個糖部分產(chǎn)生 兩個乳酸分子并且不形成氣體。同型乳酸的乳酸菌包括嗜熱鏈球菌（Streptococcus thermophilus)，乳球菌屬種，優(yōu)選乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)，以及I類乳桿菌如嗜 酸乳桿菌（Lactobacillus acidophilus)、瑞士乳桿菌（Lactobacillus helveticus)和唾 液乳桿菌(Lactobacillus salivarius)，以及由己糖產(chǎn)生兩個乳酸的兼性異型發(fā)酵的乳桿 菌，包括干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)、副干酪乳桿菌(Lactobacillus paracasei)、 鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、清 酒乳桿菌(Lactobaci 1 lus sakei)。因此，在一個實施方案中，優(yōu)選地，所述發(fā)酵的來自乳的 組合物是通過對乳(例如脫脂乳)或來自乳的產(chǎn)品（例如乳清)與至少一種選自嗜熱鏈球菌、 乳酸乳球菌、嗜酸乳桿菌、瑞士乳桿菌、唾液乳桿菌、干酪乳桿菌、副干酪乳桿菌、鼠李糖乳 桿菌、植物乳桿菌和清酒乳桿菌的菌株的結(jié)合物進(jìn)行孵育而得到的，優(yōu)選地，所述發(fā)酵的來 自乳的組合物是通過與嗜熱鏈球菌進(jìn)行孵育而得到的。優(yōu)選地，對所述結(jié)合物孵育10分鐘 至約6小時。孵育期間的溫度優(yōu)選在20和50°C之間。在一個實施方案中，孵育之后，優(yōu)選對經(jīng) 孵育的組合物進(jìn)行熱處理。通過所述熱處理，優(yōu)選至少90%、更優(yōu)選至少95%的活乳酸菌被 滅活。優(yōu)選地，所述發(fā)酵成分，更優(yōu)選所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含少于lxl〇 5菌 落形成單位(cfu)的乳酸菌每克干重。優(yōu)選在80和180°C之間的溫度下進(jìn)行所述熱處理。乳 酸菌的滅活有利地導(dǎo)致更少的后酸化作用和更安全的產(chǎn)品。這是尤其有利的，因為生產(chǎn)的 嬰兒配方物或第二階段配方物將要給予嬰兒。因此，在一個實施方案中，所述發(fā)酵成分，更 優(yōu)選所述嬰兒配方物或第二階段配方物，包含滅活的乳酸菌。制備適合于本發(fā)明目的的發(fā) 酵成分的方法本身在EP 778885中是已知的，其以引用的方式納入本文，特別地，在實施例7 中公開了制備發(fā)酵成分的合適方法。FR2723960(其以引用的方式納入本文)特別地在實施 例6中公開了制備發(fā)酵成分的合適方法。
[0050] 簡言之，將含有乳糖和任選地其他常量營養(yǎng)物如脂肪(優(yōu)選植物脂肪）、酪蛋白、乳 清蛋白、維生素和/或礦物質(zhì)等的來自乳的組合物（優(yōu)選經(jīng)過巴氏殺菌）濃縮至例如15至 50 %干物質(zhì)之間，然后用嗜熱鏈球菌接種，例如用5 %的含有106至101()細(xì)菌/ml的培養(yǎng)物接 種。優(yōu)選地，所述來自乳的組合物包含乳蛋白肽。發(fā)酵的溫度和持續(xù)時間如上所述。適當(dāng)?shù)兀?在發(fā)酵后，可對發(fā)酵成分進(jìn)行巴氏殺菌或滅菌，并且進(jìn)行例如噴霧干燥或凍干，以提供適于 在最終產(chǎn)品中配制的形式。
[0051] 為了本發(fā)明目的優(yōu)選用于制備發(fā)酵成分的嗜熱鏈球菌的細(xì)菌菌株在底物發(fā)酵過 程中產(chǎn)生β-半乳糖苷酶活性。優(yōu)選地，β-半乳糖苷酶活性與酸度同時產(chǎn)生。在EP 778885的 實施例2和FR 2723960的實施例1中記載了合適的嗜熱鏈球菌菌株的選擇。優(yōu)選地，在根據(jù) 本發(fā)明的方法或用途的嬰兒配方物或第二階段配方物中，至少部分在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的β_ 半乳糖苷酶活性被保留。優(yōu)選地，所述被保留的至少部分半乳糖苷酶活性是乳糖酶活性。 當(dāng)在嬰兒中消化時，所述嬰兒配方物或第二階段配方物中的乳糖酶活性對促進(jìn)腸道健康具 有有益效果。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明，每克干重的所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含0.2-4U(單位)β-半乳糖苷酶活性，優(yōu)選地，所述嬰兒或第二階段配方物包含0.2-4U乳糖酶活性 每克干重。1.0U(-個單位)的β-半乳糖苷酶活性對應(yīng)在pH 7.3、37 °C下每分鐘將1. Ομπιο?的 鄰硝基苯基-β-D-半乳吡喃糖苷水解成鄰硝基苯酚和D-半乳糖的能力。
[0052] 在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方案中，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含至 多l(xiāng)xl05cfu嗜熱鏈球菌的活細(xì)菌，優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含至多 lxl0 4cfu嗜熱鏈球菌的活細(xì)菌，基于克干重計。在一個實施方案中，優(yōu)選并非所有乳酸菌， 優(yōu)選并非所有嗜熱鏈球菌被滅活。因此，優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含至 少l X102cfu嗜熱鏈球菌的活細(xì)菌，優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含至少 lxl0 3cfu嗜熱鏈球菌的活細(xì)菌每克干重。
[0053] 為了本發(fā)明的目的，用于制備發(fā)酵成分，優(yōu)選發(fā)酵的來自乳的組合物的嗜熱鏈球 菌的優(yōu)選菌株已經(jīng)由Compagnie Gervais Danone于1995年8月23日以登錄號1-1620和1994 年8月25日以登錄號1-1470保藏于由巴斯德研究院（Institut Pasteur)管理的法國國家培 養(yǎng)物和微生物保藏中心（Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM))，其地址為25rue du Docteur Roux，巴黎，法國。所述菌株1-1620和1-1470已在EP 0778885中公開。
[0054]優(yōu)選地，在所述發(fā)酵成分的制備中，還存在一種或多種其他乳酸菌菌株，或同時地 或連續(xù)地存在，所述組合物還補充有一種或多種其他乳酸菌菌株或還通過一種或多種其他 乳酸菌菌株發(fā)酵。所述一種或多種其他菌株各自為不同于用于發(fā)酵如上所述的組合物的第 一菌株的菌株，優(yōu)選為不同于嗜熱鏈球菌的菌株。這類不同的乳酸菌菌株優(yōu)選選自乳桿菌 和雙歧桿菌，更優(yōu)選短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)，最優(yōu)選由Compagnie Gervais Danone于1999年5月31日以登錄號1-2219保藏于CNCM的短雙歧桿菌菌株。菌株1-2219已在 EP 1615657 中公開。
[0055] 在一個實施方案中，所述發(fā)酵成分包含嗜熱鏈球菌和/或短雙歧桿菌。在一個實施 方案中，所述發(fā)酵成分通過嗜熱鏈球菌和/或短雙歧桿菌進(jìn)行發(fā)酵。
[0056] 在一個實施方案中，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含發(fā)酵成分，其中在發(fā) 酵后滅活所述乳酸菌。
[0057] 優(yōu)選地，所述通過乳酸菌發(fā)酵的組合物不是通過保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)發(fā)酵的。保加利亞乳桿菌發(fā)酵的產(chǎn)品被認(rèn)為不適合嬰兒，因為在年幼的嬰兒 中，將D-乳酸鹽轉(zhuǎn)化成丙酮酸鹽的特異性脫氫酶遠(yuǎn)不及轉(zhuǎn)化L-乳酸鹽的脫氫酶活潑。
[0058] 所述發(fā)酵成分優(yōu)選包含蛋白質(zhì)。所述蛋白質(zhì)優(yōu)選選自非人動物蛋白，優(yōu)選非人乳 蛋白。所述發(fā)酵的組合物優(yōu)選含有酪蛋白和/或乳清蛋白，更優(yōu)選牛乳清蛋白和/或牛酪蛋 白。
[0059] 用于本發(fā)明的用途的嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包含25至100重量％，更 優(yōu)選30至99.5重量％的所述發(fā)酵成分，優(yōu)選所述發(fā)酵的來自乳的組合物，基于所述嬰兒配 方物或第二階段配方物的干重計。在一個實施方案中，本發(fā)明嬰兒配方物或第二階段配方 物優(yōu)選含有30至99重量％，更優(yōu)選30至70重量％，更優(yōu)選40至60重量％的所述發(fā)酵成分，基 于最終的嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計。較高濃度的發(fā)酵的組合物，例如25重 量％，優(yōu)選30重量％或以上，有利地改善對于絞痛發(fā)病率和哭泣發(fā)作的效果。
[0060] 本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物的pH優(yōu)選在5.0和7.5之間，更優(yōu)選在5.0 和7.0之間，甚至更優(yōu)選在5.5和7.0之間，最優(yōu)選在5.5和6.0之間。
[0061] 用于本發(fā)明的用途的嬰兒配方物或第二階段配方物包含乳酸和/或乳酸鹽。乳酸 和/或乳酸鹽是在通過乳酸菌發(fā)酵時形成的。本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物包含 0.25至1.5重量％的乳酸和乳酸鹽的總和，優(yōu)選0.30至1.0重量％，更優(yōu)選0.4至0.7重量％ 的乳酸和乳酸鹽的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計。存在的乳酸鹽 和乳酸越多，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含的發(fā)酵成分越多。優(yōu)選至少50重量％， 甚至更優(yōu)選至少90重量％的乳酸和乳酸鹽的總和是L-異構(gòu)體的形式。因此，在一個實施方 案中，L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，更優(yōu)選大于90重量％，基于總?cè)樗岷腿樗猁} 的總和計。L-乳酸鹽和L-乳酸與L-( + )_乳酸鹽和L-( + )乳酸相同。在一個實施方案中，所述 嬰兒配方物或第二階段配方物包含從0.25至1.5重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，優(yōu)選0.30 至1.0重量％的乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計，并 且其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計。
[0062]不可消化寡糖
[0063] 根據(jù)本發(fā)明，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含不可消化寡糖。發(fā)現(xiàn)不可消 化寡糖與所述發(fā)酵成分協(xié)同地發(fā)揮作用以降低絞痛發(fā)病率和每天的哭泣發(fā)作次數(shù)。有利地 且最優(yōu)選地，所述不可消化寡糖是水溶性的（根據(jù)L. Prosky等，J. Assoc . Anal. Chem 71: 1017-1023,1988中公開的方法)并且優(yōu)選是聚合度(DP)為2至200的寡糖。所述不可消化寡 糖的平均DP優(yōu)選低于200，更優(yōu)選低于100，甚至更優(yōu)選低于60，最優(yōu)選低于40。所述不可消 化寡糖不能在腸中通過人上消化道(小腸和胃）中存在的消化酶的作用而被消化。所述不可 消化寡糖可被人腸道微生物群(microbiota)發(fā)酵。例如，葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、乳糖、 麥芽糖和麥芽糊精被認(rèn)為是可消化的。不可消化寡糖原料可包括單糖如葡萄糖、果糖、巖藻 糖、半乳糖、鼠李糖、木糖、葡糖醛酸、N-乙酰半乳糖胺(GalNac)等，但這些不是本發(fā)明的嬰 兒配方物或第二階段配方物的不可消化寡糖部分的一部分。
[0064] 包含在根據(jù)本發(fā)明的方法或用途的嬰兒配方物或第二階段配方物中的不可消化 寡糖優(yōu)選包含至少兩種不同的不可消化寡糖的混合物。
[0065] 所述不可消化寡糖優(yōu)選選自果寡糖(如菊粉）、不可消化糊精、半乳寡糖(如反式半 乳寡糖（奸&1188&1&(^〇-〇118〇8&(3(3]1&1'1(168))、木寡糖（171〇-〇118〇8&(3(3]1&1'1(168)、阿拉伯寡 糖（8從13；!_11〇-〇11呂03&(3(3]1&1'1(163)、阿拉伯半乳寡糖（&從13；!_110呂&1&(^〇-〇11呂03&(3(3]1&1'1(163)、 葡萄寡糖(&111(3〇-〇118〇83(3(3]131'1(168)、龍膽寡糖(861^；!_〇-〇118〇83(3(3]131'1(168)、葡萄甘露寡 fit (glucomanno-oligosaccharides) >^^L~^S^fj|(galactomann〇-〇ligosaccharides) > 甘露寡糖（mannan-oligosaccharides)、異麥芽寡糖（isomalto-oligosaccharides)、黑曲 霉寡糖（niger〇-〇ligosaccharides)、殼寡糖（chito-oligosaccharides)、大顯寡糖（soy oligosaccharides)、糖酸酸寡糖（uronic acid oligosaccharides)、唾液酸寡糖 (81&171〇118〇8&(^11&1^(168)(如3-唾液酸乳糖（3-81&1711&(^〇86(3-31^))、3-唾液酸乳糖 (6-SL)、乳唾液酸四糖（lactosialylterasaccharide(LST) )a，b，c、二唾液酸乳_N_四糖 (di sialyl lac toNtetraose(DSLNT))、唾液酸-乳-N-六糖（sialyl-lac toNhexaose(S_ LNH))、唾液酸-乳-N-六糖(DS-LNH))、巖藻寡糖(fuco-oligosaccharides)(如（未)硫酸化 的巖藻依聚糖寡糖(fucoidan oligosaccharides)，2'-巖藻糖基乳糖(2'-fucosyllactose (2'-?1〇)，3'-巖藻糖基乳糖（3'-：[ >11(3087113(^086(3'-?10)，二巖藻糖基乳糖 (difucosyllactose)，乳-N-巖藻五糖（lact0-N_fucopenatose(LNFP))I、II、III、V，乳-N-新巖藻五糖（Lacto-N-neofucopenaose (LNnFP))，乳-N-二巖藻糖基-六糖（Lact0-N-difucosyl-hexaose(LNDH)))及其混合物，更優(yōu)選選自果寡糖、半乳寡糖、糖醛酸寡糖、巖藻 寡糖及其混合物，甚至更優(yōu)選選自果寡糖、半乳寡糖及其混合物。在一個實施方案中，所述 不可消化寡糖由反式半乳寡糖、菊粉和/或糖醛酸寡糖組成，最優(yōu)選至少包含反式半乳寡 糖。在一個實施方案中，所述不可消化寡糖選自反式半乳寡糖、果寡糖和半乳糖醛酸寡糖及 其混合物。
[0066] 所述不可消化寡糖優(yōu)選選自β-半乳寡糖、α-半乳寡糖和半乳聚糖。根據(jù)更優(yōu)選的 實施方案，所述不可消化寡糖是β_半乳寡糖。優(yōu)選地，所述不可消化寡糖包含具有β(1，4)、β (1，3)和/或β(1，6)糖苷鍵和末端葡萄糖的半乳寡糖。例如，反式半乳寡糖可以以商品名 Vivinal ⑧ G0S(Borculo Domo Ingredients，Zwol le，荷蘭）、Bi2muno(Clasado)、Cup-oligo(Nissin 31^1')和〇]^〇11^655(￥&1〇111:)獲得。
[0067] 所述不可消化寡糖優(yōu)選包含果寡糖。在其他上下文中，果寡糖的名字可為，例如果 多糖（fructopolysaccharides)、寡果糖（oligofructose)、聚果糖、聚果聚糖 (polyfructan)、菊粉、左聚糖（levan)和果聚糖(fructan)，并且可指包含β-連接(優(yōu)選通過 β(2，1)和/或β(2,6)糖苷鍵連接）的果糖單元且DP優(yōu)選在2和200之間的寡糖。優(yōu)選地，所述 果寡糖含有末端β(2，1)糖苷連接的葡萄糖。優(yōu)選地，所述果寡糖含有至少7個β-連接的果糖 單元。在另一個優(yōu)選的實施方案中，使用菊粉。菊粉是一種果寡糖，其中至少75%的糖苷鍵 是β(2，1)鍵。通常，菊粉的平均鏈長在8至60個單糖單元之間。用于本發(fā)明組合物的適合的 果寡糖可以以商品名Ra.ftUine?_HP (Oraf ti)商購。其他合適的來源為raftilose (0瓜；1^1：；0、；1^131'111〇86和；1^131'111；[116((]〇811(3瓜）以及?1'11七&；1^1：和；1^'11七&1〇86(36118118) 〇
[0068] 優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含半乳寡糖和果寡糖的混合物，所 述半乳寡糖和果寡糖的重量比為1/99至99/1，更優(yōu)選1/19至19/1，甚至更優(yōu)選1至19/1。
[0069] 優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含短鏈果寡糖和長鏈果寡糖的混合 物，所述短鏈果寡糖和長鏈果寡糖的重量比為1/99至99/1，更優(yōu)選1/19至19/1，甚至更優(yōu)選 1 至 19/1〇
[0070] 優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含β-l，3_半乳寡糖和β-l，4和/或β-1，6_半乳寡糖的混合物，所述β-l，3_半乳寡糖與β-l，4和/或β-l，6_半乳寡糖的重量比為1/ 99至99/1，更優(yōu)選1/19至19/1，甚至更優(yōu)選19/1至1。
[0071] 優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含平均DP低于10、優(yōu)選低于6的反式 半乳寡糖和平均DP低于10、優(yōu)選低于6的果寡糖的混合物。
[0072]最優(yōu)選地，所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含平均DP低于10、優(yōu)選低于6的果 寡糖和平均DP高于7、優(yōu)選高于11、甚至更優(yōu)選高于20的果寡糖的混合物。
[0073]最優(yōu)選的是平均DP低于10、優(yōu)選低于6的反式半乳寡糖和平均DP高于7、優(yōu)選高于 11、甚至更優(yōu)選高于20的果寡糖的混合物。
[0074]本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物包含0.5至20重量％的總不可消化寡糖， 更優(yōu)選1至10重量％，甚至更優(yōu)選2至10重量％，最優(yōu)選2.0至7.5重量％，基于本發(fā)明的嬰兒 配方物或第二階段配方物的干重計。
[0075]當(dāng)為液體形式，例如作為即食(ready-to-feed)液體時，基于100ml計，本發(fā)明的嬰 兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包含0.1至2.5重量％的不可消化寡糖，更優(yōu)選0.2至1.5重 量％，甚至更優(yōu)選0.4至1.5重量％，基于100ml本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物計。 [0076]嬰兒配方物或第二階段配方物
[0077] 嬰兒配方物涉及用于在生命的第一個月期間的嬰兒的特殊營養(yǎng)用途的營養(yǎng)組合 物，其單獨地滿足這類嬰兒的營養(yǎng)需求，直到引入適當(dāng)?shù)难a充喂養(yǎng)。嬰兒配方物有時也稱為 起始配方物（starter formula)或1段配方物。通常，使用嬰兒配方物直到嬰兒已達(dá)到4至6 個月的年齡。
[0078] 第二階段配方物涉及用于引入適當(dāng)?shù)难a充喂養(yǎng)時的嬰兒的特殊營養(yǎng)用途的營養(yǎng) 組合物，其構(gòu)成此類嬰兒逐漸多樣化飲食中的主要液體成分。第二階段配方物有時也稱為2 段(嬰兒)配方物。通常，從4-6個月的年齡至12個月的年齡使用第二階段配方物。
[0079]嬰兒是年齡為0至12個月的人類兒童。
[0080]嬰兒配方物和第二階段配方物符合國際管理法規(guī)。C〇dex-Stan72-1981給出了嬰 兒配方物和用于旨在用于嬰兒的特殊醫(yī)療目的的配方物的國際標(biāo)準(zhǔn)。例如，在歐洲，嬰兒配 方物和第二階段配方物還必須遵守2006年12月22日的關(guān)于嬰兒配方物和第二階段配方物 的歐盟指令2006/141/Ε(λ6Β10765-2010和GB10767-2010是中國嬰兒配方物以及較大嬰兒 和幼兒配方物的國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)。在美國，美國食品和藥品管理局21CFR Ch lpart 107 適用于嬰兒配方物。在一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所使用的本發(fā)明的嬰兒配方物 或第二階段配方物符合適當(dāng)?shù)姆ㄒ?guī)。
[0081] 本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選特別適于向年齡低于12個月、更優(yōu)選 低于6個月的人受試者提供完整的每日營養(yǎng)需求。本發(fā)明的營養(yǎng)組合物不是酸奶，因為酸奶 按照慣例含有保加利亞乳桿菌(Codex Standard for fermented Milks Codex Stan 243-2003)〇
[0082] 本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物包含可消化碳水化合物組分。優(yōu)選的可消 化碳水化合物組分是乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、麥芽糖、淀粉和麥芽糊精。乳糖是人 乳中存在的主要的可消化碳水化合物。本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包含乳 糖。由于本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物包含通過乳酸菌發(fā)酵的組合物，與其來源 相比，乳糖的量由于發(fā)酵(通過發(fā)酵乳糖被轉(zhuǎn)化成乳酸鹽和/或乳酸）而減少。因此，在本發(fā) 明的嬰兒配方物或第二階段配方物的制備中，優(yōu)選加入乳糖。優(yōu)選地，本發(fā)明的嬰兒配方物 或第二階段配方物不包含除乳糖之外的高含量的碳水化合物。與可消化碳水化合物如麥芽 糊精、蔗糖、葡萄糖、麥芽糖和其他具有高升糖指數(shù)(glycemic index)的可消化碳水化合物 相比，乳糖具有較低的升糖指數(shù)并且因此是優(yōu)選的。本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方 物優(yōu)選包含可消化碳水化合物，其中至少35重量％，更優(yōu)選至少50重量％，更優(yōu)選至少60重 量％，更優(yōu)選至少75重量％，甚至更優(yōu)選至少90重量％，最優(yōu)選至少95重量％的所述可消化 碳水化合物是乳糖?；诟芍赜?，本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包含至少25 重量％的乳糖，優(yōu)選至少40重量％，更優(yōu)選至少50重量％的乳糖。
[0083] 當(dāng)為液體形式，例如作為即食液體時，所述嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包 含3.0至30g可消化碳水化合物每100ml，更優(yōu)選6.0至20，甚至更優(yōu)選7.0至10.0g每100ml。 基于干重計，本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包含20至80重量％，更優(yōu)選40至 65重量％的可消化碳水化合物?；诳偀崃坑?，所述嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包 含9至14g可消化碳水化合物每lOOkcal。
[0084] 本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物包含脂質(zhì)組分。本發(fā)明的嬰兒配方物或第 二階段配方物的脂質(zhì)組分提供2.9至6.0g，更優(yōu)選4至6g每lOOkcal所述嬰兒配方物或第二 階段配方物。當(dāng)為液體形式，例如作為即食液體時，所述嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選 包含2.1至6.5g脂質(zhì)每100ml，更優(yōu)選3.0至4.0g每100ml?；诟芍赜?，本發(fā)明的嬰兒配方物 或第二階段配方物優(yōu)選包含12.5至40重量％的脂質(zhì)，更優(yōu)選19至30重量％。
[0085]所述脂質(zhì)組分包含必需脂肪酸α-亞麻酸(ALA)、亞油酸(LA)以及優(yōu)選長鏈多不飽 和脂肪酸(LC-PUFA)。所述LC-PUFA、LA和/或ALA可以作為游離脂肪酸、以甘油三酯形式、以 甘油二酯形式、以甘油單酯形式、以磷脂形式、或作為以上一種或多種的混合物而提供。優(yōu) 選地，本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物含有至少一種，優(yōu)選至少兩種脂質(zhì)來源，所述 脂質(zhì)來源選自菜籽油(rape seed oil)(如菜籽油（colza oil)、低芥酸菜籽油和芥花油 (canola 〇i 1))、高油酸的葵花油、高油酸的紅花油、橄欖油、海洋油(marine 〇i 1 s)、微生物 油、椰子油、棕櫚仁油和乳脂。
[0086]本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物包含蛋白質(zhì)組分。在所述嬰兒配方物或第 二階段配方物中使用的蛋白質(zhì)優(yōu)選選自非人動物蛋白，優(yōu)選非人乳蛋白，植物蛋白，如優(yōu)選 大豆蛋白和/或稻蛋白，及其混合物。本發(fā)明的營養(yǎng)組合物優(yōu)選含有酪蛋白和/或乳清蛋白， 更優(yōu)選牛乳清蛋白和/或牛酪蛋白。因此，在一個實施方案中，所述蛋白質(zhì)組分包含選自乳 清蛋白和酪蛋白的蛋白質(zhì)，優(yōu)選乳清蛋白和酪蛋白二者，且優(yōu)選地，所述乳清蛋白和/或酪 蛋白來自牛乳。優(yōu)選地，所述蛋白質(zhì)包含少于5重量％ (基于總蛋白質(zhì)計）的游離氨基酸、二 肽、三肽或水解的蛋白質(zhì)。本發(fā)明的營養(yǎng)組合物優(yōu)選包含酪蛋白和乳清蛋白，重量比酪蛋 白：乳清蛋白為10:90至90:10，更優(yōu)選20:80至80:20，甚至更優(yōu)選35:65至55:45。
[0087]本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物包含提供1.8至5.5，優(yōu)選1.8至3.5g蛋白 質(zhì)/lOOkcal所述嬰兒配方物或第二階段配方物，優(yōu)選提供1.8至2.5g/100kcal所述嬰兒配 方物或第二階段配方物的蛋白質(zhì)。在一個實施方案中，本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配 方物優(yōu)選包含2.0g/100kcal或更少量的蛋白質(zhì)。當(dāng)為液體形式，例如作為即食液體時，所述 嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包含0.5至6.0g、更優(yōu)選1.0至3.0g、甚至更優(yōu)選1.0至 1.5g蛋白質(zhì)/100ml、最優(yōu)選1.0至1.3g蛋白質(zhì)/100ml?；诟芍赜?，本發(fā)明的嬰兒配方物或 第二階段配方物包含5至20重量％的蛋白質(zhì)，優(yōu)選至少8重量％的蛋白質(zhì)，基于所述嬰兒配 方物或第二階段配方物的干重計，更優(yōu)選8至14重量％、甚至更優(yōu)選8至9.5重量％的蛋白 質(zhì)，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計。
[0088] 根據(jù)凱氏法(Kjeldahl-method)，通過測量總氮并在酪蛋白的情況下使用6.38的 轉(zhuǎn)換因子或?qū)τ诔业鞍字獾钠渌鞍踪|(zhì)使用6.25的轉(zhuǎn)換因子，計算基于本發(fā)明嬰兒配 方物或第二階段配方物的干重計的蛋白質(zhì)的重量％。本發(fā)明中所使用的術(shù)語'蛋白質(zhì)'或 '蛋白質(zhì)組分'指的是蛋白質(zhì)、肽和游離氨基酸的總和。
[0089]優(yōu)選地，所述脂質(zhì)組分提供2.9至6g脂質(zhì)/lOOkcal最終的嬰兒配方物或第二階段 配方物，優(yōu)選地，所述蛋白質(zhì)組分提供1.8至5.5g/100kcal、優(yōu)選1.8至2.5g/100kcal最終的 嬰兒配方物或第二階段配方物，以及優(yōu)選地，所述可消化碳水化合物組分提供9至14g/ lOOkcal最終的嬰兒配方物或第二階段配方物，其中優(yōu)選地，所述可消化碳水化合物組分包 含至少60重量％的乳糖，基于總可消化碳水化合物計，更優(yōu)選至少75重量％、甚至更優(yōu)選至 少90重量％的乳糖，基于總可消化碳水化合物計。通過源于蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、可消化碳水化合 物和不可消化寡糖的熱量的總和確定總熱量的量。
[0090] 在一個實施方案中，所述嬰兒配方物或第二階段配方物為液體形體。在另一個實 施方案中，所述嬰兒配方物或第二階段配方物為粉末的形式，優(yōu)選為適于用水溶液(優(yōu)選用 水)復(fù)原后制成液體的即飲嬰兒配方物或第二階段配方物的粉末。優(yōu)選地，所述嬰兒配方物 或第二階段配方物是待用水復(fù)原的粉末。優(yōu)選地，當(dāng)用Brookfield粘度計在20°C下以100s4 的剪切率測量時，所述液體組合物的粘度低于lOOmPa. s，更優(yōu)選低于60mPa. s，更優(yōu)選低于 35mPa. s，甚至更優(yōu)選低于6mPa. s。低粘度對于嬰兒配方物或第二階段配方物是重要的，因 為它模擬了母乳的粘度并且然后可以通過奶嘴給予。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明，所述營養(yǎng)組合物 在給予時的粘度與人乳粘度接近。因此，在本發(fā)明的一個實施方案中，所述營養(yǎng)組合物不包 含增稠劑，優(yōu)選地，它不包含選自刺槐豆膠、他拉膠、黃蓍膠、瓜爾豆膠和香豆膠的增稠劑， 優(yōu)選地，它不包含刺槐豆膠、他拉膠、黃蓍膠、瓜爾豆膠或香豆膠的任一種。
[0091] 為了滿足嬰兒的熱量需求，所述嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選包含60至85， 更優(yōu)選60至70kcal/100ml液體。此熱量密度確保水和熱量消耗之間的最佳比例。本發(fā)明組 合物的重量克分子滲透壓濃度(osmolar ity)優(yōu)選在150和420m0smo 1/1之間，更優(yōu)選260至 320m0sm〇l/l。低的重量克分子滲透壓濃度旨在進(jìn)一步降低胃腸壓力。
[0092] 當(dāng)所述嬰兒配方物或第二階段配方物為液體形式時，每天給予的優(yōu)選體積在約80 至2500ml的范圍內(nèi)，更優(yōu)選約200至1200ml每天。優(yōu)選地，每天喂養(yǎng)次數(shù)在1至10次之間，優(yōu) 選在3至8次之間。在一個實施方案中，每天以液體形式給予所述嬰兒配方物或第二階段配 方物，持續(xù)至少兩天的時間，優(yōu)選持續(xù)至少7天的時間，優(yōu)選持續(xù)至少2周的時間，優(yōu)選持續(xù) 至少4周的時間，優(yōu)選持續(xù)至少8周的時間，更優(yōu)選持續(xù)至少12周的時間，其中每天給予的總 體積在200ml至1200ml之間，并且其中每天喂養(yǎng)次數(shù)在1至10次之間。
[0093] 應(yīng)用
[0094] 本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，當(dāng)給予嬰兒包含不可消化寡糖的部分發(fā)酵的嬰兒配方物時，與給 予不含不可消化寡糖的部分發(fā)酵嬰兒配方物或給予含有不可消化寡糖的非發(fā)酵嬰兒配方 物的嬰兒的研究組相比，絞痛發(fā)病率和每天哭泣發(fā)作次數(shù)在統(tǒng)計上顯著降低。還發(fā)現(xiàn)，與接 受不含不可消化寡糖的非發(fā)酵嬰兒配方物的嬰兒的研究組相比，哭泣持續(xù)時間在統(tǒng)計上顯 著減少。
[0095]本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物用于向嬰兒一一年齡為0至12個月的人受 試者一一提供營養(yǎng)。本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配方物優(yōu)選口服給予。因為絞痛和哭 泣發(fā)作在年幼的嬰兒中特別突出，本發(fā)明的配方物優(yōu)選為嬰兒配方物和/或所述配方物用 于向年齡在〇至6個月、更優(yōu)選0至4個月的人受試者提供營養(yǎng)。
[0096]絞痛被定義為每周至少三天、每天哭泣持續(xù)時間大于3個小時。
[0097] 絞痛降低應(yīng)被理解為與給予了包含僅不含本文所定義的不可消化寡糖的部分發(fā) 酵嬰兒配方物的嬰兒配方物或第二階段配方物的嬰兒相比或與給予了含有本文所定義的 不可消化寡糖的非發(fā)酵嬰兒配方物的嬰兒相比，給予了本發(fā)明的嬰兒配方物或第二階段配 方物的嬰兒的絞痛降低。
[0098] 每天哭泣發(fā)作次數(shù)降低應(yīng)被理解為與給予了包含僅不含本文所定義的不可消化 寡糖的部分發(fā)酵嬰兒配方物的嬰兒配方物或第二階段配方物的嬰兒相比或與給予了含有 本文所定義的不可消化寡糖的非發(fā)酵嬰兒配方物的嬰兒相比，給予了本發(fā)明的嬰兒配方物 或第二階段配方物的嬰兒的每天哭泣發(fā)作絕對次數(shù)更低。
[0099] 每天哭泣發(fā)作與每天哭泣次數(shù)相同。
[0100] 哭泣持續(xù)時間是指哭泣發(fā)作的時間長度。
[0101] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及通過給予本文以上所定義的包含發(fā)酵成分和不可 消化寡糖的嬰兒配方物或第二階段配方物來降低嬰兒絞痛發(fā)病率以及降低嬰兒每天哭泣 發(fā)作次數(shù)。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及通過給予本文以上所定義的包含發(fā)酵成分和不 可消化寡糖的嬰兒配方物或第二階段配方物來降低嬰兒絞痛發(fā)病率以及減少嬰兒哭泣持 續(xù)時間。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及通過給予本文以上所定義的包含發(fā)酵成分和不可 消化寡糖的嬰兒配方物或第二階段配方物來降低嬰兒每天哭泣發(fā)作次數(shù)和減少嬰兒哭泣 持續(xù)時間。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及通過給予本文以上所定義的包含發(fā)酵成分和不 可消化寡糖的嬰兒配方物或第二階段配方物來降低嬰兒絞痛發(fā)病率、降低嬰兒每天哭泣發(fā) 作次數(shù)以及減少嬰兒哭泣持續(xù)時間。
[0102] 在本文及其權(quán)利要求書中，動詞"包含"及其動詞形式的變化以其非限制性意義使 用，意指包含該詞之后的項目，但不排除未被具體提及的項目。此外，通過不定冠詞"一個" 或"一種"提到要素時不排除存在多于一個所述要素的可能性，除非上下文明確要求存在一 個并且僅存在一個所述要素。因此，不定冠詞"一個"或"一種"通常意指"至少一個"。Wt.意 指重量。
[0103] 實施例
[0104] 1)包含發(fā)酵的組合物和不可消化寡糖的配方物在嬰兒絞痛發(fā)病率和哭泣發(fā)作次 數(shù)方面的效果
[0105] 征募健康的足月U 37周并且< 42周）嬰兒，其母親已決定不開始母乳喂養(yǎng)或在通 知研究的時候已停止了母乳喂養(yǎng)。在登記的時候，所述嬰兒必須<28天大，并且出生重量在 2.5-4.5kg之間或在胎齡和性別的正常范圍內(nèi)（根據(jù)當(dāng)?shù)剡m用的生長表第10至第90個百分 點）。如果嬰兒1)被診斷患有可能干擾所述研究的先天性疾病和/或當(dāng)前疾病，2)具有增加 的牛乳蛋白過敏風(fēng)險或已知的牛乳蛋白過敏、大豆過敏和/或乳糖過敏，3)其母親在妊娠期 間患有糖尿病，4)已參與另一個臨床試驗，則將其排除。從所有參與者的父母雙方或法定代 表人獲得書面知情同意書。431名嬰兒被考慮用于意向治療(ITT)分析。
[0106] 參與者隨機接受以下四種研究產(chǎn)品（均為完整的標(biāo)準(zhǔn)牛乳基嬰兒配方物）中的一 種:試驗飲食1，含有50%的Lactofidus?以及90%的短鏈半乳寡糖(scGOS)和10%的長鏈果 寡糖（lcFOS)的特定混合物，或試驗飲食2，含有15 %的Lactof idus?以及90 %的scGOS和 10 %的lcFOS的特定混合物，或?qū)φ诊嬍?，僅含有50 %的Lactof idus?，或?qū)φ诊嬍?，僅含 有90%的scGOS和10%的lcFOS的特定混合物。所有產(chǎn)品都是由Danone，Steenvoorde，法國 生產(chǎn)的。這是前瞻性的、隨機的、雙盲的、對照的、平行組、多中心臨床研究，在三個國家24個 地點（愛爾蘭(7個地點）、比利時（10個地點）、法國（7個地點））進(jìn)行。在登記時，進(jìn)行基線測 量，并隨機地分配嬰兒以接受兩種試驗飲食的一種或兩種對照飲食的一種。將指定的嬰兒 配方物及其制備說明書交給父母并建議他們隨意地喂養(yǎng)嬰兒。還給他們提供了一本日記本 并要求他們記錄他們嬰兒的哭泣和睡眠持續(xù)時間，從而提供以小時計的總持續(xù)時間每天以 及哭泣發(fā)作次數(shù)每天。進(jìn)行生長測量。主要結(jié)果是重量增加，次要結(jié)果是身長(recumbent length)和頭圍。而且，基于父母做的記錄，評價了哭泣和睡眠。如果記錄了至少3天，就將日 記納入統(tǒng)計分析中。
[0107] 在4周時，通過使用wilcoxon秩和檢驗分析了哭泣發(fā)作次數(shù)(次每天）。
[0108] 基于日記中父母報告的哭泣持續(xù)時間來定義絞痛發(fā)病率。根據(jù)所采用的Wessel標(biāo) 準(zhǔn)，如果孩子至少3天每天哭泣持續(xù)時間為3小時，則絞痛被定義為"是"（存在）。通過使用卡 方檢驗(Chi-square test)/fisher's精確檢驗(fisher's exact test)進(jìn)行分析。
[0109] 測試了以下飲食：
[0110] 飲食1，嬰兒配方物1，每100ml包含66kcal、1.35g蛋白質(zhì)（重量比為1/1的牛乳清蛋 白/酪蛋白）、8.2g可消化碳水化合物(其中5.6g乳糖和2.1g麥芽糊精）、3.0g脂肪(主要為植 物脂肪）、〇.8g不可消化寡糖（重量比為9:1的scG0S(來源為VWilial?G0S)和lcFOS(來源 為 RaftilinHP?))。
[0111] 該嬰兒配方物的50% (基于干重計）源自Lactof idus?-一一種市售的以商標(biāo)名 Galli銷售的嬰兒配方物。Lactofidus?是100%的發(fā)酵的來自乳的組合物，是通過用嗜熱鏈 球菌發(fā)酵而生產(chǎn)的，并且包含短雙歧桿菌。使用熱處理來滅活乳酸菌。
[0112] 該嬰兒配方物包含約0.55重量％的乳酸+乳酸鹽，基于干重計，其中至少95 %為L-乳酸/乳酸鹽。根據(jù)嬰兒配方物國際指令2006/141/EC，所述組合物還包含維生素、礦物質(zhì)、 微量元素和其他微量營養(yǎng)物。
[0113] 飲食2,嬰兒配方物2,與嬰兒配方物1相似，但是包含15重量^^^Lactofidus?而不 是50%，以及因此約0.16重量％的乳酸+乳酸鹽。
[0114] 飲食3,嬰兒配方物3,與嬰兒配方物1相似，但不含所述0.8g不可消化寡糖(重量比 為9:1的8〇603(來源為\1的11?膽603)和1〇?03(來源為^ &觸111|111>?))。
[0115] 飲食4,嬰兒配方物4,非發(fā)酵嬰兒配方物，其含有0.8g不可消化寡糖(重量比9:1的 SCG〇s(來源為Vivinal?G〇s)和lcF〇s(來源為RaftilinHP?))，其余具有與嬰兒配方物 1相似的組成。
[0116] 結(jié)果：
[0117] 群體
[0118] 全部431名嬰兒被納入并被隨機分組。試驗和對照組之間的中途退出率(dropout rate)在統(tǒng)計上沒有顯著差異。（fisher's精確檢驗，P>0.05)。
[0119] 哭泣和絞痛
[0120] 4周時，接受飲食1的組的平均哭泣發(fā)作最低（3.03 土 sd 1.92 )，接受飲食2的組的 均值為3.64 ± 2.19，接受飲食3的組的均值為3.72 ± 1.98，接受飲食4的組的均值為3.46 土 1.92。然而，由于數(shù)據(jù)不是正態(tài)分布的，中值的數(shù)值是更相關(guān)的。4周時，已食用飲食1(50% 的Lactofidus?以及scGOS/lcFOS)的嬰兒組的每天哭泣發(fā)作的中值次數(shù)最低。4周時，與接 受飲食3(50%的Lactofidus?)的對照組相比，接受飲食1(50%的Lactofidus?以及scGOS/ lcFOS)的組的每天哭泣發(fā)作次數(shù)顯著更低（中值:2.6對3.4次/天，胃;[1001011秩和檢驗，口 = 0.030)，參見表1，其示出ITT(意向治療)組的結(jié)果。與喂食了飲食4(0%的Lactofidus?以及 scGOS/lcFOS)的組相比，哭泣發(fā)作次數(shù)也更低。在降低每天哭泣發(fā)作次數(shù)方面，飲食2(15% 的Lactofidus?以及scGOS/lcFOS)比飲食1的有效性較差。
[0121] 4周時，已食用飲食1(50 %的Lactofidus?以及scGOS/lcFOS)的嬰兒組的絞痛發(fā)病 率最低。與已食用飲食3(50%的Lactofidus?)的對照組(8%對20%，卡方檢驗，P = 0.036) 和已食用飲食4(scGOS/1 cFOS)的對照組(8%對20%，卡方檢驗，P = 0.034)相比，已食用飲 食1(50%的Lactofidus?以及scGOS/lcFOS)的試驗組的絞痛發(fā)病率最低并且顯著不同，參 見表2,其示出了 ITT組的結(jié)果。在降低絞痛發(fā)病率方面，飲食2(15%的Lactofidus?以及 scGOS/lcFOS)比飲食1的有效性較差。
[0122] 表1:4周時的哭泣發(fā)作次數(shù)(次/天)
[0123]
[0124] N為意向治療組中的嬰兒總數(shù)，η為對分析做出貢獻(xiàn)的嬰兒數(shù)。如果記錄了至少3 天，就將日記納入分析中。使用Wilcoxon秩和檢驗計算統(tǒng)計相關(guān)性；[a]相對于飲食4; [b]相 對于飲食3; [ c ]相對于飲食2。
[0125] 表2:4周時的絞痛發(fā)病率(修改自Wessel標(biāo)準(zhǔn))
[0127] N為ITT組中的嬰兒總數(shù)，η為對分析做出貢獻(xiàn)的嬰兒數(shù)。如果嬰兒一周至少3天每 天哭泣持續(xù)時間為至少3小時，則絞痛被定義為'是'。沒有納入基線，因為在基線處沒有7天 的日記。如果記錄了至少3天，就將日記納入分析中。使用卡方檢驗計算Ρ-值；[a]相對于飲 食4; [b]相對于飲食3; [c]相對于飲食2。
[0128] 2)包含發(fā)酵組合物和不可消化寡糖的配方物在嬰兒絞痛發(fā)病率方面的效果
[0129] 以與以上相似的評估和訪診進(jìn)行臨床試驗。在該臨床試驗中，200名受試者隨機接 受飲食5或飲食6。
[0130] 199名嬰兒被考慮用于意向治療（ITT)分析，對于所有接受治療的受試者（all-81113」6(^8 1^63〖6(1(451'))而言11=198。受試者隨機接受所述兩種飲食的一種，所述兩種飲 食都為完整的標(biāo)準(zhǔn)牛乳基嬰兒配方物。這是前瞻性的、隨機的、雙盲的、對照的、平行組、多 中心臨床研究，在兩個國家意大利和西班牙進(jìn)行。
[0131] 父母完成標(biāo)準(zhǔn)化的日記以評估哭泣持續(xù)時間。對每一位受試者，計算每天哭泣持 續(xù)時間(h/天）。
[0132] 過度哭泣被定義為哭泣持續(xù)時間>3h/天。基于父母在日記中報告的哭泣持續(xù)時 間，定義絞痛發(fā)病率。根據(jù)修改的Wessel標(biāo)準(zhǔn)，如果孩子在7天的周期內(nèi)至少3天每天哭泣持 續(xù)時間為3小時，則絞痛被定義為"是"（存在）。通過使用重復(fù)測量Logistic回歸進(jìn)行分析。
[0133] 飲食5:嬰兒配方物，每100ml包含66kcal、1.2g蛋白質(zhì)（重量比例為1/1的牛乳清蛋 白/酪蛋白）、7.7g可消化碳水化合物(其中7.6g乳糖）、3.4g脂肪(主要為植物脂肪）、0.8g不 可消化寡糖（重量比為9 : 1的s c G 0 S (來源為Vivinal? G0S)和lcF0S(來源為 RaftilinHP·)。
[0134] 該嬰兒配方物的30% (基于干重計)源自Lactofidus?。該嬰兒配方物包含約0.33 重量％的乳酸+乳酸鹽，基于干重計，其中至少95 %為L-乳酸+L-乳酸鹽。根據(jù)嬰兒配方物國 際指令2006/141/EC，所述組合物還包含維生素、礦物質(zhì)、微量元素和其他微量營養(yǎng)物。
[0135] 飲食6:嬰兒配方物，與飲食5的嬰兒配方物相似，但是不包含Lactofidus?并且沒 有添加不可消化寡糖(scGOS和lcFOS)。
[0136] 結(jié)果：
[0137] 群體
[0138] 全部200名嬰兒被隨機分組。試驗組和對照組之間的提前中止（early terminations)人數(shù)在統(tǒng)計上沒有顯著差異。（卡方檢驗，P>0.05)。
[0139] 哭泣和絞痛
[0140] 發(fā)現(xiàn)，在日齡>7天的嬰兒開始使用在研飲食后，與接受飲食6的嬰兒相比，接受飲 食5的嬰兒的哭泣持續(xù)時間、過度哭泣發(fā)生率以及絞痛發(fā)病率更低。對于統(tǒng)計效應(yīng)，參見下 面的表3。
[0141] 表3:統(tǒng)計分析
[0142]
[0143] η是對分析做出貢獻(xiàn)的嬰兒數(shù)。
[0144] 此外，在AST群體中，與食用飲食6的嬰兒（104名嬰兒中的9名，8.7%)相比，食用飲 食5的嬰兒(94名嬰兒中的1名，1.1%)的嬰兒絞痛(被研究者作為不良反應(yīng)而記錄)顯著更 低(P-值0.020)。
【主權(quán)項】
1. 發(fā)酵成分和不可消化寡糖在生產(chǎn)用于降低嬰兒絞痛發(fā)病率的嬰兒配方物或第二階 段配方物中的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含0.5至20重量％的不可消 化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計，以及〇. 25至1.5重量％的乳酸鹽 和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽 的總和大于50重量％，基于總的乳酸和乳酸鹽的總和計。2. 發(fā)酵成分和不可消化寡糖在生產(chǎn)用于降低嬰兒每天哭泣發(fā)作次數(shù)的嬰兒配方物或 第二階段配方物中的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含0.5至20重量％的 不可消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計，以及〇. 25至1.5重量％的 乳酸鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸鹽的總和大于50重量％，基于總的乳酸和乳酸鹽的總和計。3. 發(fā)酵成分和不可消化寡糖在生產(chǎn)用于減少嬰兒哭泣持續(xù)時間的嬰兒配方物或第二 階段配方物中的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含0.5至20重量％的不可 消化寡糖，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計，以及〇. 25至1.5重量％的乳酸 鹽和乳酸的總和，基于所述嬰兒配方物或第二階段配方物的干重計，其中L-乳酸和L-乳酸 鹽的總和大于50重量％，基于總的乳酸和乳酸鹽的總和計。4. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物用于向年齡 為6個月或以下的嬰兒提供營養(yǎng)。5. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述不可消化寡糖選自果寡糖、不可消化糊精、 半乳寡糖、木寡糖、阿拉伯寡糖、阿拉伯半乳寡糖、葡萄寡糖、龍膽寡糖、葡萄甘露寡糖、半乳 甘露寡糖、甘露寡糖、異麥芽寡糖、黑曲霉寡糖、殼寡糖、大豆寡糖、糖醛酸寡糖、唾液酸寡 糖、巖藻寡糖及其混合物。6. 權(quán)利要求5的用途，其中所述不可消化寡糖選自半乳寡糖、果寡糖及其混合物。7. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含至少兩 種不同的不可消化寡糖。8. 權(quán)利要求7的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含半乳寡糖和果寡糖。9. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含0.2-4U β-半乳糖苷酶活性每克干重。10. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述發(fā)酵成分通過嗜熱鏈球菌和/或短雙歧桿 菌發(fā)酵。11. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含嗜熱 鏈球菌和/或短雙歧桿菌。12. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含至多 lxl05cfu乳酸菌每克所述嬰兒配方物或第二階段配方物干重。13. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含 lxl02C-lx 105cfu嗜熱鏈球菌每克所述嬰兒配方物或第二階段配方物干重。14. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物包含滅活 的乳酸菌。15. 前述權(quán)利要求中任一項的用途，其中所述嬰兒配方物或第二階段配方物是粉末的 形式。
【文檔編號】A23L33/00GK105848499SQ201480070402
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2014年11月4日
【發(fā)明人】T·路德維格, H·鮑里迪尤斯, D·余
【申請人】N·V·努特里奇亞