一種豬血提取利用方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種豬血處理方法，尤其涉及一種豬血提取利用方法。它包括豬血血紅蛋白溶液制備：往豬血中加入添加劑，離心分離，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，第一次超聲波處理；前處理：物理脫氧，調(diào)節(jié)pH值，第二次超聲波處理；分段酶解脫色；活性炭脫色：加入占其重量為1-2%的活性炭在溫度為25-35℃進行脫色處理5-10min；后處理：調(diào)節(jié)pH值，離心分離獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層超濾濃縮分離獲得第二濃縮液；豬血漿蛋白粉制備：取第一上清層噴霧干燥；豬血球蛋白粉制備：將所述第二濃縮液噴霧干燥；血紅素肽制備：取第二沉淀層物質(zhì)滾筒干燥。本發(fā)明方法脫色效果好，能制備蛋白含量高的低灰分的產(chǎn)品。
【專利說明】一種豬血提取利用方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種豬血處理方法，尤其涉及一種豬血提取利用方法。

【背景技術(shù)】
[0002]豬血中紅細胞的蛋白含量高達38%，占全血蛋白總量的75%以上，其中92%以上是血紅蛋白，因此豬血球是一種優(yōu)良的動物蛋白源，長期以來豬血加工者直接將其制成血球粉銷售。但由于血球粉中含有血紅素，使得血球粉為黑紅色，并且?guī)в泻苤氐难任?，感官不好難以接受，其經(jīng)濟附加值不高。
[0003]血紅素是以卟啉鐵的形式與四個珠蛋白結(jié)合形成血紅蛋白，存在于紅細胞中。在食品工業(yè)中，血紅素可替代肉制品中的發(fā)色劑硝酸鹽及人工合成色素，使用血紅素可減少亞硝酸鹽的致癌作用。在制藥工業(yè)中，血紅素可作為半合成膽紅素原料，而且是抗癌的特效藥。血紅素在臨床上作為補鐵劑，可治療由缺鐵引起的貧血癥，這種血紅素補鐵劑可以直接被人體吸收，吸收率高達10%?20%，具有無體內(nèi)鐵蓄積中毒及胃腸刺激等不良反應(yīng)等優(yōu)點。
[0004]CN100581377C(2010-1-20)公開了一種脫血紅素豬血血紅蛋白酶解物和血紅素肽的制備方法；該方法以豬血紅細胞為原料，通過溶血、復(fù)合蛋白酶酶解、等電離心分離制備脫血紅素豬血血紅蛋白酶解物及血紅素肽。然而該方法制備產(chǎn)物的灰分較大，且脫色效果仍然有待改進。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種脫色效果好，能制備蛋白含量高的、能改善動物適口性、提高蛋白消化吸收率和乳豬免疫力的豬血球蛋白粉的豬血提取利用方法。
[0006]本發(fā)明的上述技術(shù)目的是通過以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的:
一種豬血提取利用方法，其依次通過以下步驟制備而成:
(1)豬血血紅蛋白溶液制備:將檢驗合格的生豬采血后，加入按照質(zhì)量比1:2-5:0.01-0.03混合的乙二胺四乙酸二鈉、碳酸氫鈉和從天然植物中提取的植物酚，其中乙二胺四乙酸二鈉與豬血的重量比為1-2:1000，混合均勻后在15-25°C第一次碟式離心分離3-6min,獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入去離子水，在1800-2500W的超聲波功率下第一次超聲波處理30-60s獲得豬血血紅蛋白溶液；
所述從天然植物中提取的植物酚為茶多酚或蘋果多酚；
(2)前處理:使用氮氣鼓泡脫氧對所述豬血血紅蛋白溶液進行第一次物理脫氧和初步脫色，然后將脫氧后的所述豬血血紅蛋白溶液調(diào)節(jié)PH值至6-7，然后在600-800W的超聲波功率下第二次超聲波處理50-90S獲得前處理液；
(3)分段酶解脫色:將所述前處理液升溫至28-35°C，加入第一復(fù)合酶并保溫1-1.5h，所述第一復(fù)合酶由動物蛋白水解酶、枯草菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰酶按質(zhì)量比1:1-2:0.5-0.8:0.2-0.4混合而成，所述動物蛋白水解酶與所述豬血血紅蛋白溶液的濃度比為10000-20000U/g ;然后再升溫至45-50°C，加入第二復(fù)合酶并保溫1.5_2h后終止酶解反應(yīng)獲得酶解脫色液；所述第二復(fù)合酶由枯草菌蛋白酶和堿性蛋白酶按質(zhì)量比1:2-3混合而成；所述第一復(fù)合酶與所述第二復(fù)合酶的質(zhì)量比為3-5:1 ；
(4)活性炭脫色:向所述酶解脫色液中加入占其重量為1-2%的活性炭在溫度為25-35 °C進行脫色處理5-10min獲得活性炭脫色液；
(5)后處理:將所述活性炭脫色液調(diào)節(jié)pH值至4-5，水浴15-25min，在15_25°C第二次碟式離心分離2-5min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.5-0.SMPa下超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液；
所述超濾膜為聚偏氟乙烯超濾膜，截留分子量為6000-8000Da ；
(6)豬血漿蛋白粉制備:取所述第一上清層，采用血漿濃縮裝置進行濃縮獲得第一濃縮液，然后將所述第一濃縮液進行第一噴霧干燥獲得白色豬血漿蛋白粉；
(7)豬血球蛋白粉制備:將所述第二濃縮液進行第二噴霧干燥獲得乳白色的豬血球蛋白多妝粉；
(8)血紅素肽制備:取所述后處理步驟中獲得的第二沉淀層物質(zhì)，在-10-15°C冷凍l_2h，自然解凍后添加1-2倍去離子水洗滌，然后進行離心分離，取離心分離獲得的沉淀物，添加0.1-0.2倍去離子水洗滌后，進行第二次物理脫氧，接著再離心分離，最后滾筒干燥得到血紅素肽。
[0007]本發(fā)明豬血血紅蛋白溶液制備時加入的乙二胺四乙酸二鈉、碳酸氫鈉和從天然植物中提取的植物酚混合物可以使豬血抗凝和防變性，提高其熱穩(wěn)定性，保證營養(yǎng)成分不流失；獲得沉淀物后進行超聲波處理是為了對沉淀物中的豬血球細胞進行預(yù)破碎，利于后續(xù)的脫色；脫色采用前處理初步脫色、分段酶解二次脫色、活性炭脫色和后處理多級脫色處理和提純工藝，可充分脫除其中的顏色和血腥味，使最終制得的血球蛋白多肽粉顏色接近乳白色，蛋白含量高達96%以上，灰分低至1%以下；溶解度彡98%，揮發(fā)性鹽基氮< 130mg/kg;沙門氏菌、豬瘟病毒、口蹄疫及圓環(huán)病毒均不檢出。
[0008]本發(fā)明使得血球蛋白多肽粉脫除了顏色和血腥味，接近乳白色，并具有乳香味，其感官性狀大幅提升；血球蛋白多肽粉灰分含量低，溶解度好，蛋白含量高，尤其富含大量的小分子多肽，并且提高了多種氨基酸的含量。加工的飼料營養(yǎng)有改進，可提高乳豬免疫力，增加抗菌和對病毒的抑制作用。
[0009]作為優(yōu)選，取所述后處理步驟中獲得的第二沉淀層物質(zhì)，在-10-15°C冷凍l_2h，自然解凍后添加1-2倍去離子水洗滌，然后進行離心分離，取離心分離獲得的沉淀物，添加
0.1-0.2倍去離子水洗滌后，進行第二次物理脫氧，接著再離心分離，最后滾筒干燥得到血紅素肽。
[0010]以原始豬血為原料，經(jīng)生物酶解配合多級處理技術(shù)和該方法制得血紅素粗品副產(chǎn)物。采用本發(fā)明方法制備的血紅素回收率達95%以上，血紅素肽中的血紅素含量達到40%_45%，顏色為紫紅色，并且無腥味，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，這與冷凍分離后又進行第二次物理脫氧有關(guān)。
[0011]作為優(yōu)選，所述第一噴霧干燥的進風(fēng)溫度為250-360°C，出風(fēng)溫度為75_85°C，最大水分蒸發(fā)量為6-9kg/h。
[0012]作為優(yōu)選，所述第二噴霧干燥的進風(fēng)溫度為190_240°C，出風(fēng)溫度為60_70°C，最大水分蒸發(fā)量為3-5kg/h。
[0013]作為優(yōu)選，所述豬血血紅蛋白溶液制備具體是將檢驗合格的生豬采血后，加入按照質(zhì)量比1:3:0.03混合的乙二胺四乙酸二鈉、碳酸氫鈉和從天然植物中提取的植物酚，其中乙二胺四乙酸二鈉與豬血的重量比為1.5:1000，混合均勻后在20°C第一次碟式離心分離4min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入1.8-2倍體積的去離子水，在2000W的超聲波功率下第一次超聲波處理50s獲得豬血血紅蛋白溶液。
[0014]作為優(yōu)選，所述后處理是將所述酶解脫色液調(diào)節(jié)pH值至4-5，在溫度為10_18°C的水浴中處理15-25min，在18°C第二次碟式離心分離3min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.6MPa下超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液。
[0015]作為優(yōu)選，所述血漿濃縮裝置，包括進液口，其所述進液口連接有一級保安過濾器，所述一級保安過濾器連接有膜過濾器，所述膜過濾器的一端連接有透過液罐，所述膜過濾器的另一端連接有血漿循環(huán)罐，所述血漿循環(huán)罐還同時與所述一級保安過濾器相通，所述血漿循環(huán)罐底部連接有補液泵，所述補液泵連接有二級保安過濾器，所述二級保安過濾器連接有觀察閥。
[0016]血漿濃縮裝置可通過保安過濾器的壓力變化以控制血漿質(zhì)量，當(dāng)循環(huán)罐中的血漿開始濃縮時，補液泵開始補液工作，在濃縮過程中，通過觀察閥對其中的液體顏色檢測觀察，可以將血漿進行有效濃縮，并通過管路配制清洗，使膜過濾器再生，同時回收濃縮廢水或清洗廢水，生產(chǎn)環(huán)保高效。
[0017]作為優(yōu)選，所述第一次碟式分離采用的碟式分離機，包括機體，其所述機體內(nèi)設(shè)置有轉(zhuǎn)鼓，所述機體頂部設(shè)置有進出口裝置，所述進出口裝置包括平行布置的原料進口管、重相出口管和輕相出口管，所述原料進口管、重相出口管和輕相出口管與所述轉(zhuǎn)鼓相通，所述機體側(cè)面設(shè)置有與所述轉(zhuǎn)鼓相通的排渣部和廢水出口，所述廢水出口位于所述排渣部的下方，所述機體的側(cè)面設(shè)置有清洗水進口，所述排渣部內(nèi)設(shè)置有PLC裝置；
所述進出口裝置包括進出口座以及固定在所述進出口座上的原料進口管，所述原料進口管的側(cè)壁上設(shè)置有用于分離重相的上向心泵和用于分離輕相的下向心泵，所述上向心泵位于所述下向心泵的上方，所述原料進口管的一側(cè)連接有在所述原料進口管徑向延伸的重相出口管的一端，所述原料進口管的另一側(cè)連接有在所述原料進口管徑向延伸的輕相出口管的一端，所述重相出口管與所述輕相出口管的另一端分別設(shè)置有流量調(diào)節(jié)裝置。
[0018]本發(fā)明的優(yōu)點是:
(1)采用可編程邏輯控制器(PLC)裝置設(shè)置在所述排渣部，可以在連續(xù)進料生產(chǎn)的情況下實行定期定量排渣，也可以在停止進料時進行全排渣，以便自動清洗轉(zhuǎn)鼓中的污垢，具有自動化程度高、對工藝調(diào)整的適應(yīng)性強、調(diào)節(jié)方便、分離效果好的優(yōu)點；
(2)通過所述原料進口管、重相出口管和輕相出口管的布置，同時配合轉(zhuǎn)鼓和排渣部的設(shè)置，可以使密度相對較大的重料血球通過下向心泵室流出，使密度相對較小的輕料血漿從下向心泵室流出，對豬血血漿和血球分離的分離性能高、效果好；
(3)過所述原料進口管與所述上向心泵和下向心泵的布置，同時配合重相出口管、輕相出口管以及流量調(diào)節(jié)裝置，可以使密度相對較大的重料血球通過下向心泵流出，使密度相對較小的輕料血漿從下向心泵流出，對豬血血漿和血球分離的分離性能高、效果好。
[0019]作為優(yōu)選，所述轉(zhuǎn)鼓包括主軸、固定所述主軸的基座以及與所述基座相鄰的轉(zhuǎn)鼓體，其還包括壓緊在所述轉(zhuǎn)鼓體上的且分布于所述主軸兩側(cè)的碟片壓蓋和轉(zhuǎn)鼓蓋，所述主軸側(cè)壁固設(shè)有與所述主軸呈30-60°夾角的進料分配管，所述轉(zhuǎn)鼓體內(nèi)設(shè)置有不均勻布置的碟片，所述碟片與所述主軸的夾角為30-60°，所述主軸頂部設(shè)置有用于分離不同密度物料的比重環(huán)，所述比重環(huán)上方設(shè)置有用于分離重相的上向心泵室，所述比重環(huán)下方設(shè)置有用于分離輕相的下向心泵室。
[0020]本發(fā)明通過所述進料分配管與所述碟片的角度布置，同時配合比重環(huán)以及上向心泵室與下向心泵室的設(shè)置，可以使密度相對較大的重料血球通過下向心泵室流出，使密度相對較小的輕料血漿從下向心泵室流出，對豬血血漿和血球分離的分離性能高、效果好。
[0021]更優(yōu)選，所述碟片壓蓋與所述主軸的夾角為30-60°，所述轉(zhuǎn)鼓蓋與所述主軸的夾角為 30-60°。
[0022]更優(yōu)選，所述進料分配管下方且位于所述基座與所述轉(zhuǎn)鼓體的相鄰處設(shè)置有O型密封圈；所述O型密封圈的周向?qū)ΨQ設(shè)置有用于卡緊密封槽的兩道切口，所述兩道切口與所述O型密封圈圓心的連線夾角為90°。
[0023]O型密封圈可使轉(zhuǎn)鼓密封性更好，從而提高血漿和血球的分離效果。
[0024]更優(yōu)選，所述流量調(diào)節(jié)裝置包括與所述重相出口管或所述輕相出口管的另一端相通的流量調(diào)節(jié)室，所述流量調(diào)節(jié)室連接有壓力裝置。
[0025]通過流量調(diào)節(jié)室中的壓力調(diào)節(jié)，可以控制重相料和輕相料的進出口壓力，從而提高分離效果。
[0026]綜上所述，本發(fā)明具有以下有益效果:
1、本發(fā)明制備的豬血球蛋白多肽粉脫除了顏色和血腥味，接近乳白色，并具有乳香味，其感官性狀大幅提升；
2、本發(fā)明制備的豬血紅蛋白含量高的、能改善動物適口性、提高蛋白消化吸收率和乳豬免疫力；
3、本發(fā)明還可同時得到高附加值的血紅素粗品副產(chǎn)物。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0027]圖1是本發(fā)明碟式分離機的正視圖；
圖2是本發(fā)明碟式分離機的俯視圖；
圖3是本發(fā)明碟式分離機的側(cè)視圖；
圖4是本發(fā)明碟式分離機的工作示意圖；
圖5是本發(fā)明碟式分離機轉(zhuǎn)鼓剖視圖；
圖6是本發(fā)明O型密封圈放大示意圖；
圖7是本發(fā)明進出口裝置的示意圖；
圖8是血衆(zhòng)濃縮裝置不意圖；
圖中，1-轉(zhuǎn)鼓；2_進出口裝置；3_排渣部；4_廢水出口 ；5_清洗水進口 ；
11-主軸；12_基座；13-轉(zhuǎn)鼓體；14-碟片壓蓋；15-轉(zhuǎn)鼓蓋；16-進料分配管；17_碟片；18-比重環(huán)；19_上向心泵室；110_下向心泵室；111-異形鎖緊圈；112-定位塊；113_內(nèi)六角錐端緊定螺釘；114-水室；115-0型密封圈；116-切口； 21-進出口座；22-原料進口管；23_上向心泵；24_下向心泵；25_重相出口管；26_輕相出口管；27-流量調(diào)節(jié)裝置；271-流量調(diào)節(jié)室；272_壓力裝置；273_第一視鏡玻璃；28-進料接頭；281-第二視鏡玻璃。；
61-進液口 ；62_ —級保安過濾器；63_膜過濾器；64_透過液罐；65_血漿循環(huán)罐；66-補液泵；67_ 二級保安過濾器；68_觀察閥；69_配藥罐；610_純化水管路；611_熱水循環(huán)罐；612_地下水冷凝系統(tǒng)。
[0028]

【具體實施方式】
[0029]以下結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步詳細說明。
[0030]實施例一
豬血血紅蛋白溶液制備:將檢驗合格的生豬采血后,加入按照質(zhì)量比1:5:0.03混合的乙二胺四乙酸二鈉、碳酸氫鈉和茶多酚或蘋果多酚，其中乙二胺四乙酸二鈉與豬血的重量比為2:1000,混合均勻后在25°C第一次碟式離心分離6min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入去離子水，在2500W的超聲波功率下第一次超聲波處理60s獲得豬血血紅蛋白溶液；
前處理:使用氮氣鼓泡脫氧對豬血血紅蛋白溶液進行第一次物理脫氧和初步脫色，然后將脫氧后的豬血血紅蛋白溶液調(diào)節(jié)PH值至7，然后在800W的超聲波功率下第二次超聲波處理90s獲得前處理液；
分段酶解脫色:將前處理液升溫至35°C，加入第一復(fù)合酶并保溫1.5h，第一復(fù)合酶由動物蛋白水解酶、枯草菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰酶按質(zhì)量比1: 2: 0.8: 0.4混合而成，動物蛋白水解酶與豬血血紅蛋白溶液的濃度比為20000U/g ;然后再升溫至50°C，加入第二復(fù)合酶并保溫2h后終止酶解反應(yīng)獲得酶解脫色液；第二復(fù)合酶由枯草菌蛋白酶和堿性蛋白酶按質(zhì)量比1: 3混合而成；第一復(fù)合酶與第二復(fù)合酶的質(zhì)量比為5:1 ；
活性炭脫色:向酶解脫色液中加入占重量為1-2%的活性炭在溫度為25-35°C進行脫色處理5-10min獲得活性炭脫色液；
后處理:將活性炭脫色液調(diào)節(jié)PH值至5，水浴25min，在25 °C第二次碟式離心分離5min,獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.SMPa下用截留分子量為8000Da的PVDF超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液；
噴霧干燥:將第二濃縮液進行第二噴霧干燥獲得乳白色的豬血球蛋白多肽粉，噴霧干燥的進風(fēng)溫度為240°C，出風(fēng)溫度為70°C，最大水分蒸發(fā)量為5kg/h。血球蛋白多肽粉顏色接近乳白色，蛋白含量高達96%以上，灰分低至1%以下；溶解度> 98%，揮發(fā)性鹽基氮
<130mg/kg ;沙門氏菌、豬瘟病毒、口蹄疫及圓環(huán)病毒均不檢出。
[0031]取后處理步驟中獲得的第二沉淀層物質(zhì)，在_15°C冷凍2h，自然解凍后添加2倍去離子水洗滌，然后進行離心分離，取離心分離獲得的沉淀物，添加0.2倍去離子水洗滌后，進行第二次物理脫氧，接著再離心分離，最后滾筒干燥得到血紅素肽。血紅素回收率達96%以上，血紅素肽中的血紅素含量達到40%，顏色為紫紅色，并且無腥味。
[0032]豬血漿蛋白粉制備:取第一上清層，采用血漿濃縮裝置進行濃縮獲得第一濃縮液，然后將第一濃縮液進行第一噴霧干燥獲得豬血漿蛋白粉。
[0033]如圖1-圖7所示，第一次碟式分離采用的碟式分離機包括機體，機體內(nèi)設(shè)置有轉(zhuǎn)鼓1，機體頂部設(shè)置有進出口裝置2，進出口裝置2包括平行布置的原料進口管22、重相出口管25和輕相出口管26，原料進口管22、重相出口管25和輕相出口管26與轉(zhuǎn)鼓I相通，機體側(cè)面設(shè)置有與轉(zhuǎn)鼓I相通的排渣部3和廢水出口 4，廢水出口 4位于排渣部3的下方，機體的側(cè)面設(shè)置有清洗水進口 5，排渣部3內(nèi)設(shè)置有PLC裝置。轉(zhuǎn)鼓I包括主軸11、固定主軸11的基座12以及與基座12相鄰的轉(zhuǎn)鼓體13，其還包括壓緊在轉(zhuǎn)鼓體13上的且分布于主軸11兩側(cè)的碟片壓蓋14和轉(zhuǎn)鼓蓋15，主軸11側(cè)壁固設(shè)有與主軸11呈30-60°夾角的進料分配管16，轉(zhuǎn)鼓體13內(nèi)設(shè)置有不均勻布置的碟片17，碟片17與主軸11的夾角為30-60°，主軸11頂部設(shè)置有用于分離不同密度物料的比重環(huán)，比重環(huán)上方設(shè)置有用于分離重相的上向心泵室19，比重環(huán)下方設(shè)置有用于分離輕相的下向心泵室110。碟片壓蓋14與主軸11的夾角為30-60°，優(yōu)選50° ;轉(zhuǎn)鼓蓋15與主軸11的夾角為30-60°，優(yōu)選50°。碟片壓蓋14和轉(zhuǎn)鼓蓋15的垂直距離為4cm。轉(zhuǎn)鼓蓋15上設(shè)置有異形鎖緊圈111和定位塊112。基座12下方設(shè)置有用于反洗的水室114，清洗水進口 5與水室114相通。進料分配管16下方且位于基座12與轉(zhuǎn)鼓體13的相鄰處設(shè)置有O型密封圈115。O型密封圈115的周向?qū)ΨQ設(shè)置有用于卡緊密封槽的兩道切口 116，兩道切口 116與O型密封圈115圓心的連線夾角為90°。進出口裝置2包括進出口座21以及固定在進出口座21上的原料進口管22，原料進口管22的側(cè)壁上設(shè)置有用于分離重相的上向心泵23和用于分離輕相的下向心泵24，上向心泵23位于下向心泵24的上方，原料進口管22的一側(cè)連接有在原料進口管22徑向延伸的重相出口管25的一端，原料進口管22的另一側(cè)連接有在原料進口管22徑向延伸的輕相出口管26的一端，重相出口管25與輕相出口管26的另一端分別設(shè)置有流量調(diào)節(jié)裝置27。流量調(diào)節(jié)裝置27包括與重相出口管25或輕相出口管26的另一端相通的流量調(diào)節(jié)室271，流量調(diào)節(jié)室271連接有壓力裝置272。轉(zhuǎn)鼓體13上設(shè)置有將進料分配管16進一步固定的內(nèi)六角錐端緊定螺釘113，流量調(diào)節(jié)室271上設(shè)置有第一視鏡玻璃273。
[0034]原料進口管的頂端上方設(shè)置有進料接頭28，進料接頭28上設(shè)置有第二視鏡玻璃281。通過第一視鏡玻璃和第二視鏡玻璃的安裝，可以更準確地觀察重相料和輕相料的分離情況。
[0035]血漿濃縮裝置包括進液口 61，進液口 61連接有一級保安過濾器62，一級保安過濾器62連接有納濾膜過濾器63，納濾膜過濾器63的一端連接有透過液罐64，納濾膜過濾器63的另一端連接有血漿循環(huán)罐65，血漿循環(huán)罐65還同時與一級保安過濾器62相通，血漿循環(huán)罐65底部連接有補液泵66，補液泵66連接有二級保安過濾器67，二級保安過濾器67連接有觀察閥68。透過液罐64連接有配藥罐69。血漿濃縮裝置還包括純化水管路610，納濾膜過濾器63與純化水管路610相通。血漿濃縮裝置還包括熱水循環(huán)罐611和地下水冷凝系統(tǒng)612，循環(huán)罐還同時與熱水循環(huán)罐611和地下水冷凝系統(tǒng)612相通。
[0036]實施例二
豬血血紅蛋白溶液制備:將檢驗合格的生豬米血后，加入按照質(zhì)量比1:2:0.01混合的乙二胺四乙酸二鈉、碳酸氫鈉和茶多酚或蘋果多酚，其中乙二胺四乙酸二鈉與豬血的重量比為1:1000，混合均勻后在15°C第一次碟式離心分離3min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入去離子水，在1800W的超聲波功率下第一次超聲波處理30s獲得豬血血紅蛋白溶液； 前處理:使用氮氣鼓泡脫氧對豬血血紅蛋白溶液進行第一次物理脫氧和初步脫色，然后將脫氧后的豬血血紅蛋白溶液調(diào)節(jié)PH值至6，然后在600W的超聲波功率下第二次超聲波處理50s獲得前處理液；
分段酶解脫色:將前處理液升溫至28°C，加入第一復(fù)合酶并保溫lh，第一復(fù)合酶由動物蛋白水解酶、枯草菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰酶按質(zhì)量比1:1:0.5:0.2混合而成，動物蛋白水解酶與豬血血紅蛋白溶液的濃度比為10000U/g ;然后再升溫至45°C，加入第二復(fù)合酶并保溫1.5h后終止酶解反應(yīng)獲得酶解脫色液；第二復(fù)合酶由枯草菌蛋白酶和堿性蛋白酶按質(zhì)量比1:2混合而成；第一復(fù)合酶與第二復(fù)合酶的質(zhì)量比為3:1 ；
活性炭脫色:向酶解脫色液中加入占酶解脫色液重量為1%的活性炭在溫度為25°C進行脫色處理5min獲得活性炭脫色液；
后處理:將活性炭脫色液調(diào)節(jié)PH值至4，水浴15min，在15_25°C第二次碟式離心分離2min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.5MPa下用截留分子量為6000Da的PVDF超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液；
噴霧干燥:將第二濃縮液進行第二噴霧干燥獲得乳白色的豬血球蛋白多肽粉，噴霧干燥的進風(fēng)溫度為190°C，出風(fēng)溫度為60°C，最大水分蒸發(fā)量為3kg/h。血球蛋白多肽粉顏色接近乳白色，蛋白含量高達97%以上，灰分低至1%以下；溶解度> 98%，揮發(fā)性鹽基氮
<130mg/kg ;沙門氏菌、豬瘟病毒、口蹄疫及圓環(huán)病毒均不檢出。
[0037]取后處理步驟中獲得的第二沉淀層物質(zhì)，在-10°C冷凍lh，自然解凍后添加1-2倍去離子水洗滌，然后進行離心分離，取離心分離獲得的沉淀物，添加0.1倍去離子水洗滌后，進行第二次物理脫氧，接著再離心分離，最后滾筒干燥得到血紅素肽。血紅素回收率達96%以上，血紅素肽中的血紅素含量達到45%，顏色為紫紅色，并且無腥味。
[0038]豬血漿蛋白粉制備:取第一上清層，采用實施例一血漿濃縮裝置進行濃縮獲得第一濃縮液，然后將第一濃縮液進行第一噴霧干燥獲得豬血漿蛋白粉。
[0039]實施例三
豬血血紅蛋白溶液制備具體是將檢驗合格的生豬采血后，加入按照質(zhì)量比1:3:0.03混合的乙二胺四乙酸二鈉、碳酸氫鈉和從天然植物中提取的植物酚，其中乙二胺四乙酸二鈉與豬血的重量比為1.5:1000，混合均勻后在20°C第一次碟式離心分離4min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入1.8-2倍體積的去離子水，在2000W的超聲波功率下第一次超聲波處理50s獲得豬血血紅蛋白溶液。
[0040]前處理:使用氮氣鼓泡脫氧對豬血血紅蛋白溶液進行第一次物理脫氧和初步脫色，然后將脫氧后的豬血血紅蛋白溶液調(diào)節(jié)PH值至6.5，然后在700W的超聲波功率下第二次超聲波處理70s獲得前處理液；
分段酶解脫色:將前處理液升溫至30°C，加入第一復(fù)合酶并保溫1.2h，第一復(fù)合酶由動物蛋白水解酶、枯草菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰酶按質(zhì)量比1:1.2:0.6:0.3混合而成，動物蛋白水解酶與豬血血紅蛋白溶液的濃度比為12000U/g ;然后再升溫至48°C，加入第二復(fù)合酶并保溫1.Sh后終止酶解反應(yīng)獲得酶解脫色液；第二復(fù)合酶由枯草菌蛋白酶和堿性蛋白酶按質(zhì)量比1:2.5混合而成；第一復(fù)合酶與第二復(fù)合酶的質(zhì)量比為4:1;
活性炭脫色:向酶解脫色液中加入占重量為1.6%的活性炭在溫度為28°C進行脫色處理7min獲得活性炭脫色液； 后處理:將活性炭脫色液調(diào)節(jié)pH值至4，在溫度為15°C的水浴中處理18min，在18°C第二次碟式離心分離3min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.6MPa下超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液。
[0041]噴霧干燥:將第二濃縮液進行第二噴霧干燥獲得乳白色的豬血球蛋白多肽粉，噴霧干燥的進風(fēng)溫度為200°C，出風(fēng)溫度為65°C，最大水分蒸發(fā)量為4kg/h。
[0042]血球蛋白多肽粉顏色接近乳白色，蛋白含量高達98%以上，灰分低至1%以下；溶解度> 98%，揮發(fā)性鹽基氮< 130mg/kg ;沙門氏菌、豬瘟病毒、口蹄疫及圓環(huán)病毒均不檢出。
[0043]取后處理步驟中獲得的第二沉淀層物質(zhì)，在-12°C冷凍1.5h，自然解凍后添加1.5倍去離子水洗滌，然后進行離心分離，取離心分離獲得的沉淀物，添加0.15倍去離子水洗滌后，進行第二次物理脫氧，接著再離心分離，最后滾筒干燥得到血紅素肽。血紅素回收率達96%以上，血紅素肽中的血紅素含量達到45%，顏色為紫紅色，并且無腥味。
[0044]豬血漿蛋白粉制備:取第一上清層，采用實施例一血漿濃縮裝置進行濃縮獲得第一濃縮液，然后將第一濃縮液進行第一噴霧干燥獲得豬血漿蛋白粉。
[0045]對比實施例一
同實施例一，不同的是豬血血紅蛋白溶液制備是將檢驗合格的生豬采血后，加入乙二胺四乙酸二鈉，乙二胺四乙酸二鈉與豬血的重量比為1-2:1000，混合均勻后在15°C滾筒式離心分離3-6min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入去離子水。最后制得的血球蛋白多肽粉顏色為灰白色，蛋白含量為92%，灰分為4%。
[0046]對比實施例二
同實施例二，不同的是豬血血紅蛋白溶液制備后未進行前處理，而是直接進行酶解脫色和后處理。
[0047]最后制得的血球蛋白多肽粉顏色為灰白色，蛋白含量為90%，灰分為5%。
[0048]對比實施例三
同實施例三，不同的是酶解脫色是加入按質(zhì)量比1:3混合的動物蛋白水解酶和枯草菌蛋白酶，動物蛋白水解酶與豬血血紅蛋白溶液的濃度比為15000U/g，酶解l_2h后終止酶解反應(yīng)獲得酶解脫色液；后處理是將酶解脫色液調(diào)節(jié)PH值至6-7，水浴15min，在15°C第二次碟式離心分離5min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.4MPa下超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液。
[0049]最后制得的血球蛋白多妝粉顏色為灰白色，蛋白含量為89%,灰分為6%。
[0050]對比實施例四
同實施例三，不同的是血紅素肽制備是取后處理步驟中獲得的第二沉淀層物質(zhì)，在-10°c冷凍l-2h，自然解凍后添加1-2倍去離子水洗滌，然后進行離心分離，取離心分離獲得的沉淀物，添加0.1-0.2倍去離子水洗滌后，接著再離心分離，不進行第二次物理脫氧，直接滾筒干燥得到。血紅素回收率為90%，血紅素肽中的血紅素含量為30%，顏色為紫紅色，略有腥味。
[0051]本具體實施例僅僅是對本發(fā)明的解釋，其并不是對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員在閱讀完本說明書后可以根據(jù)需要對本實施例做出沒有創(chuàng)造性貢獻的修改，但只要在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)都受到專利法的是實力保護。
【權(quán)利要求】
1.一種豬血提取利用方法，其特征在于依次通過以下步驟制備而成: (1)豬血血紅蛋白溶液制備:將檢驗合格的生豬采血后，加入按照質(zhì)量比1:2-5:0.01-0.03混合的乙二胺四乙酸二鈉、碳酸氫鈉和從天然植物中提取的植物酚，其中乙二胺四乙酸二鈉與豬血的重量比為1-2:1000，混合均勻后在15-25°C第一次碟式離心分離3-6min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入去離子水，在1800-2500W的超聲波功率下第一次超聲波處理30-60s獲得豬血血紅蛋白溶液； 所述從天然植物中提取的植物酚為茶多酚或蘋果多酚； (2)前處理:使用氮氣鼓泡脫氧對所述豬血血紅蛋白溶液進行第一次物理脫氧和初步脫色，然后將脫氧后的所述豬血血紅蛋白溶液調(diào)節(jié)PH值至6-7，然后在600-800W的超聲波功率下第二次超聲波處理50-90S獲得前處理液； (3)分段酶解脫色:將所述前處理液升溫至28-35°C，加入第一復(fù)合酶并保溫1-1.5h，所述第一復(fù)合酶由動物蛋白水解酶、枯草菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰酶按質(zhì)量比1:1-2:0.5-0.8:0.2-0.4混合而成，所述動物蛋白水解酶與所述豬血血紅蛋白溶液的濃度比為10000-20000U/g ;然后再升溫至45-50°C，加入第二復(fù)合酶并保溫1.5_2h后終止酶解反應(yīng)獲得酶解脫色液；所述第二復(fù)合酶由枯草菌蛋白酶和堿性蛋白酶按質(zhì)量比1:2-3混合而成；所述第一復(fù)合酶與所述第二復(fù)合酶的質(zhì)量比為3-5:1 ； (4)活性炭脫色:向所述酶解脫色液中加入占其重量為1-2%的活性炭在溫度為25-35 °C進行脫色處理5-10min獲得活性炭脫色液； (5)后處理:將所述活性炭脫色液調(diào)節(jié)pH值至4-5，水浴15-25min，在15_25°C第二次碟式離心分離2-5min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.5-0.SMPa下超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液； 所述超濾膜為聚偏氟乙烯超濾膜，截留分子量為6000-8000Da ； (6)豬血漿蛋白粉制備:取所述第一上清層，采用血漿濃縮裝置進行濃縮獲得第一濃縮液，然后將所述第一濃縮液進行第一噴霧干燥獲得白色豬血漿蛋白粉； (7)豬血球蛋白粉制備:將所述第二濃縮液進行第二噴霧干燥獲得乳白色的豬血球蛋白多妝粉； (8)血紅素肽制備:取所述后處理步驟中獲得的第二沉淀層物質(zhì)，在-10-15°C冷凍l_2h，自然解凍后添加1-2倍去離子水洗滌，然后進行離心分離，取離心分離獲得的沉淀物，添加0.1-0.2倍去離子水洗滌后，進行第二次物理脫氧，接著再離心分離，最后滾筒干燥得到血紅素肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述第二噴霧干燥的進風(fēng)溫度為190-240°C，出風(fēng)溫度為60-70°C，最大水分蒸發(fā)量為3_5kg/h。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述豬血血紅蛋白溶液制備具體是將檢驗合格的生豬采血后，加入按照質(zhì)量比1:3:0.03混合的乙二胺四乙酸二鈉、碳酸氫鈉和從天然植物中提取的植物酚，其中乙二胺四乙酸二鈉與豬血的重量比為1.5:1000，混合均勻后在20°C第一次碟式離心分離4min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入1.8-2倍體積的去離子水，在2000W的超聲波功率下第一次超聲波處理50s獲得豬血血紅蛋白溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述后處理是將所述酶解脫色液調(diào)節(jié)pH值至4-5，在溫度為10-18°C的水浴中處理15-25min，在18°C第二次碟式離心分離3min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.6MPa下超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述血漿濃縮裝置包括進液口(61)，所述進液口(61)連接有一級保安過濾器(62)，所述一級保安過濾器(62 )連接有膜過濾器(63 )，所述膜過濾器(63 )的一端連接有透過液罐(64 )，所述膜過濾器(63)的另一端連接有血漿循環(huán)罐(65)，所述血漿循環(huán)罐(65)還同時與所述一級保安過濾器(62)相通，所述血漿循環(huán)罐(65)底部連接有補液泵(66)，所述補液泵(66)連接有二級保安過濾器(67 )，所述二級保安過濾器(67 )連接有觀察閥(68 )。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述第一次碟式分離采用的碟式分離機，包括機體，所述機體內(nèi)設(shè)置有轉(zhuǎn)鼓(I )，所述機體頂部設(shè)置有進出口裝置(2)，所述進出口裝置(2)包括平行布置的原料進口管(22)、重相出口管(25)和輕相出口管(26)，所述原料進口管(22)、重相出口管(25)和輕相出口管(26)與所述轉(zhuǎn)鼓(I)相通，所述機體側(cè)面設(shè)置有與所述轉(zhuǎn)鼓(I)相通的排渣部(3)和廢水出口(4)，所述廢水出口(4)位于所述排渣部(3)的下方，所述機體的側(cè)面設(shè)置有清洗水進口(5)，所述排渣部(3)內(nèi)設(shè)置有PLC裝置； 所述進出口裝置(2 )包括進出口座(21)以及固定在所述進出口座(21)上的原料進口管(22)，所述原料進口管(22)的側(cè)壁上設(shè)置有用于分離重相的上向心泵(23)和用于分離輕相的下向心泵(24)，所述上向心泵(23)位于所述下向心泵(24)的上方，所述原料進口管(22)的一側(cè)連接有在所述原料進口管(22)徑向延伸的重相出口管(25)的一端，所述原料進口管(22)的另一側(cè)連接有在所述原料進口管(22)徑向延伸的輕相出口管(26)的一端，所述重相出口管(25 )與所述輕相出口管(26 )的另一端分別設(shè)置有流量調(diào)節(jié)裝置(27 )。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述轉(zhuǎn)鼓(I)包括主軸(11)、固定所述主軸(11)的基座(12)以及與所述基座(12)相鄰的轉(zhuǎn)鼓體(13)，其還包括壓緊在所述轉(zhuǎn)鼓體(13)上的且分布于所述主軸(11)兩側(cè)的碟片壓蓋(14)和轉(zhuǎn)鼓蓋(15)，所述主軸(11)側(cè)壁固設(shè)有與所述主軸(11)呈30-60°夾角的進料分配管(16)，所述轉(zhuǎn)鼓體(13)內(nèi)設(shè)置有不均勻布置的碟片(17)，所述碟片(17)與所述主軸(11)的夾角為30-60°，所述主軸(11)頂部設(shè)置有用于分離不同密度物料的比重環(huán)，所述比重環(huán)上方設(shè)置有用于分離重相的上向心泵室(19)，所述比重環(huán)下方設(shè)置有用于分離輕相的下向心泵室(110)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述碟片壓蓋(14)與所述主軸(11)的夾角為30-60°，所述轉(zhuǎn)鼓蓋(15)與所述主軸(11)的夾角為30-60°。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述進料分配管(16)下方且位于所述基座(12)與所述轉(zhuǎn)鼓體(13)的相鄰處設(shè)置有O型密封圈(115)； 所述O型密封圈(115)的周向?qū)ΨQ設(shè)置有用于卡緊密封槽的兩道切口( 116)，所述兩道切口(116)與所述O型密封圈(115)圓心的連線夾角為90°。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種豬血提取利用方法，其特征在于:所述流量調(diào)節(jié)裝置(27)包括與所述重相出口管(25)或所述輕相出口管(26)的另一端相通的流量調(diào)節(jié)室(271)，所述流量調(diào)節(jié)室(271)連接有壓力裝置(272)。
【文檔編號】A23K1/18GK104397364SQ201410547578
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年10月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月16日
【發(fā)明者】劉觀洲, 鄧自偉, 沙歡, 李寧豐 申請人:浙江索納克生物科技有限公司