一種點花黃精組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種點花黃精組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括種子的消毒、無菌苗的獲得、芽的誘導(dǎo)、生根誘導(dǎo)等步驟。本發(fā)明方法為保護野生資源，滿足人們的需求，本發(fā)明對點花黃精的組織培養(yǎng)及無性系的建立展開了探索，確立了無菌苗的培育、腋芽誘導(dǎo)、生根的理想培養(yǎng)條件，最終成功建立了點花黃精植株的無性再生系，為實現(xiàn)對點花黃精野生資源的保護、栽培，對種苗的需求以及基因庫的建立奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。
【專利說明】一種點花黃精組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及點花黃精的組織培養(yǎng)，屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]點花黃精，--?百合科，分布在印度、越南、不丹、錫金、尼泊爾以及中國大陸的廣東、云南、貴州、四川、西藏、廣西等地，根狀莖呈連珠狀，直徑1-1.5厘米，密生肉質(zhì)須根，莖高30-70厘米，通常具紫紅色斑點，有時上部生乳頭狀突起，葉互生，有時二葉可較接近，幼時稍肉質(zhì)而橫脈不顯，老時厚紙質(zhì)或近革質(zhì)而橫脈較顯，常有光澤，卵形、卵狀矩圓形至矩圓狀披針形，長6-14厘米，寬1.5-5厘米，先端尖至漸尖，具短柄，花序具2-6花，常呈總狀，總花梗長5-12毫米，上舉而花后平展，花梗長2-10毫米，苞片早落或不存在，花被白色，全長7-9毫米，花被筒在口部稍縊縮而略呈壇狀，裂片長1.5-2毫米，花絲長0.5-1暈米,花藥長1.5-2暈米,子房長2-2.5暈米,花柱長1.5-2.5暈米,柱頭稍膨大，漿果紅色，直徑約7毫米，具8-10余顆種子，花期4-6月，果期9-11月。點花黃精是一種藥用植物，性味辛，平，清熱解毒，外用于腫毒，疔瘡，生長于海拔1100米至2700米的地區(qū)，多生在巖石上、林下和附生樹上，尚未由人工弓I種栽培。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是點花黃精組織培養(yǎng)的方法，本發(fā)明方法為保護野生資源，滿足人們的需求，本研究對點花黃精的組織培養(yǎng)及無性系的建立展開了探索，確立了無菌苗的培育、腋芽誘導(dǎo)、生根的理想培養(yǎng)條件，最終成功建立了點花黃精植株的無性再生系，為實現(xiàn)對點花黃精野生資源的保護、栽培，對種苗的需求以及基因庫的建立奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案:
將點花黃精的種子放入500ml磨口廣口瓶中，先用自來水反復(fù)震蕩洗滌15min，在超凈工作臺上先用75%乙醇震蕩滅菌2min，之后迅速用無菌水洗滌3次，再用0.05%的升汞溶液反復(fù)震蕩滅菌lOmin，最后用無菌水洗滌5次，消毒處理過的點花黃精的種子接種到Zff+3.0mg/L6-BA+l.0mg/LNAA的培養(yǎng)基中進行無菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度2 5 ± 2 °C，光照強度3 5001X，光照時間12 h / d，誘導(dǎo)出來的無菌苗切去根部接入1/2MS+0.2-0.3mg/L6-BA+l.0-1.5mg/LNAA培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導(dǎo)和繼代，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光期12h/d，溫度25±2°C，將培養(yǎng)室培養(yǎng)的點花黃精拿到薄膜大棚中煉苗3天，打開瓶蓋，取出試管苗，洗凈培養(yǎng)基，種植于泥炭土:珍珠巖:椰糠=1:1:1的基質(zhì)中，將基質(zhì)置于塑料網(wǎng)篩中，每網(wǎng)篩中30株，網(wǎng)篩置于蔭棚中，加蓋塑料薄膜，蔭棚溫度25 °C，相對濕度90%。
[0005]采用本發(fā)明制備的點花黃精生根率高，利用率大，利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1
將點花黃精的種子放入500ml磨口廣口瓶中，先用自來水反復(fù)震蕩洗滌15min，在超凈工作臺上先用75%乙醇震蕩滅菌2min，之后迅速用無菌水洗滌3次，再用0.05%的升汞溶液反復(fù)震蕩滅菌lOmin，最后用無菌水洗滌5次，消毒處理過的點花黃精的種子接種到Zff+3.0mg/L6-BA+l.0mg/LNAA的培養(yǎng)基中進行無菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度25±2°C，光照強度35001x，光照時間12h/d，誘導(dǎo)出來的無菌苗切去根部接入1/2MS+0.2mg/L6-BA+l.0mg/LNAA培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導(dǎo)和繼代，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光期12h/d，溫度25±2°C，將培養(yǎng)室培養(yǎng)的點花黃精拿到薄膜大棚中煉苗3天，打開瓶蓋，取出試管苗，洗凈培養(yǎng)基，種植于泥炭土:珍珠巖:椰糠=1:1:1的基質(zhì)中，將基質(zhì)置于塑料網(wǎng)篩中，每網(wǎng)篩中30株，網(wǎng)篩置于蔭棚中，加蓋塑料薄膜，蔭棚溫度25 °C，相對濕度90%，成活率89%。
[0008]實施例2
將點花黃精的種子放入500ml磨口廣口瓶中，先用自來水反復(fù)震蕩洗滌15min，在超凈工作臺上先用75%乙醇震蕩滅菌2min，之后迅速用無菌水洗滌3次，再用0.05%的升汞溶液反復(fù)震蕩滅菌lOmin，最后用無菌水洗滌5次，消毒處理過的點花黃精的種子接種到Zff+3.0mg/L6-BA+l.0mg/LNAA的培養(yǎng)基中進行無菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度25±2°C，光照強度35001x，光照時間12h/d，誘導(dǎo)出來的無菌苗切去根部接入1/2MS+0.3mg/L6-BA+l.5mg/LNAA培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導(dǎo)和繼代，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光期12h/d，溫度25±2°C，將培養(yǎng)室培養(yǎng)的點花黃精拿到薄膜大棚中煉苗3天，打開瓶蓋，取出試管苗，洗凈培養(yǎng)基，種植于泥炭土:珍珠巖:椰糠=1:1:1的基質(zhì)中，將基質(zhì)置于塑料網(wǎng)篩中，每網(wǎng)篩中30株，網(wǎng)篩置于蔭棚中，加蓋塑料薄膜，蔭棚溫度25 °C，相對濕度90%，成活率90%。
[0009]實施例3
將點花黃精的種子放入500ml磨口廣口瓶中，先用自來水反復(fù)震蕩洗滌15min，在超凈工作臺上先用75%乙醇震蕩滅菌2min，之后迅速用無菌水洗滌3次，再用0.05%的升汞溶液反復(fù)震蕩滅菌lOmin，最后用無菌水洗滌5次，消毒處理過的點花黃精的種子接種到Zff+3.0mg/L6-BA+l.0mg/LNAA的培養(yǎng)基中進行無菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度25±2°C，光照強度35001x，光照時間12h/d，誘導(dǎo)出來的無菌苗切去根部接入1/2MS+0.3mg/L6-BA+l.0mg/LNAA培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導(dǎo)和繼代，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光期12h/d，溫度25±2°C，將培養(yǎng)室培養(yǎng)的點花黃精拿到薄膜大棚中煉苗3天，打開瓶蓋，取出試管苗，洗凈培養(yǎng)基，種植于泥炭土:珍珠巖:椰糠=1:1:1的基質(zhì)中，將基質(zhì)置于塑料網(wǎng)篩中，每網(wǎng)篩中30株，網(wǎng)篩置于蔭棚中，加蓋塑料薄膜，蔭棚溫度25 °C，相對濕度90%，成活率91%。
【權(quán)利要求】
1.一種點花黃精組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括種子的消毒、無菌苗的獲得、芽的誘導(dǎo)、生根誘導(dǎo)，其主要步驟如下: (1)取點花黃精的種子，進行消毒處理； (2)將步驟(I)消毒處理過的點花黃精的種子接種到ZW+3.0mg/L6-BA+l.0mg/LNAA的培養(yǎng)基中進行無菌苗的培育，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度25±2°C，光照強度35001x，光照時間 12h/d ； (3)取步驟(2)誘導(dǎo)出來的無菌苗切去根部接入1/2MS+0.2-0.3mg/L6-BA+l.0-1.5mg/LNAA培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導(dǎo)和繼代，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光期 12h/d，溫度 25±2°C ； (4)將步驟(3)培養(yǎng)出來的叢生芽進行生根誘導(dǎo)。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種點花黃精組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(O中所述點花黃精無菌種子的獲得為將點花黃精的種子放入500ml磨口廣口瓶中，先用自來水反復(fù)震蕩洗滌15min，在超凈工作臺上先用75%乙醇震蕩滅菌2min，之后迅速用無菌水洗滌3次，再用0.05%的升汞溶液反復(fù)震蕩滅菌lOmin，最后用無菌水洗滌5次。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種點花黃精組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中所述點花黃精生根誘導(dǎo)的方法為將培養(yǎng)室培養(yǎng)的點花黃精拿到薄膜大棚中煉苗3天，打開瓶蓋，取出試管苗，洗凈培養(yǎng)基，種植于泥炭土:珍珠巖:椰糠=1:1:1的基質(zhì)中，將基質(zhì)置于塑料網(wǎng)篩中，每網(wǎng)篩中30株，網(wǎng)篩置于蔭棚中，加蓋塑料薄膜，蔭棚溫度25°C，相對濕度90%。
【文檔編號】A01H4/00GK104304017SQ201410550616
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月17日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司