相關(guān)申請的交叉引用本申請要求2014年3月20日提交的美國臨時申請序列號61/968,342的優(yōu)先權(quán)的權(quán)益。序列表的并入序列表包含在名為“mons362wo.txt”的文件中，其大小為29.4kb(在ms-windows中測量)并創(chuàng)建于2015年3月9日，該文件通過電子呈交同此一起提交并且通過引用并入本文中。發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及對轉(zhuǎn)基因玉米事件mon87419是獨特的重組dna分子。本發(fā)明還涉及含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物、部分、種子、細胞和農(nóng)產(chǎn)品以及使用它們的方法。含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物表現(xiàn)出對麥草畏(dicamba)和草銨膦除草劑的耐受性。發(fā)明背景玉米(maize；zeamays)是世界上許多區(qū)域中的重要作物。已經(jīng)將生物技術(shù)的方法應(yīng)用于這種作物以生產(chǎn)具有理想性狀的玉米。一種這樣的理想性狀是除草劑耐受性。在植物中表達對于除草劑耐受性的異源基因(也被稱為轉(zhuǎn)基因)可以賦予植物除草劑耐受性。然而，轉(zhuǎn)基因的表達以及因此其效力可能受到許多不同因素的影響，包括驅(qū)動轉(zhuǎn)移到植物染色體的個別轉(zhuǎn)基因的表達的表達盒的取向和組成以及轉(zhuǎn)基因插入的染色體位置和基因組結(jié)果。這在具有多個以分子方式連接的轉(zhuǎn)基因(每個轉(zhuǎn)基因賦予單獨的性狀)的轉(zhuǎn)基因植物中進一步復(fù)雜化。在這種情況下，植物中每個以分子方式連接的轉(zhuǎn)基因的適當表達必須由相同的轉(zhuǎn)基因插入(也稱為多基因事件)引起。在這種情況下，有必要設(shè)計和測試多個表達盒，每個表達盒具有轉(zhuǎn)基因和表達元件的不同配置；然后通過多代的植物產(chǎn)生且分析大量單個植物轉(zhuǎn)化事件以選擇轉(zhuǎn)基因事件，所述轉(zhuǎn)基因事件具有相對于理想性狀的每一個的優(yōu)異性質(zhì)和使其適于商業(yè)目的所需的最佳表型和農(nóng)業(yè)特性。這種選擇需要廣泛的分子表征以及在多個地點和在多種條件下進行多年的溫室和田間試驗，以便可以收集顯著量的農(nóng)藝、表型和分子數(shù)據(jù)。所得數(shù)據(jù)和觀察結(jié)果然后必須由科學(xué)家和農(nóng)學(xué)家的團隊進行分析，目標是選擇適于在各種各樣的種質(zhì)間以及各種田間條件下的商業(yè)化農(nóng)業(yè)用途的事件。一旦選擇，就可以使用植物育種方法將賦予理想性狀的商業(yè)事件滲入到其它遺傳背景中，由此產(chǎn)生許多不同的作物品種，所述作物品種含有理想的性狀并且針對特定的局部生長條件經(jīng)適當調(diào)整。為了生成含有單一轉(zhuǎn)化事件的轉(zhuǎn)基因植物，使用植物轉(zhuǎn)化技術(shù)將重組dna構(gòu)建體的一部分轉(zhuǎn)移到玉米細胞的基因組中。隨后將該玉米細胞用于產(chǎn)生獨特的r0植物，然后可將所述r0植物用于產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因后代植物。后代植物的基因組含有獨特事件，并且這些植物可以針對所需性狀以及農(nóng)藝性狀進行試驗。事件的有效性可以受相對于轉(zhuǎn)化事件中的整合位點的順式和/或反式因子的影響。由事件所賦予的表型還可以受dna構(gòu)建體的大小和設(shè)計的影響，其可以隨著表達盒中的遺傳元件、轉(zhuǎn)基因數(shù)量、表達盒數(shù)量以及此類元件和此類盒的配置的組合而變化。給定事件的性狀可進一步復(fù)雜化，因諸如轉(zhuǎn)基因表達的植物發(fā)育、晝夜、時間或空間模式的因素；或因外在因素，例如，植物生長的環(huán)境條件、水可利用性、氮可利用性、熱或應(yīng)激。因此，創(chuàng)造賦予一組理想的表型性狀的事件的能力是不容易預(yù)測的。發(fā)明概述本發(fā)明提供了一種重組dna分子，其含有選自由seqidno:1-10組成的組的序列。本發(fā)明還提供了源自含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物或種子的重組dna，包含玉米mon87419事件的種子的代表性樣品已被保藏為atcc登錄號pta-120860。本發(fā)明還提供了一種重組dna分子，其為診斷源自于玉米mon87419事件的dna的存在的擴增子。本發(fā)明還提供了一種dna分子，其在源自于包含玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的玉米植物、細胞、種子、后代植物或植物部分中。本發(fā)明提供了一種dna分子，其具有seqidno:10的足夠長度的連續(xù)dna序列以用作dna探針，所述dna探針在嚴格雜交條件下與包含選自由seqidno:1-10組成的組的dna序列的dna分子雜交，并且在嚴格雜交條件下不與不包含選自由seqidno:1-10組成的組的dna序列的dna分子雜交。本發(fā)明還提供了一對dna分子，其包含第一dna分子和第二dna分子，其中第一dna分子是seqidno:9的片段且第二dna分子是玉米mon87419事件的玉米基因組dna的片段，并且其中第一和第二dna分子各自包含具有足夠長度的連續(xù)核苷酸的dna序列以用作dna引物，當與含有玉米mon87419事件的dna在擴增反應(yīng)中一起使用時，所述dna引物產(chǎn)生診斷樣品中的玉米mon87419事件的擴增子。本發(fā)明提供了一種檢測dna的樣品中玉米mon87419事件的存在的方法，通過使樣品與dna探針接觸；使樣品和dna探針經(jīng)受嚴格雜交條件；以及檢測dna探針與樣品中的dna分子的雜交，其中dna探針與dna分子的雜交表明dna的樣品中玉米mon87419事件的存在。本發(fā)明提供了一種檢測dna的樣品中玉米mon87419事件的存在的方法，通過使樣品與一對dna引物接觸；進行足以產(chǎn)生包含選自由seqidno:1-8和seqidno:10組成的組的序列的dna擴增子的擴增反應(yīng)；以及檢測反應(yīng)中dna擴增子的存在，其中反應(yīng)中dna擴增子的存在表明dna的樣品中玉米mon87419事件的存在。本發(fā)明提供了一種dna檢測試劑盒，其包含至少一種dna分子，所述dna分子包含具有seqidno:10的足夠長度的連續(xù)核苷酸的dna序列以用作特異性用于檢測dna的樣品中玉米mon87419事件的存在的引物或探針。本發(fā)明提供了重組玉米植物、種子、細胞、植物部分或商業(yè)產(chǎn)品，其包含具有選自由seqidno:1-10組成的組的dna序列的dna分子。本發(fā)明還提供了耐受草銨膦或麥草畏、或草銨膦和麥草畏除草劑的轉(zhuǎn)基因玉米植物、種子或細胞。本發(fā)明還提供了含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物、種子、細胞、植物部分或商業(yè)產(chǎn)品。本發(fā)明還提供了轉(zhuǎn)基因玉米植物或種子，其為具有至少一個包含玉米mon87419事件的親本植物的雜種。本發(fā)明提供了一種用于控制區(qū)域內(nèi)的雜草的方法，其包括在區(qū)域內(nèi)種植包含玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米并施用有效劑量的麥草畏或草銨膦或麥草畏和草銨膦除草劑以控制區(qū)域內(nèi)的雜草而不傷害轉(zhuǎn)基因玉米。本發(fā)明還提供了一種通過在生長季節(jié)施用有效劑量的草銨膦除草劑來控制雜草的方法，所述有效劑量的草銨膦除草劑為約0.1磅酸當量/英畝至約16磅酸當量/英畝的草銨膦除草劑。本發(fā)明還提供了一種通過在生長季節(jié)施用有效劑量的草銨膦除草劑來控制雜草的方法，所述有效劑量的草銨膦除草劑為約0.4磅酸當量/英畝至約1.59磅酸當量/英畝的草銨膦除草劑。本發(fā)明還提供了一種通過在生長季節(jié)施用有效劑量的麥草畏除草劑來控制雜草的方法，所述有效劑量的麥草畏除草劑為約0.1磅酸當量/英畝至約16磅酸當量/英畝的麥草畏除草劑。本發(fā)明還提供了一種通過在生長季節(jié)施用有效劑量的麥草畏除草劑來控制雜草的方法，所述有效劑量的麥草畏除草劑為約0.5磅酸當量/英畝至約2磅酸當量/英畝的麥草畏除草劑。本發(fā)明提供了一種產(chǎn)生耐受草銨膦和麥草畏除草劑的轉(zhuǎn)基因玉米植物的方法，通過使包含玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物與第二玉米植物有性雜交；收集產(chǎn)生的種子；使種子生長以產(chǎn)生后代植物；用草銨膦或麥草畏、或草銨膦和麥草畏除草劑處理后代植物；以及選擇耐受草銨膦和麥草畏除草劑的后代植物。本發(fā)明還提供了一種產(chǎn)生耐受草銨膦和麥草畏除草劑的轉(zhuǎn)基因玉米植物的方法，通過使包含玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物自交；收集產(chǎn)生的種子；使種子生長以產(chǎn)生后代植物；用草銨膦或麥草畏、或麥草畏和草銨膦除草劑處理后代植物；以及選擇耐受草銨膦和麥草畏除草劑的后代植物。附圖簡述圖1：說明了包含玉米事件mon87419的玉米植物的基因組中的轉(zhuǎn)基因插入物的組織。水平線對應(yīng)于seqidno:1、seqidno:2、seqidno:3、seqidno:4、seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7、seqidno:8、seqidno:9、seqidno:10的相對位置；粗箭頭標記的sq26644和sq26645表示用于鑒定含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的一對引物的大致位置；編號為14至22的短粗線表示dna插入物(seqidno:9)內(nèi)的獨特重組構(gòu)建體序列的相對位置并且數(shù)字分別是指每個的對應(yīng)seqidno；細的水平箭頭表示玉米mon87419事件的異源轉(zhuǎn)基因插入dna的兩個獨立的表達盒的相對組織并且方框指示兩個表達盒的獨立的元件；引導(dǎo)詞“p”代表啟動子元件，引導(dǎo)詞‘l’代表前導(dǎo)子元件，引導(dǎo)詞“i”代表內(nèi)含子，引導(dǎo)詞“ts”代表葉綠體轉(zhuǎn)運肽，引導(dǎo)詞“t”代表3’轉(zhuǎn)錄終止和聚腺苷酸化元件(3’utr)，pat代表草銨膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(pat)蛋白的編碼區(qū)，且dmo代表麥草畏單加氧酶(dmo)蛋白的編碼區(qū)。序列簡述seqidno:1是代表玉米基因組dna與轉(zhuǎn)基因插入物的5’連接的30個核苷酸的dna序列。seqidno:1對應(yīng)于seqidno:10的核苷酸位置1232至1261。seqidno:2是代表玉米基因組dna與轉(zhuǎn)基因插入物的3’連接的30個核苷酸的dna序列。seqidno:2對應(yīng)于seqidno:10的核苷酸位置7994至8023。seqidno:3是代表玉米基因組dna與轉(zhuǎn)基因插入物的5’連接的60個核苷酸的dna序列。seqidno:3對應(yīng)于seqidno:10的核苷酸位置1217至1276。seqidno:4是代表玉米基因組dna與轉(zhuǎn)基因插入物的3’連接的60個核苷酸的dna序列。seqidno:4對應(yīng)于seqidno:10的核苷酸位置7979至8038。seqidno:5是代表玉米基因組dna與轉(zhuǎn)基因插入物的5’連接的100個核苷酸的dna序列。seqidno:5對應(yīng)于seqidno:10的核苷酸位置1197至1296。seqidno:6是代表玉米基因組dna與轉(zhuǎn)基因插入物的3’連接的100個核苷酸的dna序列。seqidno:6對應(yīng)于seqidno:10的核苷酸位置7959至8058。seqidno:7是代表5’側(cè)翼玉米基因組dna的1246個核苷酸和轉(zhuǎn)基因插入物的5’端的525個核苷酸的1771個核苷酸的dna序列。seqidno:8是代表轉(zhuǎn)基因插入物的3’端的516個核苷酸和3’側(cè)翼玉米基因組dna的1251個核苷酸的1767個核苷酸的dna序列。seqidno:9是對應(yīng)于玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因插入物的6762個核苷酸的dna序列。seqidno:10是對應(yīng)于玉米mon87419事件的9259個核苷酸的dna序列；該序列含有從位置1到1246的5’側(cè)翼基因組dna序列、從位置1247到8008的轉(zhuǎn)基因dna插入物以及從位置8009到9259的3’側(cè)翼基因組dna序列。seqidno:11是對應(yīng)于被稱為sq26644并用于鑒定樣品中的玉米mon87419事件dna的引物的33個核苷酸的dna序列；其對應(yīng)于seqidno:10的位置7966至7998。seqidno:12是對應(yīng)于被稱為sq26645并用于鑒定樣品中的玉米mon87419事件dna的引物的24個核苷酸的dna序列；其對應(yīng)于seqidno:10的位置8022至8045。seqidno:13是對應(yīng)于被稱為pb11207并用于鑒定樣品中的玉米mon87419事件dna的探針的19個核苷酸的dna序列；其對應(yīng)于seqidno:10的位置8002至8020。seqidno:14-22是對應(yīng)于玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因插入物內(nèi)的獨特序列的dna序列。發(fā)明詳述提供以下定義和方法以更好地定義本發(fā)明并指導(dǎo)本領(lǐng)域一般技術(shù)人員實施本發(fā)明。除非另有說明，否則術(shù)語可以根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域的一般技術(shù)人員的常規(guī)用法來理解?，F(xiàn)代植物轉(zhuǎn)化技術(shù)被用來產(chǎn)生基因改造的植物。術(shù)語‘轉(zhuǎn)基因’也可以用來指基因改造的植物。在產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植物的過程中，將外源dna隨機插入植物細胞的基因組中。在轉(zhuǎn)化程序期間，許多個別細胞被轉(zhuǎn)化。由于隨機整合，單獨和獨特的dna重組事件將在每個單獨的轉(zhuǎn)化植物細胞的基因組內(nèi)發(fā)生。完整的轉(zhuǎn)基因植物然后從單個轉(zhuǎn)基因細胞產(chǎn)生，這必然導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因植物的每一個細胞含有獨特插入的dna作為其基因組的穩(wěn)定部分。含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因耐受除草劑的玉米包含單一插入玉米種質(zhì)的染色體/基因組中的轉(zhuǎn)基因dna。玉米mon87419事件通過以下步驟產(chǎn)生：(i)用包括目標轉(zhuǎn)基因的核酸構(gòu)建體轉(zhuǎn)化數(shù)千個玉米植物細胞；(ii)使各自含有獨特轉(zhuǎn)基因事件的玉米植物的群體再生；以及(iii)進行多年的試驗、篩選和選擇以選擇具有理想的農(nóng)藝性狀的事件，即玉米mon87419事件。玉米mon87419事件的特征在于轉(zhuǎn)基因的獨特dna序列插入玉米植物的基因組中的特定位置。將轉(zhuǎn)基因dna插入玉米植物的基因組中的行為是由植物轉(zhuǎn)化行為實現(xiàn)并且導(dǎo)致產(chǎn)生新的轉(zhuǎn)基因型基因組分子序列，其被稱為“事件”。這個序列對事件是獨特和特異的，并且當與原始玉米基因組序列或其它轉(zhuǎn)基因玉米事件相比時可以容易地鑒定。玉米mon87419事件的分子分析鑒定插入的dna(seqidno:9)的基因組插入位點和緊鄰插入的dna的任一側(cè)的側(cè)翼玉米基因組dna序列(seqidno:7和seqidno:8)。插入的dna相對于周圍的玉米植物基因組dna的這種排列因此對于包含玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因耐除草劑玉米是特異和獨特的。這個新的基因組分子序列(seqidno:10)也是包含玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因耐除草劑玉米植物的染色體的整體部分，因此在植物中是靜態(tài)的并且可以傳遞至植物的后代。本發(fā)明還提供了包含玉米mon87419事件的原始轉(zhuǎn)化株的后代。這樣的后代可以通過包含玉米mon87419事件的玉米植物的自交或通過包含玉米mon87419事件的玉米植物與含有或不含玉米mon87419事件的另一種植物間的有性雜交而產(chǎn)生。該另一種植物可以是包含相同或不同事件的轉(zhuǎn)基因植物；或非轉(zhuǎn)基因植物，諸如來自不同品種的植物。即使在重復(fù)回交至輪回親本后，來自轉(zhuǎn)化親本的玉米mon87419事件仍存在于雜交后代的相同基因組位置。如本文所使用，術(shù)語“玉米(maize)”意指玉米(zeamays)(也稱為玉米(corn))，并且包括可以與玉米繁育的所有植物品種。本發(fā)明提供了含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因耐受除草劑的玉米植物，其耐受麥草畏(3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸)除草劑和草銨膦(2-氨基-4-(羥甲基氧膦基)丁酸)除草劑。麥草畏是一種可用于控制闊葉雜草的合成植物生長素除草劑。草銨膦是一種用于控制廣泛的一年生和多年生雜草和闊葉雜草的有機磷除草劑。玉米mon87419事件含有來自嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌(stenotrophomonasmaltophilia)的脫甲基酶(dmo)基因，其表達麥草畏單加氧酶(dmo)蛋白以賦予對麥草畏除草劑的耐受性；以及來自綠產(chǎn)色鏈霉菌(streptomycesviridochromogenes)的雙丙氨膦抗性(pat)基因，其表達草銨膦n-乙酰轉(zhuǎn)移酶(pat)蛋白以賦予對草銨膦除草劑的耐受性。如本文所使用，術(shù)語“重組”是指通常不會在自然界中發(fā)現(xiàn)并且通過人為干預(yù)產(chǎn)生的非天然dna、蛋白質(zhì)或生物體。如本文所使用，“重組dna分子”是包含不會自然地一起存在并且是人為干預(yù)的結(jié)果的dna分子組合的dna分子，例如由至少兩種彼此異源的dna分子的組合組成的dna分子，諸如包含轉(zhuǎn)基因和緊鄰該轉(zhuǎn)基因的植物基因組dna的dna分子。重組dna分子的實例是包含選自seqidno:1-10的至少一個序列的dna分子。如本文所使用，“重組植物”是在通常不會存在于自然界中，是人為干預(yù)的結(jié)果并且含有轉(zhuǎn)基因dna分子的植物。由于這樣的基因組改變，重組植物是一些新鮮的事物并且與相關(guān)的野生型植物明顯不同。重組植物的實例是含有玉米mon87419事件的玉米植物。如本文所使用，術(shù)語“轉(zhuǎn)基因”是指由于人為干預(yù)如通過植物轉(zhuǎn)化方法而人工并入生物體基因組中的dna分子。轉(zhuǎn)基因?qū)τ谏矬w可以是異源的。如本文所使用，術(shù)語“轉(zhuǎn)基因插入物”是指通過植物轉(zhuǎn)化技術(shù)插入到玉米基因組中以產(chǎn)生玉米事件mon87419的轉(zhuǎn)基因。該轉(zhuǎn)基因插入物的序列作為seqidno:9提供。術(shù)語“轉(zhuǎn)基因”是指包含轉(zhuǎn)基因，例如“轉(zhuǎn)基因植物”是指包含轉(zhuǎn)基因的植物。如本文所使用，術(shù)語“異源的”是指第一分子在自然界中通常不與第二分子或生物體結(jié)合。例如，dna分子可以源自第一物種并插入第二物種的基因組中。因此，該dna分子對于基因組和生物體將是異源的。如本文所使用，術(shù)語“嵌合的”是指通過將第一dna分子與第二dna分子融合而產(chǎn)生的單一dna分子，其中無論第一dna分子還是第二dna分子通常都不會以這種彼此融合的構(gòu)造被發(fā)現(xiàn)。因此，嵌合dna分子是一種在自然中通常不存在的新的dna分子。嵌合dna分子的實例是包含選自seqidno:1-10的至少一個序列的dna分子。本發(fā)明提供了dna分子及其相應(yīng)的dna序列。如本文所使用，術(shù)語“dna”和“dna分子”是指脫氧核糖核酸(dna)分子。dna分子可以是基因組或合成來源的，并且按照慣例是從5’(上游)端至3’(下游)端。如本文所使用，術(shù)語“dna序列”是指dna分子的核苷酸序列。所用的命名法是美國聯(lián)邦法規(guī)(unitedstatescodeoffederalregulations)§1.822的第37條所要求的命名法，并且記述于wipo標準st.25(1998)的附錄2的表1和表3中。按照慣例，僅參照兩條互補dna序列鏈中的一條鏈公開了本發(fā)明的dna序列及其片段。通過暗示和有意，本文所提供的序列的互補序列(即互補鏈的序列，在本領(lǐng)域中也被稱為反向互補序列)也在本發(fā)明的范圍內(nèi)并且明確地旨在落在要求保護的標的物的范圍內(nèi)。因此，如本文所使用，提及seqidno:1-10和seqidno:14-22及其片段包括并且是指互補鏈的序列及其片段。如本文所使用，術(shù)語“片段”是指整體中的較小片段。例如，seqidno:10的片段將包括seqidno:10的完整序列的至少約20個連續(xù)核苷酸、至少約25個連續(xù)核苷酸、至少約30個連續(xù)核苷酸、至少約35個連續(xù)核苷酸、至少約40個連續(xù)核苷酸、至少約45個連續(xù)核苷酸、至少約50個連續(xù)核苷酸、至少約60個連續(xù)核苷酸、至少約70個連續(xù)核苷酸、至少約80個連續(xù)核苷酸、至少約90個連續(xù)核苷酸或至少約100個連續(xù)核苷酸的序列。對應(yīng)于轉(zhuǎn)基因插入物的完整dna序列和位于轉(zhuǎn)基因插入物的任何一端的側(cè)翼的玉米基因組dna的大部分區(qū)段的dna序列是作為seqidno:10提供。通過磷酸二酯鍵與轉(zhuǎn)基因插入物的5’端物理連接并因此位于其側(cè)翼的玉米基因組dna的dna序列是作為seqidno:1、seqidno:3、seqidno:5和seqidno:7提供。通過磷酸二酯鍵與轉(zhuǎn)基因插入物的3’端物理連接并因此位于其側(cè)翼的玉米基因組dna的dna序列是作為seqidno:2、seqidno:4、seqidno:6和seqidno:8提供。含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米包含被稱為連接的兩個區(qū)域?！斑B接”是轉(zhuǎn)基因插入物的一端已與基因組dna連接的地方。連接橫跨或延伸跨越轉(zhuǎn)基因插入物和相鄰的側(cè)翼基因組dna的一部分，且因此是作為一個連續(xù)分子的這兩個的連接點。一個連接在轉(zhuǎn)基因插入物的5’端，且一個在轉(zhuǎn)基因插入物的3’端，在本文中分別被稱為5’連接和3’連接?！斑B接序列”是指橫跨事件的5’或3’連接的任何長度的dna序列。本領(lǐng)域技術(shù)人員利用seqidno:10容易了解玉米mon87419事件的連接序列。玉米mon87419事件的連接序列的實例作為seqidno:1-8提供。圖1說明了從5’至3’排列的seqidno:1-10的物理排列。因此，本發(fā)明提供了含有seqidno:1-8中所列出的dna序列中的至少一個的dna分子。玉米mon87419事件的連接序列可以作為含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物、種子或細胞的基因組的部分而存在。在源自轉(zhuǎn)基因玉米植物、植物部分、種子或細胞的樣品中鑒定出seqidno:1-8中的任何一個或多個表明dna是從含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米獲得并且診斷出玉米mon87419事件的存在。玉米mon87419事件含有對轉(zhuǎn)基因插入物是獨特的序列，明確來說是seqidno:14-22。這些序列對事件的轉(zhuǎn)基因插入物內(nèi)的各種啟動子、內(nèi)含子、葉綠體靶向肽(ctp)、3’終止信號、pat和dmo基因的特定嵌合配置是獨特的。圖1說明了這些獨特的轉(zhuǎn)基因插入序列中的每一個相對于seqidno:9的相對位置。提供了示例性dna分子，所述dna分子可以用作引物或探針用于診斷樣品中源自玉米mon87419事件的dna的樣品的存在。此類引物或探針對靶標核酸序列是特異性的，且因此可用于通過本文所述的方法鑒定玉米mon87419事件?！耙铩笔潜辉O(shè)計用于涉及擴增反應(yīng)的退火或雜交方法中的dna分子。擴增反應(yīng)是擴增模板dna以產(chǎn)生擴增子的體外反應(yīng)。如本文所使用，“擴增子”是已使用擴增技術(shù)合成的dna分子。本發(fā)明的擴增子具有包含seqidno:1-10中的一個或多個或其片段的dna序列。在擴增反應(yīng)(如聚合酶鏈式反應(yīng)(pcr))中可以使用一對引物和模板dna(如玉米基因組dna的樣品)以產(chǎn)生擴增子，其中所產(chǎn)生的擴增子將具有這樣的dna序列，其對應(yīng)于位于引物與模板雜交處的兩個位點之間的模板dna的序列。引物通常被設(shè)計來與互補的靶標dna鏈雜交以在引物和靶標dna鏈之間形成雜交鏈。引物的存在是聚合酶使用靶標dna鏈作為模板開始引物延伸的識別點。引物對是指使用結(jié)合雙鏈核苷酸片段的相反鏈的兩個引物，其目的在于擴增它們之間的核苷酸片段。引物序列的實例作為seqidno:11和seqidno:12提供。作為seqidno:11和seqidno:12提供的引物對可用作第一dna分子和第二dna分子，其中第一dna分子是seqidno:9的片段且第二dna分子是seqidno:10的玉米基因組dna序列的片段，并且各自具有足夠長度以用作dna引物，當與含有玉米mon87419事件的dna在擴增反應(yīng)中一起使用時，所述dna引物產(chǎn)生診斷樣品中的玉米mon87419事件的擴增子。玉米mon87419事件的玉米基因組dna序列作為seqidno:10的位置1-1246和位置8009-9259提供?！疤结槨笔桥c靶標核酸的鏈互補并且可用于雜交檢測方法中的核酸分子。本發(fā)明的探針不僅包括脫氧核糖核酸或核糖核酸，而且還包括特異性地結(jié)合靶標dna序列的聚酰胺和其它探針材料，并且檢測這種結(jié)合可用于檢測靶標dna序列的存在或不存在。“探針”可以附接至常規(guī)的可檢測標記或報道分子，諸如放射性同位素、配體、化學(xué)發(fā)光劑或酶。可用作檢測玉米mon87419事件的探針的示例性dna序列作為seqidno:13提供。設(shè)計和使用引物和探針的方法是本領(lǐng)域中熟知的，且包含seqidno:1-10的片段并可用作檢測玉米mon87419事件的引物和探針的dna分子可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地設(shè)計出。因此，本文所提供的dna分子和對應(yīng)的dna序列可用于鑒定轉(zhuǎn)基因玉米植物、細胞、種子或部分中的玉米mon87419事件；選擇包含玉米mon87419事件的玉米品種或雜種；以及檢測樣品中玉米mon87419事件的存在或不存在。如本文所使用，術(shù)語“分離的”是指分離一種分子與在天然或自然狀態(tài)下通常與其結(jié)合的其它分子。因此，術(shù)語“分離的”可以指這樣的dna分子，其已經(jīng)與在原始或天然狀態(tài)下與其結(jié)合的其它dna分子分離。這樣的dna分子可以以重組狀態(tài)存在，諸如重組dna分子。因此，由于例如重組技術(shù)而與通常不與其結(jié)合的調(diào)控或編碼序列融合的dna分子被認為是分離的，即使當所述dna分子作為轉(zhuǎn)基因整合到細胞的染色體中或與其它dna分子一起存在時。本發(fā)明提供了含有玉米mon87419事件的玉米植物、后代、種子、植物細胞和植物部分以及使用這些所產(chǎn)生的商業(yè)產(chǎn)品。包含mon87419事件的轉(zhuǎn)基因耐除草劑玉米種子的代表性樣品已經(jīng)根據(jù)布達佩斯條約保藏于美國模式培養(yǎng)物保藏中心atcc資源庫已將專利保藏號pta-120860分配給含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因耐除草劑玉米植物的種子。本發(fā)明的植物、后代、種子、植物細胞、植物部分和商業(yè)產(chǎn)品含有可檢測量的dna，其具有作為seqidno:1-10和seqidno:14-22提供的序列中的至少一個。本發(fā)明的植物、后代、種子、植物細胞和植物部分還可以含有一種或多種另外的轉(zhuǎn)基因性狀，特別是那些通過使含有玉米mon87419事件的玉米植物與含有另外的轉(zhuǎn)基因性狀的另一種植物雜交所引入的性狀。此類性狀包括但不限于：增強的昆蟲抗性、增加的用水效率、增加的產(chǎn)量表現(xiàn)、增強的抗旱性、增強的種子質(zhì)量、改善的營養(yǎng)質(zhì)量、雜種生產(chǎn)和/或增強的除草劑耐受性，其中所述性狀是相對于缺乏這種轉(zhuǎn)基因性狀的玉米植物而測量。本發(fā)明的植物可以用于產(chǎn)生含有玉米mon87419事件的后代。如本文所使用，“后代”包括包含遺傳自祖先植物的玉米mon87419事件的任何植物、種子和植物細胞，它們由包含具有選自seqidno:1-10的至少一個序列的dna分子的植物指示。植物、后代和種子對于玉米mon87419事件而言可以是純合的或雜合的。后代植物可以由含有玉米mon87419事件的玉米植物所產(chǎn)生的種子或用含有玉米mon87419事件的花粉受精的玉米植物所產(chǎn)生的種子生長而成。如本文所使用，本發(fā)明的“植物部分”是源自含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物的任何部分。植物部分包括但不限于：花粉、胚珠、莢、花、根、莖、纖維和葉。植物部分可以是有活力的或無活力的。本發(fā)明提供了從含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米生產(chǎn)出的商業(yè)產(chǎn)品。本發(fā)明的商業(yè)產(chǎn)品含有可檢測量的dna，其包含選自由seqidno:1-10組成的組的dna序列。如本文所使用，“商業(yè)產(chǎn)品”是指由源自含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物、玉米種子、玉米植物細胞或玉米植物部分的材料組成的任何組合物或產(chǎn)品。商業(yè)產(chǎn)品包括但不限于加工的種子、谷粒、植物部分和膳食。含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米可用于生產(chǎn)通常是從玉米獲得的任何商業(yè)產(chǎn)品。本發(fā)明的商業(yè)產(chǎn)品將含有可檢測量的對應(yīng)于玉米mon87419事件的dna。檢測樣品中的一個或多個該dna可以用于確定商業(yè)產(chǎn)品的含量或來源?？梢允褂胐na分子的任何標準檢測方法，包括本文公開的檢測方法。本發(fā)明提供了與含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米一起使用草銨膦或麥草畏、或草銨膦和麥草畏除草劑來控制雜草的方法。提供了一種控制區(qū)域內(nèi)(如田間)的雜草的方法，其由以下組成：在區(qū)域內(nèi)種植含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物以及對所述區(qū)域施用除草有效劑量的草銨膦或麥草畏、或草銨膦和麥草畏除草劑以控制所述區(qū)域內(nèi)的雜草而不傷害含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物。這種草銨膦或麥草畏、或草銨膦和麥草畏除草劑的施用可以在萌芽前(在種植含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米種子后以及含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物萌芽前的任何時間)或萌芽后(在含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物萌芽后的任何時間)進行。在區(qū)域內(nèi)用來控制雜草的除草有效劑量的草銨膦應(yīng)該由在整個生長季節(jié)內(nèi)為約0.1磅酸當量/英畝(ae/ac)至多達約16磅ae/ac草銨膦的范圍組成。在區(qū)域內(nèi)用來控制雜草的除草有效劑量的麥草畏應(yīng)該由在整個生長季節(jié)內(nèi)為約0.1磅ae/ac至多達約16磅ae/ac麥草畏的范圍組成。在整個生長季節(jié)內(nèi)可以使用草銨膦或麥草畏、或草銨膦和麥草畏除草劑的多次施用，例如兩次施用(諸如種植前施用和萌芽后施用或萌芽前施用和萌芽后施用)或三次施用(諸如種植前施用、萌芽前施用和萌芽后施用)。如本文中所使用，“活性成分”或“ai”是除草劑制劑的負責(zé)除草活性的組分，通常以磅/加侖計量或以磅/英畝施用。對于酸除草劑(例如，具有羧基作為其結(jié)構(gòu)的一部分的分子)而言，酸性基團在配制過程中經(jīng)常轉(zhuǎn)化為(可以被所需離子取代以形成)鹽或(與醇反應(yīng)以形成)酯。這可能不僅會改變特定除草劑分子的化學(xué)特性，而且還會改變質(zhì)量。然而，相應(yīng)的酸是制劑的除草活性部分并且不同的活性成分之間的除草活性的等價性可以使用酸當量作為標準計量單元來計算。術(shù)語“酸當量”或“ae”意指制劑中的活性成分的理論上可以被轉(zhuǎn)化回相應(yīng)酸的部分。除草劑施用率可以表示為“酸當量/英畝”(簡寫為“ae/ac”)或“活性成分/英畝”(簡寫為“ai/ac”)。提供了用于產(chǎn)生含有玉米mon87419事件的耐除草劑轉(zhuǎn)基因玉米植物的方法。由這些方法所產(chǎn)生的后代可以是變種或雜種植物；可以由含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物所產(chǎn)生的種子或由用來自含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物的花粉受精的玉米植物所產(chǎn)生的種子生長而成；并且對于玉米mon87419事件而言可以是純合或雜合的。植物可以是自花授粉的(又稱為“自交”)或異花授粉的(又稱為“雜交”)。含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物可以自花授粉以產(chǎn)生對于玉米mon87419事件而言純合的真實育種品系的植物。自交產(chǎn)生被稱為“近交”的后代并且被用于產(chǎn)生遺傳上一致的近交系?；蛘撸杏衩譵on87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物可以異型雜交(與另一種轉(zhuǎn)基因或非轉(zhuǎn)基因的植物繁育)而產(chǎn)生變種或雜種種子。由本發(fā)明的方法生成的種子和后代植物將含有玉米mon87419事件并且隨后可以用草銨膦或麥草畏、或草銨膦和麥草畏除草劑進行處理。用草銨膦或麥草畏、或草銨膦和麥草畏除草劑進行處理可以用于選擇耐受的后代?；蛘?，可以使用診斷方法分析這些后代植物以選擇含有玉米mon87419事件的植物或種子。本發(fā)明的植物、后代、種子、植物細胞和植物部分還可以含有一種或多種另外的玉米轉(zhuǎn)基因性狀，特別是那些通過使含有玉米mon87419事件的玉米植物與含有另外的轉(zhuǎn)基因性狀的另一種玉米植物雜交所引入的性狀。此類玉米轉(zhuǎn)基因性狀包括但不限于：增強的昆蟲抗性、增加的用水效率、增加的產(chǎn)量表現(xiàn)、增強的抗旱性、增強的種子質(zhì)量、改善的營養(yǎng)質(zhì)量、雜種生產(chǎn)和除草劑耐受性，其中所述性狀是相對于缺乏這種轉(zhuǎn)基因性狀的玉米植物而測量。此類玉米轉(zhuǎn)基因性狀是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的；例如，一系列此類性狀由美國農(nóng)業(yè)部(usda)動植物衛(wèi)生檢查處(aphis)提供并且可以在其網(wǎng)站http://www.aphis.usda.gov.上找到。因此，兩種轉(zhuǎn)基因植物可以雜交產(chǎn)生含有兩種或更多種獨立分離的轉(zhuǎn)基因性狀的后代。還預(yù)期了與親本植物回交以及與非轉(zhuǎn)基因植物異型雜交，以及無性繁殖。常用于不同性狀和作物的育種方法的描述可以見于若干參考文獻中的一個，例如，fehr,breedingmethodsforcultivardevelopment,wilcoxj.編輯，americansocietyofagronomy,madisonwi(1987)。本發(fā)明的植物、種子、細胞、植物部分和商業(yè)產(chǎn)品可以用于檢測指示玉米mon87419事件的存在的dna和蛋白質(zhì)分子。這種檢測將會利用本文所提供的dna序列和由作為seqidno:9提供的轉(zhuǎn)基因插入物編碼的dmo和pat蛋白序列來完成。檢測玉米mon87419事件的存在可以通過使用本領(lǐng)域中已知的方法諸如核酸的熱擴增、核酸雜交技術(shù)(如northern印跡法和southern分析)、蛋白質(zhì)檢測技術(shù)(如western印跡法、免疫沉淀法和酶聯(lián)免疫吸附分析(elisa)技術(shù))或通過使用本文所提供的檢測方法和/或檢測試劑盒來完成。一種方法包括使dna樣品與能夠從含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的dna產(chǎn)生擴增子的引物對接觸，進行擴增反應(yīng)并由此產(chǎn)生包含作為seqidno:1-10和seqidno:14-22提供的dna序列中的至少一個的dna擴增子，且然后檢測擴增子分子的存在或不存在以及任選地在擴增子的序列中確認包含作為seqidno:1-10和seqidno:14-22提供的序列中的至少一個的序列。這種擴增子的存在診斷出特異于含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米且因此特異于源自含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的樣品中的生物材料的dna的存在。另一種方法包括使dna樣品與dna探針接觸，使探針和dna樣品經(jīng)受嚴格的雜交條件，且然后檢測探針和靶標dna樣品間的雜交。雜交的檢測可診斷dna樣品中特異于含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的dna的存在。提供了用于玉米mon87419事件的dna檢測試劑盒。還可以使用本文所公開的組合物和方法以及dna檢測領(lǐng)域中熟知的方法開發(fā)此類試劑盒的變型。dna檢測試劑盒可以應(yīng)用于與含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米植物繁育的方法。此類試劑盒含有包含seqidno:1-10的片段的dna引物或探針。這種試劑盒的一個實例包含seqidno:10的足夠長度的連續(xù)核苷酸的至少一種dna分子以用作dna探針，其可用于檢測樣品中源自含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因耐受除草劑的玉米植物的dna的樣品的存在和/或不存在。足以用作dna探針的dna分子被作為seqidno:13提供，其可用于確定、檢測或診斷樣品中含有玉米mon87419事件dna的轉(zhuǎn)基因耐除草劑玉米的存在和/或不存在。其它探針可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地設(shè)計，并且應(yīng)該包含seqidno:10中的至少約十五個核苷酸且對于含有玉米mon87419事件dna的轉(zhuǎn)基因耐除草劑玉米足夠獨特，以便鑒定源自玉米mon87419事件的dna。另一種類型的試劑盒包含引物對，其可用于產(chǎn)生用于檢測樣品中玉米mon87419事件的存在或不存在的擴增子。這樣的試劑盒將采用以下方法，其包括使靶標dna樣品與引物對接觸，然后進行足以產(chǎn)生包含具有至少一個選自seqidno:1-10的序列的dna分子的擴增子的核酸擴增反應(yīng)，且然后檢測所述擴增子的存在或不存在。這樣的方法還可以包括對擴增子或其片段進行測序。其它引物對可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地設(shè)計，并且應(yīng)該包含seqidno:10中的至少二十個核苷酸且對于含有玉米mon87419事件dna的轉(zhuǎn)基因耐除草劑玉米足夠獨特，以便檢測玉米mon87419事件。本發(fā)明的試劑盒還可以任選地包含用于進行本文所述的檢測或診斷反應(yīng)的試劑或使用所述試劑盒和其內(nèi)容物的說明書。如本文中所使用，術(shù)語“包含”意指“包括但不限于”。保藏信息包含玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米種子的代表性樣品已經(jīng)根據(jù)布達佩斯條約保藏于美國模式培養(yǎng)物保藏中心(atcc)，其地址為10801universityboulevard，manassas，virginiausa，郵編20110。包含玉米mon87419事件的種子的atcc專利保藏命名(登錄號)是pta-120860，且保藏日期是2014年1月17日。所述保藏物將在保藏機構(gòu)保存30年或最后一次請求后的5年或?qū)＠挠行?，無論哪個時間更長。實施例包括下列實施例以更充分地描述本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當理解，許多修改可以在公開的具體實施例中進行并且仍然獲得類似的結(jié)果?；瘜W(xué)上和生理上相關(guān)的某些試劑可以代替本文所描述的試劑，同時實現(xiàn)相同或相似的結(jié)果。對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說顯而易見的所有此類替代和修改被認為是在本發(fā)明的范圍內(nèi)。實施例1：mon87419事件產(chǎn)生和選擇本實施例描述了含有事件mon87419(可以提供耐受麥草畏和草銨膦除草劑的事件)的轉(zhuǎn)基因玉米的產(chǎn)生、分析和選擇。匯總了在多年內(nèi)經(jīng)過玉米mon87419事件的最終選擇所需的嚴格的分子、表型和田間試驗的數(shù)萬個單個植物的產(chǎn)生和分析。設(shè)計了含有多種不同的表達盒的轉(zhuǎn)化載體并進行測試以確認其用于表達dmo和pat基因的效用。使用該數(shù)據(jù)，選擇表達元件的組合并且構(gòu)建八個不同的轉(zhuǎn)化載體并轉(zhuǎn)化至玉米中。這些載體測試啟動子和終止子與pat基因和dmo基因的兩個編碼區(qū)的各種組合(表1)。分析所得植物的蛋白質(zhì)表達并且選擇用于商業(yè)性玉米轉(zhuǎn)化的兩個載體(在表1中示出為a和b)。表1.轉(zhuǎn)化載體的盒配置。使用所選的兩個載體(a和b)產(chǎn)生超過13,000個獨特的轉(zhuǎn)化玉米植物。在植物中，所引入的基因的表達水平在單個事件之間經(jīng)常有廣泛的變化，并且基因表達可以直接與含有事件的植物的表型正相關(guān)或負相關(guān)。已知外源基因在植物中的表達尤其受其染色體位置的影響。出于這個原因，有必要通過多個年份和地點篩選大量含有隨機插入事件的個體植物以鑒別最佳事件。轉(zhuǎn)基因玉米mon87419事件是通過lh244玉米未成熟胚的農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化產(chǎn)生。用于轉(zhuǎn)化玉米的方法是本領(lǐng)域中已知的。使玉米細胞轉(zhuǎn)化并再生為完整的玉米植物。選擇具有正常表型特征的有根植物。然后將數(shù)千個單獨的獨立事件轉(zhuǎn)移至土壤中用于生長和進一步評估。表2.事件選擇過程在整個事件選擇過程中，進行分子分析以及田間試驗(經(jīng)常同時進行)以評估事件的表型、農(nóng)藝學(xué)和藥效(表2)。首先通過pcr分析13,000個單獨和獨特的轉(zhuǎn)化玉米r0植物以選擇具有轉(zhuǎn)基因插入物的單拷貝(第一輪單拷貝)的事件。這導(dǎo)致2,998個事件的推進。下一選擇是在溫室中進行的r0除草劑噴灑耐受性。通過使用在v1/v2生長階段噴灑的草銨膦(0.9lbai/ac)和麥草畏(2.0lbae/ac)的桶混劑來測試植物對草銨膦(280除草劑)和麥草畏(除草劑)的耐受性。表現(xiàn)出>15％損傷的植物被丟棄，并且選擇1,440個事件用于進一步分析。進行初步的詳細分子分析，并且包括序列鑒定和確認，以及拷貝數(shù)和骨架缺乏的第二次檢查。該分析導(dǎo)致僅含有轉(zhuǎn)基因插入物的單拷貝的184個事件被選擇用于推進。對從r0事件提取的dna進行southern分析以進一步確認轉(zhuǎn)基因插入物的拷貝數(shù)并確認不存在轉(zhuǎn)化骨架。在此基礎(chǔ)上，選擇112個事件來推進至r1作進一步分析。使r0植物自花授粉并收集種子用于r1試驗。在進行所有田間試驗的同時，另外的分子分析正在進行中。進行northern分析以檢測和測量pat和dmo基因的mrna轉(zhuǎn)錄物。進行從含有選擇事件的轉(zhuǎn)基因植物純化得到的pat和dmo蛋白質(zhì)的n端蛋白測序以確認重組蛋白質(zhì)序列。對轉(zhuǎn)基因植物的樣品進行western分析以檢測pat和dmo蛋白質(zhì)。進行整個轉(zhuǎn)基因和插入物的5’端和3’端的測序，且測序結(jié)果隨后用于開發(fā)檢測個別事件的方法。對r1植物進行深入的southern分析以確認拷貝數(shù)和骨架缺乏。對于r1田間試驗的早期篩選，基于種子返回和苗圃大小的考慮從由r0篩選選出的112事件中選擇82個事件。r1植物分離，因此對于事件而言為空、半合子或純合的。在具有高施用率除草劑的田間藥效篩選中評價r1植物中的82個事件。在使用草銨膦(ignite280)和麥草畏(clarity)的各種組合(高達20x草銨膦和高達16x麥草畏標記的田間施用率)并在從v1/v2至v8/v10的不同生長階段的施用時間下進行處理后評估植物損傷。在施用除草劑后10至14天進行損傷評級。標準損傷評級包括對萎黃百分比、畸形和繁殖的評分。含有相同事件的多個植物的總平均值被用來選擇用于推進的事件。以2x比率施用除草劑通常產(chǎn)生小于10％的損傷，且以16x和20x比率施用除草劑產(chǎn)生超過10％的損傷評級。除了藥效試驗以外，收集每個植物的農(nóng)藝評分并與其所含有的事件進行關(guān)聯(lián)。被評價的農(nóng)藝評分標準包括株高、穗高、水分百分比、試驗重量、至50％授粉的天數(shù)和至50％長須的天數(shù)。基于對從r1田間試驗和分子分析收集的數(shù)據(jù)進行的分析，44個事件被選擇用于推進至r2作進一步分析。使r1植物自花授粉并收集種子用于r2試驗。在r2田間試驗早期篩選中，r2和f1事件(來自r1異型雜交)在三個地點(兩個州和波多黎各)的田間藥效篩選中進行評估。在用草銨膦和麥草畏施用率以及施用時間安排的各種組合處理之后評估植物損傷。r2植物對于所述事件是純合的，并且除草劑施用后的除草劑耐受失敗率低，這確認了r1結(jié)果。收集農(nóng)藝數(shù)據(jù)并如在r1田間試驗中一樣進行評分。另外的分子分析(包括基因表達分析)也被用來選擇含有最佳事件的植物?；趯膔2和f1田間試驗和分子分析收集的數(shù)據(jù)進行的分析，42個事件被選擇用于推進至r3作進一步分析。使r2植物自花授粉并收集種子用于r3試驗。對于推進的田間試驗，進行雜種和近交系藥效以及雜種和近交系農(nóng)藝田間試驗。農(nóng)藝田間試驗與藥效田間試驗在相同的季節(jié)中運行。所有的田間試驗采用完全隨機區(qū)組設(shè)計，并在多個地點進行。對于藥效和農(nóng)藝田間試驗二者而言，在整個田間試驗季節(jié)收集農(nóng)藝評分，并在季末測定產(chǎn)量(藥效產(chǎn)量或農(nóng)藝產(chǎn)量)。進行藥效田間試驗以評估除草劑施用后10至14天的作物損傷、作物損傷評級和產(chǎn)量。靶標作物損傷評級為針對事件推進的小于10％的評分。對于農(nóng)藝田間試驗，地塊保持沒有雜草并且在生長季節(jié)期間不施用草銨膦或麥草畏除草劑。雜種農(nóng)藝田間試驗包括使用用于進行轉(zhuǎn)基因雜種雜交但不含有轉(zhuǎn)基因事件的同一親本玉米系產(chǎn)生的可比較雜種(雜種對照)的對照。近交系對照是轉(zhuǎn)基因近交系相當?shù)慕幌?。使用多季?jié)、多地點田間試驗數(shù)據(jù)的集合進行薈萃分析。表3說明了針對含有事件中的任一個的植物的特定田間試驗類型進行重復(fù)觀察的重復(fù)數(shù)。對于兩個事件中每一個，針對雜種農(nóng)藝表現(xiàn)記錄了135個數(shù)據(jù)點，針對雜種藥效記錄了933個數(shù)據(jù)點，針對近交系農(nóng)藝性狀記錄了179個數(shù)據(jù)點，針對近交系藥效記錄了30個數(shù)據(jù)點，并且針對含有事件的玉米的除草劑施用率的基于事件的壓力測試記錄了16個數(shù)據(jù)點。表3.兩個最終事件的田間試驗重復(fù)描述每個事件的重復(fù)雜種農(nóng)藝性狀135個重復(fù)雜種藥效933個重復(fù)近交系農(nóng)藝性狀179個重復(fù)近交系藥效30個重復(fù)基于事件的壓力測試16個重復(fù)每個事件的總重復(fù)1293在南美州(sa)第1年反季節(jié)藥效田間試驗和農(nóng)藝田間試驗中評價各含有23個選定事件(來自r2田間試驗的42個事件的子集)之一的雜種植物。試驗以完全隨機區(qū)組設(shè)計在六個地點進行，具有4個處理，每個處理2次重復(fù)。在藥效田間試驗中，麥草畏制劑是4sl除草劑，且草銨膦制劑是1.67sl。除草劑處理由以下組成：(1)未處理的對照；(2)2lbae/英畝(ac)pre(其中pre被定義為在種植時或作物萌芽前)的麥草畏，在ve-v2中的每個下、隨后在v4下隨后在v8下施用1lbae/ac麥草畏；(3)在ve-v2下、隨后在v4下隨后在v8下施用0.8lbai/ac草銨膦；和(4)在ve-v2下、隨后在v4下隨后在v8下施用0.8lbai/ac草銨膦加施用1lbae/ac麥草畏。在施用除草劑后10至14天進行損傷評級。含有相同事件的多個植物的總平均值被用來選擇用于推進的事件。靶標作物損傷評級為小于10％的評分，并且觀察到的損傷評級低于1％。基于雜種損傷評分、農(nóng)藝評分、藥效產(chǎn)量、農(nóng)藝產(chǎn)量和另外的分子分析，17個事件被選擇用于推進。隨后在美國(us)第1年藥效田間試驗和農(nóng)藝田間試驗中進一步評價來自從南美洲第1年反季節(jié)田間試驗推進的17個事件的近交和雜種植物。這些試驗是在2012年進行，該年份在美國是嚴重干旱的一個季節(jié)。雜種藥效田間試驗以完全隨機區(qū)組設(shè)計在2個州的12個地點進行，具有6個處理，每個處理3次重復(fù)。含有轉(zhuǎn)基因事件的雜種植物從雜交中的父本產(chǎn)生草甘膦耐受性。在這些藥效田間試驗中，草甘膦制劑為roundup4.5sl，麥草畏制劑為clarity4sl，且草銨膦制劑為ignite2802.34sl。除草劑處理由以下組成：(1)未處理的對照；(2)在v4下隨后在v8下施用3lbae/ac草甘膦；(3)在v2下、隨后在v4下隨后在v8下施用0.8lbai/ac草銨膦；(4)在pre下施用2lbae/ac麥草畏，然后在v4下隨后在v8下再次施用；(5)在v2下、隨后在v4下隨后在v8下施用3lbae/ac草甘膦加1.5lbae/ac麥草畏；(6)在v2下施用2lbae/ac麥草畏，隨后在生長階段v4下施用0.8lbai/ac草銨膦加1lbae/ac麥草畏，隨后在生長階段v8下施用3lbae/ac草甘膦加1.5lbae/ac麥草畏。在施用除草劑后10至14天進行損傷評級。含有相同事件的多個植物的總平均值被用來選擇用于推進的事件。靶標作物損傷評級為小于10％的評分，并且觀察到的損傷評級低于1％?；陔s種損傷評分、農(nóng)藝評分、藥效產(chǎn)量、農(nóng)藝產(chǎn)量和另外的分子分析，11個事件被選擇用于推進。然后用含有這11個事件的植物進行南美洲(sa)第2年反季節(jié)田間試驗以評估雜種藥效和近交系農(nóng)藝產(chǎn)量。含有轉(zhuǎn)基因事件的雜種植物從雜交中的父本產(chǎn)生草甘膦耐受性?；旧先玑槍δ厦乐?sa)第1年反季節(jié)田間試驗所描述但使用下列除草劑處理進行雜種藥效田間試驗：(1)未處理的對照；(2)在v4下隨后在v8下施用3lbae/ac草甘膦；(3)在v4下隨后在v8下施用0.8lbai/ac草銨膦；(4)在pre下施用2lbae/ac麥草畏，然后在v4下隨后在v8下再次施用；(5)在v4下隨后在v8下施用3lbae/ac草甘膦加1.5lbae/ac麥草畏；(6)在v4下施用0.8lbai/ac草銨膦加1lbae/ac麥草畏，隨后在v8下施用3lbae/ac草甘膦加1.5lbae/ac麥草畏。在施用除草劑后10至14天進行損傷評級。含有相同事件的多個植物的總平均值被用來選擇用于推進的事件?；陔s種損傷評分、農(nóng)藝評分、雜種藥效產(chǎn)量、近交系農(nóng)藝產(chǎn)量和另外的分子分析，5個事件被選擇用于推進。然后針對這5個事件完成另外的分子分析。接著，審查5個事件中每個的多年田間和分子數(shù)據(jù)，包括雜交性狀藥效田間試驗、雜種和近交系產(chǎn)量測量、農(nóng)藝評分和分子信息，且兩個事件被選擇用于進一步分析。這兩個事件都是使用相同的轉(zhuǎn)化載體而產(chǎn)生，并且因此具有相同的轉(zhuǎn)基因插入物，但不具有相同的基因組位置或側(cè)翼序列。進行美國(us)第2年雜種和近交系藥效田間試驗以及雜種和近交系農(nóng)藝田間試驗以評價這兩個事件。雜種藥效試驗的進行類似于第1年美國田間試驗，但包括不同的噴灑方案。通過損傷評級和雜種藥效產(chǎn)量來測定藥效。同樣對事件進行另外的分子分析。含有轉(zhuǎn)基因事件的雜種植物從雜交中的父本產(chǎn)生草甘膦耐受性。雜種藥效1和2田間試驗在兩個州的十二個地點進行，且雜種藥效3田間試驗在四個州的三十三個地點進行。在這些田間試驗中，草甘膦制劑為rounduppowermax4.5sl，麥草畏制劑為clarity4sl，且草銨膦制劑為ignite2802.34sl。用于藥效1和藥效2試驗(與兩個不同的近交系雜交)的除草劑施用為：(1)未處理的對照；(2)先后在ve-v2和v6下施用0.4lbai/ac草銨膦；(3)先后在ve-v2和v6下施用0.8lbai/ac草銨膦；(4)在v4下隨后在v8下施用0.5lbae/ac麥草畏；(5)在v4下隨后在v8下施用1.0lbae/ac麥草畏；以及(6)在v4下隨后在v8下施用2.25lbai/ac草甘膦加1.0lbae/ac麥草畏。用于藥效3試驗(代表來自與第三近交系雜交的雜種)的除草劑施用為：(1)未處理的對照；(2)在ve-v2下施用0.5lbae/ac麥草畏，隨后在v6下施用0.4lbai/ac草銨膦；以及(3)在ve-v2下施用1.0lbae/ac麥草畏，隨后在v6下施用0.8lbai/ac草銨膦。損傷評級在施用除草劑后10至14天進行，且對于含有相同事件的多個植物而言被用來選擇用于推進的事件。收集產(chǎn)量和農(nóng)藝數(shù)據(jù)。為了比較所述兩個事件的雜種損傷評級，完成了多個雜種藥效田間試驗的薈萃分析。(表4)在v8下對損傷評級進行評分(其中v8分析包括來自v2、v4、v6和v8除草劑施用的累積損傷)，其具有統(tǒng)計學(xué)最小顯著差異(lsd，p<0.05)。試驗品1、試驗品2和試驗品3代表與被用來產(chǎn)生用于指定田間試驗的雜種的3個獨立近交玉米親本系雜交。對于每一個試驗，在利用含有兩個事件中任一個的轉(zhuǎn)基因玉米親本產(chǎn)生的雜種之間沒有發(fā)現(xiàn)損傷評級的統(tǒng)計差異。表4.來自雜種藥效田間試驗的損傷評級的薈萃分析。完成了來自多個藥效田間試驗的雜種藥效產(chǎn)量(蒲式耳/英畝)的薈萃分析，其比較來自含有兩個事件中每一個的雜種的產(chǎn)量。(表5)對于每一個試驗，在利用含有兩個事件中任一個的轉(zhuǎn)基因玉米親本產(chǎn)生的雜種之間沒有發(fā)現(xiàn)雜種藥效產(chǎn)量的統(tǒng)計差異。表5.雜種藥效田間試驗的產(chǎn)量薈萃分析。還利用含有兩個事件中任一個的雜種轉(zhuǎn)基因玉米進行了壓力測試田間試驗。在壓力測試中，以非商業(yè)化的高比率施用草銨膦(ignite280,2.34sl)或麥草畏(clarity4sl)除草劑。對于典型的田間試驗，草銨膦的1x比率為0.4lbai/ac，且麥草畏的1x比率為0.5lbae/ac。對于草銨膦壓力測試田間試驗，按下列比率在ve-v2下、隨后在v4下隨后在v8下施用草銨膦：(1)1lbai/ac(2.5x)；(2)2lbai/ac(5x)；(3)4lbai/ac(10x)；和(4)8lbai/ac(20x)。對于麥草畏壓力測試田間試驗，按下列比率在ve-v2下、隨后在v4下隨后在v8下施用麥草畏：(1)2lbae/ac(4x)；(2)4lbae/ac(8x)；(3)8lbae/ac(16x)；和(4)16lbae/ac(32x)。在季末時，收獲雜種壓力測試田間試驗并測定產(chǎn)量(蒲式耳/英畝或bu/ac)。產(chǎn)量數(shù)據(jù)的分析比較了含有兩個事件中任一個的雜種。對于每一個試驗，在利用含有兩個事件中任一個的轉(zhuǎn)基因玉米親本產(chǎn)生的雜種之間沒有發(fā)現(xiàn)在任何除草劑施用率下的產(chǎn)量的統(tǒng)計差異。表6.來自雜種壓力測試藥效田間試驗的產(chǎn)量。雜種農(nóng)藝田間試驗在3個州的21個地點分3組(每組15個地點)進行，并與雜種藥效田間試驗在同一季節(jié)運行。在整個田間試驗季節(jié)中收集農(nóng)藝學(xué)測量結(jié)果，并在季末測定農(nóng)藝產(chǎn)量。橫跨多季節(jié)、多地點雜種農(nóng)藝田間試驗的薈萃分析被用來比較雜種對照和含有兩個事件中任一個的雜種的產(chǎn)量。在轉(zhuǎn)基因雜種之間或相比于雜種對照沒有發(fā)現(xiàn)雜種農(nóng)藝產(chǎn)量的統(tǒng)計差異(表7)。表7.雜種農(nóng)藝田間試驗的產(chǎn)量薈萃分析。在1個州的6個地點利用完全隨機區(qū)組設(shè)計進行近交系藥效田間試驗。在這些田間試驗中，麥草畏制劑為clarity4sl，且草銨膦制劑為ignite2802.34sl。用于近交系藥效田間試驗的除草劑施用是在ve-v2下施用0.8lbai/ac草銨膦和2.0lbae/ac麥草畏，接著在v8下施用0.8lbai/ac草銨膦和2.0lbae/ac麥草畏。在季末測定產(chǎn)量。對于每一個試驗，當比較在這些試驗中收獲自含有兩個事件中任一個的轉(zhuǎn)基因玉米的近交系產(chǎn)量時，觀察到近交系藥效產(chǎn)量的統(tǒng)計差異(表8)。這些數(shù)據(jù)表明含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的優(yōu)越表現(xiàn)。表8.近交系藥效田間試驗的產(chǎn)量薈萃分析。在與美國第1年藥效田間試驗、南美洲第1年藥效田間試驗以及美國第2年藥效田間試驗相同的季節(jié)期間進行近交系農(nóng)藝田間試驗(1個州，11個地點)。以在多個地點進行的完全隨機區(qū)組設(shè)計來設(shè)置地塊，并且試驗包括轉(zhuǎn)基因玉米近交系的可比較自交系的對照。進行橫跨多季節(jié)、多地點近交系農(nóng)藝田間試驗的薈萃分析，以比較配對對照和使用兩個事件中任一個所產(chǎn)生的轉(zhuǎn)基因近交系的產(chǎn)量。在對照和含有mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米之間沒有發(fā)現(xiàn)近交系農(nóng)藝產(chǎn)量的統(tǒng)計差異(表9)。與此相反，當與對照或含有mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米相比較時，含有事件2的轉(zhuǎn)基因玉米在產(chǎn)量上出現(xiàn)統(tǒng)計顯著的降低。這些數(shù)據(jù)進一步表明含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的優(yōu)異表現(xiàn)。表9.近交系農(nóng)藝田間試驗的產(chǎn)量薈萃分析。實施例2：玉米mon87419事件的dna序列的表征本實施例描述了對玉米mon87419事件進行的廣泛分子表征。玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因插入物從5’到3’取向含有：(i)來自大須芒草(andropogongerardii)的泛素基因(ubq)的啟動子(p-andge.ubq1)、前導(dǎo)子和內(nèi)含子(l-i-andge.ubq1)；可操作地連接至編碼賦予草銨膦除草劑耐受性的草銨膦n-乙酰轉(zhuǎn)移酶(pat)的來自綠色產(chǎn)色鏈霉菌(streptomycesviridochromogenes)的pat基因(cr-strvi.pat)；可操作地連接至來自水稻(oryzasativa)的ra5b前體基因的聚腺苷酸化信號(也稱為指導(dǎo)mrna的聚腺苷酸化的終止子)(t-os.ara5)，以及(ii)具有復(fù)制增強子區(qū)域的花生褪綠條紋病毒的全長轉(zhuǎn)錄物(pclsv)的啟動子；可操作地連接至來自小麥(triticumaestivum)的捕光復(fù)合體b1基因的前導(dǎo)子(l-ta.lhcb1)；可操作地連接至來自水稻的肌動蛋白1基因的第一內(nèi)含子(i-os.act1)；可操作地連接至來自矮牽牛(petuniaxhybrida)5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的n末端葉綠體轉(zhuǎn)運肽(ts-ph.shkg-ctp4)；可操作地連接至來自嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的被優(yōu)化來用于單子葉植物表達的dmo基因(cr-stema.dmo)，其編碼賦予麥草畏除草劑耐受性的麥草畏單加氧酶(dmo)；可操作地連接至來自小麥的熱休克蛋白17聚腺苷酸化信號(t-ta.hsp17)。轉(zhuǎn)基因插入物的5’端的側(cè)翼為根癌農(nóng)根菌(agrobacteriumtumifaciens)的右邊界，且轉(zhuǎn)基因插入物的3’端的側(cè)翼為根癌農(nóng)根菌的左邊界。進行southern印跡分析以證實含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米含有整個轉(zhuǎn)基因插入物的單一完整拷貝而不含任何載體骨架。從插入物的5’端和3’端分離側(cè)翼序列，并使用反向pcr和/或基因組步行技術(shù)確定了各自的連接。使用反向pcr來擴增目標位點以外的基因組dna，從而確定玉米mon87419事件的插入物的染色體位置。玉米mon87419事件的側(cè)翼序列被映射到已知的玉米基因組的物理裝配物，并且玉米mon87419事件被證實為不在任何已知的基因內(nèi)。該序列信息被用來設(shè)計事件特異性端點分析以鑒定樣品中玉米mon87419事件的存在。插入位點序列信息還被用于所述事件的染色體位置的生物信息學(xué)分析。使用特異于玉米mon87419事件的側(cè)翼區(qū)的引物，通過穿過野生型等位基因的pcr來確定插入位點完整性。野生型插入位點被用來將玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因整合的獨特位點映射到玉米參照基因組。為了確保在轉(zhuǎn)化期間沒有將改變或突變引入到轉(zhuǎn)基因的任何區(qū)域，從植物中分離出玉米mon87419事件的整個轉(zhuǎn)基因插入物并對其測序。使用來自含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米籽粒的免疫純化蛋白質(zhì)提取物進行表達的pat和dmo蛋白質(zhì)的n末端蛋白測序。該序列隨后被用來確認真實的n末端氨基酸序列。對從含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的籽粒獲得的蛋白質(zhì)提取物進行western分析。該分析確認對于pat和dmo各自產(chǎn)生單一的預(yù)期大小的蛋白質(zhì)。elisa被開發(fā)來確定由玉米mon87419事件表達的pat或dmo蛋白質(zhì)在各種轉(zhuǎn)基因玉米組織類型(葉、種子、根和花粉)中的蛋白水平。對從含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的籽粒分離的poly-arna進行northern分析。該分析確認pat和dmomrna產(chǎn)物的轉(zhuǎn)錄物大小和數(shù)量。還使用來自含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的樣品通過實時pcr測量了rna表達水平。實施例3：事件特異性端點分析本實施例描述了被開發(fā)來鑒定樣品中含有玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因玉米的事件特異性端點熱擴增方法。在端點分析中使用的dna引物是引物sq26644(seqidno:11)、sq26645(seqidno:12)和6-famtm標記的探針pb11207(seqidno:13)。6-famtm是連接在dna探針上的appliedbiosystems(fostercity,ca)的熒光染料產(chǎn)品。對mgbtm探針而言，taqdna聚合酶的5'外切核酸酶活性從5'端使探針在熒光團與猝滅劑之間裂解。當與靶標dna鏈雜交時，猝滅劑和熒光團充分分離以產(chǎn)生熒光信號，從而釋放熒光。sq26644和sq26645在與這些反應(yīng)方法和pb11207一起使用時產(chǎn)生診斷玉米mon87419事件的dna擴增子。用于此分析的對照應(yīng)該包括含有玉米mon87419事件的陽性對照、來自非轉(zhuǎn)基因玉米的陰性對照和不含有模板dna的陰性對照。另外，pcr反應(yīng)的對照最佳應(yīng)包括特異于玉米基因組中的單拷貝基因的內(nèi)部對照引物和內(nèi)部對照探針。這些分析被優(yōu)化來與appliedbiosystemspcrsystem9700(在最大速度下運行)或mjresearchdnaengineptc-225熱循環(huán)儀一起使用，但也可以使用其它設(shè)備。在用于檢測玉米mon87419事件的端點分析方法中有用的條件的實例如下。步驟1：將18兆歐姆水調(diào)節(jié)至10μl的最終體積。步驟2：5.0μl2xuniversalmastermix(dntp、酶、緩沖液)至1x最終濃度。步驟3：0.5μl事件引物-1(sq26644)和事件引物-2(sq26645)?；旌?再懸浮于18兆歐姆水中至每個引物的濃度為20um)至1.0μm的最終濃度(例如在微離心管中，應(yīng)加入以下物質(zhì)以獲得最終濃度為20um的500μl體積：濃度為100μm的100μl引物sq26644；濃度為100μm的100μl引物sq26645；300μl18兆歐姆水)。步驟4：0.2μl事件6-famtmmgb探針pb11207(10um)(再懸浮于18兆歐姆水中至10μm的濃度)至0.2μm最終濃度。步驟5：0.5μl內(nèi)部對照引物-1和內(nèi)部對照引物-2混合物(再懸浮于18兆歐姆水中至每個引物的濃度為20mm)至1.0μm最終濃度。步驟6：0.2μl內(nèi)部對照victm探針(10um)至0.2μm最終濃度(再懸浮于18兆歐姆水中至10mm的濃度)。步驟7：針對每個樣品為3.0μl提取的dna(模板)以及下列中各一個，包括：1.待分析的葉片樣品；2.陰性對照(非轉(zhuǎn)基因dna)；3.陰性水對照(無模板)；4.含有玉米mon87419事件dna的陽性對照轉(zhuǎn)基因玉米。步驟8：熱循環(huán)儀條件如下：在50℃下持續(xù)2分鐘的1個循環(huán)；在95℃下持續(xù)10分鐘的1個循環(huán)；在95℃下持續(xù)15秒，然后在64℃下持續(xù)1分鐘的10個循環(huán)(-1℃/循環(huán))；在95℃下持續(xù)15秒，然后在54℃下持續(xù)1分鐘的30個循環(huán)，任選的另外的10至20個循環(huán)(在95℃下持續(xù)15秒，然后在64℃下持續(xù)1分鐘(-1℃/循環(huán)))可以在端點分析期間提供更明顯的群體分離)；最后的10℃循環(huán)。實施例4：接合性分析可以利用接合性分析來確定包含玉米mon87419事件的植物對于該事件或野生型等位基因是否為雜合或純合的?？梢允褂帽疚奶峁┑男蛄行畔碓O(shè)計擴增反應(yīng)分析。例如，這樣的pcr分析將包括至少三種引物的設(shè)計：引物1、引物2和引物3，其中引物1特異于玉米mon87419事件的3’側(cè)翼上的玉米基因組dna；引物2特異于玉米mon87419事件的轉(zhuǎn)基因插入物；且引物3特異于野生型等位基因。當在擴增反應(yīng)中用作引物對時，引物1將與引物2一起產(chǎn)生特異于玉米mon87419事件的pcr擴增子。當在擴增反應(yīng)中用作引物對時，引物1將與引物3一起產(chǎn)生特異于野生型等位基因的pcr擴增子。在對玉米基因組dna進行的pcr反應(yīng)中，從(引物1+引物2)和(引物1+引物3)產(chǎn)生的相應(yīng)的pcr擴增子將具有不同的擴增子序列和大小。當在pcr反應(yīng)中包括三個引物以及從就玉米mon87419事件而言純合的植物提取的dna時，將只產(chǎn)生引物1+引物2擴增子。當在pcr反應(yīng)中包括三個引物以及從就玉米mon87419事件而言雜合的植物提取的dna時，將產(chǎn)生引物1+引物2擴增子以及引物1+引物3擴增子兩者。當在pcr反應(yīng)中將三個引物與從就玉米mon87419事件而言為空(即野生型)的植物提取的dna混合在一起時，將只產(chǎn)生引物1+引物3擴增子。用于測定玉米植物的針對玉米mon87419事件的接合性的另一種方法是端點熱擴增反應(yīng)。對于這種類型的分析，除了上述引物之外，該分析還將包括兩個熒光標記的探針。探針1將特異于玉米mon87419事件，且探針2將特異于就玉米mon87419事件而言為空(野生型)的玉米植物，并且其中這兩個探針含有不同的熒光標記，例如6-famtm標記或victm標記。當在端點熱擴增反應(yīng)中使用引物1+引物2+探針1時，將產(chǎn)生特異于玉米mon87419事件的第一熒光信號。當在端點熱擴增反應(yīng)中使用引物1+引物3+探針2時，將產(chǎn)生特異于野生型玉米的第二熒光信號。當在端點熱擴增反應(yīng)中包括三個引物和兩個探針以及從就玉米mon87419事件而言純合的植物提取的dna時，將只產(chǎn)生第一熒光信號(特異于引物1+引物2+探針1)。當在端點熱擴增反應(yīng)中包括三個引物以及從就玉米mon87419事件而言雜合的植物提取的dna時，將產(chǎn)生第一熒光信號(特異于引物1+引物2+探針1)和第二熒光信號(特異于引物1+引物3+探針2)兩者。當在端點熱擴增反應(yīng)中將三個引物與從就玉米mon87419事件而言為空(野生型)的植物提取的dna混合在一起時，將只產(chǎn)生第二熒光信號(特異于引物1+引物3+探針2)。用于測定植物的針對玉米mon87419事件的接合性的另一種方法將是southern分析。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解如何設(shè)計特異于玉米mon87419事件的southern雜交探針，以及特異于就玉米mon87419事件而言為空(野生型)的玉米植物的第二southern雜交探針。利用southern分析，只檢測到來自第一southern雜交探針的信號將指示就玉米mon87419事件而言純合的植物；檢測到來自第一southern雜交探針和第二southern雜交探針兩者的信號將指示就玉米mon87419事件而言雜合的植物；且只檢測到來自第二southern雜交探針的信號將指示dna是提取自就玉米mon87419事件而言為空(野生型)的植物。當前第1頁12