本發(fā)明屬于十字花科蕓薹屬蔬菜新品種選育技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系及保持系的選育方法。

背景技術(shù)：

烏塌菜是一種十字花科蕓薹屬葉用蔬菜，現(xiàn)在烏塌菜品種的選育方法通常有三種途徑：一、常規(guī)品種；二、利用自交不親和系為母本培育的雜種一代；三、采用細胞質(zhì)雄性不育系為母本培育的雜種一代，其雄性不育胞質(zhì)主要是ogu CMS和pol CMS。Ogu CMS常表現(xiàn)黃化現(xiàn)象，而pol CMS的育性容易受到溫度的影響。在以雄性不育為主導(dǎo)的新品種選育中，長期的單一胞質(zhì)類型容易造成發(fā)病率增加，進而影響作物產(chǎn)量。因此在以雄性不育系為母本的雜種優(yōu)勢利用中尋找和使用更多的細胞質(zhì)雄性不育類型是育種家一項長期的工作內(nèi)容。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺點，本發(fā)明提供一種烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系及保持系的選育方法，它能夠豐富烏塌菜中細胞質(zhì)雄性不育系胞質(zhì)類型，提高以細胞質(zhì)雄性不育為母本的新品種選育安全性，本發(fā)明選育一種新的不育性穩(wěn)定、徹底、不受溫度及光照條件影響的烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系，為烏塌菜雜種優(yōu)勢的利用提供新的種質(zhì)資源。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：一種烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系及保持系的選育方法，它以大白菜細胞質(zhì)雄性不育系CMS65-7為母本，以保持系烏塌菜15-141為父本，雜交獲得F₁，通過多代連續(xù)回交，結(jié)合栽培試驗、抗性鑒定及育性鑒定得到了遺傳穩(wěn)定、抗病性強、生長性狀優(yōu)良的烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系和保持系，繁殖該烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系，得到的烏塌菜不育系CMS-72是不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS的新型細胞質(zhì)雄性不育系。具體選育步驟如下：

1、父本的選育

以韶關(guān)學(xué)院英東農(nóng)業(yè)科學(xué)與工程學(xué)院多年選育的烏塌菜優(yōu)良自交系10-222與10-327為親本，通過常規(guī)育種手段結(jié)合抗病性鑒定及長勢分析選育出15-141為父本材料；

2、母本的選育

Hau CMS是華中農(nóng)業(yè)大學(xué)傅廷棟院士發(fā)現(xiàn)的一種不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS新型細胞質(zhì)雄性不育系，以該細胞質(zhì)雄性不育系構(gòu)建了大白菜細胞質(zhì)雄性不育系（專利公開號為：CN 1849881A），本發(fā)明以該不育系材料CMS63-5為母本，進行不育系的選育；

3、不育系的選育

以CMS63-5為母本，15-141為父本，在抗病性鑒定及育性鑒定的基礎(chǔ)上，采用撥蕾授粉方法獲得F₁，再對F₁進行抗病性鑒定及育性鑒定，選擇抗病性良好的不育單株為母本（非輪回親本），15-141為父本（輪回親本），經(jīng)過8次回交獲得BC₈F₁，將其命名為CMS-72，經(jīng)育性鑒定為不育材料，表現(xiàn)型為抗病性強、長勢優(yōu)良的烏塌菜不育系；

4、烏塌菜不育系及保持系的擴繁

以CMS-72為母本，15-141為父本，以網(wǎng)罩擴繁的方式進行雜交，CMS-72收獲的種子為不育胞質(zhì)為hau CMS的烏塌菜不育系，15-141收獲的種子為烏塌菜的保持系。

本發(fā)明的積極效果是：

（1）本發(fā)明的烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系的不育性非常穩(wěn)定和徹底，該不育系不受溫度和光照條件影響，在中國韶關(guān)（短日照）和甘肅和政（長日照）連續(xù)4年8代種植的育性鑒定表明，其育性均表現(xiàn)0級，不育株率及不育度均為100%；

（2）本發(fā)明的烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系沒有任何死蕾和苗期黃化現(xiàn)象；

（3）選育出的不育系及保持系抗病性好，長勢優(yōu)良。

附圖說明

圖1為本發(fā)明選育過程結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實施方式

參見圖1，一種烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系及保持系的選育及繁殖方法，它以大白菜細胞質(zhì)雄性不育系CMS65-7為母本，以保持系烏塌菜15-141為父本，雜交獲得F₁，通過多代連續(xù)回交，結(jié)合栽培試驗、抗性鑒定及育性鑒定得到了遺傳穩(wěn)定、抗病性強、生長性狀優(yōu)良的烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系和保持系，繁殖該烏塌菜細胞質(zhì)雄性不育系，得到的烏塌菜不育系CMS-72是不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS的新型細胞質(zhì)雄性不育系。具體選育步驟如下：

一、父本的選育

1、將本單位選育的烏塌菜自交系10-222與10-327去雄雜交，得到F₁；

2、將F₁自交得到F₂，在F₂群體中進行抗病性試驗及株型觀察，選擇抗病性好、株型優(yōu)異的多個F₃單株進入下一步選育；

3、在F₃群體中，進一步進行抗病性試驗及株型觀察，選擇優(yōu)異F₄單株進行下一步選育；

4、在F₄單株中進行抗病性及株型觀察試驗，同時進行豐產(chǎn)性試驗，選擇抗病性好、株型及產(chǎn)量俱佳的F₅單株作為保持系，編號為15-141；

二、母本的選育

選用華中農(nóng)業(yè)大學(xué)選育的大白菜細胞質(zhì)雄性不育系（專利公開號為：CN 1849881A）為母本材料，經(jīng)過育性鑒定及抗性試驗、長勢觀察，選擇長勢優(yōu)良、抗病性好的不育單株為母本，編號為CMS63-5；

三、烏塌菜不育系CMS-72的選育

1、以CMS63-5為母本，15-141為父本，采用人工撥蕾授粉的方法獲得F₁，同時15-141套袋自交留種備用；

2、將F₁及15-141群體小區(qū)種植，進行抗病性試驗、株型觀察及育性鑒定，選擇株型好、抗病性強同時不育的單株為母本，選擇15-141中抗病性好，株型優(yōu)良的單株為父本，采用人工撥蕾授粉方式進行雜交，獲得BC₁F₁群體；

3、重復(fù)2中步驟，以BC₁F₁中不育單株為母本，15-141為父本，獲得BC₂F₁群體；

4、重復(fù)3中步驟，以BC₂F₁中不育單株為母本，15-141為父本，獲得BC₃F₁群體；

5、在回交8代的基礎(chǔ)上，獲得BC₈F₁不育群體，其編號為CMS-72；

四、烏塌菜不育系CMS-72及保持系的擴繁

1、將CMS-72及15-141隔行種植，行數(shù)比例為3:1，待初花期以網(wǎng)罩方法進行繁種；

2、分別收獲CMS-72及15-141種子，第二年分別進行抗病性鑒定、長勢測定及育性鑒定，結(jié)果CMS-72所收獲的種子全部為不育單株，15-141上收獲種子全部為可育單株，并長勢好，抗病性強。CMS-72上所收獲種子為本發(fā)明中的不育系，15-141上所收獲種子為本發(fā)明中的保持系。