本發(fā)明屬于靈芝栽培領(lǐng)域，尤其涉及一種靈芝栽培的高效方法及其培養(yǎng)基。

背景技術(shù)：

靈芝(ganodermalucidumkarst)是一種藥用價(jià)值與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值均較高的藥用食用菌，自古以來(lái)一直被視為珍貴的中藥材?，F(xiàn)代藥理研究表明，靈芝具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力，抗腫瘤，保肝解毒，改善心血管系統(tǒng)，抗病毒等功效。靈芝的藥效成份主要有靈芝多糖類、三萜類、核苷類、氨基酸等，另還含有鉬、鋅、錳、鐵、硒、鋇等多種微量元素。大型仿野生栽培的靈芝不僅產(chǎn)量與藥用價(jià)值高于一般小靈芝，而且具有觀賞收藏價(jià)值。靈芝生產(chǎn)中存在的主要問(wèn)題是菌種質(zhì)量與數(shù)量不能滿足靈芝生產(chǎn)發(fā)展的需要，目前南方地區(qū)靈芝菌袋生產(chǎn)普遍使用固體菌種，采用固體菌種的缺點(diǎn)是：菌種本身生長(zhǎng)期長(zhǎng)(30天)、不耐貯存、接種后吃料慢。而液體菌種具有生長(zhǎng)周期短(300l液體菌種培養(yǎng)僅需6天即可達(dá)到用于生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn))、菌齡一致、發(fā)育均一和整齊健壯等特點(diǎn)，克服了固體菌種的不足。

盡管如此，靈芝液體菌種在應(yīng)用過(guò)程中依然存在各種問(wèn)題：

(1)液體培養(yǎng)基中需要加入酵母膏、蛋白胨等成份，因此培養(yǎng)基成本高；

(2)許多食用菌生產(chǎn)廠都在郊區(qū)及偏遠(yuǎn)農(nóng)村，電力供應(yīng)不穩(wěn)定，液體發(fā)酵過(guò)程中遇到停電時(shí)，整個(gè)發(fā)酵罐菌液就全部污染雜菌而報(bào)廢；

(3)發(fā)酵罐屬于高壓消毒設(shè)備，通常與接種室、培養(yǎng)室不在一個(gè)區(qū)域。發(fā)酵罐生產(chǎn)出的大量的液體菌種移動(dòng)不方便，目前普通采用加長(zhǎng)出液管的方法接種，或?qū)⒕臃N時(shí)搬到發(fā)酵罐附近，接完又搬到培養(yǎng)區(qū)，這二種方法都增加了菌袋的污染率；

(4)高質(zhì)量靈芝仿野生栽培采用相思樹(shù)枝條為材料時(shí)，液體菌種直接接種于相思樹(shù)枝條上時(shí)，由木材結(jié)構(gòu)緊密，不利于液體菌種附著，加之相思樹(shù)枝條營(yíng)養(yǎng)成份多為大分子木質(zhì)素、纖維素，也不利于液體菌種短期快速恢復(fù)生長(zhǎng)，因而菌袋成活率較低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明需要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種生產(chǎn)成本低、污染幾率小、營(yíng)養(yǎng)好且菌絲生長(zhǎng)期短、產(chǎn)量高的靈芝栽培的高效方法及其培養(yǎng)基。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

靈芝栽培的高效培養(yǎng)基，包括用于液體母種培養(yǎng)的培養(yǎng)基a和用于發(fā)酵罐液體菌種培養(yǎng)的培養(yǎng)基b；培養(yǎng)基a以土豆、平菇子實(shí)體為主要成份，培養(yǎng)基b以黃豆、平菇子實(shí)體、靈芝出菇袋廢菌渣為主要成份。

靈芝栽培的高效培養(yǎng)基，包括培養(yǎng)基a、b、c、d，其中：

培養(yǎng)基a的配方為每1000ml培養(yǎng)液中含有土豆200.0g、米糠50.0g、靈芝出菇袋廢菌渣50.0g、平菇子實(shí)體10.0g、磷酸二氫鉀3.0g、硫酸鎂1.5g、蔗糖25.0g，水700-900ml，定容至1000ml；

培養(yǎng)基b的配方為每1000ml培養(yǎng)液中含有土豆100.0g、米糠50.0g、靈芝出菇袋廢菌渣50.0g、平菇子實(shí)體40.0g、黃豆粉5.0g、磷酸二氫鉀6.0g、硫酸鎂2.5g、葡萄糖10.0g、發(fā)酵食品消泡劑0.1ml，水700-900ml，定容至1000ml；

培養(yǎng)基c的配方為每1000g培養(yǎng)基中含有棉子殼400.0g、靈芝出菇袋廢菌渣370.0g、甘蔗渣100.0g、玉米芯100.0g、石膏粉10.0g、過(guò)磷酸鈣10.0g、磷酸二氫鉀10.0g，培養(yǎng)基加水600-700ml；

培養(yǎng)基d的配方為每1000g培養(yǎng)基中含有相思樹(shù)枝條1000g，培養(yǎng)基加水600-700ml。

培養(yǎng)基a按以下操作配制：將土豆、米糠、靈芝出菇袋廢菌渣、平菇子實(shí)體這4種成分混在一起，攪碎，加水700ml，煮至沸騰，維持沸騰10分鐘，過(guò)濾，去渣，留濾汁；將磷酸二氫鉀、硫酸鎂、蔗糖加入濾液，混合攪拌溶解；加水使最終培養(yǎng)基體積達(dá)1000ml；

培養(yǎng)基b按以下操作配制：將土豆、米糠、靈芝出菇袋廢菌渣、平菇子實(shí)體、黃豆粉這5種成分混在一起拌均，煮至沸騰，過(guò)濾，去渣留濾液；將消泡劑、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、葡萄糖加到適量的水中溶解；將濾液和水溶液混合，并加水使最終培養(yǎng)液體積達(dá)到1000ml；

培養(yǎng)基c按以下操作配制：將棉子殼、靈芝出菇袋廢菌渣、甘蔗渣、玉米芯、石膏粉這5種成分混在一起拌均；將過(guò)磷酸鈣、磷酸二氫鉀在適量的水中溶解；將混合物和水溶液混合，并加水使最終培養(yǎng)基含水量達(dá)到65％；

培養(yǎng)基d按以下操作配制：將相思樹(shù)枝條材料泡水12-15小時(shí)至持水量達(dá)65％。

使用上述培養(yǎng)基進(jìn)行靈芝栽培的高效方法，將培養(yǎng)基a用于液體母種培養(yǎng)，將培養(yǎng)基b用于發(fā)酵罐液體菌種培養(yǎng)，將培養(yǎng)基c用于剛接入出菇袋的液體菌種的活化生長(zhǎng)，將培養(yǎng)基d用于出菇袋菌絲體培養(yǎng)。

上述靈芝栽培的高效方法，包括以下步驟：

(1)將培養(yǎng)基a分裝于1000ml的玻璃瓶，每瓶培養(yǎng)液500ml，120℃滅菌60分鐘，滅菌后培養(yǎng)基冷卻至室溫，接入1.0cm×1.0cm×1.0cm大小的固體母種，25-28℃室溫下?lián)u床培養(yǎng)，搖床搖速150轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)時(shí)間5天，得到菌絲密度占培養(yǎng)液80％的液體母種；

(2)將培養(yǎng)基b分裝于450l的發(fā)酵罐，每罐裝培養(yǎng)液300l，120℃下60分鐘，滅菌后培養(yǎng)液冷卻至室溫，接入1000ml液體母種，28℃室溫下培養(yǎng)，維持罐壓0.03-0.05mpa，氣磊壓力表0.15mpa，培養(yǎng)時(shí)間5-6天，得到菌絲球密度占80％的液體菌種；

(3)發(fā)酵罐液體培養(yǎng)基接種培養(yǎng)24小時(shí)后，每隔12小時(shí)從取樣口取樣測(cè)定有無(wú)雜菌感染；

(4)將配好的培養(yǎng)基d分裝于40cm×60cm聚丙烯塑料袋中，每袋裝干料4000g，在培養(yǎng)基d表面加80g的培養(yǎng)基c，平鋪表面，扎好袋口，在120℃下消毒滅菌240分鐘，然后取出，冷卻至室溫待用；移入接種室接種，每袋接入80ml液體菌種，28℃室溫下培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間60-65天，得到長(zhǎng)滿菌絲的出菇袋；

(5)將長(zhǎng)滿菌絲的菌袋剝?nèi)ニ芰洗?，放于地面消毒好的大棚或林下，在菌袋表面蓋一層塑料地膜，室溫控制在25-28℃，維持5-7天，期間每天掀開(kāi)薄膜二次以通風(fēng)換氣，每次掀開(kāi)時(shí)間10分鐘；

(6)在完成后熟作用的菌袋表面覆土，土層2-3cm厚，覆土后澆一次透水，以后每隔3-4天淋一次水；

(7)菇房溫度28-35℃，空氣濕度80-90％，覆蓋營(yíng)養(yǎng)土的菌袋菇蕾未出土之前，每隔3-4天淋一次水；當(dāng)50％以上菌袋都有菇蕾形成后，3天淋一次透水，直至采收；每批采后停止噴水5-7天。

發(fā)酵罐的排氣管上安裝有二個(gè)逆止閥，發(fā)酵罐的氣泵處安裝有一個(gè)五級(jí)過(guò)濾裝置的貯氣罐。

步驟(4)中接種使用移動(dòng)式接種壺，移動(dòng)式接種壺主要由通過(guò)耐高壓膠管依次連接的氣磊、過(guò)濾器、不銹鋼貯菌液容器、接種槍組成，貯菌液容器頂部設(shè)裝液口、側(cè)部設(shè)背帶。

針對(duì)現(xiàn)有靈芝栽培存在的問(wèn)題，發(fā)明人以平菇子實(shí)體、靈芝出菇袋廢菌渣為對(duì)象，通過(guò)不同材料組合試驗(yàn)研究，研制了低成本高產(chǎn)的靈芝栽培的高效培養(yǎng)基，包括用于液體母種培養(yǎng)的培養(yǎng)基a和用于發(fā)酵罐液體菌種培養(yǎng)的培養(yǎng)基b；培養(yǎng)基a以土豆、平菇子實(shí)體為主要成份，培養(yǎng)基b以黃豆、平菇子實(shí)體、靈芝出菇袋廢菌渣為主要成份。其中，平菇是一種比較常見(jiàn)的栽培范圍廣、產(chǎn)量高、售價(jià)低的食用菌品種，它的新鮮子實(shí)體蛋白質(zhì)含量達(dá)5-6％，干品中多糖含量達(dá)2-3％，將平菇子實(shí)體做為蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充到液體菌中培養(yǎng)基中，有利于降低培養(yǎng)基成本，同時(shí)，由于平菇與靈芝同屬真菌，營(yíng)養(yǎng)利用率會(huì)有累加效應(yīng)。據(jù)此，發(fā)明人還建立了相應(yīng)的栽培方法，該法中：出菇袋培養(yǎng)基以相思樹(shù)枝條枝條為主，通過(guò)相思樹(shù)枝條培養(yǎng)基表面添加表面吸物力與吸附面積較大的有機(jī)材料(液體菌種活化輔助培養(yǎng)料棉子殼、玉米粉、靈芝出菇袋廢菌渣等)來(lái)增加液體菌種的附著力與恢復(fù)生長(zhǎng)力；同時(shí)，發(fā)明人對(duì)發(fā)酵罐和接種裝置進(jìn)行了改進(jìn)。應(yīng)用本發(fā)明的技術(shù)體系可以替代原有的液體菌種配方，并使發(fā)酵罐發(fā)酵成功率達(dá)100％，菌袋接種成活率100％，縮短菌絲生產(chǎn)周期、提高產(chǎn)量，降低成本。

相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的突出優(yōu)勢(shì)具體在于：

(1)液體菌種生產(chǎn)配方成本下降。原配方生產(chǎn)時(shí)每100升培養(yǎng)液需加酵母膏250g，成本為17.0元(34元/500g)，采用本發(fā)明液體菌種生產(chǎn)配方后，用平菇子實(shí)體提取液替代酵母膏，現(xiàn)配方每100升培養(yǎng)液需加平菇子實(shí)體4.0kg，平菇市場(chǎng)價(jià)5.0元/kg計(jì)算，平菇子實(shí)體4.0kg成本20.0元，比對(duì)照降低41.2％。

(2)赤靈芝采用固體菌種時(shí)，母種生長(zhǎng)需10天、原種生長(zhǎng)需30天(菌瓶規(guī)格：25×20cm)、栽培種生長(zhǎng)需25天(菌瓶規(guī)格：25×20cm)，出菇袋生長(zhǎng)需90天(菌袋規(guī)格：40×60cm)，共155天，第一年生物轉(zhuǎn)化率25.5％；采用本發(fā)明的液體菌種后，液體母種需7天、發(fā)酵罐液體菌種生長(zhǎng)需5-7天，出菇袋生長(zhǎng)需60-65天，共72-79天，僅出菇袋生長(zhǎng)階段就比對(duì)照縮短了30-25天，第一年生物轉(zhuǎn)化率32.2％，比對(duì)照提高25.8％。

(3)采用未改狀發(fā)酵罐進(jìn)行液體菌種生產(chǎn)時(shí)，液體菌種培養(yǎng)成功率20％。采用改裝后狀發(fā)酵罐進(jìn)行液體菌種生產(chǎn)時(shí)，可以阻止突然停電時(shí)所造成的外界氣體向發(fā)酵罐的回流；液體菌種培養(yǎng)成功率100％，污染率為0。采用所發(fā)明的移動(dòng)式液體接種壺進(jìn)行接種，免去了菌袋搬動(dòng)至發(fā)酵罐旁邊接種及菌袋接種后搬回培養(yǎng)房所用的勞動(dòng)力成本，解決液體菌種接種時(shí)的運(yùn)輸問(wèn)題，接種效率為1270袋/6人/小時(shí)，菌袋污染率1.5％。

赤靈芝采用固體菌種時(shí)，接種效率為490袋/6人/小時(shí)，菌袋污染率4.2％。采用本發(fā)明的液體菌種后，接種效率為1270袋/6人/小時(shí)，菌袋污染率1.5％，接種效率比對(duì)照提高159.2％；菌袋污染率下降64.2％。

靈芝菌袋生產(chǎn)時(shí)間縮短，生物轉(zhuǎn)化率得到提高。采用本發(fā)明改進(jìn)的發(fā)酵罐、移動(dòng)接種壺、發(fā)酵液配方進(jìn)行液體菌種生產(chǎn)與應(yīng)用，靈芝出菇菌袋生產(chǎn)時(shí)間由原來(lái)的90-100天，縮短到60-65天；赤靈芝第一年生物轉(zhuǎn)化率由25.6％提高到了32.2％，提高幅度為25.8％；黑靈芝第一年生物轉(zhuǎn)化率由22.6％提高到了25.1％，提高幅度為11.1％。

附圖說(shuō)明

圖1是移動(dòng)式接種壺，圖中：1氣磊，2過(guò)濾器，3裝菌液容器，4接種槍，5背帶，6裝液口。

圖2是發(fā)酵罐，圖中：1氣磊，2貯氣罐，3五級(jí)過(guò)濾器，4發(fā)酵罐，5逆止閥，6排氣管，7排氣孔。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1本發(fā)明用于赤靈芝的栽培

(1)培養(yǎng)基配制

培養(yǎng)基a配方：每1000ml培養(yǎng)液中含有土豆200.0g、米糠50.0g、靈芝出菇袋廢菌渣50.0g、平菇子實(shí)體10.0g、磷酸二氫鉀3.0g、硫酸鎂1.5g、蔗糖25.0g，水700-900ml，定容至1000ml；

培養(yǎng)基a制法：將土豆、米糠、靈芝出菇袋廢菌渣、平菇子實(shí)體這4種成分混在一起，攪碎，加水700ml，煮至沸騰，維持沸騰10分鐘，過(guò)濾，去渣，留濾汁；將磷酸二氫鉀、硫酸鎂、蔗糖加入濾液，混合攪拌溶解；加水使最終培養(yǎng)基體積達(dá)1000ml；

培養(yǎng)基b配方：每1000ml培養(yǎng)液中含有土豆100.0g、米糠50.0g、靈芝出菇袋廢菌渣50.0g、平菇子實(shí)體40.0g、黃豆粉5.0g、磷酸二氫鉀6.0g、硫酸鎂2.5g、葡萄糖10.0g、發(fā)酵食品消泡劑(型號(hào)df-1209，廣東德豐消泡劑有限公司生產(chǎn))0.1ml，水700-900ml，定容至1000ml；

培養(yǎng)基b制法：將土豆、米糠、靈芝出菇袋廢菌渣、平菇子實(shí)體、黃豆粉這5種成分混在一起拌均，煮至沸騰，過(guò)濾，去渣留濾液(其中土豆煮前切為薄片，靈芝出菇袋廢菌渣、平菇子實(shí)體煮前先粉碎)將消泡劑、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、葡萄糖加到適量的水中溶解；將濾液和水溶液混合，并加水使最終培養(yǎng)液體積達(dá)到1000ml；

培養(yǎng)基c配方：每1000g培養(yǎng)基中含有棉子殼400.0g、靈芝出菇袋廢菌渣370.0g、甘蔗渣100.0g、玉米芯100.0g、石膏粉10.0g、過(guò)磷酸鈣10.0g、磷酸二氫鉀10.0g，培養(yǎng)基加水600-700ml；

培養(yǎng)基c制法：將棉子殼、靈芝出菇袋廢菌渣、甘蔗渣、玉米芯、石膏粉這5種成分混在一起拌均；將過(guò)磷酸鈣、磷酸二氫鉀在適量的水中溶解；將混合物和水溶液混合，并加水使最終培養(yǎng)基含水量達(dá)到65％左右；

培養(yǎng)基d配方：每1000g培養(yǎng)基中含有相思樹(shù)枝條1000g，培養(yǎng)基加水600-700ml。

培養(yǎng)基d制法：將相思樹(shù)枝條(直徑8-10cm)材料泡水12-15小時(shí)至持水量達(dá)65％左右。

(2)培養(yǎng)基的分裝、消毒滅菌、接種

將培養(yǎng)基a分裝于1000ml的玻璃瓶，每瓶培養(yǎng)液500ml，120℃滅菌60分鐘，滅菌后培養(yǎng)基冷卻至室溫，接入大約1.0cm×1.0cm×1.0cm大小的固體母種，25-28℃室溫下?lián)u床培養(yǎng)，搖床搖速150轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)時(shí)間5天，得到菌絲密度占培養(yǎng)液80％左右的液體母種；

將培養(yǎng)基b分裝于450l的發(fā)酵罐，每罐裝培養(yǎng)液300l，120℃下60分鐘，滅菌后培養(yǎng)液冷卻至室溫，接入大約1000ml液體母種，28℃室溫下培養(yǎng)，維持罐壓0.03-0.05mpa，氣磊壓力表0.15mpa左右，培養(yǎng)時(shí)間5-6天，得到菌絲球密度占80％左右的液體菌種；

將配好的培養(yǎng)基d分裝于40cm×60cm聚丙烯塑料袋中，每袋裝干料約4000g，在培養(yǎng)基d表面加約80g的培養(yǎng)基c，平鋪表面，扎好袋口，在120℃下消毒滅菌240分鐘，然后取出，冷卻至室溫待用；移入接種室接種，每袋接入80ml液體菌種，28℃室溫下培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間60-65天，得到長(zhǎng)滿菌絲的出菇袋；

(3)菌絲后熟作用：將長(zhǎng)滿菌絲的菌袋剝?nèi)ニ芰洗?，放于地面消毒好的大棚或林下，在菌袋表面蓋一層塑料地膜，室溫控制在25-28℃，維持5-7天，期間每天掀開(kāi)薄膜二次以通風(fēng)換氣，每次掀開(kāi)時(shí)間10分鐘。

(4)覆土：在完成后熟作用的菌袋表面覆土，土層2-3cm厚，覆土后澆一次透水，以后每隔3-4天淋一次水，使土層表面濕潤(rùn)即可；

(5)靈芝出菇期管理

菇房溫度28-35℃，空氣濕度80-90％，覆蓋營(yíng)養(yǎng)土的菌袋菇蕾未出土之前，每隔3-4天淋一次水，使土層表面濕潤(rùn)即可；當(dāng)50％以上菌袋都有菇蕾形成后，3天淋一次透水，直至采收；每批采后停止噴水5-7天，以促進(jìn)菌絲恢復(fù)生長(zhǎng)。

結(jié)果

(1)此次栽培試驗(yàn)生產(chǎn)發(fā)酵罐8罐，污染率為0；

(2)靈芝菌袋覆蓋營(yíng)養(yǎng)土15天左右，50％菌袋菇蕾，菇蕾生現(xiàn)20天左右，子實(shí)體成熟，采收；第一次采后約60天左右，第二批菇蕾形成，菇蕾生現(xiàn)20天左右，子實(shí)體成熟，采收；第二次采后約60天左右，第三批菇蕾形成，菇蕾生現(xiàn)20天左右，子實(shí)體成熟，采收。每批次采收后，清理菌塊表面，重新補(bǔ)覆土，放置7天，待菌生恢復(fù)生長(zhǎng)后，同前期一樣重復(fù)管理。第一批菇生物轉(zhuǎn)化率12.8％，第三批菇生物轉(zhuǎn)化率9.9％，第三批菇生物轉(zhuǎn)化率9.5％，共采收三批，第一年總生物轉(zhuǎn)化率32.2％。

(3)第三批采后，菌袋覆土越冬，至第二年3月下旬開(kāi)始，恢復(fù)水份與空氣濕度管理。水分管理約20天左右，菇蕾出現(xiàn)，再過(guò)20天，子實(shí)體成熟，采收；第一次采后約60天左右，第二批菇蕾形成，菇蕾生現(xiàn)20天左右，子實(shí)體成熟，采收；第二次采后約60天左右，第三批菇蕾形成，菇蕾生現(xiàn)20天左右，子實(shí)體成熟，采收。每批次采收后，清理菌塊表面，重新補(bǔ)覆土，放置7天，待菌生恢復(fù)生長(zhǎng)后，同前期一樣重復(fù)管理。第一批菇生物轉(zhuǎn)化率7.1％，第二批菇生物轉(zhuǎn)化率6.5％，第三批菇生物轉(zhuǎn)化率6.8％，共采收三批，第二年總生物轉(zhuǎn)化率20.4％。

二年生物學(xué)轉(zhuǎn)化率共計(jì)52.5％。

實(shí)施例2本發(fā)明用于黑靈芝的栽培

栽培方法參照實(shí)施例1。

結(jié)果

(1)此次栽培試驗(yàn)生產(chǎn)發(fā)酵罐11罐，污染率為0；

(2)靈芝菌袋覆蓋營(yíng)養(yǎng)土20天左右，50％菌袋菇蕾，菇蕾出現(xiàn)25天左右，子實(shí)體成熟，采收；第一次采后約60天左右，第二批菇蕾形成，菇蕾出現(xiàn)25天左右，子實(shí)體成熟，采收；第二次采后約60天左右，第三批菇蕾形成，菇蕾出現(xiàn)25天左右，子實(shí)體成熟，采收；。每批次采收后，清理菌塊表面，重新補(bǔ)覆土，放置7天，待菌生恢復(fù)生長(zhǎng)后，同前期一樣重復(fù)管理。第一批菇生物轉(zhuǎn)化率9.7％，第三批菇生物轉(zhuǎn)化率8.9％，第三批菇生物轉(zhuǎn)化率6.5％，共采收三批，第一年總生物轉(zhuǎn)化率25.1％。

(3)第三批采后，菌袋覆土越冬，至第二年4月中旬開(kāi)始，恢復(fù)水份與空氣濕度管理。水分管理約20天左右，菇蕾出現(xiàn)，再過(guò)25天左右，子實(shí)體成熟，采收；第一次采后約60天左右，第二批菇蕾形成，菇蕾出現(xiàn)25天左右，子實(shí)體成熟，采收；第二次采后約60天左右，第三批菇蕾形成，菇蕾出現(xiàn)25天左右，子實(shí)體成熟，采收。每批次采收后，清理菌塊表面，重新補(bǔ)覆土，放置7天，待菌生恢復(fù)生長(zhǎng)后，同前期一樣重復(fù)管理。第一批菇生物轉(zhuǎn)化率9.3％，第二批菇生物轉(zhuǎn)化率7.1％，第三批菇生物轉(zhuǎn)化率6.2％，共采收三批，第二年總生物轉(zhuǎn)化率22.6％。

二年生物學(xué)轉(zhuǎn)化率共計(jì)47.7％。

實(shí)施例3固體菌種與本發(fā)明液體菌種栽培的對(duì)照

(一)采用固體菌種接種與本發(fā)明液體接種及培養(yǎng)基對(duì)赤靈芝出菇袋菌絲生長(zhǎng)與產(chǎn)量情況(結(jié)果見(jiàn)表1)

常規(guī)段木出菇袋栽培配方(ck)：雜木枝條80.0％、雜木屑12.0％、米糠6％、石膏粉1.0％、過(guò)磷酸鈣1.0％；

本發(fā)明出菇袋培養(yǎng)基栽培配方c/d(同實(shí)施例1)：培養(yǎng)基d：相思樹(shù)枝條100％，每袋附加80g菌絲恢復(fù)生長(zhǎng)輔助培養(yǎng)料(培養(yǎng)基c)。

參照實(shí)施例1做好出菇袋培養(yǎng)基，并裝袋(袋規(guī)格40cm×60cm)、滅菌，然后分別接種固體菌種與液體菌種，菌袋在25-28℃培養(yǎng)室培養(yǎng)。

菌袋菌絲長(zhǎng)滿后，按實(shí)施例1進(jìn)行菌絲后熟作用、覆土及出菇管理。

表1傳統(tǒng)培養(yǎng)基與本發(fā)明培養(yǎng)基c對(duì)赤靈芝出菇袋菌絲生長(zhǎng)的影響比較

表1試驗(yàn)結(jié)果采用鄧肯氏新復(fù)極差(dmrt)法進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)后相同大小寫字母表示在1％和5％水平上差異不顯著(表2、3、4、5同)。表中生物轉(zhuǎn)化率(％)＝子實(shí)體鮮重/菌袋培養(yǎng)料干重×100％。

從表1中可見(jiàn)：在傳統(tǒng)段木袋栽出菇方式下，采用本發(fā)明液體菌種所制做的菌袋，在試驗(yàn)時(shí)間下，其處理菌絲生長(zhǎng)速度明顯優(yōu)于固體菌種所接出菇袋，但生物轉(zhuǎn)化率二者無(wú)明顯差別；在本發(fā)明相思樹(shù)枝條袋栽出菇方式下，采用本發(fā)明液體菌種所制做的菌袋，在試驗(yàn)時(shí)間下，其處理菌絲生長(zhǎng)速度明顯優(yōu)于固體菌種所接出菇袋及傳統(tǒng)段木袋栽的固體菌種與液體菌種處理，且生物轉(zhuǎn)化率在四個(gè)處理中最高。

試驗(yàn)表明，本發(fā)明出菇袋培養(yǎng)基與配合本發(fā)明液體菌種情況下，在縮短赤靈芝菌絲生長(zhǎng)時(shí)間與提高產(chǎn)量方面具有較大的優(yōu)勢(shì)。

(二)采用固體菌種接種與本發(fā)明液體接種及培養(yǎng)基對(duì)黑靈芝出菇袋菌絲生長(zhǎng)與產(chǎn)量情況(結(jié)果見(jiàn)表2)

常規(guī)段木出菇袋栽培配方(ck)：雜木枝條80.0％、雜木屑12.0％、米糠6％、石膏粉1.0％、過(guò)磷酸鈣1.0％；

本發(fā)明出菇袋培養(yǎng)基栽培配方c/d(同實(shí)施例1)：培養(yǎng)基d：相思樹(shù)枝條100％，每袋附加80g菌絲恢復(fù)生長(zhǎng)輔助培養(yǎng)料(培養(yǎng)基c)。

參照實(shí)施例1做好出菇袋培養(yǎng)基，并裝袋(袋規(guī)格40cm×60cm)、滅菌，然后分別接種固體菌種與液體菌種，菌袋在25-28℃培養(yǎng)室培養(yǎng)。

菌袋菌絲長(zhǎng)滿后，按實(shí)施例1進(jìn)行菌絲后熟作用、覆土及出菇管理。

表2傳統(tǒng)培養(yǎng)基與本發(fā)明培養(yǎng)基c對(duì)黑靈芝出菇袋菌絲生長(zhǎng)的影響比較

表1試驗(yàn)結(jié)果采用鄧肯氏新復(fù)極差(dmrt)法進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)后相同大小寫字母表示在1％和5％水平上差異不顯著。表中生物轉(zhuǎn)化率(％)＝子實(shí)體鮮重/菌袋培養(yǎng)料干重×100％。

從表2中可見(jiàn)：在傳統(tǒng)段木袋栽出菇方式下，采用本發(fā)明液體菌種所制做的菌袋，在試驗(yàn)時(shí)間下，其處理菌絲生長(zhǎng)速度明顯優(yōu)于固體菌種所接出菇袋，但生物轉(zhuǎn)化率二者無(wú)明顯差別；在本發(fā)明相思樹(shù)枝條袋栽出菇方式下，采用本發(fā)明液體菌種所制做的菌袋，在試驗(yàn)時(shí)間下，其處理菌絲生長(zhǎng)速度明顯優(yōu)于固體菌種所接出菇袋及傳統(tǒng)段木袋栽的固體菌種與液體菌種處理，且生物轉(zhuǎn)化率在四個(gè)處理中最高。

試驗(yàn)表明，本發(fā)明出菇袋培養(yǎng)基與配合本發(fā)明液體菌種情況下，在黑靈芝縮短菌絲生長(zhǎng)時(shí)間與提高產(chǎn)量方面具有較大的優(yōu)勢(shì)。

實(shí)施例4傳統(tǒng)發(fā)酵罐與本發(fā)明改進(jìn)發(fā)酵罐栽培的對(duì)照

如圖1所示，相對(duì)于傳統(tǒng)發(fā)酵罐，本發(fā)明發(fā)酵罐的排氣管上安裝有二個(gè)逆止閥，以防止菌液發(fā)酵期間突發(fā)停電造成外界不良空氣進(jìn)入所引起的發(fā)酵失敗(污染)，發(fā)酵罐的氣泵處安裝有一個(gè)五級(jí)過(guò)濾裝置的貯氣罐，可以防止菌液發(fā)酵期間突發(fā)停電造成無(wú)氣供應(yīng)導(dǎo)于外界不良空氣進(jìn)入所引起的發(fā)酵失敗及菌絲體缺氧壞死。

(一)采用本發(fā)明改進(jìn)的發(fā)酵罐與未改進(jìn)的發(fā)酵罐(ck)進(jìn)行液體培養(yǎng)時(shí)，液體菌種成品率比較(結(jié)果見(jiàn)表3)

培養(yǎng)基a、b的配制、分裝、消毒滅菌、接種參照實(shí)施例1進(jìn)行。

發(fā)酵罐液體培養(yǎng)基接種培養(yǎng)24小時(shí)后，每隔12小時(shí)從取樣口取樣測(cè)定有無(wú)雜菌感染(培養(yǎng)基涂布法)。

細(xì)菌感染與否采用為酚紅肉湯液體培養(yǎng)基檢測(cè)，其主要成份為：蛋白胨1％，葡萄糖0.3％，牛肉膏0.3％，氯化鈉0.5％，酚紅0.003％。將所測(cè)樣品接入培養(yǎng)基，如有細(xì)菌感染，則培養(yǎng)液變紅；霉菌感染與否采用肉湯固體培養(yǎng)基檢測(cè)，其主要成份為：蛋白胨1％，葡萄糖0.3％，牛肉膏0.3％，氯化鈉0.5％，瓊脂粉6.0g/l。將所測(cè)樣品按劃線接種法接入培養(yǎng)基，30-32℃下培養(yǎng)3天，觀察霉菌感染情況。

表3本發(fā)明改裝發(fā)酵罐與未改裝發(fā)酵罐所培養(yǎng)的菌液成品率對(duì)比(試驗(yàn)品種：赤靈芝)

表4本發(fā)明改裝發(fā)酵罐與未改裝發(fā)酵罐所培養(yǎng)的菌液成品率對(duì)比(試驗(yàn)品種：黑靈芝)

從表3、4中可見(jiàn)：在培養(yǎng)期間持續(xù)供電的條件，原裝發(fā)酵罐與本發(fā)明改進(jìn)發(fā)酵罐生產(chǎn)的菌液質(zhì)量相同，均無(wú)細(xì)菌與霉菌檢出。在培養(yǎng)48小時(shí)后停電20分鐘的條件下，采用本發(fā)明發(fā)酵所生產(chǎn)的液體菌種無(wú)細(xì)菌與霉菌檢出，但是赤靈芝與黑靈芝原裝發(fā)酵罐在培養(yǎng)120小時(shí)后，均全部感染，而且以霉菌感染為主。這說(shuō)明，在突然停電的情況下，原裝發(fā)酵罐排氣管部位有外界空氣進(jìn)入，而將空氣中的霉菌孢子帶到了培養(yǎng)液，而本發(fā)明發(fā)酵罐在排氣管處加了二個(gè)逆止閥，從而阻止了停電期間外界空氣的入侵。

試驗(yàn)表明，本發(fā)明發(fā)酵罐在應(yīng)對(duì)突發(fā)停電所引進(jìn)菌液感染方面比原裝發(fā)酵罐有明顯的優(yōu)勢(shì)。

實(shí)施例5傳統(tǒng)接種與本發(fā)明改進(jìn)的移動(dòng)式接種壺的對(duì)照

如圖2所示，本發(fā)明設(shè)計(jì)的移動(dòng)式接種壺(約30l)主要由通過(guò)耐高壓膠管依次連接的氣磊(含壓力表)、過(guò)濾器、不銹鋼貯菌液容器、接種槍組成，貯菌液容器頂部設(shè)裝液口、側(cè)部設(shè)背帶。

用法：將不銹鋼貯菌液容器、過(guò)濾器(過(guò)濾器孔徑0.2μm)、壓力表、接種槍、耐高壓膠管放在一起做一個(gè)包裝，120℃下滅菌20分鐘，冷卻待用；采用火焰封口法，通過(guò)發(fā)酵罐的排液管，將發(fā)酵好的液體菌種移入移動(dòng)式接種壺；移動(dòng)式接種壺移運(yùn)到放于消毒好的菌袋的接種室，接種。

表5本發(fā)明移動(dòng)式接種壺接種液體菌種與常規(guī)固體菌種接種效率與菌袋成品率比較

從表5中可見(jiàn)：采用本發(fā)明移動(dòng)式接種壺接種液體菌種接種菌袋，接種效率顯著高于使用固體菌種，也明顯的高于發(fā)酵罐排液管加長(zhǎng)接種的方法，同時(shí)菌袋污染率只有0.6％，明顯低于其它處理。因此，本發(fā)明移動(dòng)式接種壺在接種液體菌種上可較大的提高生產(chǎn)效率，并減少菌袋污染率。