(磷酸氫二鈉）溶解于1000 mL蒸餾水中；或 5_15g(示例性地，可以為5 8、88、1(^、128、158等中任意或任意兩者之間的范圍，優(yōu)選為 11. 876g)的Na2HPO4 · 2H20(二水合磷酸氫二鈉）溶解于1000 mL蒸餾水中；
[0046] 之后，取溶液I和溶液II按體積比為I :(1-4)(示例性地，可以為1 :1、1 :2、1 :3、 1 :4等中任意或任意兩者之間的范圍，優(yōu)選為I :1. 5)，混合即得到磷酸緩沖液；
[0047] ②TTC染色液配制：
[0048] TTC染色液是由四唑溶于上述磷酸緩沖液中而配制得到，TTC染色液中四唑的百 分濃度為〇. 1%_1.5% (示例性地，可以為0. 1%、0. 3%、0. 5%、0. 8%、1.2%、1.5%等中任 意或任意兩者之間的范圍，優(yōu)選為0. 2%或1% );
[0049] 例如：1 %濃度的TTC染色液：稱取Ig四唑粉劑溶解于IOOmL的上述磷酸緩沖液中 即可得到；
[0050] 0. 2%濃度的TTC染色液：按照體積量取1份配好的1 %濃度TTC染色液加入4份 上述磷酸緩沖液混合均勻可得；
[0051] 上述四挫（2, 3, 5-Triphenytetrazolium Chloride)粉劑由日本東京化成工業(yè)株 式會社（TOKYO CHEMICAL INDUSTRY CO. ,LTD.)生產(chǎn)。
[0052] (2)浸種：將早熟京茄I號茄子種子（2014年9月新采收，購自北京京研益農(nóng)科 技發(fā)展中心）經(jīng)凈度分析之后，于溫度為15-40°C (示例性地，可以為15°C、25°C、28°C、 35°C、40°C等中任意或任意兩者之間的范圍，優(yōu)選為20°C或30°C )，進(jìn)行于蒸餾水中浸泡處 理3-20小時（示例性地，可以為3小時、5小時、8小時、10小時、15小時、20小時等中任意 或任意兩者之間的范圍，優(yōu)選為4小時或18小時），得到浸泡后的種子；該凈度分析依據(jù)國 家標(biāo)準(zhǔn)《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程凈度分析GB/T 3543. 3-1995》進(jìn)行。
[0053] (3)染色：將浸泡后的種子用濾紙吸干種子表面水分，用解剖刀快速人工去除種 皮后，于避光條件下浸入TTC染色液中進(jìn)行染色處理，時間為15-40小時（示例性地，可以 為15小時、20小時、25小時、30小時、35小時、40小時等中任意或任意兩者之間的范圍，優(yōu) 選為18小時或36小時），溫度為25-40°C (示例性地，可以為25°C、28°C、32°C、37°C、40°C 等中任意或任意兩者之間的范圍，優(yōu)選為30°C或35°C )，得到染色后的種子。
[0054] 上述去除種皮的速度為50-85分鐘/100粒種子（示例性地，可以為50分鐘/100 粒種子、55分鐘/100粒種子、60分鐘/100粒種子、65分鐘/100粒種子、70分鐘/100粒種 子、75分鐘/100粒種子、80分鐘/100粒種子、85分鐘/100粒種子等中任意或任意兩者之 間的范圍，優(yōu)選為54分鐘/100粒種子或57分鐘/100粒種子）；
[0055] 上述染色方法中使用的儀器包括：發(fā)芽箱、發(fā)芽盒（透光）、培養(yǎng)皿、鑷子、解剖刀、 解剖針、標(biāo)簽紙、濾紙、量筒、燒杯、容量瓶（IOOmL)、棕色瓶。
[0056] 上述染色方法以早熟京茄1號種子為材料，采用TTC法測定茄子種子生活力的適 宜方法，快速預(yù)測茄子種子最大發(fā)芽潛力，探索茄子種子生活力四唑測定值與發(fā)芽率之間 的數(shù)量關(guān)系，以驗證評價TTC法用于早熟京茄1號種子生活力預(yù)測的可行性，為茄子種子生 產(chǎn)和銷售提供參考依據(jù)。
[0057] 上述染色方法中，茄子的種子由人工去除種皮后再染色，并選用了適宜的染色條 件，有利于加強茄子種子的染色效果；目前關(guān)于TTC法測定種子的生活力的研宄中，在染色 前的準(zhǔn)備階段，《國際種子檢驗規(guī)程》（International Rules for Seed Testing)中規(guī)范了 茄科番茄屬的番茄種子需要在將種子縱切為兩半，觀察切面染色情況；而茄子種子較小，種 皮表面光滑，不易切開；種子經(jīng)人工剝皮染色之后，縱切較易操作，有利于在體視顯微鏡下 觀察種子的切面染色效果，以區(qū)分種子胚各部分的著色效果，辨別種子的生活力。
[0058] 上述染色方法中，選用了適宜的染色條件，如浸種溫度、浸種時間、染色液濃度、染 色溫度、染色時間等，這些參數(shù)協(xié)同作用，共同提高了染色效果；不同作物活種子中的脫氫 酶含量不同，活性不同，因而需要的染色條件也不同；由于TTC測定法的原理是：利用種子 所吸收的無色TTC，接受了有生活力的種子呼吸過程中胚細(xì)胞里含有的脫氫酶產(chǎn)生的氫，而 變成還原態(tài)的紅色穩(wěn)定不溶于水的三苯基甲腙（TTF);因此，可以按胚組織的染色情況區(qū) 分有生活力的種子和無生活力的種子。
[0059] 下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于本發(fā)明而不 用于限制本發(fā)明的范圍。對外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對本發(fā) 明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
[0060] 實施例1 :
[0061] 本實施例的TTC染色液的配制方法包括以下步驟：
[0062] (1)磷酸緩沖液的配制：
[0063] 溶液I :稱取9. 078g KH2PO4溶解于1000 mL蒸餾水中；
[0064] 溶液 II :稱取 9. 472g Na2HPO4或 11. 876g Na 2ΗΡ04 ·2Η20 溶解于 1000 mL 蒸餾水中；
[0065] 然后按照體積比取溶液I :1份和溶液II :1. 5份混合即成；
[0066] (2)稱再取Ig四唑粉劑溶解于IOOmL的上述磷酸緩沖液中，即可得濃度為1 %的 TTC染色液；
[0067] 本實施例的檢測方法包括以下步驟：
[0068] 對供試的早熟京前1號種子經(jīng)凈度分析之后，在20°C恒溫浸種18h ;浸種結(jié)束后， 取出種子，用濾紙吸干種子表面水分，快速人工去皮（速度為54分鐘/100粒種子）后，進(jìn) 行選用四唑的百分濃度為1%的TTC染色液在30°C避光染色36h，得到染色后的種子。
[0069] 實施例2 :
[0070] 本實施例的TTC染色液的配制方法包括以下步驟：
[0071] (1)磷酸緩沖液的配制：
[0072] 溶液I :稱取9. 078g KH2PO4溶解于1000 mL蒸餾水中；
[0073] 溶液 II :稱取 9. 472g 似2冊04或 11. 876g Na 2ΗΡ04 ·2Η20 溶解于 1000 mL 蒸餾水中；
[0074] 然后按照體積比取溶液I :1份和溶液II :1. 5份混合即成；
[0075] (2)稱再取Ig四唑粉劑溶解于IOOmL的上述磷酸緩沖液中，即可得濃度為1%的 TTC染色液；
[0076] 本實施例的檢測方法包括以下步驟：
[0077] 對供試的早熟京茄1號種子經(jīng)凈度分析之后，在20°C恒溫浸種18h ;浸種結(jié)束后， 取出種子，用濾紙吸干種子表面水分，快速人工去皮（速度為54分鐘/100粒種子）后，進(jìn) 行選用四唑的百分濃度為1%的TTC染色液在35°C避光染色18h，得到染色后的種子。
[0078] 實施例3 :
[0079] 本實施例的TTC染色液的配制方法包括以下步驟：
[0080] (1)磷酸緩沖液的配制：
[0081] 溶液I :稱取9. 078g KH2PO4溶解于1000 mL蒸餾水中；
[0082] 溶液 II :稱取 9. 472g 似2冊04或 11. 876g Na 2ΗΡ04 ·2Η20 溶解于 1000 mL 蒸餾水中；
[0083] 然后按照體積比取溶液I :1份和溶液II :1. 5份混合即成；
[0084] (2)稱再取Ig四唑粉劑溶解于IOOmL的上述磷酸緩沖液中，即可得濃度為1 %的 TTC染色液；
[0085] 本實施例的檢測方法包括以下步驟：
[0086] 對供試的早熟京前1號種子經(jīng)凈度分析之后，在20°C恒溫浸種18h ;浸種結(jié)束后， 取出種子，用濾紙吸干種子表面水分，快速人工去皮（速度為54分鐘/100粒種子）后，進(jìn) 行選用四唑的百分濃度為1%的TTC染色液在35°C避光染色36h，得到染色后的種子。
[0087] 實施例4 :
[0088] 本實施例的TTC染色液的配制方法包括以下步驟：
[0089] (1)磷酸緩沖液的配制：
[0090] 溶液I :稱取9. 078g KH2PO4溶解于1000 mL蒸餾水中；
[0091] 溶液 II :稱取 9. 472g 似2冊04或 11. 876g Na 2ΗΡ04 ·2Η20 溶解于 1000 mL 蒸餾水中；
[0092] 然后按照體積比取溶液I :1份和溶液II :1. 5份混合即成；
[0093] (2)稱再取Ig四唑粉劑溶解于IOOmL的上述磷酸緩沖液中，即可得濃度為1 %的 TTC染色液；
[0094] 本實施例的檢測方法包括以下步驟：
[0095] 對供試的早熟京茄1號種子經(jīng)凈度分析之后，在30°C恒溫浸種4h ;浸種結(jié)束后，取 出種子，用濾紙吸干種子表面水分，快速人工去皮（速度為57分鐘/100粒種子）后，進(jìn)行 選用四唑的百分濃度為1%的TTC染色液在30°C避光染色36h，得到染色后的種子。
[0096] 實施例5 :
[0097] 本實施例的TTC染色液的配制方法包括以下步驟：
[0098] (1)磷酸緩沖液的配制：
[0099] 溶液I :稱取9. 078g KH2PO4溶解于1000 mL蒸餾水中；
[0100] 溶液 II :稱取 9. 472g 似2冊04或 11. 876g Na 2ΗΡ04 ·2Η20 溶解于 1000 mL 蒸餾水中；
[0101] 然后按照體積比取溶液I :1份和溶液II :1. 5份混合即成；
[0102] (2)稱再取Ig四唑粉劑溶解于IOOmL的上述磷酸緩沖液中，即可得濃度為1%的 TTC染色液；
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