一種三七組織培養(yǎng)育苗方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中草藥材栽培技術(shù)，具體涉及一種三七育苗的方法，尤其是三七的組織培養(yǎng)育苗方法，屬于中藥材繁殖栽培技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]三七，拉丁名為:Panaxnotoginseng (Burk.)F.H.Chen ex G.Y.WuetK.M.Feng,也稱田七，為五加科多年生草本植物。以根、根狀莖入藥，生品能散瘀止血，消腫鎮(zhèn)痛，治咯血、吐血、衄血、便血、子宮脫垂、胸腹刺痛、外傷出血、跌打腫痛；熟品能補(bǔ)血活血，治失血、貧血?；ā⑷~也能作藥用，花有清熱、平肝、降壓的作用。據(jù)現(xiàn)代臨床新用，三七亦能治療重癥肝炎、高血脂病、冠心病、上消化道出血、顱腦外傷、眼前房出血，并有防癌抗癌作用。
[0003]三七是名貴中藥材，也是我國傳統(tǒng)常用中藥材，除供國內(nèi)藥用外，還是我國大宗出口創(chuàng)匯產(chǎn)品之一，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥工業(yè)、日用化工、食品工業(yè)和美容化妝品工業(yè)，現(xiàn)全國年需要量約420萬千克，還出口 180萬千克，隨著醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展和人們生活水平的提高，三七的需要量還要增加，可大力發(fā)展三七種植。而開展三七人工種植，首先要解決三七育苗問題，現(xiàn)在人們種植三七主要用種子繁殖，用實(shí)生苗栽培，它的缺陷是遺傳性狀不穩(wěn)定，成苗率低，移栽后的三七生長緩慢，易染病，產(chǎn)量不高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]發(fā)明目的:本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中三七栽培出現(xiàn)生長緩慢，易染病，產(chǎn)量不高的問題，提供一種組織培養(yǎng)育苗方法，提高三七育苗成苗率，而且能保持母體優(yōu)良性狀，移栽后生長快，產(chǎn)量高，可大面積進(jìn)行三七人工栽培。
[0005]技術(shù)方案:本發(fā)明所述的一種三七組織培養(yǎng)育苗方法，具體包括以下步驟:
1.采種:選3年生、健壯、無病蟲害的三七植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成熟，即可采種。
[0006]2.無菌苗的培養(yǎng):將三七種子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗3?5次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照下培養(yǎng)。
[0007]3.誘導(dǎo)培養(yǎng)基:以MS為基本培養(yǎng)基，加入不同濃度的植物激素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，植物激素用芐基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，芐基嘌呤(BA)濃度為1.0?2.5mg/L，優(yōu)選為
2.0mg/L，奈乙酸(NAA)濃度為0.1?0.3mg/L，優(yōu)選為0.2mg/L，同時加入2.5%的蔗糖和
0.7%的瓊脂，培養(yǎng)基溫度保持24°C?26 °C，PH值5.9?6.2。
[0008]4.叢生芽誘導(dǎo):當(dāng)步驟2培養(yǎng)的無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米長的頂芽莖段，接入誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基培養(yǎng)28天后即有叢生芽形成。
[0009]5.叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導(dǎo)50天后，平均高達(dá)3.5?4.5厘米時，將叢生芽切成3芽一簇，轉(zhuǎn)至另一誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基，25天?30天后，每簇增殖至45?50個叢生芽。
[0010]6.誘導(dǎo)生根:當(dāng)繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉(zhuǎn)到新的誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，18天后基部切口開始分化出根。
[0011]7.試管苗的移栽:將發(fā)育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培養(yǎng)基，在有75%?80%遮蔭度的大棚內(nèi)，移栽到苗床或營養(yǎng)杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常規(guī)管理。
[0012]有益效果:本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果是:
本發(fā)明的三七育苗方法，取材方便，叢生芽誘導(dǎo)率達(dá)60%?85%，成苗達(dá)90%以上，可以滿足人工大量栽培的需要，而且培育出的三七苗能保持母體優(yōu)良性狀，移栽后生長快，產(chǎn)量高，移栽后2?3年可收獲，比傳統(tǒng)栽培時間縮短I年左右，每畝產(chǎn)田七干品650千克，在同等管理條件下比傳統(tǒng)栽培產(chǎn)量提高30%。
【具體實(shí)施方式】
[0013]下面結(jié)合具體實(shí)施事例對本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0014]實(shí)施例1:一種三七組織培養(yǎng)育苗，其具體步驟如下:
1.采種:選3年生、健壯、無病蟲害的三七植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成熟，即可采種；
2.無菌苗的培養(yǎng):將三七種子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗3次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照下培養(yǎng);
3.誘導(dǎo)培養(yǎng)基:以MS為基本培養(yǎng)基，加入植物激素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，植物激素用芐基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，芐基嘌呤(BA)濃度為1.0/L，奈乙酸(NAA)濃度為0.lmg/L，同時加入2.5%的蔗糖和0.7%的瓊脂，培養(yǎng)基溫度保持24°C?26°C，PH值5.9?6.2 ;
4.叢生芽誘導(dǎo):當(dāng)步驟2培養(yǎng)的無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米長的頂芽莖段，接入誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基培養(yǎng)28天后即有叢生芽形成，叢生芽誘導(dǎo)率為50% ;
5.叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導(dǎo)50天后，平均高達(dá)3.5?4.5厘米時，將叢生芽切成3芽一簇，轉(zhuǎn)至另一誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基，25天?30天后，每簇增殖至45?50個叢生芽；
6.誘導(dǎo)生根:當(dāng)繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉(zhuǎn)到新的誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，18天后基部切口開始分化出根；
7.試管苗的移栽:將發(fā)育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培養(yǎng)基，在有75%遮蔭度的大棚內(nèi)，移栽到苗床或營養(yǎng)杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常規(guī)管理。
[0015]實(shí)施例2:—種三七組織培養(yǎng)育苗，其具體步驟如下:
1.采種:選3年生、健壯、無病蟲害的三七植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成熟，即可采種；
2.無菌苗的培養(yǎng):將三七種子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗4次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照下培養(yǎng);
3.誘導(dǎo)培養(yǎng)基:以MS為基本培養(yǎng)基，加入不同濃度的植物激素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，植物激素用芐基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，芐基嘌呤(BA)濃度為2.0mg/L，奈乙酸(NAA)濃度為0.2mg/L，同時加入2.5%的蔗糖和0.7%的瓊脂，培養(yǎng)基溫度保持24°C?26°C，PH值5.9?6.2 ；
4.叢生芽誘導(dǎo):當(dāng)步驟2培養(yǎng)的無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米長的頂芽莖段，接入誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基培養(yǎng)28天后即有叢生芽形成，叢生芽誘導(dǎo)率為85% ;
5.叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導(dǎo)50天后，平均高達(dá)3.5?4.5厘米時，將叢生芽切成3芽一簇，轉(zhuǎn)至另一誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基，25天?30天后，每簇增殖至45?50個叢生芽；
6.誘導(dǎo)生根:當(dāng)繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉(zhuǎn)到新的誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，18天后基部切口開始分化出根；
7.試管苗的移栽:將發(fā)育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培養(yǎng)基，在有77%遮蔭度的大棚內(nèi)，移栽到苗床或營養(yǎng)杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常規(guī)管理。
[0016]實(shí)施例3:—種三七組織培養(yǎng)育苗，其具體步驟如下:
1.采種:選3年生、健壯、無病蟲害的三七植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成熟，即可采種；
2.無菌苗的培養(yǎng):將三七種子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗5次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照下培養(yǎng);
3.誘導(dǎo)培養(yǎng)基:以MS為基本培養(yǎng)基，加入不同濃度的植物激素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，植物激素用芐基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，芐基嘌呤(BA)濃度為2.5mg/L，奈乙酸(NAA)濃度為0.3mg/L，同時加入2.5%的蔗糖和0.7%的瓊脂，培養(yǎng)基溫度保持24°C?26°C，PH值5.9?6.2 ；
4.叢生芽誘導(dǎo):當(dāng)步驟2培養(yǎng)的無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米長的頂芽莖段，接入誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基培養(yǎng)28天后即有叢生芽形成，叢生芽誘導(dǎo)率為67% ;
5.叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導(dǎo)50天后，平均高達(dá)3.5?4.5厘米時，將叢生芽切成3芽一簇，轉(zhuǎn)至另一誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基，25天?30天后，每簇增殖至45?50個叢生芽；
6.誘導(dǎo)生根:當(dāng)繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉(zhuǎn)到新的誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，18天后基部切口開始分化出根；
7.試管苗的移栽:將發(fā)育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培養(yǎng)基，在有80%遮蔭度的大棚內(nèi)，移栽到苗床或營養(yǎng)杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常規(guī)管理。
【主權(quán)項】
1.一種三七組織培養(yǎng)育苗方法，其特征在于包括以下步驟: (1)采種:選3年生、健壯、無病蟲害的三七植株作采種母株，每年霜降節(jié)氣過后，種子成熟，即可采種； (2)無菌苗的培養(yǎng):將三七種子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒，后在超凈工作臺上用無菌水浸洗3?5次，每次浸洗3分鐘，然后將種子播種于培養(yǎng)基，在室內(nèi)自然散射光照下培養(yǎng); (3)誘導(dǎo)培養(yǎng)基:以MS為基本培養(yǎng)基，加入植物激素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，植物激素用芐基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA)，同時加入2.5%的蔗糖和0.7%的瓊脂，培養(yǎng)基溫度保持24°C?26°C，PH 值 5.9 ?6.2 ; (4)叢生芽誘導(dǎo)，當(dāng)無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2.6?2.9厘米長的頂芽莖段，接入誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基培養(yǎng)叢生芽； (5)叢生芽繼代增殖，叢生芽誘導(dǎo)后，平均高達(dá)3.5?4.5厘米時，將叢生芽切成3芽一簇，轉(zhuǎn)至另一誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基進(jìn)行繼代增殖； (6)誘導(dǎo)生根，當(dāng)繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉(zhuǎn)到新的誘導(dǎo)過的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根； (7)試管苗的移栽，將發(fā)育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗3?4天后取出小苗，用清水洗去根部了培養(yǎng)基，在有75%?80%遮蔭度的大棚內(nèi)，移栽到苗床或營養(yǎng)杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常規(guī)管理。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三七組織培養(yǎng)育苗方法，其特征在于所述的步驟(2)三七種子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒的時間為15分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三七組織培養(yǎng)育苗方法，其特征在于所述的步驟(3)的植物激素芐基嘌呤(BA)濃度為1.0?2.5mg/L，奈乙酸(NAA)濃度為0.1?0.3mg/L。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種三七組織培養(yǎng)育苗方法，屬于中藥材繁殖栽培技術(shù)領(lǐng)域，有效解決了三七育苗遺傳性狀不穩(wěn)定，成苗率低，移栽后的三七生長緩慢，易染病，產(chǎn)量不高的問題，具體包括采種、培養(yǎng)無菌苗、誘導(dǎo)培養(yǎng)基、誘導(dǎo)叢生芽、叢生芽繼代增殖、誘導(dǎo)生根、試管苗的移栽等具體步驟，其有益效果是：具有取材方便，叢生芽誘導(dǎo)率達(dá)60%～85%，成苗達(dá)90%以上，可以滿足人工大量栽培的需要，而且培育出的三七苗能保持母體優(yōu)良性狀，移栽后生長快，產(chǎn)量高，移栽后2～3年可收獲，比傳統(tǒng)栽培時間縮短1年左右，每畝產(chǎn)田七干品650千克，在同等管理條件下比傳統(tǒng)栽培產(chǎn)量提高30%。
【IPC分類】A01H4-00
【公開號】CN104813938
【申請?zhí)枴緾N201510243354
【發(fā)明人】黃振忠
【申請人】黃振忠
【公開日】2015年8月5日
【申請日】2015年5月14日