專利名稱：抗變態(tài)反應(yīng)劑、含有它的藥品、食品或化妝品及它們的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由番茄產(chǎn)生的抗變態(tài)劑、組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑及它們的制備方法，更具體地說(shuō)是涉及有效成分為柑桔素查耳酮或咖啡酸衍生物的抗變態(tài)反應(yīng)劑、組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑、含有它們的藥品、食品或化妝品及它們的制備方法。
在該I型變態(tài)反應(yīng)中，由于抗原的侵入而產(chǎn)生的IgE抗體與肥大細(xì)胞上的Fc受體結(jié)合，若再次侵入的抗原與該IgE抗體結(jié)合，肥大細(xì)胞內(nèi)顆粒就釋放組胺或白三烯等化學(xué)遞質(zhì)(化學(xué)物質(zhì))，而直接或間接的引起伴有哮喘或鼻炎、噴囔、稀鼻涕、眼癢等癥狀的急性炎癥反應(yīng)。所以為防止I型變態(tài)反應(yīng)，只要阻斷所述路徑的任何一個(gè)就可以。
以往，對(duì)于具有抗變態(tài)反應(yīng)作用的藥物成分進(jìn)行了很多研究，并且已經(jīng)報(bào)道了很多具有該作用的合成類化合物。例如具有抑制肥大細(xì)胞釋放組胺活性或抑制巨噬細(xì)胞釋放白三烯活性(也稱為白三烯產(chǎn)生抑制)的成分，能夠有望具有作為抗變態(tài)反應(yīng)的效果。但是具有抗變態(tài)反應(yīng)活性的天然物質(zhì)還很少。進(jìn)一步具有充分的抗變態(tài)反應(yīng)活性的安全的天然物質(zhì)就幾乎沒(méi)有。為此，在醫(yī)療領(lǐng)域人們就特別期望對(duì)具有充分的抗變態(tài)反應(yīng)活性的化合物的探索和對(duì)抗變態(tài)反應(yīng)劑的開(kāi)發(fā)。
本發(fā)明的目的在于提供新型的抗變態(tài)反應(yīng)劑、含有它的藥品、食品或化妝品以及其制備方法。
本發(fā)明人等將抑制組胺釋放活性作為變態(tài)反應(yīng)性疾病的有效治療指標(biāo)，為探索新型抗變態(tài)反應(yīng)劑進(jìn)行了銳意的研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在番茄中含有抗變態(tài)反應(yīng)活性成分，以及具有抗變態(tài)反應(yīng)活性的組份主要存在于番茄的果皮中。另外，本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)具有所述抗變態(tài)反應(yīng)活性的組份為柑桔素查耳酮及咖啡酸衍生物的三咖啡酰基奎尼酸和二咖啡?；牾？崴幔鼈兙哂幸种平M胺的釋放活性以及作為抗變態(tài)反應(yīng)劑有效。進(jìn)而發(fā)現(xiàn)這些化合物的抗變態(tài)反應(yīng)活性也比已知的具有該活性的其它咖啡酸衍生物(咖啡酸或二咖啡酰基奎尼酸)的活性強(qiáng)。根據(jù)這些發(fā)現(xiàn)完成了本發(fā)明。
(1)有效成分為番茄提取物的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
(2)有效成分為番茄提取物的組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑。
(3)有效成分為番茄果皮的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
(4)有效成分為柑桔素查耳酮或其衍生物的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
(5)有效成分為柑桔素查耳酮或其衍生物的組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑。
(6)有效成分為三咖啡?；崴峄蚱溲苌锏目棺儜B(tài)反應(yīng)劑。
(7)有效成分為二咖啡酰基琥珀酰奎尼酸或其衍生物的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
(8)有效成分為三咖啡?；崴?、二咖啡?；牾？崴峄蚱溲苌镏腥魏我环N的組胺釋放抑制劑。
(9)有效成分為三咖啡?；崴峄蚱溲苌锏陌兹┽尫乓种苿?。
(10)含有所述(1)、(3)、(4)、(6)或(7)中記載的抗變態(tài)反應(yīng)劑為特征的藥品、食品或化妝品。
(11) 含有所述(2)、(5)、(8)或(9)中記載的組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑為特征的藥品、食品或化妝品。
(12)一種抗變態(tài)反應(yīng)劑的制備方法，其特征在于用溶劑提取原料番茄。
圖2是表示以實(shí)施例1～3制備的組胺釋放抑制劑成分(柑桔素查耳酮)的13C-NMR譜。
圖3是表示以實(shí)施例1～3制備的組胺釋放抑制劑成分(柑桔素查耳酮)的LC-MS。
圖4是表示實(shí)施例1～4中所述具有組胺釋放抑制活性的化合物(三咖啡酰基奎尼酸)的1H-NMR譜。
圖5是表示實(shí)施例1～4中所述具有組胺釋放抑制活性的化合物(三咖啡酰基奎尼酸)的13C-NMR譜。
圖6是表示實(shí)施例1～4中所述具有組胺釋放抑制活性的化合物(三咖啡?；崴?LC-MS。
圖7是表示實(shí)施例2(2)中所述組胺釋放抑制活性的測(cè)定結(jié)果。
圖8是表示在小鼠耳廓浮腫模型中柑桔素查耳酮顯示過(guò)敏性抑制作用的圖。
圖9是表示在小鼠耳廓浮腫模型中三咖啡?；崴犸@示過(guò)敏性抑制作用的圖。


圖10是表示在小鼠耳廓浮腫模型中經(jīng)口給藥時(shí)三咖啡?；崴犸@示過(guò)敏性抑制作用的圖。
1.有效成分為番茄提取物的抗變態(tài)反應(yīng)劑本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，其特征在于有效成分為番茄提取物。番茄提取物，例如可以通過(guò)用適當(dāng)?shù)娜軇┨崛≡戏讯苽洹?br> 作為用于提取的原料番茄，除整個(gè)植物體外，還可以是果實(shí)、果皮、果汁等任意部位。特別優(yōu)選的部位是含有具有抗變態(tài)反應(yīng)活性成分(以下[抗變態(tài)反應(yīng)活性成分])較多的果皮。另外，原料番茄，也可以是將番茄果實(shí)榨汁后所得的榨汁殘?jiān)Ｕブ瓪堅(jiān)驗(yàn)楹ぽ^多，所以是特別優(yōu)選的。原料番茄的品種無(wú)特殊限定，可以使用一般流通的生食用、加工用的品種。
原料番茄含水分較多時(shí)，為了能夠更好的操作，優(yōu)選使用干燥后的。具體地說(shuō)，例如，優(yōu)選在50～150℃下用太陽(yáng)光或熱風(fēng)干燥1～24小時(shí)，減少含水量。另外，為提高提取效率，原料優(yōu)選粉碎后使用。對(duì)于粉碎方法無(wú)特殊限制，可以舉出利用乳缽粉碎方法；利用旋轉(zhuǎn)攪拌器、高速攪拌器等的粉碎機(jī)粉碎地方法。原料番茄優(yōu)選粉碎到16目以下。
用于高濃度提取抗變態(tài)反應(yīng)活性成分的優(yōu)選的原料番茄，是將番茄果皮或番茄榨汁殘?jiān)稍锖筮M(jìn)行粉碎。
用于提取的溶劑，只要是能夠提取出抗變態(tài)反應(yīng)活性成分的溶劑，就沒(méi)有特殊限制，可以使用普通的極性溶劑、兩性溶劑等。作為溶劑，例如可以使用有機(jī)溶劑、含有有機(jī)溶劑的溶劑、或水和有機(jī)溶劑的混合液。
所謂有機(jī)溶劑，例如除低級(jí)醇(具體的有乙醇、甲醇、丙醇、丁醇)、醚類(具體的有乙醚)、鹵代烴類(具體的有氯仿)、腈類(具體的有乙腈)、酯類(具體的有乙酸乙酯)、酮類(丙酮)等外，還可以是己烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺等。從操作性等方面來(lái)看，作為有機(jī)溶劑優(yōu)選乙醇、甲醇、或乙酸乙酯。有機(jī)溶劑也可以將兩種以上溶劑混合使用。
從抗變態(tài)反應(yīng)活性成分的提取效率來(lái)看，作為溶劑特別優(yōu)選有機(jī)溶劑和水的混合溶劑。水和有機(jī)溶劑的混合比例沒(méi)有限定，但優(yōu)選有機(jī)溶劑為20％以上，特別優(yōu)選為40～80％。
番茄提取物，若從最終向食品或化妝品等中添加這一點(diǎn)來(lái)考慮，作為有機(jī)溶劑優(yōu)選使用乙醇。此時(shí)，除100％乙醇外，還可以使用含水醇，優(yōu)選使用40～90％乙醇溶液，特別優(yōu)選50～70％乙醇溶液。
提取時(shí)的原料番茄和溶劑的混合比例沒(méi)有特殊限定，相對(duì)于原料番茄1，溶劑為2～10重量倍，從提取操作、效率方面來(lái)看，特別優(yōu)選5～10重量倍。提取溫度，設(shè)為室溫、常壓下的溶劑沸點(diǎn)范圍內(nèi)時(shí)方便，特別優(yōu)選邊加熱回流邊提取。溶劑為60％乙醇時(shí)，提取溫度優(yōu)選40～70℃的范圍，提取時(shí)間優(yōu)選30分鐘～24小時(shí)的范圍。
另外，用含有有機(jī)溶劑的溶劑提取前，可以先通過(guò)用水或熱水提取原料番茄，除去水溶性雜質(zhì)。此時(shí)，回收水提取后的殘?jiān)?，以用于溶劑提取?br> 根據(jù)提取工藝，可以使抗變態(tài)反應(yīng)活性成分溶解于溶劑中。從通過(guò)含有有機(jī)溶劑、特別是含有醇的溶劑能夠高效提取抗變態(tài)反應(yīng)活性成分這一點(diǎn)來(lái)看，可以推斷該成分在番茄的醇溶成分中含量特別多。
為提高提取效率，提取工藝優(yōu)選多次反復(fù)提取。提取后，抽濾，回收含有提取物的溶劑。通過(guò)以上操作，可以獲得浸膏狀的番茄提取物。另外，根據(jù)需要，可以通過(guò)合成吸附劑或離子交換樹(shù)脂進(jìn)行進(jìn)一步的精制。
所得的番茄提取物，即使是含有溶劑的狀態(tài)或從其濃縮物、提取物中除去溶劑后的干燥物等各種狀態(tài)，都可以作為抗變態(tài)反應(yīng)劑使用。但是，從保存性、有機(jī)溶劑的安全性觀點(diǎn)來(lái)看，番茄的提取物優(yōu)選制作為干燥物的狀態(tài)。
溶劑提取或通過(guò)樹(shù)脂精制操作的各個(gè)階段所得組份的抗變態(tài)反應(yīng)活性，可以以抑制肥大細(xì)胞釋放組胺的活性為指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定方法記載在實(shí)施例2中。
2.有效成分為番茄果皮等的抗變態(tài)反應(yīng)劑在另外的實(shí)施例中，本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，特征是有效成分為番茄果皮。其原因在于在原料番茄的果皮中富含抗變態(tài)反應(yīng)活性成分。本發(fā)明人，將番茄榨汁殘?jiān)謩e分為果皮殘?jiān)头N子殘?jiān)瑢?duì)所得的同量提取物，測(cè)定了它們的抗變態(tài)反應(yīng)活性。結(jié)果表明來(lái)自果皮的提取物的抗變態(tài)反應(yīng)活性，約為來(lái)自種子的提取物活性的5～10倍。
所以，番茄果皮，作為抗變態(tài)反應(yīng)劑非常有效。這里所說(shuō)的果皮，是指例如番茄果實(shí)的干燥物或干燥后粉碎物、榨汁殘?jiān)?、榨汁殘?jiān)母稍镂锘蚋稍锖蟮姆鬯槲锏?。番茄果皮，為了使其容易作為抗變態(tài)反應(yīng)劑使用，優(yōu)選制作為顆粒狀、粉末狀、片狀或塊狀等。有效成分為番茄果皮的抗變態(tài)反應(yīng)劑，可以含有果皮以外的其它成分。所說(shuō)的其它成分，例如為固體輔料、液體輔料、油性輔料、防腐殺菌劑、香料、矯味劑、著色劑等。
另外，在有效成分為番茄果皮的抗變態(tài)反應(yīng)劑中可以含有果皮以外的番茄組織，例如果肉、種子等。
作為所述活性成分，本發(fā)明人等鑒定為以下成分。
即，本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，有效成分為柑桔素查耳酮或其衍生物。柑桔素查耳酮(2’，4’，6’，4-Tetrahydroxychalcone)為下述結(jié)構(gòu)式(I)所示的化合物。 另外，本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，有效成分為三咖啡?；崴峄蚱溲苌铩ＨХ弱；崴釣橄率鼋Y(jié)構(gòu)式(II)所示的化合物。 式中R1、R2、R3及R4中，一個(gè)表示氫原子、其余三個(gè)表示相當(dāng)于下述結(jié)構(gòu)式(III)的咖啡?；?。
結(jié)構(gòu)式(III) 只要具有抗變態(tài)反應(yīng)活性，對(duì)于三咖啡?；崴嶂锌Х弱；奈恢脹](méi)有特殊限制，R1～R4中的其中三個(gè)可以是咖啡?；Ｗ鳛槟軌蚴褂玫娜Х弱；崴?，例如可以舉出實(shí)施例記載的3，4，5-三咖啡酰基奎尼酸。該化合物如下述結(jié)構(gòu)式(IV)所示。結(jié)構(gòu)式(IV) 另外，在別的實(shí)施例中，本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，有效成分為二咖啡酰基琥珀?？崴峄蚱溲苌?。二咖啡?；牾？崴崛缦率鼋Y(jié)構(gòu)式(V)所示。
結(jié)構(gòu)式(V) 式中R5、R6、R7以及R8中，一個(gè)表示氫原子、一個(gè)表示相當(dāng)于結(jié)構(gòu)式(VI)的琥珀?；?，兩個(gè)表示相當(dāng)于所述結(jié)構(gòu)式(III)的咖啡?；?。
結(jié)構(gòu)式(VI) 只要有抗變態(tài)反應(yīng)活性，二咖啡酰基琥珀?？崴嶂锌Х弱；蜱牾；奈恢脽o(wú)特殊限制，R5～及R8中兩個(gè)可以為咖啡?；?，一個(gè)可以為琥珀?；?。作為能夠使用的二咖啡?；牾？崴?，例如可以舉出3，5-二咖啡?；?4-琥珀?；崴帷Ｔ摶衔锶缦率鼋Y(jié)構(gòu)式(VII)所示。
結(jié)構(gòu)式(VII) 這些化合物為下述結(jié)構(gòu)式(VIII)所示咖啡酸中的一種衍生物。結(jié)構(gòu)式(VIII) 已知咖啡酸具有抗變態(tài)反應(yīng)作用。另外，作為具有抗變態(tài)反應(yīng)作用的咖啡酸衍生物，已知的有氯櫞酸、二咖啡?；崴?、氯櫞酸甲酯。(特開(kāi)昭60-192555號(hào))。
如實(shí)施例所示，柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴岷投Х弱；牾？崴幔@示很強(qiáng)的抑制肥大細(xì)胞釋放組胺的活性。另外，其活性，比咖啡酸或二咖啡酰基奎尼酸強(qiáng)。所以，有效成分為這些化合物的抗變態(tài)反應(yīng)劑，作為各種變態(tài)反應(yīng)性疾病預(yù)防治療劑、抗炎劑或組胺釋放抑制劑是有效的。所說(shuō)的變態(tài)反應(yīng)性疾病，例如特應(yīng)性皮炎、過(guò)敏性鼻炎、花粉癥、過(guò)敏性哮喘、食物過(guò)敏、炎癥等。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，從I型變態(tài)反應(yīng)中的阻斷肥大細(xì)胞釋放組胺這一點(diǎn)來(lái)看，對(duì)由此引起的特應(yīng)性皮炎、過(guò)敏性鼻炎、花粉癥或過(guò)敏性哮喘等的預(yù)防治療特別有效。
另外，只要具有作為抗變態(tài)反應(yīng)劑的活性，柑桔素查耳酮、三咖啡酰基奎尼酸或二咖啡?；牾？崴幔梢允瞧洳糠纸Y(jié)構(gòu)改變或修飾的衍生物。作為這些衍生物，例如可以舉出藥理上許可的鹽、酯或藥物前體等。
作為藥理上許可的鹽，無(wú)特殊限制，例如可以舉出堿金屬(鈉、鉀等)、堿土類金屬(鎂、鈣等)、它們的氫氧化物或碳酸鹽、堿金屬醇鹽(甲醇鈉、叔丁醇鉀等)的鹽。另外，作為鹽，可以舉出無(wú)機(jī)酸(鹽酸、硫酸、磷酸)或有機(jī)酸(馬來(lái)酸、檸檬酸、富馬酸)加成后的酸加成鹽、進(jìn)一步與胺加成后的鹽、氨基酸的加成鹽等。另外，所述鹽的水合物也包括在所說(shuō)的鹽之內(nèi)。
酯只要是與醇或羧酸通過(guò)酯化反應(yīng)生成的酯，就沒(méi)有特殊限制。作為醇可以舉出甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇等，另外，作為羧酸可以舉出蟻酸、醋酸、乳酸等。
所說(shuō)的藥物前體，是指向生物體給藥后，變化為柑桔素查耳酮、三咖啡酰基奎尼酸或二咖啡?；牾？崴岷蠖哂凶鳛榭棺儜B(tài)反應(yīng)劑作用的化合物。用于改善穩(wěn)定性或吸收性、減小副作用等目的的藥物前體化的化合物也包括在本發(fā)明所說(shuō)的衍生物之內(nèi)。
3.抗變態(tài)反應(yīng)劑的制備方法本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的有效成分的所述番茄提取物、柑桔素查耳酮、三咖啡酰基奎尼酸或二咖啡?；牾？崴?，可以通過(guò)各種方法制備，可以廣泛采用從含有這些化合物的生物體精制的方法、化學(xué)合成方法、半合成方法等。
柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴峄蚨Х弱；牾？崴?，可以從植物，例如柑桔類、蔬菜類，具體的有番茄、春菊，利用含有有機(jī)溶劑的溶劑進(jìn)行提取。從番茄中精制柑桔素查耳酮或三咖啡?；崴釙r(shí)，在番茄果皮或榨汁殘?jiān)屑尤?0倍量的60％乙醇，在60℃的溫水中提取3小時(shí)。因?yàn)槟軌虻玫胶懈探鬯夭槎涂Х弱？崴岬奶崛∥?，所以可以將該提取物供與高壓液相色譜法色譜使用。在取得顯示抑制組胺釋放活性的組份后，確定各組份中化合物的結(jié)構(gòu)。通過(guò)以上方法，可以精制柑桔素查耳酮或咖啡?？崴?。
根據(jù)同樣的方法，可以從冷凍干燥后粉碎的春菊中精制二咖啡?；牾？崴?。
另外，本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，只要含有精制后的有效成分就沒(méi)有限制，也可以是含有柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴峄蚨Х弱；牾？崴岬拇志莆铩?br> 另外，藥理上許可的鹽，可以通過(guò)在柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴峄蚨Х弱；牾？崴嶂信c堿金屬、堿土金屬、堿金屬醇化物、無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸相互作用來(lái)制備。而且，酯可以通過(guò)在酸催化劑存在下，在柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴峄蚨Х弱；牾？崴嶂信c醇或羧酸相互作用來(lái)制備。
4.本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的用途本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，有效成分為番茄提取物或番茄果皮，更具體地說(shuō)是柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴峄蚨Х弱；牾？崴帷Ｈ鐚?shí)施例所示，本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，顯示抑制肥大細(xì)胞釋放組胺或抑制巨嗜細(xì)胞釋放白三烯的活性。所以，本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，作為各種變態(tài)反應(yīng)性疾病的預(yù)防或治療劑、抗炎劑或組胺釋放抑制劑、白三烯釋放抑制劑有效。所說(shuō)的變態(tài)反應(yīng)性疾病，是指例如由于花粉、壁虱、室尖等引起的過(guò)敏性鼻炎、過(guò)敏性皮炎、對(duì)牛奶雞蛋等的特定食物引起的食物過(guò)敏、過(guò)敏性支氣管炎、炎癥等。本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，尤其對(duì)I型變態(tài)反應(yīng)引起的過(guò)敏性疾病的預(yù)防、治療有效。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，作為具有抗變態(tài)反應(yīng)活性、抗炎活性、抑制組胺釋放的活性或抑制白三烯釋放活性的藥品、食品或化妝品，可以直接使用或添加在這些產(chǎn)品中使用。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，可以單獨(dú)的作為藥品、食品或化妝品使用，另外，也可以和其它的抗變態(tài)反應(yīng)劑合用。進(jìn)而，可以將柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴岷投Х弱；牾？崴嶂械闹辽賰煞N的混合物作為本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
A.藥品本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，可以直接的將番茄提取物或番茄果皮、或直接的將所述精制化合物、或通過(guò)將它們與已知的醫(yī)藥用輔料制劑化后作為藥品使用。本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，例如可以做成片劑、顆粒劑、粉劑、糖漿劑等口服劑型或栓劑、外用劑等非口服劑。作為醫(yī)藥用輔料，無(wú)特殊限制，例如，可以舉出固體輔料(淀粉、乳糖、羧甲基纖維素等)、液體輔料(蒸餾水、生理食鹽水、葡萄糖水溶液、乙醇、丙二醇等)、油性輔料(各種動(dòng)植物油、白色凡士林、石蠟等)。
所述藥品，可以用于人和人以外的動(dòng)物(寵物、家畜)。所述藥品的給藥量，可以根據(jù)使用它的患者等的癥狀、性別、年齡進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑O(shè)定，例如成人每日可以服用0.1～1000mg范圍的量。
B.食品本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，可以直接作為具有抗變態(tài)反應(yīng)活性、抗炎活性、組胺釋放抑制活性或白三烯釋放抑制活性的食品使用。另外，可以通過(guò)將本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑添加在例如番茄果汁或番茄果泥中，以使該食品賦予所述活性。
能夠添加的食品，無(wú)特殊限制，可以舉出肉制品、加工蔬菜、家常菜類、乳制品、點(diǎn)心、面包、清涼飲料、果汁飲料、酒類等。對(duì)于食品的本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的混合比例也沒(méi)有限制。
另外，也可以將本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑與其它食品原料混合，做成顆粒狀、粉末狀、片狀或塊狀等，以用于食品原料或保健食品等。所說(shuō)的其它食品原料，例如為糖類、食用蛋白質(zhì)、醇、維生素、增粘多糖、氨基酸、鈣鹽類、色素、香料、防腐劑等。
C.化妝品本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，可以添加在化妝品中，使該化妝品賦予抗變態(tài)反應(yīng)活性、組胺釋放抑制活性或白三烯釋放抑制活性。所說(shuō)的化妝品，無(wú)特殊限定，例如為化妝水、雪花膏、乳液、粉底、口紅、染發(fā)劑、生發(fā)油、生發(fā)劑、牙膏、香波或洗滌劑等。
在調(diào)配化妝品時(shí)，可以將用作植物油等的油脂類、羊毛脂或蜂蠟等的蠟類、烴類、脂肪酸、高級(jí)醇類、各種表面活性劑、色素、香料、維生素類、植物動(dòng)物提取成分、紫外線吸收劑、抗氧化劑、防腐劑等作為普通的化妝品原料使用的物質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)混合后制備。
5.本發(fā)明的組胺釋放抑制劑如實(shí)施例所示，番茄提取物、柑桔素查耳酮、三咖啡酰基奎尼酸和二咖啡?；牾？崴?，由于顯示抑制組胺釋放活性，所以作為組胺釋放抑制劑有效。
所以，所述化合物等，可以直接地或添加在藥品、食品或化妝品中用于預(yù)防治療抑制組胺釋放有效的疾病。所述混合物等，作為藥物的有效成分可以單獨(dú)使用，也可以將兩種以上混合使用。
只要具有作為組胺釋放抑制劑的活性，柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴岷投Х弱；牾？崴幔梢允瞧浣Y(jié)構(gòu)的一部分發(fā)生改變或修飾的衍生物。作為柑桔素查耳酮的衍生物，例如可以舉出藥理上許可的鹽、酯或藥物前體等。關(guān)于衍生物的詳細(xì)內(nèi)容，如同所述抗變態(tài)反應(yīng)劑部分中記載的。
6.本發(fā)明的白三烯釋放抑制劑如實(shí)施例所示，番茄提取物、柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴岷投Х弱；牾？崴幔捎陲@示抑制白三烯釋放活性，所以作為白三烯釋放抑制(也稱為[白三烯產(chǎn)生抑制劑])劑有效。
所以，所述化合物等，可以直接地或添加在藥品、食品或化妝品中用于預(yù)防治療抑制白三烯釋放有效的疾病。所述化合物等，作為藥物的有效成分可以單獨(dú)使用，也可以將兩種以上混合使用。
只要具有作為白三烯釋放抑制劑的活性，柑桔素查耳酮、三咖啡?；崴岷投Х弱；牾？崴?，可以是其結(jié)構(gòu)的一部分發(fā)生改變或修飾的衍生物。作為柑桔素查耳酮的衍生物，例如可以舉出藥理上許可的鹽、酯或藥物前體等。關(guān)于衍生物的詳細(xì)內(nèi)容，如同所述抗變態(tài)反應(yīng)劑部分中記載的。
實(shí)施例以下表示關(guān)于有效成分為番茄提取物的本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的制備方法、組胺釋放抑制試驗(yàn)、以及含有本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的藥品、食品、化妝品的制備實(shí)施例。
實(shí)施例1(實(shí)施例1-1)番茄提取物的制備(1)將干燥的番茄榨汁殘?jiān)?0g用粉碎機(jī)粉碎，加水200ml，一邊60℃加熱回流，一邊進(jìn)行水提取，提取除去雜質(zhì)。然后，回收提取殘?jiān)尤胱鳛槿軇┑?0％乙醇200ml，一邊70℃加熱回流，一邊進(jìn)行再次提取。將所得的提取液過(guò)慮后，減壓濃縮濾液，進(jìn)一步進(jìn)行冷凍干燥，得到番茄提取物粉末812mg(番茄提取物1)。
(2)作為溶劑，使用60％的甲醇，用與所述(1)同樣的方法制備番茄提取物粉末753mg(番茄提取物2)。
(3)作為溶劑，使用60％的乙酸乙酯，用與所述(1)同樣的方法制備番茄提取物粉末625mg(番茄提取物3)。
(實(shí)施例1-2)番茄提取物的制備(1)將番茄漿100g離心分離，回收殘?jiān)?。將所得沉淀物冷凍干燥，之后加?0ml的乙醇提取，減壓干燥后獲得800mg的提取粉末(番茄提取物4)。
(2)將生食用番茄300g用果汁榨漿機(jī)粉碎，離心，回收殘?jiān)?。將所得殘?jiān)鋬龈稍锖螅尤胍掖?50ml提取，減壓干燥后獲得1.94g的提取物(番茄提取物5)。
(實(shí)施例1-3)柑桔素查耳酮的精制將番茄果皮置于60％的乙醇、60℃的溫水中提取2小時(shí)。過(guò)慮后，減壓濃縮慮液，然后用高壓液相色譜法(柱SHISEIDO CAPCELL PAKC18 15mmφ×250mm；流動(dòng)相含有0.1％三氟乙酸的乙腈/水＝40/60)分離，得到組胺釋放抑制成分。對(duì)所述成分用LC-MS、NMR等鑒定。圖1、圖2、圖3分別表示1H-NMR譜、13C-NMR譜、LC-MS。通過(guò)以上譜圖鑒定該化合物為柑桔素查耳酮。另外，對(duì)精制的各個(gè)階段所得的組份，對(duì)其組胺釋放抑制活性，根據(jù)實(shí)施例2的方法進(jìn)行測(cè)定。
(實(shí)施例1-4)三咖啡?；崴岬木茖⒎压ぶ糜?0％的乙醇、60℃的溫水中提取2小時(shí)。過(guò)慮后，減壓濃縮慮液，然后冷凍干燥，得到番茄果皮的提取物。將其溶解在20％的乙醇中，用于YMC凝膠ODS-AM120-S50(YMC Co.Ltd.制)的柱色譜分離，收集30％乙醇溶液的洗脫成分。
進(jìn)一步將其減壓濃縮，用高壓液相色譜法(柱子SHISEIDOCAPCELL PAK C18 15mmφ×250mm；流動(dòng)相含有0.1％三氟乙酸的乙腈/水＝28/72)分離，得到具有組胺釋放抑制活性的混合物。
然后，用LC-MS、NMR鑒定該混合物。圖4、圖5、圖6分別表示1H-NMR譜、13C-NMR譜、LC-MS(日立Science systems、Techno ResearchCenter)。
通過(guò)以上方法鑒定該化合物為3，4，5-三咖啡?；崴?。另外，對(duì)于在精制的各個(gè)階段所得的組份，其組胺釋放抑制活性根據(jù)實(shí)施例2的方法進(jìn)行測(cè)定。
(實(shí)施例1-5)二咖啡?；牾？崴岬木茀⒖嘉墨I(xiàn)(Chuda et.al.，J.Argric.Food Chem.46；1437-1439，1998)中記載的方法，精制二咖啡?；牾？崴?。
首先，在冷凍干燥后粉碎的春菊中加入60％的乙醇，在50℃的溫水中提取兩小時(shí)。過(guò)慮提取液，減壓濃縮，然后用用高壓液相色譜法(柱SHISEIDO CAPCELL PAK C18 15mmφ×250mm；流動(dòng)相含有0.1％三氟乙酸的乙腈/水＝23/77)精制具有組胺釋放抑制活性的混合物。用LC-MS等鑒定該化合物為3，5-二咖啡酰基-4-琥珀?？崴?。
實(shí)施例2抑制大鼠肥大細(xì)胞釋放組胺活性的測(cè)定(1)對(duì)于番茄提取物1～3、柑桔素查耳酮以及三咖啡酰基奎尼酸，用以下方法測(cè)定抑制大鼠肥大細(xì)胞釋放組胺的活性。另外，測(cè)定結(jié)果如表1所示。
將大鼠放血致死后，立即用含有肝素的肥大細(xì)胞用緩沖液(組成0.150M NaCl、3.7mM KCl、3.0mM Na2HHPO4、3.5mM KH2HPO4、0.9mMCaCl2、5.6mM D-glucose、0.1％(w/v)gelatin)從腹腔采集細(xì)胞(生物藥科學(xué)試驗(yàn)講座12炎癥與變態(tài)反應(yīng)II、大內(nèi)和雄編集、廣川書(shū)店、1993年、372頁(yè))。將細(xì)胞清洗后，加入所述含有肝素的肥大細(xì)胞用緩沖液調(diào)配其濃度為2.0×105個(gè)/ml，制成細(xì)胞懸浮液。
另一方面，將番茄提取物3mg溶解于1ml的1％二甲基亞砜(DMSO)中，調(diào)配試樣溶液。另外，將以實(shí)施例1-3所得的柑桔素查耳酮、已知的具有抗變態(tài)反應(yīng)活性的富馬酸ketotifen分別溶解于含有0.15％DMSO(最終濃度)的含肝素肥大細(xì)胞用緩沖液中，進(jìn)一步將以實(shí)施例1-4所得的三咖啡?；崴帷⒁阎木哂锌棺儜B(tài)反應(yīng)活性的咖啡酸分別溶解于含有0.08％乙醇(最終濃度)的含肝素的肥大細(xì)胞用緩沖液中，調(diào)配25～250μg/ml濃度的試樣溶液。
在試樣溶液20μl中加入所述細(xì)胞懸浮液80μl，在37℃下培養(yǎng)10分鐘。然后，加入作為脫顆粒誘發(fā)劑的混合物48/80(5μg/ml)20μl，培養(yǎng)10分鐘。之后用冰冷卻，離心分離(1,500×g、5分、4度)，將上清液中釋放的組胺用設(shè)有熒光監(jiān)測(cè)器的高壓液相色譜法測(cè)定。
組胺釋放抑制活性，由測(cè)定的組胺值通過(guò)下述計(jì)算式(1)計(jì)算。
組胺釋放抑制率(％)＝(1-(S-B)/(C-B))×100(1)B不加誘發(fā)劑的對(duì)照細(xì)胞釋放的組胺量C加入誘發(fā)劑后，細(xì)胞釋放的組胺量S與受試物共存下，加入誘發(fā)劑后，細(xì)胞釋放的組胺量表1

如表1結(jié)果所示可知，番茄提取物具有非常強(qiáng)的組胺釋放抑制活性。另外，其活性，比已知的抗變態(tài)反應(yīng)劑富馬酸ketotifen活性強(qiáng)，顯示組胺釋放抑制活性。三咖啡酰基奎尼酸在少量的情況下也顯示非常強(qiáng)的組胺釋放抑制活性。由此顯示番茄提取物、柑桔素查耳酮以及三咖啡?；崴嶙鳛榭棺儜B(tài)反應(yīng)劑或組胺釋放抑制劑有效。
另外，與已知的抗變態(tài)反應(yīng)劑的富馬酸ketotifen進(jìn)行比較時(shí)，柑桔素查耳酮的IC50(半數(shù)抑制率)約為70μg/ml、三咖啡酰基奎尼酸的的IC50(半數(shù)抑制率)約為25μg/ml、咖啡酸和富馬酸ketotifen約為250μg/ml，柑桔素查耳酮的活性約是它的3.5倍，三咖啡?；崴岬幕钚约s為它的10倍。(2)然后，對(duì)于作為三咖啡?；崴峤M成部分的咖啡酸、奎尼酸、以及咖啡酸衍生物的氯櫞酸、二咖啡?；崴?、琥珀?；Х弱；崴嵋策M(jìn)行了評(píng)價(jià)。分別以100μg/ml的試樣溶液計(jì)評(píng)價(jià)結(jié)果如圖7所示，奎尼酸、氯櫞酸不抑制組胺的釋放。另外，組胺抑制活性以咖啡酸、二咖啡酰基奎尼酸的順序依次增強(qiáng)，二咖啡酰基琥珀?；崴嵋约叭Х弱；崴犸@示飛躍式的強(qiáng)活性。(3)如所述，三咖啡?；崴嵋约岸Х弱；牾；崴?，從少量就能夠顯示較強(qiáng)的組胺釋放抑制活性這一點(diǎn)來(lái)看，這些化合物作為抗變態(tài)反應(yīng)劑或組胺釋放抑制劑有效就一目了然了。
實(shí)施例3白三烯B4釋放抑制活性的測(cè)定將以實(shí)施例1-1所得的番茄提取物1、實(shí)施例1-3所得的柑桔素查耳酮以及以實(shí)施例1-4所得的三咖啡?；崴嶙鳛槭茉囄铮孟率龇椒?，測(cè)定大鼠巨嗜細(xì)胞產(chǎn)生的白三烯B4釋放抑制活性，結(jié)果如表2所示。
將可溶性淀粉(和光一級(jí))和Bactopeptone(DIFCO)分別懸濁于生理鹽水(0.9％NaCl、大塚制藥)，調(diào)配為5％的濃度。用高壓滅菌器滅菌后(121℃，20分鐘)，冷卻至室溫。對(duì)乙醚麻醉下的大鼠每100g腹腔給予5ml(21G針使用)。
4日后，切斷乙醚麻醉下的大鼠頸動(dòng)脈，放血。充分放血后，在大鼠上噴霧乙醇，置于干凈的試驗(yàn)臺(tái)上。腹腔給予CMF-HBSS(Ca，Mg、free HBSS)25ml，充分的捏揉腹部。用滅菌后的器具將大鼠的腹部切開(kāi)，回收腹腔內(nèi)的溶液。回收后的溶液，用三層紗布過(guò)慮。再次用CMF-HBSS(Ca，Mg、free HBSS)25ml清洗腹腔，同樣回收。將采集的細(xì)胞用冰冷0.1％BSA-PBS清洗三次后，使細(xì)胞懸浮于10％FBS-RPMI1640培養(yǎng)基上，并倒入6cm培養(yǎng)皿中，使?jié)舛葹?.5×106cells/3ml/皿，在5％CO2、37℃的孵化器內(nèi)培養(yǎng)2小時(shí)。然后，棄去上清液，用PBS清洗培養(yǎng)皿三次，洗下非粘接性細(xì)胞，將培養(yǎng)皿內(nèi)粘接的細(xì)胞作為巨嗜細(xì)胞使用。用1％FBS-RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)20分鐘后，用大鼠的血清，添加調(diào)理素調(diào)理后的酵母多糖，在5％CO2、37℃的孵化器內(nèi)培養(yǎng)一定時(shí)間，另外，在加入酵母糖30分鐘前添加試樣。結(jié)束培養(yǎng)后，回收培養(yǎng)的上清液，利用ELISA kit(Leukotriene B4EIA Kit Cayman)測(cè)定上清液中的LTB4的量。白三烯B4釋放抑制活性，由測(cè)定的白三烯B4值通過(guò)下式(2)計(jì)算。
白三烯B4釋放抑制率(％)＝(1-(S-B)/(C-B))×100(2)B不加誘發(fā)劑的對(duì)照細(xì)胞釋放白三烯B4量C加入誘發(fā)劑后，細(xì)胞釋放白三烯B4量S與受試物共存下，加入誘發(fā)劑后，細(xì)胞釋放白三烯B4量表2

表2結(jié)果明顯表明，番茄提取物、柑桔素查耳酮和三咖啡?；崴犸@示劑量依賴性的白三烯釋放抑制活性。
實(shí)施例4小鼠耳廓浮腫模型中過(guò)敏抑制作用的評(píng)價(jià)(1)對(duì)于以實(shí)施例1-1所得的提取物1，用下述方法測(cè)定過(guò)敏抑制作用。其結(jié)果如表3所示。
小鼠每組用體重為15～20g的C3H/Hecrj、7周齡雌性5只。番茄提取物1懸濁于0.5％CMC-Na(羧甲基纖維素鈉)溶液，調(diào)配懸濁液，作為對(duì)照給予0.5％的CMC-Na。試樣的給予，在五日間分六次進(jìn)行，在第五日時(shí)進(jìn)行測(cè)定。第一日至第四日，一日給藥一次，只有在第五日的給予TNP-IgE溶液前4小時(shí)和給予后30分鐘兩次經(jīng)口給予試樣。番茄提取物1的給藥量，設(shè)定為每1kg小鼠體重0.16mg、0.8mg以及4mg。
從眼底靜脈給予1％的抗TNP-IgE溶液0.2ml，30分鐘后經(jīng)口給予試樣溶液。進(jìn)一步30分鐘后測(cè)定左右耳的厚度，然后立即在各耳上涂敷2，4，6-三硝基氯苯的0.8％丙酮∶橄欖油(1∶1)的溶液10μl。涂敷2小時(shí)后，測(cè)定小鼠的左右耳的厚度，將涂敷前后耳朵厚度的差值作為過(guò)敏引起的浮腫。顯著差的檢驗(yàn)用Student的T檢驗(yàn)。
表3

**p＜0.01(與2，4，6-三硝基氯苯致敏對(duì)照組的顯著差)*p＜0.05(與2，4，6-三硝基氯苯致敏對(duì)照組的顯著差)(2)對(duì)于以實(shí)施例1-3所得的柑桔素查耳酮，用與所述(1)相同的方法測(cè)定過(guò)敏抑制作用。另外，柑桔素查耳酮的給藥量，設(shè)定為每1kg的小鼠體重0.0064mg、0.032mg、0.16mg或0.8mg。其結(jié)果如圖8所示。
圖8結(jié)果明顯提示，柑桔素查耳酮顯示劑量依賴性的過(guò)敏抑制作用。由于過(guò)敏為變態(tài)反應(yīng)癥狀中的一種，所以進(jìn)一步提示了柑桔素作為抗變態(tài)反應(yīng)劑有效。
(3)對(duì)于以實(shí)施例1-4所得的三咖啡酰基奎尼酸，用與所述(1)相同的方法，測(cè)定過(guò)敏抑制作用。另外，三咖啡酰基奎尼酸的給藥量，設(shè)定為每1kg小鼠體重4mg。其結(jié)果如圖9所示。
圖9結(jié)果明顯提示，三咖啡?；崴犸@示過(guò)敏抑制作用。由于過(guò)敏也是I型變態(tài)反應(yīng)癥狀，所以進(jìn)一步提示三咖啡酰基奎尼酸作為抗變態(tài)反應(yīng)劑有效。
(4)對(duì)于以實(shí)施例1-4所得的三咖啡酰基奎尼酸，用下述方法測(cè)定過(guò)敏抑制作用，其結(jié)果如圖10所示。
除給藥方法與所述(1)給藥方法不同外，其余的相同。試樣的給予，在五日間分六次進(jìn)行，在第五日進(jìn)行測(cè)定。第一日至第四日，一日給藥一次，只有在第五日的給予TNP-IgE溶液前4小時(shí)和給予后30分鐘兩次經(jīng)口給予試樣。三咖啡?；崴岬慕o藥量，設(shè)定為每1kg小鼠體重0.16mg、0.8mg、4mg以及20mg。
圖10的結(jié)果明顯提示，三咖啡酰基奎尼酸顯示過(guò)敏抑制作用。
實(shí)施例5細(xì)胞毒性試驗(yàn)在以與實(shí)施例2相同的方法調(diào)配后的細(xì)胞懸浮液(1～2×106個(gè)/ml)80μl中，加入各濃度的試樣溶液(以實(shí)施例1制備的番茄提取物1、柑桔素查耳酮、三咖啡酰基奎尼酸或二咖啡?；牾？崴?20μl，37℃下培養(yǎng)。在培養(yǎng)后0、10、20、60、120分鐘各取出10μl，加入預(yù)先準(zhǔn)備好的0.4％臺(tái)盼藍(lán)液20μl。被藍(lán)色色素染藍(lán)的細(xì)胞判斷為死細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)算盤(pán)在顯微鏡下測(cè)定細(xì)胞數(shù)，測(cè)定cell viability(相對(duì)于全部細(xì)胞數(shù)的存活細(xì)胞的比例)與存活細(xì)胞數(shù)。結(jié)果未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞毒性。
實(shí)施例6含有本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的藥品(1)在實(shí)施例1-1的番茄提取物1(100mg)中混合等量的乳糖和硬脂酸鎂5g，利用單動(dòng)壓片機(jī)對(duì)該混合物進(jìn)行壓片，制備直徑為10mm、重量為300mg的片劑。
(2)將所述(1)所得的片劑粉碎、整粒、過(guò)篩，制備20～50目的顆粒劑。
對(duì)于以實(shí)施例1-3精制后的柑桔素查耳酮，用以下的方法制劑化，制備藥品。
(3)在柑桔素查耳酮100mg中混合等量的乳糖和硬脂酸鎂5g，利用單動(dòng)壓片機(jī)對(duì)該混合物進(jìn)行壓片，制備直徑為10mm、重量為300mg的片劑。
(4)將所述(3)所得的片劑粉碎、整粒、過(guò)篩，制備20～50目的顆粒劑。
對(duì)于以實(shí)施例1-4或5精制后的三咖啡酰基奎尼酸或二咖啡?；牾；崴嵊靡韵碌姆椒ㄟM(jìn)行制劑化，制備藥品。
(5)在抗變態(tài)反應(yīng)劑100mg中混合等量的乳糖和硬脂酸鎂5g，利用單動(dòng)壓片機(jī)對(duì)該混合物進(jìn)行壓片，制備直徑為10mm、重量為300mg的片劑。
(6)將所述(5)所得的片劑粉碎、整粒、過(guò)篩，制備20～50目的顆粒劑。
實(shí)施例7含有本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的食品(7-1a)制備以下組成(重量份)的糖果砂糖(47.0)、糖稀(49.76)、香料(1.0)、水(2.0)、番茄提取物(0.24)。
(7-1b)作為含有本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的食品，制備以下組成(重量份)的糖果砂糖(47.0)、糖稀(49.76)、香料(1.0)、水(2.0)、柑桔素查耳酮(0.24)。
(7-1c)作為含有本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的食品，制備以下組成(重量份)的糖果砂糖(47.0)、糖稀(49.76)、香料(1.0)、水(2.0)、三咖啡?；崴峄蚨Х弱；牾？崴?0.24)。
(7-2)制備以下組成(重量份)的番茄果汁。
將市售的番茄果汁(99)和番茄提取物1(1.0)混合。
(7-3a)制備以下組成(重量份)的果汁。
將濃縮溫州柑桔果汁(5)、果糖葡萄糖液糖(11)、檸檬酸(0.2)、L-抗壞血酸(0.02)、番茄提取物1(1.0)、水調(diào)配至100ml。
(7-3b)制備以下組成(重量份)的果汁。
將濃縮溫州柑桔果汁(5)、果糖葡萄糖液糖(11)、檸檬酸(0.2)、L-抗壞血酸(0.02)、三咖啡?；崴峄蚨Х弱；牾？崴?0.1)、水調(diào)配至100ml。
實(shí)施例8含有本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑的化妝品(8-1a)制備以下組成(重量份)的牙膏。
將磷酸氫鈣(42)、甘油(18)、角差菜膠(0.9)、月桂基硫酸鈉(1.2)、糖精鈉(0.09)、對(duì)羥基苯甲酸丁酯(0.005)、番茄提取物(1.0)、香料(1)、水調(diào)配至100ml。
(8-1b)制備以下組成(重量份)的牙膏。
將磷酸氫鈣(42)、甘油(18)、角差菜膠(0.9)、月桂基硫酸鈉(1.2)、糖精鈉(0.09)、對(duì)羥基苯甲酸丁酯(0.005)、柑桔素查耳酮(0.05)、香料(1)、水調(diào)配至100ml。
(8-1c)制備以下組成(重量份)的牙膏。
將磷酸氫鈣(42)、甘油(18)、角差菜膠(0.9)、月桂基硫酸鈉(1.2)、糖精鈉(0.09)、對(duì)羥基苯甲酸丁酯(0.005)、三咖啡?；崴峄蚨Х弱；牾；崴?0.1)、香料(1)、水調(diào)配至100ml。
(8-2a)制備以下組成(重量份)的化妝水。
將甘油(5.0)、丙二醇(4.0)、番茄提取物(0.5)、聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯(2.0)、乙醇(10.0)、香料(0.1)、凈化水調(diào)配至100ml。
(8-2b)制備以下組成(重量份)的化妝水。
將甘油(5.0)、丙二醇(4.0)、柑桔素查耳酮(0.15)、聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯(2.0)、乙醇(10.0)、香料(0.1)、凈化水調(diào)配至100ml。
(8-2c)制備以下組成(重量份)的化妝水。
將甘油(5.0)、丙二醇(4.0)、三咖啡酰基奎尼酸或二咖啡?；牾；崴?0.3)、聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯(2.0)、乙醇(10.0)、香料(0.1)、凈化水調(diào)配至100ml。
(8-3a)制備以下組成(重量份)的生發(fā)油將二甲基硬脂酰氯(1.4)、芐基銨硬脂醇(0.6)、硬脂酸單甘油酯(1.5)、食鹽(0.1)、番茄提取物1(0.5)、凈化水調(diào)配100ml。
(8-3b)制備以下組成(重量份)的生發(fā)油將二甲基硬脂酰氯(1.4)、芐基銨硬脂醇(0.6)、硬脂酸單甘油酯(1.5)、食鹽(0.1)、柑桔素查耳酮1(0.1)、凈化水調(diào)配100ml。
(8-3c)制備以下組成(重量份)的生發(fā)油將二甲基硬脂酰氯(1.4)、芐基銨硬脂醇(0.6)、硬脂酸單甘油酯(1.5)、食鹽(0.1)、康變態(tài)反應(yīng)劑(0.1)、凈化水調(diào)配100ml。
根據(jù)本發(fā)明可以提供一種抗變態(tài)反應(yīng)劑的制備方法，其特征在于用有機(jī)溶劑提取有效成分為番茄提取物、柑桔素查耳酮或其衍生物、和/或三咖啡酰基奎尼酸、二咖啡?；牾？崴峄蚱渌鼈兊难苌锏目棺儜B(tài)反應(yīng)劑，有效成分為番茄果皮的抗變態(tài)反應(yīng)劑以及原料番茄。
作為用于提取的原料番茄，可以使用番茄果皮或番茄殘?jiān)?。這些都是在番茄果汁、番茄果醬等食品加工廠大量產(chǎn)生的廢物。本發(fā)明即使在有效利用產(chǎn)業(yè)廢物這一點(diǎn)上也是非常有效的。
本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，由于顯示很強(qiáng)的組胺釋放抑制活性和白三烯釋放抑制活性，所以作為各種變態(tài)反應(yīng)性疾病的預(yù)防治療劑、抗炎劑、以及作為組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑有效。另外，本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，由于能夠阻斷I型變態(tài)反應(yīng)中的肥大細(xì)胞產(chǎn)生的組胺釋放，所以在由此引起的特應(yīng)性皮炎、過(guò)敏性鼻炎、花粉病或過(guò)敏性哮喘等的預(yù)防治療中特別有效。
另外，根據(jù)本法明，可以提供藥品、食品或化妝品，其特征在于含有該抗變態(tài)反應(yīng)劑。本發(fā)明的抗變態(tài)反應(yīng)劑，除作為藥品外，還可以通過(guò)添加在食品、化妝品中，使這些產(chǎn)品賦予抗變態(tài)反應(yīng)活性、抗炎活性、或組胺釋放抑制活性。
權(quán)利要求
1.一種抗變態(tài)反應(yīng)劑，其有效成分為番茄提取物。
2.一種組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑，其有效成分為番茄提取物。
3.一種抗變態(tài)反應(yīng)劑，其有效成分為番茄果皮。
4.一種抗變態(tài)發(fā)應(yīng)劑，其有效成分為柑桔素查耳酮或其衍生物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抗變態(tài)反應(yīng)劑，所述柑桔素查耳酮為下式(I)所示的化合物
6.一種組胺釋放抑制劑，其有效成分為柑桔素查耳酮或其衍生物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的組胺釋放抑制劑，所述柑桔素查耳酮為下式(I)所示的化合物
8.一種抗變態(tài)反應(yīng)劑，其有效成分為三咖啡酰基奎尼酸或其衍生物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的抗變態(tài)反應(yīng)劑，所述三咖啡?；崴釣橄率?II)所示的化合物 式中R1、R2、R3及R4中，一個(gè)表示氫原子、其余三個(gè)表示相當(dāng)于下述結(jié)構(gòu)式(III)的咖啡?；?。
10.一種抗變態(tài)反應(yīng)劑，其有效成分為二咖啡?；牾？崴峄蚱溲苌?。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的抗變態(tài)反應(yīng)劑，所述二咖啡?；牾？崴釣橄率?V)所示的化合物 式中R5、R6、R7以及R8中，一個(gè)表示氫原子、兩個(gè)表示相當(dāng)于所述結(jié)構(gòu)式(III)的咖啡?；?、一個(gè)表示相當(dāng)于結(jié)構(gòu)式(VI)的琥珀?；?，。
11.一種組胺釋放抑制劑，其有效成分為三咖啡?；崴帷⒍Х弱；牾？崴峄蚱溲苌镏腥魏我粋€(gè)。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的組胺釋放抑制劑，所述三咖啡?；崴釣橄率?II)所示的化合物 式中R1、R2、R3及R4中，一個(gè)表示氫原子、其余三個(gè)表示相當(dāng)于下述結(jié)構(gòu)式(III)的咖啡?；?br> 13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的組胺釋放抑制劑，所述二咖啡酰基琥珀?？崴釣橄率?V)所示的化合物 式中R5、R6、R7以及R8中，一個(gè)表示氫原子、兩個(gè)表示相當(dāng)于所述結(jié)構(gòu)式(III)的咖啡?；?、一個(gè)表示相當(dāng)于結(jié)構(gòu)式(VI)的琥珀?；?。
14.一種白三烯釋放抑制劑，其有效成分為柑桔素查耳酮或其衍生物。
15.一種白三烯釋放抑制劑，其有效成分為三咖啡?；崴峄蚱溲苌?。
16.一種藥品、食品或化妝品，其特征在于含有權(quán)利要求1、3～5和8～10中任一項(xiàng)所述的抗變態(tài)反應(yīng)劑。
17.一種藥品、食品或化妝品，其特征在于含有權(quán)利要求2、6～7和11～15中的任一項(xiàng)所述的組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑。
18.一種抗變態(tài)反應(yīng)劑的制備方法，其特征在于用溶劑提取原料番茄。
全文摘要
本發(fā)明提供以番茄提取物、番茄果皮、柑桔素查耳酮或其衍生物、三咖啡?；崴峄蚱溲苌?、二咖啡?；牾？崴峄蚱溲苌镏兄辽僖环N為有效成分的抗變態(tài)反應(yīng)劑、組胺釋放抑制劑或白三烯釋放釋放抑制劑；含有所述抗變態(tài)反應(yīng)劑、組胺釋放抑制劑或白三烯釋放抑制劑的為特征的藥品、食品和化妝品；一種用有機(jī)溶劑提取原料番茄為特征的抗變態(tài)反應(yīng)劑的制備方法。
文檔編號(hào)A23G3/00GK1440293SQ01812108
公開(kāi)日2003年9月3日 申請(qǐng)日期2001年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2000年6月28日
發(fā)明者山本大地, 金森智子, 山口典男, 齊藤實(shí), 辻亮平, 小幡明雄 申請(qǐng)人:龜甲萬(wàn)株式會(huì)社