專利名稱：細菌培養(yǎng)基及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種細菌培養(yǎng)基及其制備方法，特別是一種以營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基的細菌培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術：
目前，現(xiàn)有技術中細菌培養(yǎng)基大部分以瓊脂為基質(zhì)，并添加一些細菌生長所需的營養(yǎng)物，然后在無菌實驗室中按照嚴格的無菌操作程序?qū)毦M行培養(yǎng)、觀察與測定。上述背景技術中存在著檢測程序繁瑣、不能直接觀察和計算測定結(jié)果的缺點。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種易于觀察菌落情況，同時避免培養(yǎng)基失水、影響測定結(jié)果的細菌培養(yǎng)基及其制備方法。
本發(fā)明的整體構思是它以營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，基礎培養(yǎng)基中還添加有保水劑和染色劑，其中，營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑的重量比為36-40∶1000∶0.1-5∶0.01-0.1。
細菌培養(yǎng)基的制備方法，包括下面的步驟a、先將營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑按36-40∶1000∶0.1-5∶0.01-0.1的重量比稱重后，分開放置；b、將稱量好的營養(yǎng)瓊脂和水混合制備營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；c、向上述步驟中制備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中加入稱量好的保水劑；d、對c步驟中制備的含保水劑的培養(yǎng)基進行滅菌；e、將已稱量的染色劑滅菌后，加入d步驟制備的培養(yǎng)基中，即制成細菌培養(yǎng)基。
本發(fā)明的其他構思是細菌培養(yǎng)基中營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑的重量比為36-40∶1000∶0.1-1∶0.01-0.1。
保水劑可選用淀粉接枝共聚丙烯酸(鹽)超強吸水劑、改性纖維素類高吸水樹脂、 丙烯衍生物和無機物等復合成高吸水樹脂，染色劑可選用石碳酸復紅、剛果紅、石碳酸馬尾藻紅、結(jié)晶紫、甲基蘭、紅四氮唑。
制備細菌培養(yǎng)基時，將營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑按36-40∶1000∶0.1-1∶0.01-0.1的重量比稱量。
將營養(yǎng)瓊脂與水混合放置8-12分鐘，然后加溫，使營養(yǎng)瓊脂充分溶解。
加入保水劑時，先將保水劑粉碎成80-100目的顆粒后再添加到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，攪拌8-12分鐘。
對含有保水劑的培養(yǎng)基滅菌時，采用高壓滅菌12-18分鐘，壓強，溫度115-230℃。
向含保水劑的培養(yǎng)基中添加染色劑時，先將染色劑配制成5％水溶液后滅菌，再加入含保水劑的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
本發(fā)明取得的技術進步在于細菌培養(yǎng)基中的保水劑可維持培養(yǎng)基的水分，避免培養(yǎng)基因失水干燥影響測定結(jié)果的準確性；染色劑可將大部分菌落染成紅色或粉紅色，便于觀察檢測結(jié)果；同時它的制備方法工藝設計合理、操作簡單方便。
具體實施例方式
以下對本發(fā)明的實施例做進一步的描述本實施例中，細菌培養(yǎng)基以營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(GB4789.28-1994)為基礎培養(yǎng)基，基礎培養(yǎng)基中還添加有保水劑和染色劑，其中，營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑的重量比為38∶1000∶3∶0.01。
制備細菌培養(yǎng)基時，應按照下面的步驟a、制備營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；b、將制備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基∶水∶保水劑∶染色劑按38∶1000∶3∶0.01的重量比稱重后，分開放置；c、將稱量好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和水混合，放置10分鐘后，隔石棉鐵絲網(wǎng)微火煮沸，使完全溶解；d、將保水劑粉碎成100目的顆粒后，添加到上述步驟中制備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，攪拌10分鐘；e、對d步驟中制備的含保水劑的培養(yǎng)基，采用高壓滅菌15分鐘，壓強1.385×105Pa，溫度125℃。
f、將稱量好的染色劑配制成5％水溶液后滅菌，加入e步驟中制備的含保水劑的培養(yǎng)基中，即得到細菌培養(yǎng)基。
保水劑可選用北京理工大學生產(chǎn)的改性纖維素類高吸水樹脂，染色劑可選用石碳酸復紅。
本發(fā)明所制備的細菌培養(yǎng)基可置于檢測板、平面培養(yǎng)皿或其它培養(yǎng)基載體。
權利要求
1.一種細菌培養(yǎng)基，它以營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，其特征在于基礎培養(yǎng)基中還添加有保水劑和染色劑，其中，營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑的重量比為36-40∶1000∶0.1-5∶0.01-0.1。
2.根據(jù)權利要求1所述的細菌培養(yǎng)基，其特征在于營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑的重量比為36-40∶1000∶0.01-1∶0.01-0.1。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的細菌培養(yǎng)基，其特征在于保水劑可選用淀粉接枝共聚丙烯酸(鹽)超強吸水劑、改性纖維素類高吸水樹脂、丙烯衍生物和無機物等復合成高吸水樹脂，染色劑可選用石碳酸復紅、剛果紅、石碳酸馬尾藻紅、結(jié)晶紫、甲基蘭、紅四氮唑。
4.根據(jù)權利要求1所述的細菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于它包括下面的步驟a、先將營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑按36-40∶1000∶0.1-5∶0.01-0.1的重量比稱重后，分開放置；b、將稱量好的營養(yǎng)瓊脂和水混合制備營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；c、向上述步驟中制備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中加入稱量好的保水劑；d、對c步驟中制備的含保水劑的培養(yǎng)基進行滅菌；e、將已稱量的染色劑滅菌后，加入d步驟制備的培養(yǎng)基中，即制成細菌培養(yǎng)基。
5.根據(jù)權利要求4所述的細菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于將營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑按36-40∶1000∶0.1-1∶0.01-0.1的重量比稱量。
6.根據(jù)權利要求4所述的細菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于先將營養(yǎng)瓊脂與水混合放置8-12分鐘，然后加溫，使營養(yǎng)瓊脂充分溶解。
7.根據(jù)權利要求4所述的細菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于加入保水劑時，先將保水劑粉碎成80-100目的顆粒后再添加到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，攪拌8-12分鐘。
8.根據(jù)權利要求4所述的細菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于對含有保水劑的培養(yǎng)基滅菌時，采用高壓滅菌12-18分鐘，壓強，溫度115-230℃。
9.根據(jù)權利要求4所述的細菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于向含保水劑的培養(yǎng)基中添加染色劑時，先將染色劑配制成5％水溶液后滅菌，再加入含保水劑的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種細菌培養(yǎng)基及其制備方法，特別是一種以營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基的細菌培養(yǎng)基及其制備方法。它以營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，在基礎培養(yǎng)基中添加有保水劑和染色劑，營養(yǎng)瓊脂∶水∶保水劑∶染色劑的重量比為36－40∶1000∶0.1－5∶0.01－0.1；制備時將按重量比稱量好的上述各組分混合、滅菌。它克服了現(xiàn)有技術中不易觀察和計算測定結(jié)果、檢測程序繁瑣的缺點，具有維持培養(yǎng)基水分、便于觀察檢測結(jié)果，制備方法工藝設計合理、操作簡單方便的特點。
文檔編號C12N1/20GK1557943SQ20041001213
公開日2004年12月29日 申請日期2004年1月29日 優(yōu)先權日2004年1月29日
發(fā)明者胡常英, 馬清河, 馬允莉, 付麗萍, 王潔, 孫淑琴 申請人:胡常英